HPLC法測(cè)定羥乙磺酸噴他脒的含量

王 健,姜洪波

(1.新鄉(xiāng)市食品藥品檢驗(yàn)所，河南 新鄉(xiāng) 453000;2.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院營(yíng)養(yǎng)科, 河南 新鄉(xiāng) 453000)

?

HPLC法測(cè)定羥乙磺酸噴他脒的含量

王 健1,姜洪波2

(1.新鄉(xiāng)市食品藥品檢驗(yàn)所，河南 新鄉(xiāng) 453000;2.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院營(yíng)養(yǎng)科, 河南 新鄉(xiāng) 453000)

目的：建立高效液相色譜法測(cè)定羥乙磺酸噴他脒的含量的方法。方法:C18色譜柱，甲醇—醋酸銨溶液(30g/L醋酸銨水溶液，用三乙胺調(diào)pH為7.5)(50 ：50)，流速1.0mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)265nm。結(jié)果：羥乙磺酸噴他脒在9.98～99.66μg/mL濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。結(jié)論:測(cè)定方法簡(jiǎn)便，重現(xiàn)性好。

羥乙磺酸噴他脒；HPLC法；含量測(cè)定

羥乙磺酸噴他脒 別名： 戊烷脒、英文名：Pentamidine Isethionate 為無(wú)色結(jié)晶性粉末，無(wú)臭、味苦?？扇苡谒蚋视?，微溶于乙醇，幾乎不溶于氯仿、丙酮、乙醚。 藥理和應(yīng)用： 本品為芳香雙脒類藥物。本品作用機(jī)制尚不夠清楚，可能干擾核苷酸生物合成和DNA的復(fù)制，也可干擾葉酸鹽的轉(zhuǎn)換。對(duì)利什曼原蟲(chóng)有直接殺滅作用。是治療癌艾滋病并發(fā)卡氏肺孢子蟲(chóng)肺炎的首選藥[1]，是治療黑熱病的有效藥物，但因其毒副作用較嚴(yán)重，故臨床僅用于銻劑無(wú)效或?qū)︿R劑過(guò)敏等不宜用銻劑的患者。本品還可用于非洲錐蟲(chóng)病的早期治療。本文采用HPLC法測(cè)定其含量，方法簡(jiǎn)便快捷，準(zhǔn)確[2]，重現(xiàn)性及穩(wěn)定性好，測(cè)定結(jié)果滿意。

1 儀器與試藥

Waters2695高效液相色譜儀,2996PDA檢測(cè)器，Empower數(shù)據(jù)處理軟件。羥乙噴他脒對(duì)照品(SIGMA公司)，色譜甲醇(天津四友)，醋酸銨(分析純)。供試品：羥乙磺酸噴他脒(河南龍泉藥業(yè)) 。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 色譜條件

色譜柱：C18(4.6×250mm)；流動(dòng)相：甲醇—醋酸銨溶液(30g/L醋酸銨水溶液，用三乙胺調(diào)pH為7.5)(50 ：50)，流速1mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)265nm；理論板數(shù)：7000。

圖1 羥乙磺酸噴他脒對(duì)照品色譜圖

2.2 線性關(guān)系考察[3]

精密稱取干燥至恒重的羥乙磺酸噴他脒對(duì)照品適量，加流動(dòng)相溶解并定量稀釋成每1mL中含羥乙磺酸噴他脒9.98～9.66μg的溶液；分別精密量取上述溶液各10μL，注入液相色譜儀。

2.3 精密度實(shí)驗(yàn)[4]

精密稱定羥乙磺酸噴他脒對(duì)照品適量于100mL容量瓶中，加流動(dòng)相使其溶解，并稀釋至刻度，搖勻，即得(40μg/mL)，作為供試品溶液；精密量取10μL，注入液相色譜儀。

2.4 回收率實(shí)驗(yàn)

精密量取0.08229g、0.10701g、0.12205g的羥乙磺酸噴他脒對(duì)照品各三份，分別置100mL容量瓶中，加流動(dòng)相使其溶解，并稀釋至刻度，搖勻。各精密吸取2mL于50mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻作為供試品溶液；另取0.10701g 的羥乙磺酸噴他脒對(duì)照品置100mL容量瓶中，加流動(dòng)相使其溶解，并稀釋至刻度。精密吸取2mL于50mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻作為對(duì)照品溶液。分別精密量取供試品溶液與對(duì)照品溶液各10μL，注入液相色譜儀。

2.5 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)[5]

精密稱定羥乙磺酸噴他脒對(duì)照品適量于100mL容量瓶中，加流動(dòng)相使其溶解，并稀釋至刻度，搖勻，即得(40μg/mL)， 作為供試品溶液。 在規(guī)定時(shí)間精密量取供試品溶液10μL注入液相色譜儀， 進(jìn)樣三次測(cè)定。

2.6 樣品含量測(cè)定

分別精密稱取3批樣品各兩分，每份約0.1g于100mL量瓶中，加流動(dòng)相40mL后使完全溶解，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻。移取此溶液2mL，用流動(dòng)相稀釋定容至50mL，搖勻，作為供試品溶液。精密量取10μL，注入液相色譜儀，進(jìn)樣兩次，記錄色譜圖；另取干燥至恒重的羥乙磺酸噴他脒對(duì)照品兩份。每份0.1g，同法測(cè)定。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 線性關(guān)系

按“2.2”實(shí)驗(yàn)方法，記錄色譜圖，量取峰面積，平行三次，結(jié)果取平均值，見(jiàn)表1。

表1 含量HPLC法線性考察結(jié)果

以濃度χ(μg/mL)對(duì)峰面積Y進(jìn)行回歸的線性方程為：у=28518χ-8787.4 г=1.0000

結(jié)果表明：本法在9.98～99.66μg/mL范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

3.2 精密度實(shí)驗(yàn)

按“2.3”實(shí)驗(yàn)方法，記錄色譜圖，量取峰面積，平行測(cè)定6次，見(jiàn)表2。

表2 含量進(jìn)樣精密度測(cè)定結(jié)果

結(jié)果表明：進(jìn)樣精密度(RSD)小于2.0%，符合規(guī)定。

表3 回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

樣品NO．對(duì)照品加入量(g)峰面積回收率(%)對(duì)照品10．10701122509320．10701122529030．10701121549580%10．0822992656799．2320．0822992647499．2230．0822993312999．93100%40．107011216227100．1650．107011219776100．4560．107011221555100．60120%70．122051385016100．0180．12205138407699．9490．122051384900100．00

3.3 回收率實(shí)驗(yàn)

按“2.4”實(shí)驗(yàn)方法，記錄色譜圖，量取峰面積，求回收率，平均回收率=99.95% RSD=0.47%,見(jiàn)表3。

3.4 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

按“2.5”實(shí)驗(yàn)方法，記錄色譜圖，峰面積取平均值，見(jiàn)表4。

表4 供試品溶液穩(wěn)定性考察結(jié)果

峰面積RSD%為：0.13%，結(jié)果表明：本品溶液在8h內(nèi)基本穩(wěn)定。

3.5 樣品含量測(cè)定

按“2.6”實(shí)驗(yàn)方法，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，含量結(jié)果(以羥乙磺酸噴他脒計(jì))，見(jiàn)表5。

表5 含量測(cè)定結(jié)果(%)

4 討論

曾采用甲醇—水和乙腈—水按不同比例為流動(dòng)相進(jìn)行實(shí)驗(yàn)[6]，結(jié)果色譜圖峰形較差，經(jīng)多次實(shí)驗(yàn)，流動(dòng)相中加入一定量醋酸銨，并用三乙胺調(diào)pH到7.5，以甲醇—醋酸銨溶液(30g/L醋酸銨水溶液，用三乙胺調(diào)pH為7.5)(50 ：50)為流動(dòng)相結(jié)果峰形良好，理論板數(shù)高。通過(guò)上述試驗(yàn)表明，采用本文的HPLC法測(cè)定羥乙磺酸噴他脒的含量，方法簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確，重復(fù)性好，其專屬性較好，可用于羥乙磺酸噴他脒的質(zhì)量控制，為藥品的注冊(cè)申報(bào)提供依據(jù)。

[1]陳紅. 噴他脒治療卡氏肺孢子蟲(chóng)肺炎的最新見(jiàn)解[J].新藥與臨床，1990,9(5)：309-310

[2]沈德鳳，張啟星，計(jì)瑩，等. HPLC法測(cè)定止瀉片中穿心蓮內(nèi)酯的含量 [J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2006,29(1)：38

[3]王海英. 高效液相色譜法測(cè)定更昔洛韋凝膠的含量[J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2009,32(3)：26

[4]王健. HPLC梯度法測(cè)定復(fù)方氯霉素咪康唑乳膏中氯霉素和硝酸咪康唑的含量 [J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2008,31(5)：21-22

[5]王海英. HPLC法測(cè)定鼻炎糖漿中黃芩苷的含量 [J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2009,32(2)：22

[6]丁立新，韓寧，高金波. 美沙拉嗪腸溶片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2007,30(2)：24

王健(1980～)男，黑龍江佳木斯人，本科，雙學(xué)士學(xué)位，主管藥師。

R285.5

A

1008-0104(2016)06-0127-02

2016-07-12)