佩蘭的化學(xué)成分

楊錦強(qiáng)，楊念云，吳南

（南京中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，江蘇南京210023）

·實(shí)驗(yàn)研究·

佩蘭的化學(xué)成分

楊錦強(qiáng)，楊念云，吳南

（南京中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，江蘇南京210023）

目的研究佩蘭Eupatorium fortunei Turez的化學(xué)成分。方法采用硅膠柱色譜、Sephadex LH－20凝膠柱色譜，以及重結(jié)晶等技術(shù)，對(duì)佩蘭的化學(xué)成分進(jìn)行分離純化，并通過(guò)1H－NMR，13C－NMR，質(zhì)譜等技術(shù)對(duì)化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果從佩蘭中分離得到8個(gè)化合物，分別為1－O－ －D－吡喃葡萄糖基－（2 S，3 S，4 R，8 E）－2－[（2′－R）－2′－羥基棕櫚酰胺]－8－十八烯－1，3，4－三醇（化合物1），1－O－ －D－吡喃葡萄糖－（2 S，3 S，4 R，8 E）－2－[（2′－R）－2′－羥基二十四烷酰胺]－8－十八烯－1，3，4－三醇（化合物2），蒲公英甾醇（化合物3），蒲公英甾醇乙酸酯（化合物4），2－O－ －D－吡喃葡萄糖基反式肉桂酸（化合物5），異鼠李素－3－O－蕓香糖苷（化合物6），尿嘧啶（化合物7），3，5－二羥基苯甲酸（化合物8）?；衔?和化合物2為腦苷脂類(lèi)化合物。結(jié)論所有化合物均為首次從該佩蘭中分離得到。

佩蘭；腦苷脂類(lèi)；蒲公英甾醇；2－O－ －D－吡喃葡萄糖基反式肉桂酸

佩蘭為菊科澤蘭屬植物佩蘭Eupatorium fortunei Turez的地上部分，又名香草、小澤蘭、大澤蘭、雞骨香，主產(chǎn)于華東、華南和西南等地區(qū)，喜溫暖濕潤(rùn)氣候，高溫高濕環(huán)境生長(zhǎng)較快。其為多年生草本植物，味微苦，性寒，具有清熱解暑、芳香化濕、健胃開(kāi)胃、發(fā)表去濕、和中化濁、殺蟲(chóng)抑菌的功效，可治療胸悶腹?jié)M、無(wú)汗發(fā)熱、口中甜膩、傷暑頭痛、口臭等癥狀[1]。近年來(lái)，對(duì)于佩蘭化學(xué)成分的研究主要集中在其揮發(fā)油成分，而對(duì)其他成分的研究相對(duì)較少。本研究中對(duì)佩蘭的化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)分離鑒定，為進(jìn)一步研究其藥理作用和合理利用佩蘭資源提供理論依據(jù)?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

儀器：Bruker ARX－300型和DRX－500型核磁共振儀(德國(guó)Brucker公司)；Zabspec質(zhì)譜儀，LCQ－Advantage質(zhì)譜儀(美國(guó)Waters公司)；薄層層析硅膠板，柱層析色譜硅膠（100－200目，200－300目，300－400目)，均購(gòu)自青島海洋化工廠分廠；Sephadex LH－20凝膠色譜柱（Pharmacia公司）。

試藥：佩蘭（市售品），由南京中醫(yī)藥大學(xué)吳南教授鑒定為Eupatorium fortunei Turez，標(biāo)本保存于南京中醫(yī)藥大學(xué)生藥學(xué)實(shí)驗(yàn)室。所有有機(jī)試劑均為分析純（南京化學(xué)試劑股份有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 化學(xué)成分的提取

稱(chēng)取干燥的佩蘭地上部分10 kg（經(jīng)粉碎），用水回流提取3次，每次2 h，過(guò)濾收集，合并提取液；再用無(wú)水乙醇回流提取3次，每次2 h，過(guò)濾收集，合并提取液；合并水提液和醇提液，減壓濃縮至無(wú)醇味，得含水浸膏；依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得到石油醚層部位、乙酸乙酯層部位、正丁醇層部位；分別減壓回收溶劑，得到浸膏。

2.2 化合物的分離

將石油醚部位浸膏硅膠干法上柱，進(jìn)行硅膠柱層析色譜分離，經(jīng)石油醚－乙酸甲酯系統(tǒng)梯度洗脫，得到130個(gè)餾分，薄層層析分析，合并餾分。將編號(hào)P－21餾分結(jié)晶，進(jìn)一步純化得化合物4（8 mg）；將編號(hào)P－37餾分結(jié)晶，進(jìn)一步純化得化合物3（35 mg）。

將乙酸乙酯部位浸膏硅膠干法上柱，進(jìn)行硅膠柱層析色譜分離，經(jīng)二氯甲烷－甲醇系統(tǒng)梯度洗脫，得到102個(gè)餾分，薄層層析分析，合并餾分。將編號(hào)E－63～74的餾分合并上硅膠柱，經(jīng)二氯甲烷－甲醇系統(tǒng)梯度洗脫（100∶0，10∶1，8∶1），編號(hào)A－21餾分結(jié)晶，進(jìn)一步純化得化合物2（8 mg）；將編號(hào)E－75～83的餾分合并上Sephadex LH－20凝膠柱，經(jīng)甲醇洗脫，洗脫餾分中S－7為純化合物，得化合物1（5 mg）；編號(hào)E－91餾分結(jié)晶，進(jìn)一步純化得化合物5（10 mg）。

將正丁醇部位浸膏硅膠干法上柱，進(jìn)行硅膠柱層析色譜分離，經(jīng)二氯甲烷－甲醇系統(tǒng)梯度洗脫，得到104個(gè)餾分，薄層層析分析，合并餾分。將編號(hào)B－6餾分結(jié)晶，進(jìn)一步純化得化合物7（10 mg）；編號(hào)B－23餾分結(jié)晶，進(jìn)一步純化得化合物8（25 mg）；編號(hào)B－36餾分結(jié)晶，進(jìn)一步純化得化合物6（1 mg）。

2.3 結(jié)構(gòu)鑒定

2.3.1 化合物1

白色無(wú)定型粉末（甲醇）。ESI－MS(m/z):732.5[M＋H]＋，714.8[M－OH]＋，570.5[M＋H－162]＋，551.4[M－H－179]＋，298.0[M＋H－255－179]＋。1H－NMR（500 MHz，ACETONE－d6）δ：0.88（6H，t，J＝6.5Hz，2 x Me），1.29[s，（CH2）n]，4.33（1H，d，J＝7.5Hz，1″－H），3.55（1H，m，6″－Ha），3.65（1H，m，6″－Hb），3.63（1H，m，1－Ha），3.74（1H，m，1－Hb），4.03（1H，m，2－H），3.37（1H，m，3－H），3.31（1H，m，4－H），3.88（1H，m，2′－H），7.51（1H，d，J＝8.5 Hz，N－H）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[2]報(bào)道一致，故鑒定化合物1為1－O－β－D－吡喃葡萄糖基－（2 S，3 S，4 R，8 E）－2－[（2′－R）－2′－羥基棕櫚酰胺]－8－十八烯－1，3，4－三醇。

2.3.2 化合物2

白色無(wú)定型粉末（甲醇）。ESI－MS(m/z):844.2[M＋H]＋，816.5[M－OH]＋，682.5[M＋H－162]＋，664.4[M－H－179]＋，478.3[M＋H－367]＋，460.4[M＋H－367－H2O]＋，298.0[M＋H－367－179]＋，280.2[M＋H－367－179－H2O]＋。1H－NMR（500 MHz，DMSO－d6）δ：0.85（6H，t，J＝6.5 Hz，2 x Me），1.23[s，（CH2）n]，4.14（1H，d，J＝7.5 Hz，1″－H），3.43（1H，m，6″－Ha），3.65（1H，m，6″－Hb），3.63（1H，m，1－Ha），3.79（1H，m，1－Hb），4.10（1H，m，2－H），3.36（1H，m，3－H），3.34（1H，m，4－H），3.83（1H，m，2′－H），7.50（1H，d，J＝9 Hz，N－H），5.32（1H，9－H），5.39（8－H）。13C－NMR（125 MHz，DMSO－d6）δ：14.39（Me），22.54，24.90，26.08，27.12，17.42，29.14，19.43，29.51，29.64，69.34（C－1），70.49（C－4″），71.04（C－4），71.39（C－2′），73.92（C－2″），74.68（C－3），76.99（C－3″），77.36（C－5″），103.94（C－1″），129.83（C－9），130.31（C－8），174.23（C－1′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[2－3]報(bào)道一致，故鑒定化合物2為1－O－β－D－吡喃葡萄糖－（2 S，3 S，4 R，8 E）－2－[（2′－R）－2′－羥基二十四烷酰胺]－8－十八烯－1，3，4－三醇。

2.3.3 化合物3

白色片狀結(jié)晶（二氯甲烷－乙醇）。ESI－MS(m/z):426[M]＋。1H－NMR（300 MHz，CDCl3）δ：4.69（1H，brs，H－30a），4.56（1H，brs，H－30b），3.18（1H，dd，J＝11 Hz，5.4 Hz，H－3），1.68（3H，s，H－30），1.01（3H，s，H－26），0.95（3H，s，H－27），0.94（3H，s，H－23），0.83（3H，s，H－25），0.79（3H，s，H－28），0.76（3H，s，H－24）。13C－NMR（75 MHz，CDCl3）δ：38.75（C－1），28.01（C－2），77.01（C－3），38.11（C－4），55.35（C－5），18.35（C－6），35.62（C－7），40.90，（C－8），50.49（C－9），37.01（C－10），21.39（C－11），25.20（C－12），39.10（C－13），42.11（C－14），27.32（C－15），38.30（C－16），34.33（C－17），48.36（C－18），39.40（C－19），153.92（C－20），26.23（C－21），40.03（C－22），27.48（C－23），15.38（C－24），16.12（C－25），16.01（C－26），15.53（C－27），20.97（C－28），109.31（C－29），25.75（C－30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[4－5]報(bào)道一致，故鑒定化合物3為蒲公英甾醇。

2.3.4 化合物4

白色粒狀結(jié)晶（乙酸乙酯）。ESI－MS(m/z):468[M]＋。1H－NMR（300 MHz，CDCl3）δ：4.64（1H，brs，H－29a），4.59（1H，brs，H－29b），4.48（1H，dd，J＝5.5 Hz，11 Hz，H－3），2.03（3H，s，COCH3），1.02（3H，s，H－30），0.99（3H，s，H－26），0.88（3H，s，H－27），0.85（3H，s，H－23），0.84（3H，s，H－25），0.84（3H，s，H－28），0.81（3H，s，H－24）。13C－NMR（75 MHz，DMSO－d6）δ：38.95（C－1），26.14（C－2），79.89（C－3），37.71（C－4），54.59（C－5），18.16（C－6），33.39（C－7），40.06（C－8），49.56（C－9），37.31（C－10），21.41（C－11），23.31（C－12），39.22（C－13），40.34（C－14），27.61（C－15），38.21（C－16），35.10（C－17），49.56（C－18），39.50（C－19），153.88（C－20），25.61（C－21），38.67（C－22），28.86（C－23），17.65（C－24），16.35（C－25），15.95（C－26），14.44（C－27），19.23（C－28），107.23（C－29），25.09（C－30），170.63（COCH3），21.24（COCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[4－6]報(bào)道一致，故鑒定化合物4為蒲公英甾醇乙酸酯。

2.3.5 化合物5

白色粉末。ESI－MS(m/z):349[M＋Na]＋。1H－NMR(500 MHz，DMSO－d6)δ:7.22（1H，d，J＝8.0 Hz，H－3），7.40（1H，t，J＝7.7，H－4），7.06（1H，t，J＝7.5 Hz，H－5），7.71（1H，d，J＝7.7 Hz，H－6），7.94（1H，d，J＝16.0 Hz，H－7），6.55（1H，d，J＝16.0 Hz，H－8），5.03（1H，d，J＝7.0 Hz，H－1′）。13C－NMR（125 MHz，DMSO－d6）δ:121.9（C－1），155.6（C－2），115.1（C－3），131.4（C－4），123.3（C－5），128.0（C－6），138.7（C－7），119.6（C－8），167.8（C－9），100.0（C－1′），73.3（C－2′），77.0（C－3′），69.6（C－4′），76.7（C－5′），60.6（C－6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7]報(bào)道一致，故鑒定化合物5為2－O－β－D－吡喃葡萄糖基反式肉桂酸。

2.3.6 化合物6

淡黃色粉末。ESI－MS(m/z):623[M－H]－。1H－NMR(500 MHz，DMSO－d6)δ：12.58（1H，s，OH－5），7.99（1H，d，J＝2 Hz，H－2′），7.51（1H，dd，J＝2 Hz，8.5 Hz，H－6′），6.90（1H，d，J＝8.5 Hz，H－5′）6.43（1H，d，J＝1.5 Hz，H－8），6.20（1H，d，J＝1.5 Hz，H－6）5.44（1H，d，J＝7.5 Hz，H－1″），4.42（1H，s，H－1?），3.85（1H，s，3′－OCH3），3.06～3.64（10H of 3－O－glc，3－O－rha），1.05（1H，d，J＝3 Hz，H－6?）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8－9]報(bào)道一致，故鑒定化合物6為異鼠李素－3－O－蕓香糖苷。

2.3.7 化合物7

白色無(wú)定型粉末。ESI－MS(m/z):112[M]＋（100），68（60）。1H－NMR(500 MHz，ACETONE－d6)δ:10.78(1H，s，H－1)，10.96（1H，s，H－3），5.64（1H，d，J＝7.6 Hz，H－5），7.38（1H，d，J＝7.6 Hz，H－6）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]報(bào)道一致，故鑒定化合物7為尿嘧啶。

2.3.8 化合物8

白色結(jié)晶性粉末（二氯甲烷－乙醇）。ESI－MS(m/z):155[M]＋。1H－NMR（500 MHz，ACETONE－d6）δ：12.78（1H，s，COOH），9.67（2H，s，3，5－OH），6.99（2H，d，J＝3.0 Hz，H－2，6），6.68（1H，t，J＝3.0 Hz，H－4）。13CNMR（125 MHz，DMSO－d6）δ:169.3（COOH），158.8（C－3，5），133.4（C－1），112.6（C－2，6），108.5（C－4）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11－12]報(bào)道一致，故鑒定化合物8為3，5－二羥基苯甲酸。

3 討論

本研究中首次從佩蘭中分離出腦苷脂類(lèi)（化合物1和化合物2）、蒲公英甾醇、蒲公英甾醇乙酸酯等成分。腦苷脂是?；拾贝忌弦蕴擒真I結(jié)合1分子六碳糖而成的化合物，腦苷脂類(lèi)成分已用于治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病，國(guó)外腦苷脂類(lèi)成分已應(yīng)用于改善老年性腦功能衰退[13]。此外，腦苷脂類(lèi)成分具有抑制腫瘤和調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)、抗病毒等藥理活性，應(yīng)用前景十分廣闊[14－15]。蒲公英甾醇，蒲公英甾醇乙酸酯是蒲公英烷型五環(huán)三萜類(lèi)化合物，有研究發(fā)現(xiàn)，此類(lèi)化合物具有抗菌、抗炎、抗病毒、調(diào)節(jié)血糖、免疫調(diào)節(jié)、降血壓和抗腫瘤活性[16]。本研究中系統(tǒng)分離了佩蘭的化學(xué)成分，豐富了佩蘭化學(xué)成分的種類(lèi)，為其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂和質(zhì)量控制，以及為進(jìn)一步研究藥理活性和合理利用資源提供了理論依據(jù)和參考。

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Chemical Constituents of Eupatorium Fortunei Turez

Yang Jinqiang,Yang Nianyun,Wu Qinan
(College of Pharmacy,Nanjing University of Chinese Medicine,Nanjing,Jiangsu,China210023)

ObjectiveTo study the chemical constituents of Eupatorium fortunei Turez.M ethodsThe chemical constituents of Eupatorium fortunei Turez were isolated and purified by silica gel column,Sephadex LH－20 chromatography and recrystallization and the compounds were identified by1H－NMR,13C－NMR and Mass spectrometry.ResultsEight compounds were isolated and elucidated fromEupatoriumfortunei Turez,they were 1－O－β－D－glucopyranosyl－(2 S,3 S,4 R,8 E)－2－[(2′－R)－2′－h(huán)ydroxypalmitoyl－amino]－8－octadecene－1,3,4－triol(Compound 1),1－O－β－D－glucopyranosyl－(2 S,3 S,4 R,8 E)－2－[(2′－R)－2′－h(huán)ydroxydocosanosylamino]－8－octadecene－1,3,4－triol(Compound 2),taraxasterol(Compound 3)taraxasterol acetate(Compound 4),trans－melilotoside(Compound 5),isorhamnetin－3－O－rutinoside(Compound 6),uracil(Compound 7),3,5－dihydroxybenzoic acid(Compound 8),respectively.Compound 1 and Compound 2 were cerebroside compounds.Conclusion All compounds were isolated from Eupatorium fortunei Turez for the first time.

Eupatorium fortunei Turez;cerebroside;taraxasterol;trans－melilotoside

R282.71；R284.1

A

1006－4931(2017)21－0004－03

10.3969/j.issn.1006－4931.2017.21.002

2015年國(guó)家中醫(yī)藥管理局資助項(xiàng)目[201507002]。

楊錦強(qiáng)（1990－），在讀碩士研究生，研究方向?yàn)樘烊凰幬锷a(chǎn)加工與品質(zhì)評(píng)價(jià)，（電子信箱）13770676634＠163.com。

吳南，教授，碩士研究生導(dǎo)師，博士研究生導(dǎo)師，研究方向?yàn)橹兴幪烊凰幬镔Y源化學(xué)，（電子信箱）qnlxw＠yahoo.com.cn。

2017－08－06）