麻脫膠菌株選育的研究進(jìn)展與前景

鞏繼賢，張秋亞，李育強(qiáng)，張春春，張健飛

（1.天津工業(yè)大學(xué)紡織學(xué)院，天津300387；

2.天津工業(yè)大學(xué)先進(jìn)紡織復(fù)合材料教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津300387）

麻脫膠菌株選育的研究進(jìn)展與前景

鞏繼賢1，2*，張秋亞1，2，李育強(qiáng)1，2，張春春1，2，張健飛1，2

（1.天津工業(yè)大學(xué)紡織學(xué)院，天津300387；

2.天津工業(yè)大學(xué)先進(jìn)紡織復(fù)合材料教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津300387）

隨著環(huán)境問(wèn)題的日益凸顯，麻纖維微生物脫膠技術(shù)憑借其污染小、能耗低而逐漸被人們重視，并不斷應(yīng)用于生產(chǎn)實(shí)踐。菌種是生物脫膠過(guò)程中的關(guān)鍵因素，隨著對(duì)其認(rèn)識(shí)與研究不斷深入，逐漸形成比較完備的麻生物脫膠用菌種選育技術(shù)，并在研究與實(shí)踐的不斷結(jié)合中達(dá)到了新的高度。文章主要針對(duì)麻脫膠菌株選育技術(shù)的研究現(xiàn)狀進(jìn)行了綜述，并對(duì)未來(lái)的發(fā)展做了展望。

麻；脫膠；菌種選育

麻纖維在我國(guó)作為紡織纖維的應(yīng)用有著悠久的歷史。麻纖維因具有吸濕、透氣、抗菌等優(yōu)良性能，而受到人們的青睞。近年來(lái)，麻纖維作為一種重要的生物質(zhì)纖維種類，又受到新的關(guān)注。麻纖維可以自然降解，其廢棄物不會(huì)帶來(lái)環(huán)境負(fù)荷。而且此類生物質(zhì)纖維的應(yīng)用還能有效緩解由對(duì)石油原料過(guò)度依賴而造成的能源危機(jī)。麻纖維可以利用山坡、荒灘等非基本農(nóng)田進(jìn)行種植，不存在與糧爭(zhēng)地的問(wèn)題。為加快麻纖維產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，國(guó)家啟動(dòng)了“麻類產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系”建設(shè)加以推動(dòng)。

脫膠是制備韌皮纖維的首要環(huán)節(jié)。傳統(tǒng)的化學(xué)脫膠加工存在能耗高、污染大、品質(zhì)低的問(wèn)題，嚴(yán)重影響了韌皮纖維產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。隨著以生物催化為中心的新型工業(yè)生物技術(shù)的發(fā)展，生物脫膠正逐漸成為韌皮纖維脫膠的發(fā)展方向。微生物菌種選育在麻纖維的生物脫膠中占有重要地位，是決定脫膠過(guò)程是否具有工業(yè)化價(jià)值和纖維質(zhì)量高低的關(guān)鍵。

1 脫膠菌株的分離篩選

高效菌株是麻纖維生物脫膠的關(guān)鍵。目前生產(chǎn)用的優(yōu)良菌株，大都是從自然界中分離到的。微生物在自然界的分別及其廣泛，且不同環(huán)境條件下生長(zhǎng)的微生物有著不同的代謝類型和獨(dú)特的生理特性，因此自然界尤其是土壤是取之不盡的菌種寶庫(kù)。自然環(huán)境下的微生物是混雜生長(zhǎng)的，要得到理想菌株，就要將它們分離出來(lái)。環(huán)境微生物的分離一般要經(jīng)過(guò)樣品采集、富集培養(yǎng)、分離、篩選和鑒定等環(huán)節(jié)。在麻脫膠菌株的分離篩選研究中，樣品的來(lái)源和脫膠菌株的篩選方法是兩個(gè)關(guān)鍵步驟。

根據(jù)目標(biāo)菌株的特點(diǎn)選擇適當(dāng)?shù)牟蓸迎h(huán)境是菌株分離篩選關(guān)鍵的第一步。麻田中的土壤是人們首先想到的適合分離麻脫膠菌的環(huán)境。近年來(lái)，仍有研究人員從麻類植物生長(zhǎng)的土壤中進(jìn)行采樣，以篩選麻脫膠的高效菌株［1］。有觀點(diǎn)認(rèn)為，果膠是植物細(xì)胞間的“粘合劑”，麻的脫膠在某種程度上就是去除果膠質(zhì)的過(guò)程。因此，從富含果膠質(zhì)的植物及其周圍環(huán)境中分離麻脫膠菌株，也是一種選擇。董政娥［2］等從通過(guò)對(duì)腐敗海草中的生物菌群進(jìn)行富集培養(yǎng)，篩選出了能夠進(jìn)行生物脫膠的菌種。另外，在液體環(huán)境如生產(chǎn)用廢水、污泥、發(fā)酵液［3］等環(huán)境中的生物菌群種類數(shù)量繁多，同樣可以作為育種的出發(fā)點(diǎn)，進(jìn)行生物脫膠用出發(fā)菌種的篩選。

篩選方法的設(shè)計(jì)是從環(huán)境微生物中得到高效脫膠菌株的另一個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)。在這一環(huán)節(jié)，培養(yǎng)基的設(shè)計(jì)是首先要解決的問(wèn)題。很長(zhǎng)一段時(shí)間內(nèi)，通常認(rèn)為果膠酶是麻生物脫膠的主要菌種。因此在許多研究中都將果膠作為碳源，用于富集培養(yǎng)、分離和篩選等各階段［4］。有研究表明，半纖維素酶活對(duì)苧麻的脫膠也是非常重要的，于是半纖維素類物質(zhì)也被用作碳源［5］。后來(lái)，人們認(rèn)識(shí)到麻皮中膠質(zhì)成分的復(fù)雜性，又有將麻皮粉碎后，以麻皮粉末的分散液作為培養(yǎng)基［6］。在篩選方法上，已有的研究也多用果膠酶的活性作為指標(biāo)，比如用剛果紅染料透明圈法、盧戈氏碘液法透明圈法、高碘酸透明圈法、十六烷基三甲基溴化銨法和釕紅染色透明圈法等。

2 誘變育種

基因突變是微生物變異的主要形式。人工誘變［7－9］是加速基因突變的重要手段。以人工誘變?yōu)榛A(chǔ)的誘變育種，具有速度快、收效大、方法簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)，是微生物菌種選育的重要途徑。時(shí)至今日，誘變育種仍是麻脫膠微生物育種方面最重要，且最有效的技術(shù)。目前誘變育種主要采用物理誘變育種以及物理化學(xué)方法結(jié)合誘變育種方法。

物理誘變一般包括紫外誘變電離輻射、激光、微波、太空誘變、等離子誘變等［10－12］。而言目前應(yīng)用較多的是紫外誘變法，紫外誘變具有變異率，操作簡(jiǎn)單，成本低的優(yōu)點(diǎn)。盧必濤［13］等，從已經(jīng)得到的高效脫膠菌株出發(fā)，以紫外線為誘變劑，通過(guò)對(duì)該菌株進(jìn)行紫外燈照射處理的方式，對(duì)菌株分別紫外照射20 s，40 s和60 s，通過(guò)照射后的致死率的對(duì)比，最后選擇了照射60 s的條件，采取該條件誘變后，獲得了菌株的脫膠關(guān)鍵酶的活性相應(yīng)提高的突變株。Molina［14］等在分析能夠產(chǎn)生果膠酶的18株真菌的基礎(chǔ)之上得到菌株Q176，并以此為出發(fā)菌株，以紫外線為誘變劑，通過(guò)對(duì)該菌株進(jìn)行紫外燈照射處理的方式對(duì)菌株進(jìn)行誘變，最后從390株變異體中選出39株進(jìn)行性能的測(cè)定，誘變后的菌株相比誘變前的菌株果膠酶活提高了5倍。馬偉超［15］等通過(guò)復(fù)合誘變（超聲波處理40 min，紫外照射60 s，經(jīng)過(guò)高通量篩選，得到4株高產(chǎn)菌，經(jīng)傳代培養(yǎng)后證明：C23－7、C23－9這2株菌遺傳穩(wěn)定，酶活分別可達(dá)705.7 U/ml和695.0 U/ml，分別比出發(fā)菌株（477.3 U/ml）提高了47.85%、45.61%，適合應(yīng)用。

雖然紫外誘變整體而言應(yīng)用較廣泛，但從某些方面而言紫外線誘也存在有利變異少，工作量較大，具有一定的盲目性的缺點(diǎn)，所以對(duì)于紫外誘變同其他物理誘變方法結(jié)合起來(lái)應(yīng)用是將來(lái)菌種選育中的發(fā)展方向之一。除此之外對(duì)于化學(xué)誘變而言也較為常用［16］，化學(xué)誘變方法是借助化學(xué)助劑對(duì)菌種的誘變作用來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)菌種的選育，所述的化學(xué)助劑包括烷化劑如亞硝酸胍，堿基類物質(zhì)如5－氟尿嘧啶（5－FU）等，無(wú)機(jī)化合物如氯化鋰等，其他的還如鹽酸羥胺等，目前化學(xué)誘變單獨(dú)應(yīng)用的比較少，往往與物理誘變輔助以化學(xué)誘變對(duì)微生物群體進(jìn)行處理，以獲得較高的致死率，從而使突變率提高，從而增加獲得正向突變的概率。

李慧玲［17］等以產(chǎn)β－甘露聚糖酶的Bacillus subtilis WD23為出發(fā)菌株，利用紫外線誘變和甲基磺酸乙酯誘變的方法提高酶的活性，紫外線照射時(shí)間選為20～30 s，誘變后酶活提高了8.72%，1%的甲基磺酸乙酯誘變10 min，酶活提高了1.29%。解生權(quán)［18］等以紫外線誘變后得到的多脂鱗傘（Pholiota sdiposa）的菌種作為出發(fā)菌種，對(duì)其進(jìn)行化學(xué)誘變劑處理。結(jié)果表明，采用亞硝酸鈉終濃度3450 mg/l誘變10 min、亞硝酸鈉終濃度6900 mg/l誘變5 min所得到的變異菌株菌絲生長(zhǎng)速度、菌絲產(chǎn)量和栽培的生物轉(zhuǎn)化率都有所提高。

3 雜交育種

除了誘變育種，以基因組為基礎(chǔ)的雜交育種也是菌種選育的重要途徑，其中原生質(zhì)體融合［19－26］是實(shí)現(xiàn)雜交育種的重要技術(shù)形式。原生質(zhì)體融合，將親株細(xì)胞分別去除細(xì)胞壁后在高滲條件下輔以多種手段進(jìn)行融合，經(jīng)基因組間的交換重組，獲得融合子的過(guò)程。此技術(shù)起源于20世紀(jì)60年代，其特點(diǎn)在于親本細(xì)胞隨機(jī)融合，有效地篩選具有親本特性的優(yōu)良融合菌株。

張惠玲［27］等通過(guò)在紅棗上選育果膠酶PE組分含量低的果膠酶產(chǎn)生菌，并通過(guò)與高產(chǎn)菌進(jìn)行細(xì)胞融合，獲得產(chǎn)PE組分低，產(chǎn)PG、PL組分高的優(yōu)良的果膠酶產(chǎn)生菌Rh－12菌株。隨著生物技術(shù)的研究不斷深入，原生質(zhì)體融合技術(shù)的成功研發(fā)將傳統(tǒng)意義上的微生物領(lǐng)域有關(guān)于微生物種間的界限被打破，此技術(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)遠(yuǎn)緣菌株的基因重組，對(duì)于麻脫膠菌株選育而言，原生質(zhì)體融合有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，能夠?qū)崿F(xiàn)遠(yuǎn)緣菌種的基因重組，憑借這一優(yōu)勢(shì)越來(lái)越多有利與麻生物脫膠的性狀將會(huì)不斷的出現(xiàn)。

4 基因工程育種

基因工程，工具酶切割遺傳物質(zhì)，連接載體，導(dǎo)入受體細(xì)胞，使外源遺傳物質(zhì)進(jìn)行正常復(fù)制和表達(dá)。隨機(jī)性和盲目性小，可以完全突破物種間的障礙，進(jìn)行定向變異和育種［28－40］。張懿翔［41］等為了提高菌種的產(chǎn)果膠酶的能力，進(jìn)而取得較好的亞麻脫膠效果，利用基因工程的方法，將vgb基因整合到Bacillus subtilis A5染色體上，得到了能夠正確表達(dá)血紅蛋白菌株Bacillus subtilis A5－vbg（＋），通過(guò)對(duì)脫膠前后結(jié)晶度以及電鏡的測(cè)試，測(cè)定脫膠效果，結(jié)果表明此菌種對(duì)亞麻的脫膠效率有提升。陳濤［42］等利用木糖采用進(jìn)化工程的方法，發(fā)現(xiàn)了有利于枯草芽孢桿菌利用木糖生長(zhǎng)的基因突變，并獲得了能夠利用木糖快速生長(zhǎng)的枯草芽孢桿菌。

隨著生物工程技術(shù)的逐漸發(fā)展，基因工程的方法在一些微生物育種領(lǐng)域以及某些代謝產(chǎn)物生產(chǎn)領(lǐng)域被廣泛的應(yīng)用，雖然基因工程的方法具有隨機(jī)性及盲目性的特點(diǎn)，但是在微生物育種利于依然存在著選育菌種穩(wěn)定性差的問(wèn)題，所以基因工程方法與其他育種方法的結(jié)合運(yùn)用是目前對(duì)基因工程技術(shù)在麻生物脫膠育種方面應(yīng)用的發(fā)展方向之一。隨著基因工程技術(shù)的發(fā)展，該技術(shù)用于麻脫膠菌種選育和遺傳改良所帶了基因多樣性的優(yōu)勢(shì)定會(huì)顯現(xiàn)出來(lái)。

5 進(jìn)化工程育種

進(jìn)化工程育種技術(shù)［43－47］，是對(duì)出發(fā)菌種進(jìn)行基因多樣化處理，并對(duì)處理后的生物菌群從擴(kuò)大底物利用范圍、提高產(chǎn)品的生產(chǎn)能力、提高微生物的環(huán)境耐受性等方面進(jìn)行選擇壓力下培養(yǎng)，此過(guò)程模擬自然選擇進(jìn)程，經(jīng)過(guò)多代時(shí)的培養(yǎng)，使發(fā)生定向突變的優(yōu)勢(shì)菌群得以保留。在麻脫膠菌種選育中應(yīng)用較多的是產(chǎn)酶能力高以及耐堿菌株的選育。經(jīng)過(guò)誘變的出發(fā)菌種，選擇壓力培養(yǎng)基的控制可以根據(jù)目標(biāo)菌種的優(yōu)勢(shì)性狀來(lái)確定，如欲得到麻韌皮脫膠效果較好的菌株，可以將選擇壓力設(shè)定為以果膠、木聚糖、麻粉或者麻皮為唯一碳源的液體培養(yǎng)基，進(jìn)行多次傳代培養(yǎng)，使具有多樣基因型的誘變菌種在這樣的選擇壓力以及相互競(jìng)爭(zhēng)環(huán)境下優(yōu)勢(shì)群體逐漸增長(zhǎng)，并經(jīng)過(guò)最后的酶活篩選法選育出最終的目標(biāo)菌體；而對(duì)于耐受性表現(xiàn)型菌種的篩選，可以選擇相應(yīng)耐受型的選擇壓力，如耐高溫型、耐堿型性狀的篩選，將基因多樣化的誘變菌群在高溫或者強(qiáng)堿的選擇壓力下進(jìn)行多代時(shí)的培養(yǎng)，最后經(jīng)過(guò)耐受性篩選選擇出最終的目標(biāo)菌體。鄭權(quán)莉［48］等通過(guò)對(duì)枯草芽孢桿菌進(jìn)行的進(jìn)化工程選育，獲得一株在較強(qiáng)堿環(huán)境（pH9.8）中具有脫膠作用的進(jìn)化株B2，將菌株培養(yǎng)液以10%的接種量接種于滅菌后的堿性脫膠培養(yǎng)基中，于37℃，140 r/min條件下振蕩培養(yǎng)24 h，可使麻皮中的膠質(zhì)含量分別降至15%，脫膠效果明顯提升。

傳統(tǒng)誘變育種與進(jìn)化工程育種技術(shù)各有優(yōu)勢(shì)，傳統(tǒng)誘變側(cè)重于個(gè)體表現(xiàn)型與選擇壓力的相符性，目標(biāo)明確、操作簡(jiǎn)單，但缺點(diǎn)在于目標(biāo)菌種的穩(wěn)定性較差；進(jìn)化工程育種技術(shù)則側(cè)重于在選擇壓力下目標(biāo)菌種的群體進(jìn)化，在培養(yǎng)的同時(shí)不但體現(xiàn)了選擇壓力環(huán)境下對(duì)菌種的選擇，也反映出在選擇壓力下群體中微生物之間的競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系，在相應(yīng)的選擇壓力以及菌群中微生物之間的相互競(jìng)爭(zhēng)作用下，能夠適應(yīng)環(huán)境的菌群優(yōu)勢(shì)不斷被選擇出來(lái)，在經(jīng)過(guò)多代的傳代培養(yǎng)之后，通過(guò)高通量篩選，即當(dāng)菌群全部成為適應(yīng)性菌株時(shí)，反應(yīng)器中菌體生長(zhǎng)速度大幅增加時(shí)，即得到目標(biāo)菌種。目前傳統(tǒng)誘變育種技術(shù)與進(jìn)化工程育種技術(shù)不斷發(fā)展，對(duì)兩種技術(shù)的同時(shí)應(yīng)用不但可以降低對(duì)特定菌種選擇的時(shí)間，同時(shí)也可以使目的菌種的穩(wěn)定性大大提高。

6 結(jié)論與展望

隨著脫膠用菌種的初篩、誘變、選擇等方面研究不斷深入，麻纖維生物脫膠技術(shù)中的育種技術(shù)在菌種選育的多個(gè)環(huán)節(jié)中，菌種初篩方法選擇、出發(fā)菌種的種類變得更加廣泛；同時(shí)菌種誘變方法的選擇從原來(lái)的單一誘變方法向多種誘變方法共同作用的方向發(fā)展，同時(shí)新技術(shù)的應(yīng)用也越來(lái)越多，如基因重排技術(shù)的應(yīng)用，能夠高效的構(gòu)建目標(biāo)基因，大大地提高了基因多樣化的效率；在變異菌種的選擇上，也有更多微生物領(lǐng)域的新思想的實(shí)踐與運(yùn)用，如進(jìn)化工程育種技術(shù)，側(cè)重于在選擇壓力環(huán)境施加的同時(shí)去模擬環(huán)境壓力下個(gè)體之間的競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系，又如對(duì)于傳統(tǒng)平板篩選的改進(jìn)方法：自控微量平板篩選法的應(yīng)用，對(duì)變異菌種的篩選提高到一個(gè)新的高度。

基于其他學(xué)科的發(fā)展起來(lái)的太赫茲時(shí)域光譜技術(shù)，也已經(jīng)開始運(yùn)用于微生物領(lǐng)域，而這些新方法的應(yīng)用也將推動(dòng)菌種選育技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展。新技術(shù)的應(yīng)用也大大提高的麻生物脫膠菌種選育的效率，就目前的研究而言，新技術(shù)的應(yīng)用較單一，在一定程度上不利于新技術(shù)的深入應(yīng)用與學(xué)科的多向發(fā)展，目前麻生物脫膠還存在著一些局限性，菌種的單獨(dú)脫膠效率相對(duì)較低，高效率菌種的選育還需繼續(xù)進(jìn)行。

［1］汪學(xué)軍，閔長(zhǎng)莉，楊艷，殷智超.大麻微生物脫膠特異放線菌菌株的篩選與鑒定［J］.紡織學(xué)報(bào).2014（11）：102－106.

［2］董政娥，丁若垚，鄭磊，張興群，郁崇文.亞麻粗紗堿性脫膠菌株的篩選鑒定及脫膠效果［J］.印染助劑.2013（10）：16－19.

［3］張興群，原月夢(mèng)，孔德枝，郁崇文，金關(guān)榮，傅佳佳，丁若垚.亞麻與黃麻漚麻池的細(xì)菌生物多樣性分析［J］.中國(guó)麻業(yè)科學(xué).2015（01）：14－20.

［4］林靜，譚曉明，王臻，李德舜.亞麻纖維脫膠菌的篩選及脫膠效果研究［J］.生物技術(shù)通報(bào).2011（5）：132－136.

［5］Guo G，Liu Z，Xu J，Liu，J，Dai，X，Xie，D，Peng，K，F(xiàn)eng，X，Duan，S，Zheng，K，Cheng，L，F(xiàn)u，Y.Purification and characterization of a xylanase from Bacillus subtilis isolated from the degumming line［J］.JBasic Microbiol.2012，52（4）：419－428.

［6］黃芙蓉.苧麻生物脫膠用菌株的選育和復(fù)合發(fā)酵條件的研究［D］.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)，2011.

［7］Mitchison N A，Clarke B.From ENU mutagenesis to population genetics［J］.Mammalian Genome.2008，19（4）：221－225.

［8］Zou S，Zhong W，Xia C，et al.Mutagenesis breeding of high echinocandin B producing strain and further titer improvementwith culturemedium optimization［J］.Bioprocess and Biosystems Engineering.2015，38（10）：1845－1854.

［9］Wang J，Liu C，Liu J，et al.Spacemutagenesis of genetically engineered bacteria expressing recombinant human interferonα1b and screening of higher yielding strains［J］.World Journal of Microbiology and Biotechnology.2014，30（3）：943－949.

［10］Horneck G，Rabbow E.Mutagenesis by outer space parametersother than cosmic rays［J］.Advances in Space Research.2007，40（4）：445－454.

［11］Jaszek M，Janczarek M，Kuczynski K，et al.The response of the Rhizobium leguminosarum bv.trifoliiwild－type and exopolysaccharide－deficientmutants to oxidative stress［J］.Plant and Soil.2014，376（1－2）：75－94.

［12］譚曉明.大麻微生物脫膠菌種選育及脫膠工藝研究［D］.山東大學(xué)，2010.

［13］盧必濤，陳景浩，王天佑，藍(lán)廣芊.苧麻纖維微生物脫膠菌株的誘變研究［J］.西南師范大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版）.2015（06）：49－54.

［14］Molina S，Pelissari F A，Vitorello C.Screening and genetic improvement of pectinolytic fungi for degumming of textile fibers［J］.Brazilian Journal of Microbiology.2001，32（4）：320－326.

［15］馬瑋超，杜茂林，谷亞楠，郭彥昭，薛婷婷，陳五嶺.高通量法選育果膠酶高產(chǎn)菌株［J］.江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué).2016（07）：513－516.

［16］Agrawal R，Satlewal A，Verma A K.Development of aβ－glucosidase hyperproducing mutant by combined chemical and UV mutagenesis［J］.Biotech.2013，3（5）：381－388.

［17］李慧玲，劉祖艷，趙敏.產(chǎn)β－甘露聚糖酶菌株的物理和化學(xué)誘變育種研究［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué).2014（18）：5741－5750.

［18］解生權(quán)，全艷玲.多脂鱗傘的化學(xué)誘變育種［J］.江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué).2015（05）：244－246.

［19］單尹珮.微生物菌種選育技術(shù)的發(fā)展和研究［J］.北京農(nóng)業(yè).2013（33）：3.

［20］魏希穎，王家穩(wěn)，劉清梅，胡妍妍.基因組重排技術(shù)在微生物菌種選育中的應(yīng)用［J］.陜西師范大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版）. 2013（05）：68－72.

［21］王麗.有關(guān)微生物菌種選育技術(shù)的探索［J］.生物技術(shù)世界.2014（01）：9.

［22］趙旭，王文麗，李娟，呼和.低溫秸稈降解微生物菌劑的研究進(jìn)展［J］.生物技術(shù)通報(bào).2014（11）：55－61.

［23］王麗寧，趙妍，奚麗萍，陳明杰.基因組重排技術(shù)及其在真菌育種中的應(yīng)用［J］.食品工業(yè)科技.2014（18）：362－365.

［24］王瑤.原生質(zhì)體融合在微生物育種的應(yīng)用與研究進(jìn)展［J］.農(nóng)村經(jīng)濟(jì)與科技.2016（12）：276.

［25］侯孝侖，劉雅清，郭瑋婷，高紅亮，常忠義，步國(guó)建，魯偉，解秀娟，金明飛.原生質(zhì)體融合提高產(chǎn)谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶菌株產(chǎn)量［J］.食品科學(xué).2016，37（3）：145－150.

［26］閆冬，韓金志，別小妹，陸兆新，呂鳳霞，趙海珍，張充.原生質(zhì)體融合選育高產(chǎn)脂肽LI－F多粘類芽胞桿菌及融合菌株表達(dá)差異分析［J］.生物工程學(xué)報(bào).2015，31（9）：1401－1407.

［27］張惠玲.一種棗汁酶解用低甲酯化果膠酶菌種選育方法與應(yīng)用［P］.中國(guó)，CN201410431693.X，20150429

［28］尹伊，屈建航，李海峰，焦國(guó)寶，丁長(zhǎng)河，屈凌波，劉仲敏.耐酸耐高溫α－淀粉酶及其菌種選育研究進(jìn)展［J］.糧油食品科技.2015（5）：101－105.

［29］王繼蓮，李明源，陳蕓.蛋白酶基因的克隆與表達(dá)研究進(jìn)展［J］.食品科學(xué).2015，36（23）：377－381.

［30］Abdin M Z，Alam P.Genetic engineering of artemisinin biosynthesis：prospects to improve its production［J］.Acta Physiologiae Plantarum.2015，37（UNSP 332）.

［31］Bernard D J.Disinhibiting an inhibitor：genetic engineering leads to improvements in recombinant inhibin a production［J］.Endocrinology.2016，157（7）：2583－2585.

［32］Wannathong T，Waterhouse JC，Young R E B，etal.New tools for chloroplastgenetic engineering allow the synthesis of human growth hormone in the green alga Chlamydomonas reinhardtii［J］.Applied Microbiology and Biotechnology.2016，100（12）：5467－5477.

［33］Doran T J，Cooper C A，Jenkins K A，et al.Advances in genetic engineering of the avian genome：＂Realising the promise＂［J］.Transgenic Re.2016，25（3）：307－319.

［34］Huang Y，Tan H，Guo Z，et al.The biosynthesis and genetic engineering of bioactive indole alkaloids in plants［J］.Journal of Plant Biology.2016，59（3）：203－214.

［35］Schaller RW.The Recombinant University：Genetic Engineering and the Emergence of Stanford Biotechnology［J］.ISIS.2016，107（2）：447－448.

［36］Florea M，Hagemann H，Santosa G，etal.Engineering control of bacterial cellulose production using a genetic toolkitand a new cellulose－producing strain［J］.Proceedingsof the National Academy of Sciencesof the United Statesof America.2016，113（24）：E3431－E3440.

［37］Gerber A，Milhim M，Hartz P，etal.Genetic engineering of Bacillusmegaterium for high－yield production of themajor teleost progestogens17 alpha，20 beta－di－and 17 alpha，20 beta，21 alpha－trihydroxy－4－pregnen－3－one［J］.Metabolic Engineering. 2016，36：19－27.

［38］Ni X，Sun Z，Zhang H，et al.Genetic engineering combined with random mutagenesis to enhance G418 production in Micromonospora echinospora［J］.Journal of Industrial Microbiology＆Biotechnology.2014，41（9）：1383－1390.

［39］Srirangan K，Liu X，Westbrook A，etal.Biochemical，genetic，andmetabolic engineering strategies to enhance coproduction of 1－propanol and ethanol in engineered Escherichia coli［J］.Applied Microbiology and Biotechnology.2014，98（23）：9891－9892.

［40］Huang X，Lu X，Li Y，etal.Improving itaconic acid production through genetic engineering of an industrial Aspergillus terreus strain［J］.Microbial Cell Factories.2014，13（119）.

［41］張懿翔，梅旭旭，張興群.同源重組vgb基因提升果膠酶枯草桿菌工程菌亞麻脫膠能力［C］.2015.

［42］陳濤，章博，王智文，趙學(xué)明.利用木糖生長(zhǎng)的重組枯草芽孢桿菌［P］.中國(guó)，CN201310664891.6，2014－03－12

［43］Gong J，Duan N，Zhao X.Evolutionary engineering of Phaffia rhodozyma for astaxanthin－overproducing strain［J］.Frontiers of Chemical Science＆Engineering.2012，6（2）：174－178.

［44］Arslan M，Sürmeli Y，Topalo？lu A，et al.Longevity of stress－resistant yeastmutants obtained by evolutionary engineering［C］.2016.

［45］Sürmeli Y，Arslan M，Topalo？lu A，et al.Evolutionary Engineering of Caffeine－resistant Saccharomyces cerevisiae［C］. 2016.

［46］Morales P，Mussatto S I，Gentina JC，etal.Evolutionary Engineering of Spathaspora passalidarum resistance to inhibitors compounds using autohydrolysate of Eucalyptus globulus to produce bioethanol［C］.2016.

［47］Zhou J，Wu K，Rao CV.Evolutionary engineering of Geobacillus thermoglucosidasius for improved ethanol production［J］.Biotechnology＆Bioengineering.2016.

［48］鄭權(quán)莉.羅布麻的生物脫膠研究［D］.天津工業(yè)大學(xué)，2014.

Research Progress and Prospect of Strain Breeding for Bast Fiber Bio－degumm ing

GONG Jixian1，2*，ZHANG Qiuya1，2，LIYuqiang1，2，ZHANG Chunchun1，2，ZHANG Jianfei1，2
（1.School of Textile，Tianjin Polytechnic University，Tianjin，300387，China；2 Key Laboratory of Advanced Textile Composites，Ministry of Education of China，Tianjin 300160，China）

As the growing environmental pollution problem in the textile industrial，the technology of bio－degumming attractedmore andmore attention and was applied in production for its low pollution and low energy consumption.An efficient strain is the key factor in the bio－degumming process..With the deep research of the strain breeding and its application into industrial production，the technology of breeding strain has been improved greatly for a higher degree.This paper reviewed the recent progress of the strain breeding technology for the bast fiber bio－degumming，and it discussed the prospect for its development.

bast fibers；degumming；strain breeding

S563

：A

1671－3532（2017）01－0050－05

2016－09－13

國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃（2016YFC0400503－02）；新疆自治區(qū)重大專項(xiàng)（2016A03006）

鞏繼賢（1975－），男，副教授，博士，研究方向：主要從事清潔染整技術(shù)研究；E－mail：gongjixian＠126.com