南京市建鄴區(qū)2015年疑似食物中毒的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)與分析

摘要：目的 了解食物中毒的細(xì)菌污染情況并進(jìn)行分析，為食物中毒處理提供依據(jù)。方法 收集南京市建鄴區(qū)2015年6起疑似食物中毒的有關(guān)數(shù)據(jù)，運(yùn)用實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)，進(jìn)行致病菌分析。結(jié)果 84份樣品中3份肛拭子檢出金黃色葡萄球菌，1份食品檢出金黃色葡萄球菌，未檢出其他致病菌。結(jié)論 6起疑似食物中毒事件中，2起確定檢測(cè)出金黃色葡萄球菌。食物中毒事件并非偶然，應(yīng)加強(qiáng)監(jiān)督和相應(yīng)技術(shù)指導(dǎo)，減少此類(lèi)食物中毒事件的發(fā)生。

關(guān)鍵詞：食物中毒；金黃色葡萄球菌；細(xì)菌鑒定；實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

南京市建鄴區(qū)2015年全年共發(fā)生6起疑似食物中毒事件，2015年1月7日某幼兒園有十多名幼兒在食堂進(jìn)食后發(fā)生伴有惡心、嘔吐，腹瀉，發(fā)燒等癥狀的食物中毒事件；4月28日我中心收到舉報(bào)，十多人在某酒店聚餐后多人嘔吐，腹瀉；5月17日莫某在某熟食店買(mǎi)熟食回家進(jìn)食，導(dǎo)致家人多發(fā)生腹瀉；8月5日收到食物中毒投訴樣品，在某酒店聚餐多人腹瀉；10月16日某中學(xué)學(xué)生在食堂進(jìn)食后，多名學(xué)生發(fā)生惡心，腹瀉等食物中毒癥狀；10月19日某幼兒園在食堂進(jìn)食后發(fā)生嘔吐，腹瀉等食物中毒癥狀。經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查，立即對(duì)可疑食物，生物樣品和接觸樣本進(jìn)行采集，檢測(cè)，結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 六起疑似食物中毒事件中，刮取砧板表面殘?jiān)杉瘡N師手表面樣品共18份，均保存于生理鹽水中送檢；剩余食物31份；患者肛拭子35份，共計(jì)84份樣品。

1.2試劑 BPW緩沖液，SC、TTB、BS、志賀增菌肉湯、XLD、3%氯化鈉堿性蛋白胨水、7.5%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯、Baird-Parker、血平板、血漿凝固酶試劑和營(yíng)養(yǎng)瓊脂均為北京陸橋技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)；副溶血型弧菌顯色培養(yǎng)基、金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基均為上海欣中生物工程有限公司生產(chǎn)；ATB 20E生化試劑條為法國(guó)梅里埃公司生產(chǎn)。以上試劑均在有效期內(nèi)使用，并經(jīng)過(guò)質(zhì)量控制。金黃色葡萄球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株（ATCC 25923）和血漿凝固酶陰性的表皮葡萄球菌（ATCC 26096）為江蘇省疾病預(yù)防控制中心提供。

1.3主要儀器 ATB Expression自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀為法國(guó)梅里埃公司生產(chǎn)。

1.4檢測(cè)方法 根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查和臨床表現(xiàn)主要檢測(cè)沙門(mén)、志賀、金黃色葡萄球菌和副溶血性弧菌，檢測(cè)方法按照《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)》GB/4789.4-2010、GB/4789.5-2012、GB/4789.10-2010、GB/4789.7-2013進(jìn)行檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1一般情況 1月7號(hào)某幼兒園送檢的剩余食物和患者的肛拭子以及8月5日某飯店送檢的患者肛拭子經(jīng)分離后，在BP平板上可疑菌落直徑為2～3 mm，顏色呈黑色，邊緣為淡色，周?chē)鸀橐粶啙釒В谄渫鈱佑幸煌该魅?，用接種針接觸菌落有似奶油狀至樹(shù)膠樣的硬度；在血平板上可疑菌落較大，圓形、光滑凸起、濕潤(rùn)、金黃色，菌落周?chē)梢?jiàn)完全透明溶血圈。

2.2細(xì)菌鑒定 從1份剩余食物樣品和3份患者肛拭子樣品中檢出的可疑菌落均為革蘭氏染色陽(yáng)性葡萄狀球菌，溶血（+），血漿凝固酶（+），API 32 STAPH鑒定為金黃色葡萄球菌（非常好的鑒定結(jié)果）%id=99.0/T=0.99，見(jiàn)圖1。

圖1 可疑金黃色葡萄球菌API 32 STAPH實(shí)驗(yàn)結(jié)果

注：URE：尿酶；ADH：精氨酸雙水解酶；ODC：鳥(niǎo)氨酸脫羧酶；ESC：七葉靈（水解）GLU：葡萄糖；FRU：果糖；MNE：甘露糖；MAL：麥芽糖；LAC：乳糖（發(fā)酵）；TRE：海藻糖；MAN：甘露醇；RAF：棉子糖；NIT：硝酸鹽（還原）；VP：產(chǎn)丙酮；βGAL：β-半乳糖苷酶；ArgA：精氨酸芳胺酶；PAL：堿性磷酸酶；PyrA：吡咯烷基芳胺酶；NOVO：新生霉素（抗性）；SAC：蔗糖（發(fā)酵）；NAG：N-乙酰葡糖胺；TUR：松二糖（發(fā)酵）；ARA：阿拉伯糖（發(fā)酵）；βGUR：β-葡糖醛酸酶；RIB：核糖；CEL：纖維二糖。

2.3檢驗(yàn)結(jié)果 31份剩余食物中有1份檢出金黃色葡萄球菌，占比3.2%；35份患者肛拭子中有3份檢出金黃色葡萄球菌，占比8.6%；18份砧板及其他可能接觸的物表未檢出其他致病菌，所有樣品均未檢出沙門(mén)氏菌、志賀氏菌和副溶血性弧菌，見(jiàn)表1。

3 討論

對(duì)于細(xì)菌性食物中毒，其通用檢測(cè)流程，一般都根據(jù)患者的臨床癥狀、流行病學(xué)特征等具體情況，而選擇檢測(cè)項(xiàng)目。但是由于實(shí)際上可能存在多種菌混合污染，個(gè)人差異和病原菌菌株不同的原因，導(dǎo)致食物中毒臨床癥狀缺乏典型性，易造成漏檢。應(yīng)用細(xì)菌性食物中毒檢測(cè)流程加上實(shí)驗(yàn)室的細(xì)菌鑒定，避免了上述不足，提高檢測(cè)速度和檢出率，為臨床治療和疫情的控制提供可靠的依據(jù)和贏得寶貴的時(shí)間[1]。同時(shí)，細(xì)菌鑒定能夠確切的分析出病原菌的具體種屬，這也為食物中毒確診定性打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。

此次通過(guò)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，收集到的6起疑似食物中毒事情中，有2起確定檢測(cè)出了金黃色葡萄球菌，檢出率為33.3%。另外只在部分患者肛拭子中和1份剩余食物中檢出病原菌。病原菌的檢出率不夠理想，若排除非食物中毒話，原因可能與現(xiàn)場(chǎng)被破壞、無(wú)剩余食物、患者用藥治療、未能采集到理想樣本等因素有關(guān)。因此，要加強(qiáng)對(duì)經(jīng)營(yíng)戶的衛(wèi)生知識(shí)培訓(xùn)，供餐單位、消費(fèi)者、食品衛(wèi)生機(jī)構(gòu)要緊密配合，做到食物中毒早發(fā)現(xiàn)、早報(bào)告、及時(shí)采樣，以提高病原菌檢出率，以更好地控制食物中毒的發(fā)生[2]。

本次檢測(cè)出食物中毒的病原菌皆為金黃色葡萄球菌，且都在公共用餐的地點(diǎn)。由于金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的耐熱腸毒素經(jīng)100℃煮沸30 min而不被破壞。一般餐飲烹飪加工只能殺死其菌體，不能滅活其毒素，當(dāng)人們食物含腸毒素食品就可能會(huì)引起食物中毒[3]。另外，金黃色葡萄球菌在自然界廣泛存在，其作為我國(guó)高發(fā)的細(xì)菌性食品中毒的病原菌，提示我們把關(guān)好食品源頭，尤其是一些公共用餐的餐飲單位，要加強(qiáng)衛(wèi)生控制，做好食品安全保障。食物中毒事件在本地區(qū)并非偶然發(fā)生，我們應(yīng)高度重視，科學(xué)分析，加強(qiáng)監(jiān)督和技術(shù)指導(dǎo)，減少此類(lèi)食物中毒事件的發(fā)生[4-5]。

參考文獻(xiàn)：

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[5]于京平，閆兆鳳，李作寧.2010-2013年某地食物中毒事故分析[J].中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2015，16（8）：659-670. 編輯/羅茗柯