土大黃根提取物對小鼠非特異性免疫功能的影響*

尤力都孜·買買提，阿布都吉力力·阿布都艾尼，熱比姑麗·伊斯拉木

（1．新疆維吾爾自治區(qū)維吾爾醫(yī)藥研究所，新疆 烏魯木齊 830049； 2．新疆維吾爾醫(yī)方劑學實驗室，新疆 烏魯木齊 830049）

土大黃根提取物對小鼠非特異性免疫功能的影響*

尤力都孜·買買提1，2，阿布都吉力力·阿布都艾尼1，2，熱比姑麗·伊斯拉木1，2

（1．新疆維吾爾自治區(qū)維吾爾醫(yī)藥研究所，新疆 烏魯木齊 830049； 2．新疆維吾爾醫(yī)方劑學實驗室，新疆 烏魯木齊 830049）

目的 探討土大黃根提取物對正常小鼠非特異性免疫功能的影響。方法 采用小鼠體內吞噬廓清能力測定試驗（惰性炭粒吞噬廓清法），觀測土大黃根提取物（1，2，4 g／kg）灌胃給藥后，小鼠的一般狀況、體重、脾臟及胸腺指數、廓清指數。結果 土大黃提取物（1，2，4 g／kg）在試驗期間小鼠的一般狀況、體重、脾臟及胸腺指數變化無明顯異常（P＞0．05）；各給藥組雖能升高正常小鼠廓清指數，但其差異無統(tǒng)計學意義（P＞0．05）。結論 土大黃根提取物對正常小鼠非特異性免疫功能（單核－巨噬細胞系統(tǒng)吞噬功能）有一定影響。

土大黃根提取物；小鼠；非特異性免疫

土大黃 RumexL．是蓼科 Polyonaceae酸模屬 Rumex多年生草本植物，維吾爾藥物名有阿提庫拉克（Atkulak）、歐麻孜（Hummaz）、土日謝（Turux）、塔給庫斯（Tagkusi），其藥用部位為全草、葉子、根莖及根，用于腎、肝及胃腸疾患，并用于皮疹及皮膚瘙癢等[1－2]。本研究中通過小鼠體內吞噬廓清能力測定試驗，探討了土大黃根提取物對正常小鼠非特異性免疫功能的影響。

1 材料與方法

1．1 儀器、動物與試藥

儀器：CPA1245型精密電子天平（賽多利斯科學儀器有限公司）；UV－7504C型紫外可見分光光度計（上海精科實業(yè)有限公司）。

動物：昆明種小鼠80只，雄性，體重18～22 g，由新疆實驗動物研究中心提供，試驗動物生產許可證號SCXK（新）2011－0001，試驗動物使用許可證號SYXK（新）2011－0005。試驗開始前檢疫，經一般行為觀察，選用符合要求的70只小鼠進行試驗。

試藥：土大黃根（新疆華安中藥飲片有限責任公司，批號為12110），由新疆大學資源與環(huán)境科學學院努爾巴依·阿不都沙力克教授鑒定為土大黃根；醋酸地塞米松片（DXM，浙江仙琚制藥股份有限公司，國藥準字H33020822，批號為 140670，規(guī)格為每片 0．75 mg）；消銀顆粒（XYKL，陜西康惠制藥股份有限公司，國藥準字Z20000019，批號為130809，規(guī)格為每袋3．5 g）；異常黏液質成熟劑[木尼孜其白里海密，維吾爾語命名為Munziq Balgam（MB），批準文號為M20052633]，由新疆維吾爾自治區(qū)維吾爾醫(yī)醫(yī)院制劑室（GMP認證）提供。印度墨汁（Cat．NO．18060）；碳酸鈉（Na2CO3，天津永晟精細化工有限公司，批號為20111020）。

1．2 試驗方法

土大黃根提取物的制備：土大黃根用乙醇室溫密閉浸泡 1 h后回流提取3次，過濾，合并濾液減壓濃縮，真空干燥，得干膏粉，試驗時配成所需濃度。

體內吞噬廓清能力測定[3]：將70只小鼠隨機分為7組，分別為空白對照組（CON組），地塞米松組（DXM組），消銀顆粒組（XYKL組），異常黏液質成熟劑組（MB組），土大黃根醇提物低劑量組（RE－L組）、中劑量組（RE－M組）、高劑量組（RE－H組），每組10只。給予相應藥物每10 g體重0．2 mL灌胃，每日1次，共10 d。末次給藥后1 h，于小鼠尾靜脈注入稀釋的印度墨汁每10 g體重0．1 mL。于注入墨汁后2 min（T2）及10 min（T10）用特制取血吸管從小鼠眼眶后靜脈叢取血20 μL，立刻吹入0．1%Na2CO3液2 mL中，吸管于該液中吸入、吸出數次，以充分洗出吸管壁附著血液，取血完畢，以20 μL正常小鼠血溶于2 mL 0．1%Na2CO3液校零，于UV－7504C型紫外可見分光光度計675 nm波長處比色，計算廓清指數（K）。K＝（lg OD2－lg OD10）／（T10－T2），其中 OD2為T2時 OD值，OD10為T10時 OD值。

小鼠臟器指數測定：取小鼠脾臟、胸腺觀察并稱重，計算臟器指數。臟器指數＝臟器質量／體重。

1．3 統(tǒng)計學處理

采用 SPSS 17．0統(tǒng)計軟件。計量資料用 X±s表示，采用One－Way ANOWA方法行多組樣本均數比較，檢驗水準 α＝0．05。P＜0．05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2．1 小鼠一般狀況及體重變化

與CON組比較，陽性對照藥物組（DXM組、XYKL組、MB組）、土大黃根醇提物組（RE－L組、RE－M組、RE－H組）小鼠在試驗期間，行為活動、皮毛、糞便、飲食等均未見異常。與 CON組比較，DXM組、XYKL組小鼠體重減輕（P＜0．05），其余各組小鼠體重差異無統(tǒng)計學意義（P＞0．05）。詳見表1。

表1 各組小鼠體重變化比較（X±s，g，n＝10）

2．2 小鼠臟器指數和廓清指數變化

與CON組比較，DXM組正常小鼠脾臟指數、胸腺指數均顯著降低（P＜0．01），其余組對正常小鼠脾臟指數、胸腺指數無明顯影響（P＞0．05）。與CON組比較，各給藥組雖能升高正常小鼠廓清指數，但其差異無統(tǒng)計學意義（P＞0．05）。結果見表2。

表2 小鼠臟器指數及廓清指數變化（X±s，n＝10）

3 討論

機體免疫系統(tǒng)除T及B淋巴細胞外，還有自然殺傷細胞、單核細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞、嗜中性粒細胞等，是同樣具有免疫功能的細胞，這些細胞活性的測定對于研究中藥對機體免疫功能的影響具有重要意義[4]。

小鼠體內吞噬廓清能力測定試驗[5－6]是從整體水平測定單核－巨噬細胞系統(tǒng)（RES）的吞噬功能，常用方法有惰性炭粒廓清試驗。當顆粒異物進入體內血液循環(huán)時，可迅速被單核－巨噬細胞吞噬而清除，其主要作用部位為肝、脾，故測定血中異物的清除能力可反映機體網狀內皮系統(tǒng)（單核－巨噬細胞系統(tǒng)）的吞噬功能狀況，以觀察藥物對該系統(tǒng)吞噬能力的影響。

本研究中通過小鼠體內吞噬廓清能力測定試驗，探討土大黃根提取物對正常小鼠非特異性免疫功能的影響。試驗結果表明，小鼠灌胃給藥10 d后，與空白對照組比較，各給藥組小鼠在試驗期間，行為活動、皮毛、糞便、飲食等未見異常；地塞米松組、消銀顆粒組小鼠體重減輕（P＜0．05）；地塞米松組小鼠脾臟指數、胸腺指數降低（P＜0．01）；地塞米松組（1．02 mg／kg）、消銀顆粒組（1．577 g／kg）、異常黏液質成熟劑組（2 g／kg）、土大黃根醇提物組（低、中、高劑量組，1，2，4 g／kg），雖能升高正常小鼠廓清指數（惰性炭粒吞噬廓清法），但其差異無統(tǒng)計學意義（P＞0．05），提示土大黃根醇提物能對單核－巨噬細胞系統(tǒng)的吞噬功能有一定影響，有待深入研究。

[1]阿不力克木·努爾買買提阿吉，穆塔力甫·艾力阿吉·艾米奇．維吾爾醫(yī)常用草藥（維文）[M]．烏魯木齊：新疆人民衛(wèi)生出版社，2006：335－336．

[2]吐爾洪·吾買爾．維吾爾醫(yī)生藥學（維文，上冊）[M]．烏魯木齊：新疆人民衛(wèi)生出版社，2006：362－363．

[3]張 帥，王紅梅，常秀娟，等．熱毒寧注射液抗菌及調節(jié)免疫活性作用研究[J]．世界科學技術——中醫(yī)藥現(xiàn)代化技術應用研究，2015，17（5）：1 056－1 060．

[4]郭金英，杜 潔，李彤輝，等．發(fā)狀念珠藻胞外多糖對小鼠免疫活性的影響[J]．河南科技大學學報：自然科學版，2015，36（1）：72－75．

[5]陳 奇．中藥藥理研究方法學[M]．第2版．北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：308－309，346－347．

[6]魏 偉，吳希美，李元建．藥理實驗方法學[M]．第4版．北京：人民衛(wèi)生出版社，2010：1 299－1 300．

Effects of Rumex L．Root Extract on Non－Specific Immune Function of Mice

Yultuz Mamat1，2，Abdujilil Abdugheny1，2，Rabigul Islam1，2
（1．Inistitute of Xinjiang Traditional Uyghur Medicine，Wulumuqi，Xinjiang，China 830049； 2．Xinjiang Laboratory of Traditional Uyghur Medicine Prescription，Wulumuqi，Xinjiang，China 830049）

Objective To explore the effect of Rumex L．root extract on non－specific immune function of mice．M ethods Carbon clearance test was used in mice（inert carbon granule clearance method）to observe the effect of Rumex L．extract administration（1，2，4 g／kg）on mice in the general status，body weight，spleen and thymus index and then clearance index．Results There were no obvious abnormality in mice of Rumex L．root extract（1，2，4 g／kg）in the general status，body weight，spleen and thymus index（P＞0．05）；though the clearance index was increased in normal mice，there was no significant changes（P＞0．05）．Conclusion Rumex L．root extract has a certain influence on non－specific immune function（phagocytosis of mononuclear scavenger system）of mice．

Rumex L．root；mice；non－specific immunity

R285．5；R282．71

A

1006－4931(2016)10－0018－03

尤力都孜·買買提，女，大學本科，助理研究員，研究方向為維藥藥理毒理學，（電子信箱）1453187693＠qq．com；熱比姑麗·伊斯拉木，女，博士研究生，副研究員，研究方向為維藥藥理毒理學，本文通訊作者，（電子信箱）rabiya272＠126．com。

2015－12－10)

*2015年新疆維吾爾自治區(qū)公益性基金項目，項目編號：KY2015139，KY2015138。