2—氨基—4，6—二甲氧基嘧啶的液相色譜分析

摘要：建立高效液相色譜法測定農(nóng)藥中間體的方法，采用外標(biāo)法定量分析2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶，流動相采用甲醇與水體積比7∶3配制，流速為1.0 mL/min，檢測波長為254 nm，進樣量為20 μm，靈敏度為0.08 AUFS，柱溫為室溫。測定結(jié)果表明，平均回收率為99.5%，標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.213，變異系數(shù)為0.205%，線性相關(guān)系數(shù)為0.999 6。測定方法簡便、可靠，可用于產(chǎn)品的含量分析。

關(guān)鍵詞：2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶；高效液相色譜；外標(biāo)法定量分析

中圖分類號：O657.7+2；TQ457.2+3 文獻標(biāo)識碼：A 文章編號：0439-8114（2016）11-2885-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.11.044

磺酰脲類除草劑能夠抑制多數(shù)種類的雜草，具有高活性、高選擇性、高安全性（對人畜毒性低）等特點，應(yīng)用前景廣闊[1-3]。2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶（2-amino-4，6-dimethoxypyrimidine，C6H9N3O2）是一種重要的農(nóng)藥和醫(yī)藥中間體，應(yīng)用廣泛，通常用于合成磺酰脲類農(nóng)藥等除草劑[4]。2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶的快速、簡便檢測指標(biāo)，如水分和干燥失重等，是該產(chǎn)品質(zhì)量控制的重要內(nèi)容，受到研究者重視。吳培等[5]利用毛細(xì)管氣相色譜分析法，在2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶樣品中加入已知量的標(biāo)樣，測得2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶的回收率為99.5%。高效液相色譜分析法是應(yīng)用最普遍的一種分析方法[6]，本研究使用高效液相色譜法對2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶進行分析研究，以探究適用的分析方法。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

主要試劑：甲醇（Sinopharm Chemical Reagent Co），無水甲醇（天津市嘉宇精細(xì)化工有限公司）均為AR；卡爾費休試劑3-5（安全型無吡啶，上海新中化學(xué)科技公司）。

主要儀器：KF-1B水份測定儀（CHI660B，上海辰華儀器公司）；電子分析天平（FA2004B，上海化工研究院儀表廠）；超聲波清洗器（KQ3200E型，昆山市超聲儀器有限公司）；電熱鼓風(fēng)干燥箱（9070（A），上海一恒科學(xué)儀器有限公司）；島津高效液相色譜儀（Shimadzu LC-10AT，島津制作所）。

試驗在室溫下進行（約15 ℃），所用水為蒸餾水。

1.2 色譜試驗條件

流動相為甲醇∶水=70∶30（V/V），將抽濾過的甲醇和水混合用超聲波排氣，色譜柱為Shimaudzu Shim-pack vp-ODS（250 mm×4.6 mm，5 μm），流速為1.0 mL/min，檢測波長為254 nm，進樣量為20 μm，靈敏度為0.08 AUFS，柱溫為室溫。

1.3 試驗方法

采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法來測定2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶的含量。分別稱取0.04、0.06、0.08、0.12、0.16 g共5組樣品加入5個50 mL的容量瓶中，分別加入40 mL溶劑，超聲溶樣10 min，定容50 mL，搖勻，用移液管移取5 mL至另一50 mL容量瓶中定容、搖勻，待用。進樣前，將樣品溶液過濾，進樣時用100 μm的進樣器抽取80 μm（注意趕氣泡），每個樣品進2個平行樣，兩次進樣峰面積平均誤差不能超過1%[計算公式為（A1-A2）/（A1+A2）]。否則需要重復(fù)進樣，直到兩次進樣峰面積平均誤差不超過1%。

采用卡爾費休水分滴定儀測定水分。爾費休水分滴定儀測定水分操作簡單、應(yīng)用廣泛、自動化程度高，結(jié)果可靠準(zhǔn)確[20]。對編號為A、B、C的3批產(chǎn)品分別進行多組平行樣的測定。

烘箱干燥法測定干燥失重。干燥失重[21]是評價2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶質(zhì)量的重要指標(biāo)之一，采用烘箱干燥法測定，干燥溫度設(shè)定為50 ℃，干燥時間為45 min。

2 結(jié)果與分析

2.1 高效液相色譜測定2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶的含量

2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶的測定數(shù)據(jù)及濃度的計算結(jié)果見表1和圖1。由表1和圖1可知，標(biāo)樣的濃度與峰面積呈正比。當(dāng)稱樣量增大時，濃度增大，其峰面積增大。由多組數(shù)據(jù)得到峰面積（x）與濃度（y）的關(guān)系，y=0.131 5x-0.09 7，R2=0.099 1。

以2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶在0.040 0～0.140 0 g范圍內(nèi)配制溶液，在相同色譜條件下測定，以2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶對內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量為縱坐標(biāo)，對應(yīng)的峰面積為橫坐標(biāo)繪制線性關(guān)系曲線圖，得到線性關(guān)系方程為y=0.100 0x-0.009 7，R2=0.999 1。

選取1個2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶樣品進行方法精密度的測定，按上述色譜條件平行測定7次，結(jié)果見表2和圖2，經(jīng)計算，得到線性方程y=0.108 5x-0.005 8，標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.21，變異系數(shù)為0.21%。

2.2 2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶水分的含量

水分測定結(jié)果見表3、表4、表5?？梢娫摦a(chǎn)品的水分含量較穩(wěn)定，均小于限量（0.06%），說明該方法所測的平行性較好。

2.3 2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶干燥失重

干燥失重情況見表6、表7、表8。該產(chǎn)品的干燥失重含量較穩(wěn)定，均小于限量（0.5%），且該方法所測的平行性較好?？蓮V泛應(yīng)用于工業(yè)化操作。

3 結(jié)論

利用高效液相色譜法對2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶進行分析，具有操作簡單、準(zhǔn)確度高、穩(wěn)定性好、易于工業(yè)化生產(chǎn)操作等一系列優(yōu)點。根據(jù)此方法還可以制定出快速粗測檢測2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶含量的歸一化法，兩種方法的配合使用，可以有效提高工業(yè)化生產(chǎn)的效率。通過對2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶的水分和干燥失重的測定，其含量穩(wěn)定有效，符合國家標(biāo)準(zhǔn)。

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