畜產(chǎn)品中獸藥殘留前處理技術(shù)研究進(jìn)展

王志恒 劉松雁 宋 瑞 曹 楠 張夢(mèng)雪 趙 超 陳曉勇劉亞娟 葛 劍 趙建立 趙鎖林 王建濤

（1.石家莊市畜產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測(cè)中心，河北石家莊 050041；2.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，河北保定 071000；3.河北畜牧獸醫(yī)研究所，河北保定 071000；4. 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，河北保定 071000；5.河北北方學(xué)院動(dòng)物科技學(xué)院，河北張家口 075000；6.石家莊市石藥集團(tuán)新諾威制藥股份有限公司，河北石家莊 051430；7.石家莊市藁城區(qū)畜牧水產(chǎn)局畜產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測(cè)站，河北石家莊 050000；8.唐山市畜牧工作站，河北唐山 063000）

畜產(chǎn)品中獸藥殘留前處理技術(shù)研究進(jìn)展

王志恒1劉松雁1宋 瑞1曹 楠1張夢(mèng)雪1趙 超2陳曉勇3劉亞娟4葛 劍5趙建立6趙鎖林7王建濤8

（1.石家莊市畜產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測(cè)中心，河北石家莊 050041；2.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，河北保定 071000；3.河北畜牧獸醫(yī)研究所，河北保定 071000；4. 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，河北保定 071000；5.河北北方學(xué)院動(dòng)物科技學(xué)院，河北張家口 075000；6.石家莊市石藥集團(tuán)新諾威制藥股份有限公司，河北石家莊 051430；7.石家莊市藁城區(qū)畜牧水產(chǎn)局畜產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測(cè)站，河北石家莊 050000；8.唐山市畜牧工作站，河北唐山 063000）

近年來，獸藥在畜牧養(yǎng)殖業(yè)中的廣泛使用，造成畜產(chǎn)品中可能會(huì)有獸藥殘留的蓄積，危害人體健康，故對(duì)獸藥殘留的檢測(cè)顯得尤為重要。本文中筆者比較全面地論述了畜產(chǎn)品的前處理技術(shù)的最新研究，并對(duì)畜產(chǎn)品中獸藥殘留前處理技術(shù)在未來的發(fā)展方向做了進(jìn)一步的展望。

畜產(chǎn)品 獸藥殘留

隨著動(dòng)物生產(chǎn)的集約化、規(guī)?；芏鄷r(shí)候不得不使用獸藥來預(yù)防和治療疾病。獸藥的不正確使用或者是停藥期的縮短，會(huì)導(dǎo)致藥物在畜產(chǎn)品中如肉、蛋、奶中的殘留，進(jìn)而影響食品質(zhì)量安全，因此國(guó)家越來越重視畜產(chǎn)品的安全。這些年，各種先進(jìn)技術(shù)已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于獸藥殘留的檢測(cè)。但是，畜產(chǎn)品中獸藥殘留的檢測(cè)存在以下幾個(gè)難點(diǎn)：不同性質(zhì)的獸藥同時(shí)測(cè)定時(shí)較為復(fù)雜；畜產(chǎn)品的基質(zhì)比較復(fù)雜，干擾比較多；獸藥殘留的檢測(cè)越來越痕量化。因此，研究同時(shí)能檢測(cè)多種獸藥，并且能更好地去除基質(zhì)效應(yīng)的獸藥檢測(cè)方法是當(dāng)務(wù)之急。

畜產(chǎn)品（肉、蛋、奶）中含有蛋白質(zhì)、脂肪等，基質(zhì)很復(fù)雜。從檢測(cè)的角度來看，即使是少量的脂肪也會(huì)影響試驗(yàn)的準(zhǔn)確度，因此，畜產(chǎn)品檢測(cè)的樣品前處理一定要有效地分離蛋白質(zhì)和脂肪，才能實(shí)現(xiàn)畜產(chǎn)品殘留檢測(cè)的準(zhǔn)確定量。畜產(chǎn)品中獸藥殘留主要有以下4類：抗生素類、磺胺類、激素和β-興奮劑類和其他獸藥。因?yàn)樾螽a(chǎn)品中的獸藥殘留種類繁多，因此一次能檢測(cè)多種獸藥成為獸藥檢測(cè)的發(fā)展方向，樣品前處理能同時(shí)滿足多種獸藥的檢測(cè)，同時(shí)檢測(cè)多種獸藥成為獸藥殘留分析的發(fā)展方向。

1 獸藥殘留檢測(cè)的種類

獸藥殘留檢測(cè)常見的獸藥主要有抗生素類、磺胺類、呋喃類、抗寄生蟲類和激素類藥物。

1.1 抗生素類

畜產(chǎn)品生產(chǎn)過程中，養(yǎng)殖戶在生產(chǎn)過程中使用抗生素，如果沒有達(dá)到足夠的停藥期就進(jìn)行屠宰的話，畜產(chǎn)品種就會(huì)有一定量的獸藥殘留，人食后就會(huì)產(chǎn)生耐藥性而產(chǎn)生各種毒副作用。在動(dòng)物生產(chǎn)種常用的抗生素主要四環(huán)素類、氯霉素類、土霉素類等。

1.2 磺胺類

磺胺類藥物以其良好的預(yù)防和治療疾病的效果而大量使用，因此畜產(chǎn)品中磺胺類藥物殘留超標(biāo)十分嚴(yán)重。

1.3 激素和β-興奮劑類

激素和β-興奮劑可以促進(jìn)動(dòng)物的生長(zhǎng)，因此在畜牧生產(chǎn)中會(huì)有養(yǎng)殖戶使用這些激素類藥物，常見的類主要有性激素類、皮質(zhì)激素類和鹽酸克侖特羅等。長(zhǎng)期食用這樣的畜產(chǎn)品可對(duì)人的心肺功能產(chǎn)生嚴(yán)重影響，鹽酸克侖特羅攝入超過20μg就會(huì)造成傷害，攝入量加大則會(huì)導(dǎo)致中毒。

1.4 其他獸藥

有些獸藥不得在動(dòng)物源食品中檢出，例如呋喃唑酮和硝呋烯腙，是中國(guó)食品動(dòng)物禁用獸藥。另外，有些藥物能在動(dòng)物機(jī)體各器官中蓄積，不易被代謝掉，比如苯并咪唑類藥物。

2 獸藥殘留前處理技術(shù)研究進(jìn)展

與農(nóng)產(chǎn)品檢測(cè)相比，畜產(chǎn)品（肉、蛋、奶）樣品基質(zhì)更加復(fù)雜，干擾物質(zhì)更多，并且待測(cè)物的濃度較低，分離和純化的難度較大[1]。在一個(gè)完整的試驗(yàn)過程中，樣品的前處理占用了大部分的時(shí)間，并且對(duì)獸藥殘留分析起到關(guān)鍵作用，其過程包括提取、凈化、濃縮與富集、化學(xué)衍生化等，在這其中提取和凈化是前處理的關(guān)鍵步驟，提取效果與樣品的回收率呈正相關(guān)；凈化不好的話，基質(zhì)效應(yīng)就大，干擾物質(zhì)就比較多。目前，同時(shí)檢測(cè)多種獸藥成為獸藥殘留分析的發(fā)展方向，因此同時(shí)處理上百種獸藥的前處理技術(shù)尤為重要，這些技術(shù)主要包括液-液萃取技術(shù)、固相萃取技術(shù)、基質(zhì)固相萃取技術(shù)、QuECHERS技術(shù)等。

2.1 液－液萃取

液-液萃取（liquid-liquid extraction，LLE）常用于樣品中被測(cè)物質(zhì)與基質(zhì)的分離，在樣品溶液和提取液之間通過重新分配而提取待測(cè)物，并消除干擾物質(zhì)。待測(cè)物能溶解到提取液中，而一些干擾物質(zhì)不能溶解，LLE具有提取和凈化兩種作用。M.J.Schneider[2]等用乙腈／水（4：1）提取牛腎中120種獸藥，回收率為53%～129%。J.Zhan等[3]用ACN－乙醇（Ethanol）-EDTA提取牛奶中255種藥物，回收率可達(dá)到63%～144%[4]。LLE在提取性質(zhì)相似的待測(cè)物時(shí)應(yīng)用廣泛，但是也存在一些缺陷，比如操作過程煩瑣，消除基質(zhì)干擾效果不理想，對(duì)操作人員傷害較大，增大廢液處理量等缺點(diǎn)。

2.2 固相萃取技術(shù)

固相萃取技術(shù)（solid phase extraction，SPE）就是利用固體吸附劑將液體樣品中的目標(biāo)化合物吸附，與樣品的基體和干擾化合物分離，然后再用洗脫液洗脫或加熱解吸附，達(dá)到分離和富集目標(biāo)化合物的目的。這些年，固相萃取技術(shù)在獸藥殘留檢測(cè)中得到了越來越廣泛的應(yīng)用。與液-液萃取相比，固相萃取有很多優(yōu)點(diǎn)：（1）更高的回收率；（2）更好的分離效果；（3）有機(jī)溶劑的使用量小，減小了對(duì)檢測(cè)人員的傷害；（4）操作更簡(jiǎn)單，節(jié)省人力、物力。X.J.Deng等[5]以乙腈-0.1%甲酸提取，檢測(cè)畜產(chǎn)品中105種獸藥，回收率為71%～115%。A.A.M.Stolker等用乙腈提取，過固相萃取柱凈化，檢測(cè)奶中101種獸藥，回收率為70%～120%。SPE經(jīng)常用于微量或痕量物質(zhì)的凈化，是一個(gè)很重要的凈化技術(shù)。但是SPE同樣也存在著一些缺陷，如果樣品基質(zhì)比較復(fù)雜，會(huì)造成待測(cè)物的回收率低，易堵塞填料等不足，這些不足還有待改進(jìn)。

2.3 基質(zhì)固相分散技術(shù)

基質(zhì)固相分散技術(shù)（matrix solid phase dispersion extraction，MSPD）是一種由固相萃取而進(jìn)一步改進(jìn)發(fā)展起來的一種處理方法。將樣品直接與適當(dāng)反相硅膠一起夾雜研磨，制作成半固態(tài)柱，繼而選用和固相萃取相似的洗脫方式，將各種待測(cè)物洗脫下來。MSPD在前處理過程中包含了樣品勻化、提取、凈化等過程，不需要進(jìn)行樣品提取、離心、過柱等操作步驟，減少了樣品的損失，提高了待測(cè)物的回收率。王煉等[6]用基質(zhì)固相分散技術(shù)提取了畜禽肉和牛奶中的20種獸藥，用甲醇洗脫含C18填料的萃取柱，回收率分別在74%～102%和71%～95%。MSPD是一種簡(jiǎn)單高效的提取凈化方法，減少了試驗(yàn)的操作步驟，減少了前處理的時(shí)間，減少了試劑用量、是一種很有前景的技術(shù)。

2.4 QuEChERS技術(shù)

QuEChERS（Quick、Easy、Cheap、Effective、Rugged、Safe）技術(shù)，是由美國(guó)農(nóng)業(yè)部于2003年開發(fā)的快速樣品前處理技術(shù)，原理與高效液相色譜（HPLC）和固相萃取（SPE）相似，都是利用吸附劑填料吸附樣品中的雜質(zhì)，從而達(dá)到除雜凈化的目的。不同之處就是它選用的是合適的具有吸附作用的吸附劑，比如PSA粉、C18粉、ODS粉、石墨烯、碳納米材料等，對(duì)藥物或者雜質(zhì)進(jìn)行吸附，使其在提高目標(biāo)分辨率和靈敏度的同時(shí)，提高了方法的適用性和實(shí)用性，因此QuEChERS現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于多類獸藥殘留分析。A.L.Capriotti等[7]用甲醇－水－乙酸（80：19：1）提取蛋中藥物，以Na2SO4凈化，檢測(cè)了四環(huán)素類、青霉素類、磺胺類等7大類21種獸藥，回收率為62%～119%。M.Kellmann等[8]以1%甲酸－乙腈提取蜂蜜和飼料中151種獸藥、農(nóng)藥、真菌毒素和植物毒素。

2.5 其他處理技術(shù)

其他的樣品前處理技術(shù)還有濁點(diǎn)萃取技術(shù)、免疫親和色譜技術(shù)、微波輔助萃取等，但其主要應(yīng)用于單種或者單類獸藥殘留的檢測(cè)，在多類獸藥殘留同時(shí)檢測(cè)中應(yīng)用報(bào)道較少。

3 展望

隨著畜產(chǎn)品檢測(cè)越來越受重視，畜產(chǎn)品檢測(cè)得到快速發(fā)展，儀器的分辨率越來越高，分析時(shí)間越來越短。但是樣品前處理仍然存在一些問題，例如前處理時(shí)間長(zhǎng)，溶劑消耗量大，提取效率低等。前處理往往占到整個(gè)試驗(yàn)的70%～80%的時(shí)間甚至更多。近年來，樣品的前處理出現(xiàn)了很多的新方法，與傳統(tǒng)的萃取方式相比有很多的優(yōu)點(diǎn)，如固相萃取和液-液萃取適用于液體樣品萃取，基質(zhì)固相分散技術(shù)適用于固體樣品萃取。固相萃取近些年發(fā)展很快，是目前畜產(chǎn)品樣品前處理主要的方法，但是固相萃取也存在選擇性不高的缺點(diǎn)?；|(zhì)固相分散技術(shù)具有更好的選擇性和回收率，因此新技術(shù)的出現(xiàn)使得樣品的前處理得到了一定發(fā)展?？傊螽a(chǎn)品的樣品前處理技術(shù)向著準(zhǔn)確、高效、痕量化、適合多殘留檢測(cè)方向發(fā)展。

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王志恒（1981-），男，河北省石家莊市人，畜牧師，碩士研究生，研究方向：動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)。