消化道腫瘤患者腸道菌群的變化

劉思敏 黃金龍 梁文豪 羅賢宇 邢德剛

(廣東藥科大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院，廣東 廣州 510006)

消化道腫瘤患者腸道菌群的變化

劉思敏 黃金龍1梁文豪2羅賢宇2邢德剛2

(廣東藥科大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院，廣東 廣州 510006)

目的 探究消化道腫瘤患者腸道菌群的變化。方法 選取消化道腫瘤患者的糞便標(biāo)本，運用傳統(tǒng)梯度稀釋法進行細菌培養(yǎng)計數(shù)。結(jié)果 消化道腫瘤患者與正常組相比，需氧菌中的腸球菌、大腸桿菌計數(shù)明顯增多(P<0.05)，葡萄球菌顯著增加(P<0.01)。厭氧菌中的雙歧桿菌、乳酸桿菌計數(shù)顯著性減少(P<0.05)，擬桿菌顯著增加(P<0.01)。結(jié)論 消化道腫瘤患者出現(xiàn)明顯腸道菌群失調(diào)。

消化道腫瘤；腸道菌群

人體腸道內(nèi)含有800多種菌屬，7 000多種菌株，構(gòu)成了腸道微生物組〔1〕。腸道菌群中絕大多數(shù)與宿主細胞是共生關(guān)系，參與食物分解、防御反應(yīng)、免疫調(diào)節(jié)和新陳代謝等重要生理過程。研究顯示腸道微生態(tài)是惡性腫瘤發(fā)生和進展的關(guān)鍵調(diào)控因素〔2〕。腸道菌群與惡性腫瘤之間的關(guān)系至今還未被完全闡明，但越來越多的證據(jù)揭示了腸道微生態(tài)與局部炎癥、代謝產(chǎn)物和基因組穩(wěn)定性的聯(lián)系，這些因素可能在癌變過程中發(fā)揮重要作用〔3,4〕。本研究擬分析消化道腫瘤患者的主要腸道菌群。

1 資料與方法

1.1 對象 廣東藥科大學(xué)附屬第一和第二醫(yī)院2015年5月至2016年12月消化道腫瘤確診患者共56例，其中男35例，女21例，年齡30～65歲，平均(56.70±10.46)歲;排除標(biāo)準(zhǔn)：①近期遭遇過重大生活事件者；②有精神疾病或心理疾病相關(guān)家族史或出現(xiàn)腦部轉(zhuǎn)移等腦部器質(zhì)變化者；③伴有其他嚴(yán)重軀體性疾病者；④近1 w內(nèi)接受過手術(shù)治療者。選正常人群為對照組(30例)，男15例，女15例，年齡30～60歲，平均(52.10±9.49)歲。兩組年齡及性別比無顯著差異(P>0.05)。

1.2 方法 稱取標(biāo)本，加入生理鹽水稀釋，標(biāo)本稀釋呈梯度系列10-1、10-2、10-3、10-4、10-5，連同原液共6個稀釋度。取上述標(biāo)本系列稀釋液分別接種于培養(yǎng)基平板上，每個平板3個稀釋度。將厭氧菌培養(yǎng)基放在35℃、5%CO2的孵育箱中培養(yǎng)48 h；將葡萄球菌、腸球菌培養(yǎng)基放在35℃孵育箱中培養(yǎng)24 h，一般腸桿菌培養(yǎng)18 h。菌落經(jīng)涂片、革蘭染色鑒定，細菌確定后，根據(jù)平板上的活菌計數(shù)以及稀釋度，按照活菌計數(shù)公式計算?；罹鋯挝?CFU/ml)=(標(biāo)本質(zhì)量+稀釋量)/標(biāo)本質(zhì)量×稀釋度×菌落個數(shù)(或×10)。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS19.0軟件進行t檢驗。

2 結(jié) 果

消化腸道腫瘤患者需氧菌中的腸球菌數(shù)量為(7.16±0.38)、大腸桿菌為(6.86±0.28)，與對照組(6.36±0.49)、(6.14±0.25)相比明顯增加(P<0.05)，葡萄球菌數(shù)量(8.34±1.01)與對照組(6.98±0.79)相比也顯著增加(P<0.01)，厭氧菌中的雙歧桿菌(6.96±1.77)、乳酸桿菌(6.45±0.06)與對照組(8.25±0.47)、乳酸桿菌數(shù)量(7.30±1.05)相比明顯減少(P<0.05)，而擬桿菌數(shù)量(8.90±1.17)與對照組(6.66±1.34)相比顯著增加(P<0.01)。

3 討 論

人類腸道通常居住大約1千億個細菌，近年來科學(xué)家對腸道菌群的生理功能和病理地位越來越重視。研究表明，腸道菌群可能不僅參與代謝性疾病如肥胖、糖尿病、冠心病等的發(fā)生和發(fā)展，還是惡性腫瘤的起始與發(fā)生過程中潛在的調(diào)控因素〔5～7〕。Dapito等〔4〕研究顯示，無病原體的動物模型腫瘤發(fā)生率明顯減少。Grivennikov等〔8〕通過清除小鼠的腸道菌群，也觀察到肝臟和結(jié)腸的腫瘤發(fā)生率減少。近年來研究發(fā)現(xiàn)，消化道腫瘤如胃癌、肝癌、大腸癌和結(jié)直腸癌都與腸道菌群有重要關(guān)聯(lián)〔8〕。本實驗患者表現(xiàn)為厭氧菌和需氧菌比值下降。厭氧菌是與宿主共生的生理性菌群，需氧菌是與宿主共棲的條件致病菌〔9〕。厭氧菌和需氧菌比值維持在正常水平是正常生命活動的必要條件之一。厭氧菌和需氧菌比值下降，腸道菌群發(fā)生失調(diào)，可能導(dǎo)致腸道免疫功能下降以及細菌代謝紊亂，免疫功能下降使機體正常微生物的宿主排斥外來微生物定位停留的阻抗力下降。細菌代謝紊亂也有可能是消化腸道腫瘤患者惡化的促發(fā)因素，有研究表明腸道里細菌產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物可以促發(fā)惡性腫瘤的發(fā)生和發(fā)展〔10〕。消化腸道腫瘤確診后檢測腸道群菌的變化，將對消化腸道腫瘤尋找最佳治療方法有重要的意義。

1 Ley RE,Peterson DA,Gordon JI.Ecological and evolutionary forces shaping microbial diversity in the human intestine〔J〕.Cell,2006;124:837-48.

2 Festi D,Schiumerini R,Birtolo C.Gut microbiota and its pathophysiology in disease paradigms〔J〕.Dig Dis,2011;29:518-24.

3 Authur JC,Perezchanonae E,Muhlbauer M,etal.Intestinal inflammation targets cancer-inducing activity of the microbiota〔J〕.Science,2012;338(6103): 120-3.

4 Dapito DH,Mencina,Gwak GY,etal.Promotion of hepatocellular carcinoma by the intestinal microbiota and TLR4〔J〕.Cancer Cell,2012;21(4): 504-16.

5 Zhao L,Shen J.Whole body systems approaches for gut microbiota targeted,preventive healthcare〔J〕.J Biotechnol,2010;149(3):183-90.

6 Hope ME,Hold GL,Kain R,etal.Sporadic colorectal cancer role of the commensal microbiota〔J〕.FEMS Microbiol Lett,2005;244(1):1-7.

7 Schwabe RF,Jobin C.The microbiome and cancer〔J〕.Nat Rev Cancer,2013;13(11):800-12.

8 Grivennikov SI,Wang K,Mucida D,etal.Adenoma-linked barrier defects and microbial products drive IL-23/IL-17-mediated tumour growth〔J〕.Nature,2012;491(7423):254-8.

9 牛 輝.消化道腫瘤患者腸道微生態(tài)的研究〔D〕.昆明:昆明醫(yī)學(xué)院,2010.

10 Zhu Y.Gut microbiota and probiotics in colon tumorigenesis〔J〕.Cancer Lett,2011;309:119-27.

〔2017-02-20修回〕

(編輯 郭 菁/滕欣航)

廣東省科技計劃項目資助(2013B021800270)

邢德剛(1969-)，男，教授，主要從事胃腸動力學(xué)研究。

劉思敏(1977-)，女，講師，主要從事臨床檢驗研究。

R735.34

A

1005-9202(2017)09-2187-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.09.047

1 廣東藥科大學(xué)附屬第二醫(yī)院(廣州新海醫(yī)院)

2 廣東藥科大學(xué)基礎(chǔ)學(xué)院