五味子花中脂溶性成分的GC/MS分析研究

高 潔 賴普輝

(陜西國際商貿(mào)學院醫(yī)藥學院，咸陽，712046)

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中藥研究

五味子花中脂溶性成分的GC/MS分析研究

高 潔 賴普輝

(陜西國際商貿(mào)學院醫(yī)藥學院，咸陽，712046)

目的：對五味子花中的脂溶性成分進行分析。方法：采用索氏提取法對脂溶性成分進行了提取，結合GC/MS法對五味子花中脂溶性成分進行分析。結果：共鑒定出11種成分，五味子花中的活性成分維生素E含量為1.066%。結論：從五味子花中得出的角鯊烯為首次從五味子花中獲取的活性成分，經(jīng)分析五味子的花和果實含有相似的脂溶性成分。

五味子花；索氏提取；氣相色譜-質譜連用；脂溶性成分

五味子作為中藥在臨床上有很大的治療效果，秦嶺山區(qū)各縣均有出產(chǎn)，資源豐富。主要用于肺腎兩虛所致的虛咳、氣喘，經(jīng)常與補腎藥合用，還可用于陰液不足所致的口干渴，盜汗以及一切氣血耗散之休克、虛脫等癥，與其他中藥配伍用于治療肝炎、肝腎功能不足、月經(jīng)失調、神經(jīng)衰弱等[1-7]。五味子中所含的化學成分主要有木脂素類和揮發(fā)油類和多糖類，本研究運用GC-MS分析技術對五味子花中的脂溶性成分進行了分析研究，并將其與五味子果實中的脂溶性成分進行了比較分析[8-9]。

1 材料與方法

1.1 試藥 五味子花(采自陜西秦嶺南側留壩縣)，五味子果實(采自陜西秦嶺南側留壩縣)，經(jīng)陜西中醫(yī)藥大學生藥教研室雷國蓮教授鑒定為木蘭科植物五味子的花和果實。

1.2 試劑 石油醚；正己烷(色譜標準)；維生素E標準品(中國生物制品鑒定所)；其他試藥均為分析純。

1.3 儀器與設備 氣相色譜-質譜聯(lián)用儀(Hp5989B型)；高效氣相色譜儀(日本島津GC-14A)，KQ2200DB型數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；高速萬能粉碎機(天津鑫博得儀器有限公司)；旋轉蒸發(fā)器(上海亞榮生化儀器廠)；電熱恒溫水浴鍋(北京科偉永興儀器有限公司)；索氏提取裝置。

1.4 測試樣品的制備 五味子花干燥粉碎，五味子果實粉碎后置于索氏提取器中用石油醚提取，揮去溶劑后，殘余物用濃乙醇溶解，溶液置于冰箱中冷凍，然后過濾分去沉淀，減壓蒸去乙醇得黃褐色油狀物。

1.5 色譜條件 1)氣相色譜-質譜連用：色譜柱HP-5，毛細管柱30 m×0.25 mm，氣化室溫度260 ℃，柱溫50～250 ℃(4 ℃/min)，載氣氮氣，柱前壓1.5 kg/cm2，電離方式EI，電子能量70 ev，離子源溫度260 ℃，收集電流300 MA，掃描速度0.41次/秒。2)高效氣相色譜：玻璃柱2 m×3 mm，填充劑：1.890 silicon ov，溫度265 ℃，檢測器及進樣品溫度300 ℃，氫火焰離子化檢測器(FID)，氣體流速：氮氣0.8 m/min，氫氣0.5 kg/cm2，空氣1 kg/cm，量程103，流速1 mm/min，進樣量2 μL。

1.6 保留時間，色譜柱塔板數(shù)的測定 維生素E的理論塔板數(shù)為2 432，保留時間為21.7 min，內(nèi)標峰為13.417 min。

1.7 定量校正因子的測定 1)內(nèi)標溶液的配制：精密稱取0.046 6 g，正三十二烷置于50 mL容量瓶中，加正己烷使溶解并稀釋至刻度，搖勻。2)標準溶液的配制：精密稱取維生素E標準品0.045 2 g，置于20 mL容量瓶中，用內(nèi)標液稀釋，定容。3)校正因子的測定：分別注入標準溶液3 μL進行測定3次，取平均值為1.066。

1.8 樣品的制備與測定 五味子果實干燥粉碎，精密稱取0.999 2 g，根據(jù)實驗選擇用25 mL正己烷，在室溫下，用超聲提取20 min，過濾，濾渣再用超聲提取20 min，合并提取液，揮去溶劑，將黃色油狀物用內(nèi)標溶液使溶解稀釋，定容至2 mL，分別取2 μL測定2次，取其平均值用校正因子計算其含量，結果為1.500 9‰。

1.9 對比試驗 精密稱取五味子果實樣品0.9994 g，加25 mL正己烷加熱回流提取3 h，過濾，濾渣用25 mL正己烷再加熱回流提取1 h，用上述方法測定，含量為0.487‰。

2 結果

2.1 五味子花中脂溶性成分的GC/MS分析結果 結果如表1所示，通過GC-MS聯(lián)用儀標準質譜數(shù)據(jù)庫NIST2.0進行檢索，確認各化合物；通過GC-MS聯(lián)用儀工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，按峰面積歸一化法計算各化合物相對的量，共檢出20個色譜峰，鑒定出了11個化合物，其中脂肪酸有3種：棕櫚酸，亞油酸，硬脂酸，其中角鯊烯為首次從五味子花中獲取的活性成分。

2.2 五味子花中維生素E的含量測定結果 可獲取正三十二烷、維生素E的保留時間，正三十二烷的保留時間為13.417 min，維生素E的保留時間為21.7 min。用內(nèi)標法計算五味子花中維生素E的含量，3次測定的結果分別為：1.066%，1.068%，1.065%，平均值為1.066%，RSD為1.48%。

2.3 五味子果實中脂溶性成分的GC/MS分析結果 結果如表2所示，通過GC-MS聯(lián)用儀標準質譜數(shù)據(jù)庫NIST2.0進行檢索，確認各化合物，共檢出29個色譜峰，鑒定出了14個化合物，占樣品總量的83.445%，檢出組分中脂肪酸含量較高，占總成分的81.56%，其中亞油酸含量最高，達總量的58.11%，飽和脂肪酸含量占23.45%，不飽和脂肪酸占71.57%。

表1 花中脂溶性成分GC/MS分析結果

表2 果實中脂溶性成分GC/MS分析結果

2.4 五味子花和果實脂溶性成分的比較 根據(jù)所得實驗結果，對五味子花和果實中的脂溶性成分進行比對，結果如表3所示。根據(jù)實驗對比，得出表3，可知五味子果實中的脂溶性成分較五味子花中的脂溶性成分都含有萜類化合物，但它們的具體結構與分子式不相同，且五味子果實中的脂溶性成分種類明顯多于花中。在五味子花中首次檢測出鯊烯，在果實中未檢出該化學組分。

3 結論

從五味子花的氣相色譜圖中，共測定出20個色譜峰，鑒定出11種化合物，其中脂肪酸有3種：棕櫚酸，亞油酸，硬脂酸，其中角鯊烯為首次從五味子花中獲取的活性成分。

表3 五味子花和果實中主要脂溶性成分的比較

從五味子果實中的色譜圖中，共測定29個色譜圖，鑒定出14種化合物，檢出組分中脂肪酸含量較高，占總成分的81.56%，其中亞油酸含量最高，達總量的58.11%，飽和脂肪酸含量占23.45%，不飽和脂肪酸占71.57%。

通過試驗對比得知五味子花中維生素E相對比果實中多，并含有一定量的脂肪酸和揮發(fā)油類。含揮發(fā)油的中草藥或提取出的揮發(fā)油大多具有發(fā)汗、理氣、止痛、抑菌、矯味等作用。五味子花中的α-可巴烯是一種三環(huán)倍半萜類的化合物，它是蒿草里芳香油中的成分之一，具有抗真菌，利尿，鎮(zhèn)靜等作用；石竹烯可用作藥草調配香精[10-11]；亞油酸能降低血液膽固醇，預防動脈粥樣硬化；鯊烯可用作殺菌劑、口服營養(yǎng)藥、皮膚柔軟滑潤劑及制備藥物、橡膠、香料、有機色料和表面活性劑的原料[12-15]。五味子花中的其他脂溶性成分也具有一定的藥理活性，有待于進一步研究。

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(2015-11-23收稿 責任編輯：張文婷)

GC/MS Analysis of Fat-soluble Components in Schisandra Sphenanthera Flower

Gao Jie，Lai Puhui

(CollegeofMedical，ShaanxiInstituteofInternationalTrade&Commerce，XianYang712046，China)

Objective:To study the fat-soluble components of the Schisandra sphenanthera flower.Methods:Fat-soluble components of the Schisandra sphenanthera flower were extracted by Soxhlet extraction and were analyzed by gas chromatography-mass spectrometry.Results:The eleven compounds were identified and the determination the content of vitamin E with the yields was 1.066%.Conclusion:The squalene was reported for the first time，and there are same fat-soluble components in fructus schisandrae flower and fruit.

Schisandra sphenanthera flower； Soxhlet extraction； GC/MS； Fat-soluble components

陜西省教育廳科學研究項目(編號：12JK1044)——板栗殼棕色素清除“腦部缺血后再灌流氧自由基”效果評價模式的建立；陜西省咸陽市科學技術研究計劃項目(編號：2015k04-20)——板栗殼棕色素清除“肝臟缺血后再灌流氧自由基”效果評價模式的建立

高潔(1984.11—)，女，碩士，講師，研究方向：生物制藥及藥物活性成分分析及應用，E-mail：251536749@qq.com

R284.1；R284.2

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2016.11.056