犬細(xì)小病毒單克隆抗體在治療犬細(xì)小病毒病上的應(yīng)用

王國明

(昌樂縣畜牧獸醫(yī)局,山東昌樂 262400)

犬細(xì)小病毒單克隆抗體在治療犬細(xì)小病毒病上的應(yīng)用

王國明

(昌樂縣畜牧獸醫(yī)局,山東昌樂 262400)

犬細(xì)小病毒病是由犬細(xì)小病毒感染幼犬所引發(fā)的傳染性疾病，該疾病的癥狀表現(xiàn)主要為白細(xì)胞減少、出血性腸炎以及嘔吐等，具有傳染性強(qiáng)死亡率高以及發(fā)病率高等方面的特點(diǎn)，對(duì)經(jīng)濟(jì)型犬類養(yǎng)殖業(yè)產(chǎn)生嚴(yán)重影響。犬細(xì)小病毒單克隆抗體可以與犬細(xì)小病毒抗原相結(jié)合，促進(jìn)犬細(xì)小病毒變性，改善該疾病的治療效果。本文從臨床癥狀、流行病學(xué)等角度對(duì)犬細(xì)小病毒單克隆杭體治療犬細(xì)小病毒病的作用原理進(jìn)行了詳細(xì)的闡述。

臨床應(yīng)用 犬細(xì)小病毒病 單克隆抗體

犬細(xì)小病毒病通常出現(xiàn)于我國華東、東北等地區(qū)的犬類養(yǎng)殖領(lǐng)域，由于在該疾病的抗病毒藥物研制不足，相關(guān)的治療沒有根本性的突破。研究發(fā)現(xiàn)，犬細(xì)小病毒單克隆抗體可以中和犬細(xì)小病毒，提高免疫能力，達(dá)到預(yù)期的治療效果。

1 病原學(xué)

犬幼小病毒是一種單負(fù)股、無囊膜的NDA病毒，由VP1、VP2與VP3蛋白組成。該病毒也可以劃分為CPV1與CPV2兩種類型，其中CPV1型也可以被稱為犬微小病毒，能夠引發(fā)腸炎、心肌炎等疾病，能夠通過生育傳染給下一代，造成幼仔死亡。CPV2則類似于貓泛白細(xì)胞減少癥病毒。在經(jīng)歷長期的變異過程后，產(chǎn)生了CPV2b型等新的素株，傳染性更強(qiáng)。

2 流行病學(xué)

犬細(xì)小病毒普遍出現(xiàn)于90日齡以內(nèi)的幼犬，發(fā)病迅速，能夠短時(shí)間內(nèi)引發(fā)心肌炎病進(jìn)而造成死亡。相對(duì)于土種犬來說，外來犬與純種犬發(fā)病率較高，多發(fā)于冬春季。

3 發(fā)病機(jī)理

患有犬細(xì)小病毒病的犬類在受到感染2日內(nèi)，病毒于口咽部復(fù)制，在體液循環(huán)作用下擴(kuò)散至體內(nèi)其他器官，一周后產(chǎn)生毒血癥，造成全身性病毒感染。病毒主要攻擊心肌細(xì)胞與腸上皮細(xì)胞兩種細(xì)胞，犬與犬之間則通過口鼻傳播，病毒于胸腺、腸系淋巴結(jié)以及咽喉部不斷復(fù)制。病毒對(duì)腸隱窩胚上皮組織造成侵害，進(jìn)而引發(fā)上皮組織萎陷，消解正常的細(xì)胞更新能力。病犬上皮細(xì)胞不斷壞死，固有膜得不到保護(hù)，進(jìn)而造成腸腺上皮細(xì)胞出現(xiàn)壞死現(xiàn)象。心臟細(xì)胞則出現(xiàn)間質(zhì)水腫、局部斷裂、變細(xì)等問題，心肌毛細(xì)血管充血、擴(kuò)張。淋巴結(jié)與脾臟中細(xì)胞數(shù)量大幅降低。各大臟器均會(huì)出現(xiàn)炎性細(xì)胞分潤、出血以及充血等癥狀。對(duì)于疾病癥狀十分嚴(yán)重的犬類，還可能會(huì)相繼出現(xiàn)淋巴細(xì)胞減少癥以及中性粒細(xì)胞減少癥等疾病。

4 臨床癥狀

犬類在感染犬細(xì)小病毒后，疾病內(nèi)在表現(xiàn)可以分為心肌炎型與腸炎型。對(duì)于腸炎型的犬類，會(huì)經(jīng)歷1～2周的潛伏期，病初表現(xiàn)為發(fā)熱嘔吐、精神沉郁等，嘔吐物呈現(xiàn)黃綠色、黏液狀。發(fā)病1日后產(chǎn)生腹瀉癥狀，糞便呈番茄醬色或咖啡色稀狀血便。隨著病情的發(fā)展，血便次數(shù)增加，腥臭氣味加重。血便后病犬會(huì)出現(xiàn)體重明顯減輕、鼻境干燥以及眼球下陷等方面的癥狀。對(duì)于嚴(yán)重病例，由于犬類腸內(nèi)腐敗引發(fā)彌散性凝血與內(nèi)毒素中毒，造成犬類死亡，白細(xì)胞數(shù)量大幅降低。對(duì)于心肌炎型的犬類，在癥狀表現(xiàn)上并不十分明顯，病患會(huì)出現(xiàn)呼吸困難，并在較短時(shí)間內(nèi)死亡，部分疾病會(huì)出現(xiàn)輕度腹瀉癥狀。

5 犬細(xì)小病毒病的單克隆抗體治療法

5.1 犬細(xì)小病毒單克隆抗體的制備

犬細(xì)小病毒單克隆抗體，是通過細(xì)胞融合技術(shù)，愈合SP2/9瘤細(xì)胞與BALB/c小鼠脾細(xì)胞，所制備出的雜交瘤細(xì)胞株中含有抗犬細(xì)小病毒單克隆抗體，再通過該抗體分離出雜交瘤細(xì)胞，并進(jìn)行罐流培養(yǎng)，對(duì)培養(yǎng)物進(jìn)行純化處理后得到特異性較強(qiáng)的抗體，即為犬細(xì)小病毒的單克隆抗體藥物。相比于高免血血清，單克隆抗體效價(jià)高、純度高、質(zhì)地均一并且可以投入規(guī)?；a(chǎn)。

5.2 作用機(jī)理

犬細(xì)小病毒單克隆抗體能夠通過血液與淋巴循環(huán)系統(tǒng)，能夠在較短時(shí)間內(nèi)到達(dá)患病的細(xì)胞與組織，抑制病毒的復(fù)制與侵染。該抗體能夠?qū)λ拗骷?xì)胞的復(fù)制與吸附過程進(jìn)行抑制，進(jìn)而起到病毒中和的作用，不同類型的該抗體可以利用不同的機(jī)制起到病毒中和的效果，同種類型的該抗體能夠補(bǔ)體存在的情況下起到中和效果，補(bǔ)體也可以在抗體-病毒復(fù)合物的作用下發(fā)揮作用。部分非中和活性的抗體會(huì)與其他種類的抗病毒物質(zhì)聯(lián)合起到形成保護(hù)機(jī)制，激活并喚醒細(xì)胞免疫系統(tǒng)。因此，犬細(xì)小病毒單克隆抗體作用一種典型的被動(dòng)免疫制劑，也能夠與其他物質(zhì)一同起到激發(fā)犬類機(jī)體主動(dòng)免疫的效果。

5.3 抗體使用的需要注意事項(xiàng)

第一，對(duì)于患病犬類，需要盡早使用抗體藥物，可以盡早起到降低機(jī)體組織破壞程度的效果；第二，單克隆抗體只具有相對(duì)較短的半衰期，藥物作用時(shí)間只能夠維持1～2周，抗體藥物的注射一方面要保證足量，另外，也要適當(dāng)提高注射的頻率，才能夠起到預(yù)期的治療效果。在單克隆抗體的使用量方面，則需要依照犬類的年齡與體征對(duì)使用量進(jìn)行調(diào)整。對(duì)于較高的疾病預(yù)防需求，可以加倍提高抗體制劑的作用量。在注射劑量較大的情況下，可以取多個(gè)部位同時(shí)注射，飼養(yǎng)人員需要對(duì)注射部位進(jìn)行揉壓處理，促進(jìn)藥物分散；第三，對(duì)于過敏體質(zhì)比較嚴(yán)重的犬類，在使用該抗體藥物之前需要進(jìn)行過敏性實(shí)驗(yàn)，若在使用該藥物后發(fā)現(xiàn)存在過敏現(xiàn)象，則需要立即使用其他脫敏藥物。

另外，對(duì)于犬細(xì)小病毒病犬類，還可以選用克林霉素、恩氟沙星、慶大霉素、頭抱哇林等輔助治療藥物，鞏固治療效果。

6 結(jié)語

經(jīng)實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，犬細(xì)小病毒單克隆抗體在效價(jià)、特異性以及純度等方面均有著較為明顯的優(yōu)勢，對(duì)于犬細(xì)小病毒病的治療與預(yù)防方面能夠在較短時(shí)間內(nèi)收到效果。另外，抗體治療還可以與其他種類的治療方式相配合，能夠進(jìn)一步改善治療效果，提高治愈率，加快病犬痊愈速度。

[1] 文翼平，李英倫，文心田.犬細(xì)小病毒單克隆抗體對(duì)犬細(xì)小病毒病的臨床應(yīng)用研究[J].中國獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2011，（11）：1564-1567.

[2] 楊振宇.犬細(xì)小病毒單克隆抗體的制備和初步應(yīng)用[D].揚(yáng)州大學(xué)，2007.

[3] 高麗.犬細(xì)小病毒單克隆抗體的制備及初步應(yīng)用[D].吉林大學(xué)，2009.