中藥對腦缺血和缺血/再灌注性損傷的保護作用研究*

李沐涵 程海波 李 黎 馬艷霞 趙鳳鳴 陳海彬 周紅光 吳勉華

（南京中醫(yī)藥大學，江蘇 南京 210023）

·綜 述·

中藥對腦缺血和缺血/再灌注性損傷的保護作用研究*

李沐涵 程海波 李 黎 馬艷霞 趙鳳鳴 陳海彬 周紅光 吳勉華△

（南京中醫(yī)藥大學，江蘇 南京 210023）

為了探討中藥在缺血性腦損傷和缺血再灌注腦損傷方面的腦保護作用，查閱近10年相關文獻及研究報道，從實驗方法、實驗結果及結論等方面總結了相關中藥復方、單味中藥及有效成分的腦保護作用，為今后進一步研究相關中藥或復方的腦保護作用以及臨床應用提供有效參考。

缺血性腦損傷 缺血/再灌注腦損傷 腦保護 中藥

腦缺血是因大腦血流障礙引起大腦缺血、缺氧，導致局部腦組織水腫、壞死或軟化。缺血/再灌注損傷（CI/ RI）是指缺血腦組織在恢復血流灌注后腦組織損傷進一步加重，通常伴隨神經(jīng)細胞損傷，神經(jīng)功能破壞，腦梗死灶形成，嚴重的炎癥反應。據(jù)調(diào)查缺血性腦損傷及缺血/再灌注損傷已經(jīng)成為了威脅人類生命的重要因素之一，病后即使患者恢復意識，但往往伴隨嚴重的后遺癥，諸如肢體麻木、半身不遂、腦萎縮等，嚴重影響患者的智力和生活質(zhì)量。近年來實驗研究表明，多種中藥復方、單味中藥及有效提取成分在防治缺血性和缺血/再灌注腦損傷方面有良好的療效，本文將近十年有關治療缺血性腦損傷和缺血/再灌注腦損傷的實驗研究進行如下綜述。

1 中藥復方

小續(xù)命湯由麻黃、桂枝、防風、防己、杏仁、黃芩、人參、甘草、大棗、川芎、白芍、大附子、生姜組成，是治療中風及神經(jīng)系統(tǒng)疾病的代表方劑。Rui Lan等通過組織形態(tài)學觀察，小續(xù)命湯顯著改善缺血/再灌注模型大鼠缺血受損區(qū)細胞形態(tài)、線粒體的完整性，TUNNEL法檢測凋亡細胞顯著減少，Western Blot和免疫熒光顯示小續(xù)命湯治療可下調(diào)凋亡基因P53和Bax表達，上調(diào)抗凋亡基因Bcl-2表達，抑制細胞色素C和Smac/Diablo的釋放以及Caspase-9和Caspase-3的激活［1］。路暢等研究發(fā)現(xiàn)小續(xù)命湯有效成分對局灶性腦缺血/再灌注大鼠損傷恢復早期即產(chǎn)生神經(jīng)保護作用，其作用機理可能與調(diào)節(jié)腦內(nèi)氧化－抗氧化平衡有關［2］。

補陽還五湯由黃芪、當歸、赤芍、川芎、地龍、紅花、桃仁組成，為補氣活血之代表方，臨床常用來治療麻痹和中風。周賽男等［3］研究發(fā)現(xiàn)補陽還五湯組在各時間點腦梗死面積均明顯小于同時相模型組，神經(jīng)功能評分也均較模型組，差異具有統(tǒng)計學意義，HE染色顯示補陽還五湯組海馬和皮質(zhì)細胞形態(tài)明顯改善，細胞排列較模型組整齊。史文心等研究發(fā)現(xiàn)補陽還五湯對大鼠腦組織有保護作用，其機制可能與減少海馬神經(jīng)元損傷，促進海馬5-HT含量顯著增多有關［4］。

黃芪注射液是臨床治療缺血性腦血管疾病的常用藥物。Guangli Liu等研究發(fā)現(xiàn)黃芪注射液能顯著降低局灶性腦缺血損傷模型大鼠的神經(jīng)元細胞細胞凋亡和梗死灶面積，缺血區(qū)細胞形態(tài)和動物行為學功能顯著改善，其機制可能是通過抑制凋亡基因JNK3的mRNA和蛋白的表達實現(xiàn)的［5］。韋云飛等研究黃芪注射液對大鼠腦缺血損傷后腦組織巢蛋白（Nestin）及星形膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）、微管相關蛋白（MAP2）陽性細胞數(shù)的表達，結果顯示黃芪注射液組各時間點Nestin及GFAP、MAP2陽性細胞數(shù)顯著高于對照組（P＜0.05），而黃芪注射液組和對照組的Nestin-GFAP陽性細胞數(shù)于各時間點明顯多于Nestin-MAP2陽性細胞數(shù)，說明黃芪注射液可通過增加Nestin的表達而促進神經(jīng)干細胞的增殖和分化［6］。

地黃飲子是臨床常用常用補腎填髓法治療缺血性腦血管疾病的常用方［7］，宮健偉等研究發(fā)現(xiàn)與模型組比較，地黃飲子組能顯著降低Bax、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase-3）蛋白表達，升高Bcl-2蛋白表達，實驗研究表明地黃飲子在大鼠腦缺血再灌注損傷時可下調(diào)Bax、Caspase-3蛋白及升高Bcl-2蛋白表達，抑制細胞凋亡而發(fā)揮腦保護作用［8］。

圣腦康臨床常用來治療各種急慢性腦血管疾病。Lin Chen等研究發(fā)現(xiàn)圣腦康能有效降低缺血再灌注造成的神經(jīng)缺損評分和梗死灶面積，治療組大鼠血清中丙二醛（MDA）、iNOS（誘導型）和TNOS（總）含量降低，超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽過氧化物酶（GSHPx）含量升高，組織學檢測表明損傷腦組織神經(jīng)元凋亡減少，機制研究表明凋亡基因Caspase-3表達減低［9］。

2 單味中藥或有效成分

香港遠志為遠志科遠志屬植物，主要分布在中國大陸江西、福建、廣東、四川等地，可安神益智、祛痰開竅、消散癰腫，是失眠多夢、癲癇、驚風，以及咳嗽痰多等癥的臨床常用藥。詹海濤等研究發(fā)現(xiàn)，香港遠志提取物治療能夠顯著改善缺血/再灌注模型大鼠的神經(jīng)缺損癥狀，顯著降低腦梗死面積、血清神經(jīng)元烯醇化酶、缺損區(qū)神經(jīng)元凋亡，其機制可能是通過上調(diào)抗凋亡基因Bcl-2，下調(diào)凋亡基因Bax表達，抑制缺損區(qū)細胞凋亡［10］。也有報道香港遠志提取物對大鼠腦缺血再灌注損傷有保護作用，機制可能是下調(diào)nNOS（神經(jīng)元型）、iNOS的表達，抑制細胞凋亡，改善神經(jīng)功能［11］。詹海濤等同時報道香港遠志總黃酮苷也可改善缺血/再灌注模型大鼠神經(jīng)缺損癥狀，顯著降低腦梗死面積、血清神經(jīng)元烯醇化酶、缺損區(qū)神經(jīng)元凋亡，其機制可能是通過促進轉化生長因子β（TGF-β）和熱休克蛋白70（HSP70）的表達，延緩神經(jīng)元死亡實現(xiàn)的［12］。

大黃具有瀉下攻積、清熱瀉火、涼血解毒等作用，現(xiàn)代研究表明大黃具有抗炎、抗衰老、降低血脂、改善血黏度的作用，對心腦血管系統(tǒng)也具有廣泛的藥理作用。嚴志康等采用缺血再灌注模型研究發(fā)現(xiàn)，大黃可顯著改善缺血區(qū)神經(jīng)細胞形態(tài)改變，減輕細胞腫脹程度、神經(jīng)功能評分以及梗死面積；心臟取血，發(fā)現(xiàn)大黃組全血黏度、紅細胞聚集指數(shù)顯著降低，從血液流變學角度論證了大黃對缺血性腦保護的作用［13］。另有文獻報道大黃減輕缺血/再灌注區(qū)細胞受損程度，與抗凋亡基因Bcl-2升高，凋亡基因bax降低關系密切［14］。李建生等研究發(fā)現(xiàn)大黃苷元可降低缺血/再灌注模型大鼠神經(jīng)癥狀評分、神經(jīng)元細胞凋亡，其bcl-2基因表達增強，Bax基因表達減少［15］。

山茱萸肉入藥為成熟果實，可補益肝腎、收澀固脫，為臨床平補陰陽之要藥。張麗等實驗研究發(fā)現(xiàn)，山茱萸環(huán)烯醚萜苷可降低局灶性腦缺血模型大鼠保護缺血再灌注腦損傷大鼠神經(jīng)功能和神經(jīng)元［16］。有研究發(fā)現(xiàn)山茱萸主要成分莫諾苷可升高缺血/再灌注模型大鼠腦組織SOD含量和神經(jīng)元細胞數(shù)［17］，增加GSH含量，同時降低Caspase-3表達［18］。

葛根為解表、發(fā)散風熱常用中藥，臨床多用于治療外感發(fā)熱、斑疹不透、項背強痛、熱痢、脾虛泄瀉等癥。張義兵等采用大鼠局灶性腦缺血模型的研究發(fā)現(xiàn)，3′-甲氧基葛根素可改善局灶性腦缺血引起的神經(jīng)行為學障礙，減少缺血引起的腦梗死范圍和腦含水量；顯著提高腦缺血再灌模型大鼠缺血區(qū)海馬過氧化氫酶（CAT）、GSH-Px活性和皮層CAT活性；降低腦缺血再灌模型大鼠缺血區(qū)海馬過氧化脂質(zhì)（LPO）和乳酸（LD）的含量，提示其腦保護作用可能與其抗氧化作用有關［19］。另有研究發(fā)現(xiàn)葛根素對缺血/再灌注損傷的保護作用與上調(diào)抗調(diào)亡基因Bc1-2表達有關，從而延緩遲發(fā)性神經(jīng)元死亡的發(fā)生［20］。王培源等通過實驗發(fā)現(xiàn)葛根黃酮能明顯降低缺血/再灌注模型大鼠腦組織含水量，縮小腦梗死體積，提高SOD活性，降低MDA的含量，減輕自由基反應對腦組織的損傷［21］。

川芎為傘形科植物，主要功效為活血行氣，祛風止痛，是臨床各種血瘀氣滯證、風濕痹痛證的常用藥。川芎嗪是中藥川芎的有效成分之一，臨床上用于治療腦梗塞方面療效肯定。邱芬利等用大鼠局灶性缺血模型研究發(fā)現(xiàn)，川芎嗪能夠使大鼠缺血梗死灶面積明顯減小，能夠減小缺血側半球腦組織含水量，有效地保護缺血梗死周圍區(qū)神經(jīng)元的形態(tài)和功能，提示川芎嗪對腦缺血后神經(jīng)元及腦缺血周圍神經(jīng)元有顯著保護作用［22］。凌婧等用TTC染色法發(fā)現(xiàn)川芎油可顯著降低缺血再灌注損傷大鼠腦梗死體積，同時可降低受損腦組織NO和MDA含量，減輕自由基損傷［23］。

人參大補元氣，補脾益肺，安神益智，臨床常用于元氣虛脫、肺脾心腎氣虛等癥。人參皂苷Rg1已作為復方制劑的主要成分之一在臨床上用于治療腦血管疾病，胡霞敏等實驗發(fā)現(xiàn)人參皂苷Rg1可明顯減少缺血再灌注模型大鼠腦梗死面積，改善神經(jīng)功能癥狀，同時缺血區(qū)缺血側細胞凋亡程度、Caspase-3蛋白表達降低，而Bcl-2的蛋白表達增加［24］。胡瑜等通過大鼠局灶性腦缺血損傷模型發(fā)現(xiàn)，一定劑量人參皂苷Rb3能明顯緩解腦缺血大鼠的行為學癥狀，減輕其腦水腫程度，降低血清中MDA含量，升高SOD含量，并能減少其腦梗死面積，減輕組織病理學損傷［25］。趙海波等［26］通過短暫性局灶性大鼠大腦中動脈栓塞（MCAO）模型，發(fā)現(xiàn)人參皂苷Rd組在用藥后第3日和第7日的神經(jīng)功能評分與模型組相比有顯著性差異；TTC染色結果表明，人參皂苷Rd能夠顯著減小腦梗死體積；Iba1免疫染色結果顯示，人參皂苷Rd治療組在用藥后第3天和第7天，人參皂苷Rd處理組則明顯減弱了缺血誘導的細胞形態(tài)學改變。

黃芪為豆科植物可補氣健脾、升陽舉陷、益衛(wèi)固表、利尿消腫，臨床可用于脾、肺氣虛證，及氣虛自汗和氣血虧虛證。黃芪甲苷是黃芪的主要活性成分，具有抗炎、降壓、改善心肌缺血及清除自由基等作用［27］。周軍等研究發(fā)現(xiàn)，黃芪甲苷明顯降低局灶性缺血動物模型的神經(jīng)學評分，明顯減輕缺血大鼠腦梗死組織重量，缺血區(qū)腦組織SOD、谷胱甘肽（GSH）活性增加，MDA含量降低，證明黃芪甲苷可能通過增強機體清除自由基能力，抑制脂質(zhì)過氧化反應，減輕腦組織損傷。Chao Guo等實驗發(fā)現(xiàn)，黃芪的另一重要成分毛蕊異黃酮可改善缺血再灌注損傷大鼠的神經(jīng)缺損癥狀，減輕腦組織梗死面積；實驗結果顯示缺血區(qū)腦組織MDA、蛋白質(zhì)羰基、活性氧（ROS）含量降低，SOD、GSH-Px含量升高，且成劑量依賴性；免疫組化結果顯示缺血區(qū)腦組織4-羥基-2-壬烯醛（一種特殊的脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物）含量降低，證明抗氧化性增強可能是毛蕊異黃酮腦保護機制之一［28］。

紅景天苷是景天科植物紅景天的主要成分之一，陳秀娟［29］實驗發(fā)現(xiàn)，紅景天苷給藥能夠顯著改善腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)功能評分，明顯降低梗死面積、腦組織含水量；同時紅景天苷給藥組的SOD活性顯著高于模型組，提高了腦內(nèi)的抗氧化酶活性；降低髓過氧化物酶（MPO）活性和炎癥因子TNF-α的表達，從而減輕腦水腫、降低白細胞浸潤，保護腦組織。

胡黃連苷2是從中藥胡黃連干燥根莖提取的有效的成分之一。Yuliang Guo等實驗發(fā)現(xiàn)，胡黃連苷2可降低缺血再灌注模型大鼠的神經(jīng)功能評分、缺血區(qū)梗塞面積、凋亡細胞數(shù)，以及降低缺血區(qū)腦組織TLR4，NF-κB和TNF-α等炎癥因子，從而抑制了缺血區(qū)細胞凋亡和因缺血再灌注引起的炎癥反應［30］。

3 結 語

通過文獻的總結可以看到，在我國巨大的中醫(yī)藥寶庫中，眾多的中藥包括中藥復方制劑、單味中藥以及有效成分均對大腦缺血性損傷發(fā)揮著良好的療效。以往的研究大多關注藥效，諸如神經(jīng)功能評分、腦組織的抗氧化能力以及凋亡基因的表達等方面的改變，對腦缺血或缺血再灌注損傷復雜的發(fā)病機制探討較少，因此就很難解釋中藥對疾病的治療原理，反應不出中藥多靶點、多機制的治療優(yōu)勢。此外期望能夠篩選出可以長期服用，并且可以有效預防老年性的突發(fā)性腦卒中、中風的藥物，減少腦缺血的發(fā)病率，也是中藥提倡“未病先治”的目的所在。

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R743.3

A

1004-745X（2017）04-0648-04

10.3969/j.issn.1004-745X.2017.04.027

2016-10-20）

國家自然科學基金面上項目（81273717）；國家自然科學青年基金項目（81503535）

△通信作者（電子郵箱：1983songqiang@163.com）