乙型肝炎病毒學(xué)和免疫學(xué)與臨床特征相關(guān)性的前瞻性研究

于曉麗

（遼寧省丹東市傳染病醫(yī)院 檢驗(yàn)科，遼寧 丹東 118002）

乙型肝炎病毒學(xué)和免疫學(xué)與臨床特征相關(guān)性的前瞻性研究

于曉麗

（遼寧省丹東市傳染病醫(yī)院 檢驗(yàn)科，遼寧 丹東 118002）

目的 研究慢性乙型肝炎（CHB）、肝硬化（HBV-LC）、原發(fā)性肝癌患者血清中的乙型肝炎表面抗原（hepatitis B surface antigen,HBsAg）和乙型肝炎病毒脫氧核糖核酸（HBV DNA）定量分布特點(diǎn)，以及二者之間相關(guān)性，為乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）在病程不同階段的診斷和干預(yù)治療提供臨床依據(jù)。方法 采集2014年7月至2015年7月，在丹東市傳染病醫(yī)院住院的慢性乙型肝炎（CHB）150例、肝硬化（LC）100例、肝癌患者50例，采用微粒子化學(xué)發(fā)光定量動態(tài)檢測HBsAg水平，熒光PCR定量動態(tài)檢測HBVDNA載量，并對HBVDNA水平及HBsAg進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果 HBsAg定量值大?。郝砸倚透窝祝靖斡不靖伟珻HB中檢測值最高，其次為肝硬化，肝癌組檢測值最低，且P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；HBVDNA定量和HBsAg呈現(xiàn)相同的規(guī)律，即慢性乙型肝炎＞肝硬化＞肝癌且P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 ①HBsAg定量值和HBVDNA定量值一樣在慢性乙型肝炎疾病進(jìn)展中呈逐漸下降漸下降趨勢。②HBsAg與HBVDNA之間呈一定的正相關(guān)，可以使用HBsAg與HBVDNA互補(bǔ)評估HBV病毒復(fù)制情況。

乙型肝炎表面抗原；乙型肝炎病毒脫氧核糖核酸；慢性乙型肝炎；肝硬化；原發(fā)性肝癌；乙型肝炎病毒

乙型肝炎病毒是具有高度的傳染性，全球約有20億人感染乙型肝炎病毒，近1/4的病毒患者最終死于肝癌或肝硬化[1]。慢性乙型肝炎已成為嚴(yán)重的臨床和公共衛(wèi)生問題。乙型肝炎造成的社會公共衛(wèi)生問題正在逐年上升。本研究通過定量檢測CHB、肝硬化和肝癌患者血清中HBsAg和HBVDNA的水平，分析HBsAg和HBVDNA在乙型肝炎疾病進(jìn)展過程中的分布特點(diǎn)，尋找判斷HBV相關(guān)性疾病的病情程度及治療療效更可靠的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選擇2014年7月至2015年7月在丹東市傳染病醫(yī)院住院的為CHB的患者150例，和LC患者100例，肝癌患者50例，其中：患者年齡分布在33～72歲，年齡以50～59歲為多見，平均年齡為（57.34± 14.23）歲，本次研究所調(diào)查的患者病例均符合《慢性乙型肝炎病毒感染防治指南》[2]，肝癌患者符合原發(fā)性肝癌診療規(guī)范（2011年版）。排除標(biāo)準(zhǔn)：排除甲、丙、丁、戊型肝炎病毒感染及合并酒精性、藥物性、自身免疫性或代謝性肝病。

1.2 方法：HBsAg定量檢測使用雅培i2000全自動微粒子化學(xué)發(fā)光分析儀及配套專用試劑。HBVDNA使用廈門安普利全自動核酸提取儀及PCR擴(kuò)增儀，用使用安普利專用配套試劑。

1.3 參考標(biāo)準(zhǔn)：HBsAg陽性參考范圍≥0.05 IU/mL，高于檢測上限（250 IU/mL）的樣本用雅培專用HBsAg稀釋液稀釋500倍后再檢測；HBVDNA檢測下限為1.0×103拷貝/mL。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析符合正分布的數(shù)據(jù)，采用（均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差）表示。不符合正態(tài)分布以中位數(shù)和分位數(shù)間距[M（QR）]表示；兩兩組比較采用t檢驗(yàn)，相關(guān)性檢驗(yàn)采用Spearman's分析，若P＜0.05則視為有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié) 果

2.1 患者的分組情況及各組患者的一般資料：慢性乙型肝炎患者150例，男性82例，女性68例。平均年齡在（45.44±11.4）歲。HBVDNA定量為5.04 copies/mL，HBsAG定量為5301.0 IU/mL。

肝硬化患者100例，男性52例，女性48例。平均年齡在（45.20± 10.14）歲。HBV-DNA定量為4.11 copies/mL，HBsAG定量為1138.4 IU/mL。

肝癌患者50例，男性30例，女性20例。平均年齡在（52.01 ±9.98）歲。HBV-DNA定量為1.52 copies/mL，HBsAG定量為601.4 IU/mL。

2.2 HBsAg定量值在CHB、肝硬化、原發(fā)性肝癌中的分布：慢性乙型肝炎組、肝硬化組、肝癌組患者血清HBsAg定量值分布不同，分別是：5301.0（70.5～18735.3）IU/mL、2138.4（14.52～2471.7） IU/mL、989.4（49.0～1175.2）IU/mL，CHB中檢測值最高，其次為肝硬化，肝癌組檢測值最低，呈現(xiàn)逐漸下降趨勢。

2.3 三組患者HBV DNA對數(shù)值的變化分布：在慢性乙型肝炎組、肝硬化組、肝癌組患者血清HBV DNA定量值分別是：5.07（4.01～6.91）log10copies/mL、4.11（0.00～5.81）log10copies/mL、（0.00～4.69）log10copies/mL，CHB中檢測值最高，其次為肝硬化，肝癌組檢測值最低，三組中HBV DNA呈逐漸下降趨勢，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其中兩兩比較中慢性乙型肝炎與肝硬化有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，肝硬化與肝癌組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），但慢性乙型肝炎與肝硬化，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.4 HBsAg與HBVDNA在CHB、肝硬化、原發(fā)性肝癌三組之間定量值的相關(guān)性分析

可以看出：HBsAg與HBVDNA在CHB中r=0.287，P=0.043；在肝硬化中r=0.316，P=0.003；在肝癌中r=0.449，P=0.001；因此，HBsAg與HBVDNA在CHB、肝硬化、原發(fā)性肝癌三組中均呈正相關(guān)。

3 討 論

亞洲人群普遍對肝炎病毒具有基因水平上的不耐受[3]，我國更是典型的乙型肝炎易感地區(qū)。作為乙型肝炎的高發(fā)國家，人們對乙型肝炎的了解卻不是很多。乙型肝炎是由乙型肝炎病毒感染所導(dǎo)致的，并且隨著病情發(fā)展可以導(dǎo)致肝硬化和原發(fā)性肝癌。有研究報(bào)道[4]，每年約有100萬人死于HBV感染相關(guān)性疾病，慢性乙型肝炎患者發(fā)展為肝硬化的年發(fā)生率大約為2.3%，嚴(yán)重威脅人類的健康和生命。

乙型肝炎病毒屬于嗜肝病毒科，電鏡下呈現(xiàn)球形，具有雙層蛋白衣殼。常見的病毒顆粒形式有3種，即大球型顆粒，小球型顆粒以及管型顆粒。乙型肝炎病毒的抗原主要是由病毒衣殼外表的表面抗原HBsAg、Pre S1、Pre S2組成。其病毒表面的特異性抗原是參與人體免疫識別的關(guān)鍵媒介。HBV感染可以刺激機(jī)體產(chǎn)生一系列的抗體和免疫細(xì)胞。借由檢測抗體和免疫分子來診斷是否罹患乙型肝炎，是目前主要的檢測手段之一，除此之外，也可以通過檢測轉(zhuǎn)氨酶來判斷乙型肝炎病情。

HBsAg是感染乙型肝炎病毒后，篩查和診斷乙型肝炎疾病的一項(xiàng)重要的實(shí)驗(yàn)指標(biāo)，并且在感染乙型肝炎后最先出現(xiàn)的血清標(biāo)志物，作為HBV感染的穩(wěn)定、可靠的血清標(biāo)志物，已有40多年的歷史了。HBsAg是HBV被發(fā)現(xiàn)的第一個蛋白[5]，是由混合糖蛋白組成的外膜蛋白，有HBV包膜基因轉(zhuǎn)錄和編碼，在感染HBV的患者血清中，作為感染HBV顆粒的外膜蛋白。HBsAg的合成有兩條途徑：一條途徑是以宿主基因中溶原性的病毒核酸片段為模板，經(jīng)細(xì)胞內(nèi)翻譯后產(chǎn)生；另一條途徑是以具有轉(zhuǎn)錄活性的CCCDNA為模板翻譯后產(chǎn)生。因此；HBsAg常作為HBV感染的標(biāo)志。研究發(fā)現(xiàn)[6]，HBsAg清除可降低肝硬化及HCC的發(fā)生率。

HBV-DNA（乙型肝炎病毒脫氧核糖核酸）位于HBV核心內(nèi)，其絕對數(shù)量的多少直接顯示了病毒繁殖速率的大小，這被認(rèn)為是評價(jià)HBV的金標(biāo)準(zhǔn)[7]。但由于DNA檢測技術(shù)要求嚴(yán)格，準(zhǔn)確率沒有保證，檢測下限不盡如人意，因此尋找一種能取代舊方法而又穩(wěn)定標(biāo)志物，對評估HBV患者病情有著重大意義。

那么，HBsAg的水平在慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌進(jìn)展中是如變化的，以及HBsAg與DNA的關(guān)系，值得我們進(jìn)行研究。本研究結(jié)果顯示：HBsAg定量檢測在CHB中檢測值最高，其次為肝硬化，肝癌組檢測值最低，呈現(xiàn)逐漸下降趨勢。HBVDNA也呈現(xiàn)相同的規(guī)律，即隨乙型肝炎疾病進(jìn)展呈現(xiàn)逐漸下降趨勢。HBsAg與HBVDNA在CHB、肝硬化、原發(fā)性肝癌三組中均呈正相關(guān)。分析原因可能為：HBV侵入機(jī)體，機(jī)體產(chǎn)生特異性細(xì)胞免疫和體液免疫應(yīng)答，從而引起肝細(xì)胞嚴(yán)重?fù)p傷。HBV感染的時(shí)間越長，免疫應(yīng)答就越持久，肝細(xì)胞破會的就越嚴(yán)重，結(jié)果造成肝細(xì)胞廣泛的壞死，進(jìn)而導(dǎo)致依賴于肝細(xì)胞產(chǎn)生的HBsAg合成和分泌減少，依賴于肝細(xì)胞產(chǎn)生的HBV病毒的復(fù)制減少。

HBsAg水平下降則是機(jī)體啟動調(diào)節(jié)并逐漸清除HBV的表現(xiàn)[8]。HBVDNA載量下降是評價(jià)抗病毒有效的指標(biāo)之一，通過動態(tài)監(jiān)測二者的變化，可有效預(yù)測抗病毒的療效，判定個體化應(yīng)答治療策略，以指導(dǎo)調(diào)整抗病毒治療方案，提高療效，警惕發(fā)展為肝硬化和（或）肝癌。

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R512.6+2

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1671-8194（2017）06-0097-02