竹屬新品種DUS測(cè)試指南的研制

朱振賢，蔡函江，畢毓芳，鐘哲科，杜旭華

1.浙江省森林資源監(jiān)測(cè)中心，浙江 杭州 310020； 2.國(guó)家林業(yè)局竹子研究開發(fā)中心，浙江 杭州 310012；3.浙江省竹子高效加工重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，浙江 杭州 310012)

植物新品種是指在國(guó)家植物新品種保護(hù)名錄范圍內(nèi)，具備新穎性、特異性、一致性和穩(wěn)定性并有適當(dāng)命名的植物品種[1]。只有通過(guò)特異性(Distinctness)、一致性(Uniformity)和穩(wěn)定性(Stability)測(cè)試(簡(jiǎn)稱DUS)并達(dá)到要求的新品種，才能被授予植物新品種權(quán)并獲得法律保護(hù)[2]。研制DUS測(cè)試指南是科學(xué)規(guī)范的開展DUS測(cè)試工作的基礎(chǔ)，是對(duì)申請(qǐng)品種進(jìn)行實(shí)質(zhì)審查和植物品種權(quán)的授予的重要依據(jù)[3]。簕竹屬(Bambusa)原產(chǎn)印度，是重要的經(jīng)濟(jì)竹種，包括簕竹亞屬、孝順竹亞屬和單竹亞屬等3個(gè)亞屬，本屬100余種，分布于亞洲、非洲和大洋洲的熱帶及亞熱帶地區(qū)。簕竹屬在我國(guó)有60多種，主要產(chǎn)于我國(guó)華東、華南及西南部[4]。簕竹屬竹種具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和觀賞價(jià)值，新品種的應(yīng)用前景廣闊。2002年12月，簕竹屬被國(guó)家林業(yè)局正式列入第三批《中華人民共和國(guó)植物新品種名錄(林業(yè)部分)》，而研制簕竹屬DUS測(cè)試指南是進(jìn)行新品種保護(hù)的基礎(chǔ)。目前利用形態(tài)、生理、遺傳標(biāo)記等方法對(duì)簕竹屬竹種進(jìn)行研究不少，但對(duì)簕竹屬進(jìn)行DUS相關(guān)的研究報(bào)道極少，在我國(guó)是項(xiàng)全新的工作。為此，本文以國(guó)際植物新品種保護(hù)聯(lián)盟(UPOV)制定的關(guān)于植物新品種測(cè)試指南研制的技術(shù)文件“TG/1 /3 植物新品種特異性、一致性、穩(wěn)定性測(cè)試及統(tǒng)一描述總則”[5]“TGP/7/1植物新品種測(cè)試指南的研制”[6]“TGP/9特異性測(cè)試”[7]“TGP/10一致性測(cè)試”[8]“TGP/11穩(wěn)定性測(cè)試”[9]以及我國(guó)“GB /T 19557.1 植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測(cè)試指南總則”[10]等為標(biāo)準(zhǔn)和依據(jù)，對(duì)簕竹屬植物新品種 DUS 測(cè)試指南性狀特征進(jìn)行研究，以期為制定我國(guó)簕竹屬植物新品種 DUS 測(cè)試指南奠定基礎(chǔ)，為建立簕竹屬國(guó)內(nèi)外已知品種數(shù)據(jù)庫(kù)提供性狀特征依據(jù)。

1 調(diào)查對(duì)象及調(diào)查方法

1.1 調(diào)查對(duì)象

調(diào)查和整理中國(guó)現(xiàn)有簕竹屬竹種，構(gòu)建中國(guó)簕竹屬竹種數(shù)據(jù)庫(kù)。確定全部品種的類型及關(guān)鍵性狀的變異范圍，以此為基礎(chǔ)篩選測(cè)試性狀，并確定這些性狀的變異范圍，然后劃分各個(gè)性狀的變異等級(jí)，作為測(cè)試依據(jù)。

1.2 調(diào)查方法

在簕竹屬竹種栽培比較多的廣東廣州、福建華安等地，用目測(cè)、計(jì)數(shù)和測(cè)量方法。調(diào)查內(nèi)容包括所有營(yíng)養(yǎng)器官及部分生長(zhǎng)性狀，對(duì)每個(gè)性狀按照形態(tài)學(xué)術(shù)語(yǔ)進(jìn)行文字描述記載，并對(duì)每個(gè)種類的局部和全部形態(tài)拍攝照片，采集標(biāo)本。

觀測(cè)調(diào)查地點(diǎn)設(shè)在福建華安植物園、中國(guó)科學(xué)院華南植物園、浙江長(zhǎng)興竹子中心基地、臨安太湖源竹種園等地點(diǎn)。

2 簕竹屬植物新品種DUS測(cè)試指南的研制

2.1 測(cè)試材料要求

品種權(quán)申請(qǐng)人按規(guī)定時(shí)間、地點(diǎn)提交符合數(shù)量和質(zhì)量要求的測(cè)試品種植物材料。從非測(cè)試地國(guó)家或地區(qū)遞交的材料，申請(qǐng)人應(yīng)按照國(guó)際植物出入境管理和運(yùn)輸?shù)南嚓P(guān)規(guī)定提供海關(guān)、植物檢疫等相關(guān)文件。

根據(jù)簕竹屬竹種的特點(diǎn)，提交的測(cè)試材料數(shù)量不得少于10叢，提交的測(cè)試材料應(yīng)該是1～2年生植株，每1叢都要獨(dú)立帶蔸、含1個(gè)以上稈數(shù)，并含有不短于10 cm的竹鞭，且該竹鞭應(yīng)著生有3個(gè)以上健壯芽的。待測(cè)新品種材料應(yīng)為外觀正常、無(wú)病蟲害感染的植株。除非審批機(jī)關(guān)準(zhǔn)許或要求，否則不應(yīng)對(duì)提交的測(cè)試材料施以任何影響性狀表達(dá)的額外處理。如果已經(jīng)被處理，需提供處理的詳細(xì)信息。

2.2 測(cè)試設(shè)計(jì)和測(cè)試方法

2.2.1測(cè)試設(shè)計(jì)

(1)在符合測(cè)試條件的情況下，測(cè)試周期至少一個(gè)生長(zhǎng)周期。

(2)待測(cè)品種的測(cè)試地點(diǎn)應(yīng)在符合測(cè)試要求的指定測(cè)試基地和實(shí)驗(yàn)室。無(wú)論自然或人為控制測(cè)試條件，均應(yīng)該充分保障待測(cè)品種相關(guān)特征能夠最宜表達(dá)為原則，且待測(cè)品種在測(cè)試地點(diǎn)定植2 a以上。

(3)每個(gè)測(cè)試設(shè)計(jì)10叢待測(cè)品種植株，2個(gè)重復(fù)，每重復(fù)5叢。待測(cè)品種應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)品種和相似品種栽植在相同的測(cè)試設(shè)計(jì)和測(cè)試條件下進(jìn)行。所有的觀測(cè)應(yīng)基于10叢植株或取自10叢植株的相同部位上的材料進(jìn)行。

2.2.2測(cè)試方法 (1)稈應(yīng)在新竹抽枝展葉高生長(zhǎng)基本停止時(shí)，選取正常生長(zhǎng)的植株胸高至2 m高左右部位作為竹稈性狀的測(cè)試材料，測(cè)試植株3株以上。(2)枝的測(cè)試材料選取測(cè)試植株的當(dāng)年生稈的中下部，測(cè)試植株至少3株以上。(3)葉應(yīng)選取在新葉生成的一個(gè)月內(nèi)，測(cè)試植株的當(dāng)年生稈的中下部枝上著葉小枝的中部葉。葉性狀的測(cè)試應(yīng)隨機(jī)取10枚以上，取其平均值。(4)在竹筍—幼竹生長(zhǎng)期，從竹稈基部向上約1.5 m～2.0 m高處的稈籜作為測(cè)試材料。

色彩性狀觀測(cè)時(shí)竹稈應(yīng)在新竹長(zhǎng)成期0～3個(gè)月內(nèi)，稈籜在竹筍—幼竹生長(zhǎng)期附著在幼稈上未脫落前進(jìn)行測(cè)試。色彩特征的觀測(cè)以英國(guó)皇家園藝協(xié)會(huì)出版的比色卡(RHS colour chart)為標(biāo)準(zhǔn)。多數(shù)性狀用目測(cè)(V)確定，少數(shù)性狀用測(cè)量(M)獲得，將個(gè)別測(cè)試性狀具體化，如籜耳形狀中，籜耳的長(zhǎng)寬比<1.2的為卵狀、籜耳的長(zhǎng)寬比在1.3-2.0的為長(zhǎng)卵狀、籜耳的長(zhǎng)寬比>2.0為鐮刀狀。又根據(jù)測(cè)試時(shí)一次測(cè)得單個(gè)記錄(G) 還是多個(gè)記錄(S)，將測(cè)試方法分為 3種：①VG是針對(duì)一組植株或植株部位進(jìn)行單次目測(cè)得到單個(gè)記錄；②VS是針對(duì)一定數(shù)量的植株或植株部位分別進(jìn)行目測(cè)得到多個(gè)記錄；③MS是針對(duì)一定數(shù)量的植株或植株部位分別進(jìn)行測(cè)量得到多個(gè)記錄。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)品種的選擇

在 DUS 測(cè)試中，標(biāo)準(zhǔn)品種主要在性狀分級(jí)中起參照作用，并用來(lái)輔助判斷試驗(yàn)的可靠性。標(biāo)準(zhǔn)品種必須為現(xiàn)有已知品種。標(biāo)準(zhǔn)品種選取的原則如下：(1)性狀穩(wěn)定；(2)分布廣泛；(3)性狀表現(xiàn)與性狀描述要準(zhǔn)確一致；(4)標(biāo)準(zhǔn)品種數(shù)量要盡可能少，盡量篩選能代表多個(gè)性狀表達(dá)狀態(tài)的已知品種作為標(biāo)準(zhǔn)品種[5，11]。

遵循以上原則，篩選出34個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品種：簕竹，長(zhǎng)枝竹，黃金間碧玉，黃紋媽竹，信宜石竹，孝順竹，小佛肚竹，單竹，藤枝竹，藤單竹，花竹，青絲黃竹，油竹，緬甸竹，媽竹，印度簕竹，俯竹，撐篙竹，水單竹，小葉琴絲竹，青竿竹，大眼竹，馬甲竹，粉單竹，學(xué)琳石竹，綿竹，細(xì)單竹，刀把竹，冇節(jié)竹，黃竹仔，黃稈小佛肚，馬蹄竹，大佛肚竹，爛目竹。其中有28個(gè)種6個(gè)變種。部分品種被多次使用。

2.4 測(cè)試性狀的選擇

在DUS測(cè)試指南中，測(cè)試性狀的選擇是其重要的環(huán)節(jié)。植物性狀按照測(cè)試類型被劃分為質(zhì)量性狀(QL)、數(shù)量性狀(QN)和假性質(zhì)量性狀(PQ)3種。質(zhì)量性狀通常不受環(huán)境影響，不同性狀之間不存在連續(xù)性數(shù)量變化，而呈現(xiàn)中斷性變化，即質(zhì)量性狀是間斷的、不連續(xù)的，表達(dá)性狀是一維的性狀。在實(shí)際操作過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，對(duì)于一種植物或者一個(gè)器官，“形狀”“形態(tài)”等特征可能是質(zhì)量性狀，而在另外一個(gè)器官和植物上，“形狀”“形態(tài)”等特征可能是數(shù)量性狀，在本次測(cè)試中，很多“形狀”“形態(tài)”等性狀為數(shù)量性狀，如竹株節(jié)間形態(tài)即為數(shù)量性狀，分為圓柱狀、短縮腫脹畸形和圓柱狀呈“之字形”彎曲，表明這些性狀雖然相似，但卻處于不同基因型控制下。數(shù)量性狀指群體內(nèi)各個(gè)體間變異是連續(xù)的、一維的、線性的，如籜鞘長(zhǎng)度和籜舌高度等。假性質(zhì)量性狀表達(dá)至少部分是連續(xù)的，但其變化范圍是多維的、是非線性的，跟質(zhì)量性狀一樣需要確定表達(dá)的各個(gè)狀態(tài)。

根據(jù)測(cè)試類型的定義，并結(jié)合具有較好的遺傳穩(wěn)定性、在品種間可以表現(xiàn)足夠的差異型、能夠比較準(zhǔn)確的識(shí)別和描述等原則，篩選出77個(gè)測(cè)試性狀。

從類型上看，性狀中有質(zhì)量性狀25個(gè)，包括氣生根、新稈節(jié)下白粉環(huán)、新稈節(jié)間被白粉、新稈節(jié)間被毛、新稈顏色條紋、新稈節(jié)被毛環(huán)、新稈節(jié)被毛環(huán)部位、新稈顏色條紋、竹株枝具刺、1.3 m籜鞘被毛、1.3 m籜鞘斑點(diǎn)數(shù)量、1.3 m籜鞘邊緣被毛、1.3 m籜鞘基部毛環(huán)、1.3 m籜鞘顏色條紋、1.3 m籜耳大小、1.3 m籜葉背面被毛、1.3 m籜葉腹面被毛、2.0 m籜鞘被毛、2.0 m籜鞘斑點(diǎn)數(shù)量、2.0 m籜鞘邊緣被毛、2.0 m籜鞘基部毛環(huán)、2.0 m籜鞘顏色條紋、2.0 m籜耳大小、2.0 m籜葉背面被毛、2.0 m籜葉腹面被毛；數(shù)量性狀49個(gè)，主要有新稈被毛性狀、新稈2.0 m節(jié)間長(zhǎng)、稈節(jié)籜環(huán)隆起程度、竹株胸徑、竹株第一分枝高、竹株節(jié)間形態(tài)、每小枝葉片數(shù)、一般葉片長(zhǎng)度、葉基形狀、1.3 m籜鞘被白粉、1.3 m籜鞘先端形狀、1.3 m籜鞘長(zhǎng)度、1.3 m處2個(gè)籜耳比較、1.3 m籜耳波狀皺褶、1.3 m籜耳形狀、1.3 m籜耳繸毛長(zhǎng)度、1.3 m籜耳繸毛形態(tài)、1.3 m籜耳生長(zhǎng)位置、1.3 m籜耳下延程度、1.3 m籜葉形狀、1.3 m籜葉生長(zhǎng)狀態(tài)、1.3 m籜葉形態(tài)、1.3 m籜葉先端形狀、1.3 m籜鞘頂寬/籜葉基寬、1.3 m籜葉長(zhǎng)度/籜鞘長(zhǎng)度、1.3 m籜舌高度、1.3 m籜舌邊緣睫毛、1.3 m籜舌睫毛長(zhǎng)度、1.3 m籜舌邊緣性狀、2.0 m籜鞘被白粉、2.0 m籜鞘先端形狀、2.0 m籜鞘長(zhǎng)度、2.0 m處2個(gè)籜耳比較、2.0 m籜耳波狀皺褶、2.0 m籜耳形狀、2.0 m籜耳繸毛長(zhǎng)度、2.0 m籜耳繸毛形態(tài)、2.0 m籜耳生長(zhǎng)位置、2.0 m籜耳下延程度、2.0 m籜葉形狀、2.0 m籜葉生長(zhǎng)狀態(tài)、2.0 m籜葉形態(tài)、2.0 m籜葉先端形狀、2.0 m籜鞘頂寬/籜葉基寬、2.0 m籜葉長(zhǎng)度/籜鞘長(zhǎng)度、2.0 m籜舌高度、2.0 m籜舌邊緣睫毛、2.0 m籜舌睫毛長(zhǎng)度、2.0 m籜舌邊緣性狀；假質(zhì)量性狀3 個(gè)，新稈顏色、1/3 m籜葉顏色、2.0 m籜葉顏色。

從功能上看，可以分為必測(cè)性狀和補(bǔ)充性狀2種。必測(cè)性狀(帶“*”號(hào)性狀)是每個(gè)申請(qǐng)品種必須進(jìn)行測(cè)試、考察的基本性狀，確定為44個(gè)，包括根莖氣生根、新稈節(jié)間被白粉、新稈被毛性狀、新稈節(jié)被毛環(huán)、新稈顏色、新稈顏色條紋、新稈2.0 m節(jié)間長(zhǎng)、葉背面被毛、1.3 m籜鞘被毛、1.3 m籜鞘斑點(diǎn)數(shù)量、1.3 m籜鞘基部毛環(huán)、1.3 m籜鞘先端形狀、1.3 m籜鞘邊緣被毛、1.3 m籜鞘顏色條紋、1.3 m籜耳大小、1.3 m籜耳波狀皺褶、1.3 m籜葉生長(zhǎng)狀態(tài)、1.3 m籜耳生長(zhǎng)位置、1.3 m籜耳下延、1.3 m籜葉形狀、1.3 m籜耳形狀、1.3 m籜葉形態(tài)、1.3 m籜舌高度、1.3 m籜舌邊緣睫毛、1.3 m籜舌睫毛長(zhǎng)度、1.3 m籜舌邊緣性狀、2 m籜鞘被毛、2 m籜鞘斑點(diǎn)數(shù)量、2 m籜鞘基部毛環(huán)、2 m籜鞘先端形狀、2 m籜鞘邊緣被毛、2 m籜鞘顏色條紋、2 m籜耳大小、2 m籜耳波狀皺褶、2 m籜葉生長(zhǎng)狀態(tài)、2 m籜耳生長(zhǎng)位置、2 m籜耳下延、2 m籜葉形狀、2 m籜耳形狀、2 m籜葉形態(tài)、2 m籜舌高度、2 m籜舌邊緣睫毛、2 m籜舌睫毛長(zhǎng)度、2 m籜舌邊緣性狀。補(bǔ)充性狀(非“*”號(hào)性狀)是在必測(cè)性狀不能區(qū)別申請(qǐng)品種和近似品種時(shí)，仍需進(jìn)一步測(cè)試而選用的性狀，確定為33個(gè)，包括新稈節(jié)下白粉環(huán)、新稈節(jié)被毛環(huán)部位、新稈節(jié)間被毛、新稈節(jié)被毛環(huán)部位、籜環(huán)隆起程度、竹株胸徑、竹株枝具刺、竹株第一分枝高、竹株節(jié)間形態(tài)、一般葉片長(zhǎng)度、每小枝葉片數(shù)、葉基形狀、1.3 m籜鞘被白粉、1.3 m籜鞘長(zhǎng)度、1.3 m處2個(gè)籜耳比較、1.3 m籜耳繸毛形態(tài)、1.3 m籜耳繸毛長(zhǎng)度、1.3 m籜葉背面被毛、1.3 m籜葉腹面被毛、1.3 m籜葉顏色、1.3 m籜葉先端形狀、1.3 m籜鞘頂寬/籜葉基寬、1.3 m籜葉長(zhǎng)度/籜鞘長(zhǎng)度、2.0 m籜鞘被白粉、2.0 m籜鞘長(zhǎng)度、2.0 m處2個(gè)籜耳比較、2.0 m籜耳繸毛形態(tài)、2.0 m籜耳繸毛長(zhǎng)度、2.0 m籜葉背面被毛、2.0 m籜葉腹面被毛、2.0 m籜葉顏色、2.0 m籜葉先端形狀、2.0 m籜鞘頂寬/籜葉基寬、2.0 m籜葉長(zhǎng)度/籜鞘長(zhǎng)度。“+”號(hào)性狀是附加了圖解說(shuō)明的表達(dá)性狀，包括葉基形狀、籜鞘先端形狀、籜耳形狀、籜葉形狀和籜葉先端形狀。

2.5 測(cè)試指南中性狀的劃分和表達(dá)狀態(tài)描述分級(jí)及代碼的確定

測(cè)試指南對(duì)每個(gè)性狀的表達(dá)狀態(tài)(即性狀特征描述)進(jìn)行準(zhǔn)確描述和科學(xué)分級(jí)，共描述劃分了261個(gè)表達(dá)狀態(tài)或等級(jí)。質(zhì)量性狀是指表達(dá)性狀是一維的性狀，在測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)里從代碼1開始，沒有上限，如新稈節(jié)間被毛“無(wú)、稀疏被毛、密被毛”分別用代碼“1、2、3”來(lái)進(jìn)行描述；數(shù)量性狀主要指數(shù)量多少、個(gè)體大小等，分級(jí)代碼可以是連續(xù)數(shù)字“1、2、3……”，也可以是間隔數(shù)字“1、3、5、7、9”，如竹株胸徑分為“小型竹(<3 cm)、中型竹(3-7.9 cm)、大型竹(>8 cm)”3種表達(dá)狀態(tài)，主要根據(jù)胸徑大小來(lái)劃分，分級(jí)代碼為“1、2、3”，籜鞘先端形狀“顯著凹下、微凹下、平截或近平截、微凸、強(qiáng)烈凸起”，分級(jí)代碼為“1、3、5、7、9”。假性質(zhì)量性狀如籜葉顏色分為“綠色、綠染紫色、彩色、枯草色、棕色……”，狀態(tài)代碼分別用“1、2、3……”來(lái)描述。

2.6 簕竹屬DUS的判定標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)UPOV制定的有關(guān)植物新品種特異性、一致性、穩(wěn)定性判定方法[7-9]，特異性必須是申請(qǐng)的新品種與已知品種存在顯著差異，而且差異必須具有恒定性。簕竹屬DUS的判定標(biāo)準(zhǔn)如下：

2.6.1特異性分析 特異性分析是DUS測(cè)試的核心，它關(guān)系到新品種是否能被授予。在簕竹屬新品種測(cè)試中，如測(cè)試品種與相似品種間差異非常顯著，則只需1個(gè)生長(zhǎng)周期的測(cè)試；如因環(huán)境因素等的影響，導(dǎo)致測(cè)試品種與相似品種間差異不顯著，則需要2個(gè)或2個(gè)以上生長(zhǎng)周期的測(cè)試。測(cè)試品種與相似品種在質(zhì)量性狀只要有1個(gè)性狀有顯著差異，則可判定測(cè)試品種具備特異性。如在“新稈節(jié)被毛環(huán)”(性狀6)這個(gè)測(cè)試指標(biāo)上，申請(qǐng)品種表現(xiàn)為“無(wú)(1)”，近似品種表現(xiàn)為“籜環(huán)被毛環(huán)(2)”，兩者在這個(gè)性狀上分屬不同的表達(dá)狀態(tài)，就可以認(rèn)為2個(gè)品種之間存在顯著差異，申請(qǐng)品種具有特異性。在數(shù)量性狀上，測(cè)試品種與相似品種如果有2個(gè)以上性狀有顯著差異，或者1個(gè)性狀的超過(guò)2個(gè)代碼的差異，即可判定測(cè)試品種具備特異性，若申請(qǐng)品種與相似品種差異表達(dá)相差2個(gè)或2個(gè)以下代碼時(shí)，需要通過(guò)數(shù)理統(tǒng)計(jì)分析其差異是否顯著，例如：在 “1.3 m籜鞘(2個(gè)籜耳比較)”(性狀 29)上，如果申請(qǐng)品種表現(xiàn)為“近相等(1)”，而近似品種為“4倍以上(5)”，則可以明確判定申請(qǐng)品種具有特異性；而如果申請(qǐng)品種表現(xiàn)為“1.1-1.9倍(2)”，近似品種表現(xiàn)為“3-3.9倍(4)”，則必須通過(guò)數(shù)理統(tǒng)計(jì)分析去判定兩者差異是否顯著。測(cè)試品種與相似品種在假質(zhì)量性狀上要至少有2個(gè)性狀有差異或者1個(gè)性狀的超過(guò)2個(gè)不連貫代碼的差異，則可判定測(cè)試品種具備特異性。如“新稈顏色”(性狀8)上，如果申請(qǐng)品種表現(xiàn)為“綠色(1)”，近似品種表現(xiàn)為“黃綠條紋相間(5)”，即表明申請(qǐng)品種和近似品種差異是顯著的；或者如“新稈顏色”(性狀8)和“1.3 m籜葉顏色”(性狀41)上，申請(qǐng)品種和近似品種存在差異，也可以判定申請(qǐng)品種具有特異性。

2.6.2一致性分析 一致性原則一般要求申請(qǐng)品種經(jīng)過(guò)繁殖后，除因?yàn)榉敝撤椒ú煌斐刹煌淖儺愃酵?，所有測(cè)試性狀或品種描述性狀特征一致[12]。竹子開花不多見，簕竹屬繁殖一般以分蔸育苗、埋稈育苗、埋節(jié)育苗、埋蔸育苗、竹枝育苗等無(wú)性繁殖為主，一致性判斷采用異型株法，根據(jù)1%群體標(biāo)準(zhǔn)和95%可靠性概率，10株觀測(cè)植株中異型株的最大允許值為1。

2.6.3穩(wěn)定性分析 測(cè)試品種在測(cè)試中符合特異性和一致性要求，可認(rèn)為該品種具備穩(wěn)定性。在實(shí)際操作中，一般不會(huì)對(duì)穩(wěn)定性進(jìn)行單獨(dú)測(cè)試，如特殊情況或存在疑問(wèn)時(shí)，可以再進(jìn)行測(cè)試1個(gè)生長(zhǎng)周期，若2次測(cè)試的表現(xiàn)一致，變異度無(wú)顯著變化，則可以認(rèn)為該測(cè)試品種具有穩(wěn)定性；或者可以提供新的測(cè)試材料，測(cè)試其是否與先前提供的測(cè)試材料表達(dá)出相同的特征。

3 結(jié)論

簕竹屬測(cè)試指南研制工作是根據(jù)國(guó)際植物新品種保護(hù)聯(lián)盟和國(guó)內(nèi)相關(guān)文件要求，吸取了各方面專家的意見和建議完成的。根據(jù)多年、多點(diǎn)的測(cè)試實(shí)踐，比較全面的掌握了簕竹屬植物種類的形態(tài)特征，選擇的77個(gè)測(cè)試性狀比較有代表性，對(duì)測(cè)試性狀的表達(dá)狀態(tài)進(jìn)行準(zhǔn)確描述和科學(xué)分級(jí)。本項(xiàng)研究將為保護(hù)育種者權(quán)利，促進(jìn)簕竹屬植物新品種選育起到積極作用。

目前DUS測(cè)試指南主要以形態(tài)特征為主，這些性狀雖然簡(jiǎn)單易測(cè)，但是會(huì)受到季節(jié)、自然災(zāi)害及病蟲害等的限制。而其中數(shù)量性狀為多基因控制，性狀分級(jí)通常不明顯，而且受遺傳力的影響較大，很多親緣關(guān)系很近的品種從形態(tài)上難以區(qū)分。DNA分子標(biāo)記是以DNA多態(tài)性為基礎(chǔ)的遺傳標(biāo)記，在鑒別不易從表型區(qū)分的親緣關(guān)系很近的品種上有較強(qiáng)優(yōu)勢(shì)。目前已經(jīng)有利用SSR標(biāo)記技術(shù)、RAPD技術(shù)和SRAP技術(shù)對(duì)簕竹屬進(jìn)行遺傳多樣性方面的研究。婁永峰等[13]采用AFLP和ISSR分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)簕竹屬4個(gè)竹種的12個(gè)變異類型的遺傳變異進(jìn)行分析，2種標(biāo)記均揭示簕竹屬4個(gè)竹種間存在較大的遺傳變異，但同一竹種不同變異類型間的遺傳差異極小，且AFLP和ISSR標(biāo)記的遺傳相似性相關(guān)性較高，說(shuō)明2種標(biāo)記結(jié)果均可用于簕竹屬遺傳多樣性研究。管雨[14]利用EST-SSR和SRAP技術(shù)對(duì)簕竹屬和牡竹屬的45個(gè)竹種進(jìn)行了遺傳多樣性分析。張志欣[15]對(duì)28個(gè)簕竹屬竹種進(jìn)行DNA隨機(jī)擴(kuò)增，所得的RAPD產(chǎn)物顯示了豐富的多態(tài)性，而且聚類結(jié)果與形態(tài)分類基本吻合，表明RAPD技術(shù)可以應(yīng)用于簕竹屬分類研究。這些均證明DNA分子標(biāo)記在竹類植物遺傳多態(tài)性研究上起到了很好的輔助作用，今后也將會(huì)更加廣泛地被用于竹類植物新品種測(cè)試審查和品種鑒別。以表型測(cè)試性狀為主，建立并完善已知品種DNA指紋數(shù)據(jù)庫(kù)，將逐步成為植物新品種測(cè)試的主要技術(shù)手段，是今后DUS測(cè)試指南研制的趨勢(shì)和方向。

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