■吳貴富 鄒糧澤 張 敏 耿春銀 金英海
(延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院動物科學(xué)系,吉林延吉133002)
鍺是痕跡的微量元素,于1886年春被德國化學(xué)家Winkler首次發(fā)現(xiàn)。在后續(xù)的試驗(yàn)中表明,鍺在提高人體免疫力,維持機(jī)體內(nèi)平衡以及消炎和抗癌等方面有著顯著效果,還有利于預(yù)防心腦血管疾病,對防止血管硬化,調(diào)節(jié)機(jī)體脂肪代謝都有一定的作用,是一種比較優(yōu)越的保健元素。但由于人及動物小腸的吸收機(jī)制等原因的影響,限制了無機(jī)鍺的應(yīng)用。
在自然界中,生物有機(jī)鍺的資源稀少,人參、靈芝等名貴藥材雖然含有豐富的有機(jī)鍺,但是價格極其昂貴,而酵母菌卻對這些微量元素的富集有良好的效果,酵母菌也是一種效果顯著的蛋白質(zhì)飼料,普遍應(yīng)用在畜禽生產(chǎn)中,因此,它是將無機(jī)鍺轉(zhuǎn)化為有機(jī)鍺的理想載體。而且酵母菌本身富含糖類、蛋白質(zhì)和維生素等多種營養(yǎng)元素,能促進(jìn)機(jī)體的代謝作用,維持神經(jīng)的正常功能,防止貧血,促進(jìn)腸道內(nèi)維生素的合成,增強(qiáng)機(jī)體體力。同時它還含有核酸和礦物質(zhì),也含有一些具有保健作用的活性物質(zhì)。因此,酵母菌是一種優(yōu)質(zhì)的載體。
目前,富鍺酵母是一種新型的生物添加劑,它集合了酵母菌和有機(jī)鍺的雙重優(yōu)勢,通過酵母菌的富集作用,將無機(jī)鍺轉(zhuǎn)化為有機(jī)鍺,降低了無機(jī)鍺的毒性,提高了機(jī)體對鍺的吸收率,同時還能為畜禽提供豐富的蛋白質(zhì)資源。本試驗(yàn)通過對小鼠攝入不同劑量的富鍺酵母,觀察不同劑量富鍺酵母對高脂小鼠脂肪的代謝作用,證明富鍺酵母對小鼠有降脂作用,并促進(jìn)小鼠生長,為今后富鍺酵母在家畜生產(chǎn)中的實(shí)際應(yīng)用提供理論依據(jù)。
試驗(yàn)用小白鼠:選用體質(zhì)量在 18~22 g,體況良好、機(jī)體健康的雄性小白鼠60只,購自于延邊大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)中心。
1.2.1 高脂模型的建立
對所有小鼠預(yù)飼7 d后,采用完全隨機(jī)方法,將試驗(yàn)用小白鼠分成5組,以組內(nèi)和組間差異不顯著為原則。用飼喂高脂料的方法來平行復(fù)制建立高脂模型。基礎(chǔ)對照組飼喂基礎(chǔ)料,其它4組小鼠以高脂料和不同劑量富鍺酵母喂養(yǎng),每天記錄小鼠采食量,造模時間為28 d。
1.2.2 分組
采用完全隨機(jī)方法,將試驗(yàn)用小白鼠分成5組,即基礎(chǔ)料組、高脂組和試驗(yàn)Ⅰ組、試驗(yàn)Ⅱ組、試驗(yàn)Ⅲ組,每組3個重復(fù),每個重復(fù)4只,以組內(nèi)和組間差異不顯著為原則?;A(chǔ)料組飼喂基礎(chǔ)日糧(見表1),高脂料組飼喂高脂料(5%的豬油、10%的蛋黃粉、0.5%膽鹽、84.5%基礎(chǔ)料),三個試驗(yàn)組分別飼喂高脂料及20、40、60 mg/kg 3個濃度梯度的富鍺酵母。以基礎(chǔ)料組為對照組,高脂組為模型組,3個濃度梯度為試驗(yàn)組,測定不同濃度富鍺酵母對雄性小鼠脂肪代謝的影響。
表1 基礎(chǔ)日糧配方(%)
將基礎(chǔ)料組、高脂料組和試驗(yàn)組的小白鼠分別飼養(yǎng)于代謝籠中。試驗(yàn)期間,每天供給充足的飲水和日糧,讓其自由采食,同時也要記錄每天的給料量,剩余料量及損失料量,以計(jì)算消耗的飼料質(zhì)量。飼養(yǎng)環(huán)境:溫度(25±3)℃,相對濕度55%,自然光照。
在試驗(yàn)期開始和結(jié)束時,對所有小白鼠空腹12 h后稱質(zhì)量,并記錄日常各組小鼠的采食情況。在試驗(yàn)結(jié)束后將小鼠處死,摘除小鼠肝臟進(jìn)行稱重,并分別剝離小鼠生殖器官的脂肪、腎周圍的脂肪、腹股溝皮下的脂肪,并稱重。對每組小白鼠摘除眼球采血,置于離心管內(nèi)并做好標(biāo)記,以3 000 r/min離心10 min,吸取上清液血清,分別裝于Eppendorf管內(nèi),置于-20℃冰箱中保存,備用。
2.2.1 生長性能
根據(jù)試驗(yàn)過程中記錄的每籠小鼠消耗的飼料質(zhì)量,計(jì)算出每只小鼠平均每天的采食量;分別以初末時每籠小鼠空腹體重算出各組平均日增質(zhì)量;用平均日采食量與平均日增重的比值表示料重比。
2.2.2 血液指標(biāo)
用制備好的血清分別測定基礎(chǔ)料組、高脂料組和三個試驗(yàn)組小白鼠血清中的總膽固醇(mmol/l)、甘油三酯(mmol/l)、高密度脂蛋白(mmol/l)、TC/HDL-C含量(利用全自動生化分析儀測定)。
2.2.3 肝臟質(zhì)量和不同部位脂肪質(zhì)量
對小鼠脫頸處理,摘除小鼠肝臟后,稱取肝臟質(zhì)量;并分別剝離小鼠生殖器官、腎周圍和腹股溝皮下的脂肪,并稱重。
2.2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件中的ANOVA分析試驗(yàn)數(shù)據(jù),結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。
表2 小鼠的生長性能
如表2所示,相比于高脂料組,各劑量富鍺酵母小鼠的初、末體重以及料重比均沒有明顯差異(P>0.05),試驗(yàn)Ⅰ、Ⅲ組小鼠的平均日增重均有所上升,分別增加了11.3%和15.1%,但增加的不明顯(P>0.05)。試驗(yàn)Ⅱ組平均日采食量相較于高脂料組顯著降低(P<0.05),試驗(yàn)Ⅰ、Ⅲ組小鼠的料重比分別降低13.5%和17.4%,試驗(yàn)Ⅱ組小鼠的料重比上升2.36%,但均不顯著(P>0.05)。
表3 小鼠各項(xiàng)血液指標(biāo)
由表3能得出,相比于基礎(chǔ)料組,高脂料組小鼠的總膽固醇顯著升高(P<0.05),這說明高脂小鼠模型建立成功。試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ組的甘油三酯明顯低于高脂料組(P<0.05),試驗(yàn)Ⅲ組甘油三酯與高脂料組相比有所下降,但不明顯(P>0.05)。各試驗(yàn)組和基礎(chǔ)料組的總膽固醇與高脂料組相比均有下降,但下降不明顯(P>0.05)。各組高密度脂蛋白及TC/HDL-C都無明顯差異(P>0.05),與高脂料組相比,各試驗(yàn)組高密度脂蛋白有所上升,但差異不顯著(P>0.05)。
表4 小鼠各項(xiàng)生理指標(biāo)表
通過表4可知,各組小鼠的肝臟質(zhì)量均沒有明顯變化(P>0.05),腎周圍和腹股溝下脂肪也沒有明顯差異(P>0.05)。但與高脂料組小鼠相比,各試驗(yàn)組生殖器官周圍脂肪極顯著下降(P<0.01)。
有研究表明,鍺能增加機(jī)體中碘、三碘甲狀腺原氨酸(T3)、四碘甲狀腺原氨酸(T4)的含量,從而增強(qiáng)動物機(jī)體的代謝,達(dá)到促進(jìn)生長和增重的效果。溫萍等在用鍺飼喂仔雞的試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),鍺能不同程度增進(jìn)仔雞的成長。楊志強(qiáng)對7周齡雞飼喂不同劑量的無機(jī)鍺粉,當(dāng)添加10、20 mg/kg的鍺粉時,對雞的生長有明顯的促進(jìn)作用,并且提高了飼料的利用率和雞的屠宰率。唐兆新等也通過試驗(yàn)證明有機(jī)鍺有較好的提高30日齡后雛雞質(zhì)量的作用。在本試驗(yàn)中,與高脂料組相比,試驗(yàn)Ⅰ組、試驗(yàn)Ⅲ組小鼠的平均日增重均有所增加,分別增加11.3%和15.1%,試驗(yàn)Ⅰ組、試驗(yàn)Ⅲ組小鼠的料重比分別降低13.5%和17.4%,與上述結(jié)果一致。但試驗(yàn)Ⅱ組小鼠的平均日采食量較高脂料組明顯下降(P<0.05),料重比上升2.36%。這與梁軒在鍺對肉仔雞生長影響的研究中,30 mg/kg Ge-132添加組只均增重和只日均增重顯著低于對照組,料重比高于對照組的結(jié)果保持一致。雖然各試驗(yàn)組對小鼠的促進(jìn)作用均不一致,但在20、60 mg/kg時,對小鼠的日增重和飼料報酬均有一定的促進(jìn)作用。
由表3結(jié)果得知,在日糧中加入適當(dāng)劑量的富鍺酵母,對小鼠血清中的脂代謝產(chǎn)生了一定的影響。使血清中的總膽固醇和甘油三酯的含量均有不同程度的降低,且其中甘油三酯的含量與高脂料組相比在試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ組中顯著下降(P<0.05)。唐兆新等在Ge-132對蛋雞脂類代謝影響的試驗(yàn)中表明,鍺對降低蛋雞血清中總脂含量也有顯著效果(P<0.05)。對小鼠血清中甘油三酯和總膽固醇的變化,表明富鍺酵母對促進(jìn)小鼠血清中脂肪代謝是有顯著效果的。同時,高密度脂蛋白的含量各試驗(yàn)組與高脂料組相比均有上升,但不明顯(P>0.05)。楊利在Ge-132對紹興鴨生產(chǎn)性能、種蛋品質(zhì)及血液生化指標(biāo)的試驗(yàn)中表明,鍺能適當(dāng)增加血清中高密度脂蛋白的含量,與本試驗(yàn)結(jié)果一致。各試驗(yàn)組的TC/HDL-C較高脂料組有輕微的降低,但不明顯。
由表4試驗(yàn)數(shù)據(jù)得出,富鍺酵母對各組小鼠的肝臟質(zhì)量和腹股溝皮下脂肪質(zhì)量均無顯著性變化(P>0.05),表明富鍺酵母未對小鼠肝臟造成不利影響,梯度添加量是適宜的。而與高脂料組相比,其余各組小鼠的生殖器官周圍脂肪和腎周圍脂肪均不同程度低于高脂料組,其中各試驗(yàn)組小鼠生殖器官周圍脂肪極顯著降低(P<0.01),腎周圍脂肪各試驗(yàn)組也相對降低,但不顯著(P>0.05)。試驗(yàn)結(jié)果表明,富鍺酵母對小鼠的體脂有一定的降低效果。
本試驗(yàn)對雄性高脂小鼠飼喂不同劑量富鍺酵母28 d后,通過對小鼠生長性能、各部位體脂和部分血清指標(biāo)的測定表明,富鍺酵母能不同程度降低小鼠血清中總膽固醇和甘油三酯的含量,以及小鼠生殖器官周圍脂肪的質(zhì)量,達(dá)到一定的降脂作用,同時對小鼠生長也起到一定的促進(jìn)作用。