大腸癌中P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達(dá)

王 莉，任秀英，辛 華，孫玉鴻，朱艷麗，王李鳴

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江 佳木斯 154003)

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大腸癌中P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達(dá)

王 莉，任秀英，辛 華，孫玉鴻，朱艷麗，王李鳴

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江 佳木斯 154003)

目的：探討研究大腸癌中P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達(dá)及其臨床意義。方法：選擇2013-01～2015-01于我院就診的大腸癌患者共60例作為本次研究的觀察組，同期60例正常黏膜者為對照組，依據(jù)免疫組化LSAB法檢測兩組患者的P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達(dá)，比較兩組患者表達(dá)結(jié)果并探討臨床意義。結(jié)果：觀察組患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達(dá)率分別為55.67%、40.00%和58.33%，對照組患者分別為11.67%、81.67%和6.67%，觀察組患者P53和MMP-9基因表達(dá)遠(yuǎn)高于、nm23-H1基因表達(dá)遠(yuǎn)低于對照組，比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。浸潤深度在黏膜及黏膜下患者的P53和MMP-9基因表達(dá)遠(yuǎn)高于、nm23-H1基因表達(dá)遠(yuǎn)低于肌層及外肌層組，比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的P53和MMP-9基因表達(dá)遠(yuǎn)高于、nm23-H1基因表達(dá)遠(yuǎn)低于淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移患者，比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論：利用LSAB法檢測大腸癌患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達(dá)發(fā)現(xiàn)，P53和MMP-9基因表達(dá)高于正常，nm23-H1低于正常，P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達(dá)與大腸癌患者的浸潤深度和淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移有直接相關(guān)性，這對臨床疾病診斷和預(yù)后判斷有重要意義。

大腸癌；P53；nm23-H1；MMP-9；基因表達(dá)

大腸癌是臨床上常見消化道惡性腫瘤的一種，是指患者結(jié)腸黏膜上皮在多因素作用下發(fā)生了基因改變，一般認(rèn)為遺傳因素占據(jù)主要地位，發(fā)病率和年齡呈正比關(guān)系?；颊吲R床癥狀表現(xiàn)為腹部隱痛，排便習(xí)慣和糞便形狀改變。近年來，大腸癌的發(fā)病率呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢，研究大腸癌患者的異?；虮磉_(dá)對于研究大腸癌發(fā)病機(jī)理和治療方法有重要現(xiàn)實意義。本次研究的主要目的是觀察研究大腸癌中P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達(dá)及其臨床意義，選取2013-01～2015-01于我院就診的60例大腸癌患者作為本次研究的對象，進(jìn)行對照試驗，分析報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2013-01～2015-01于我院就診的60例大腸癌患者作為本次研究的觀察組，同期60例正常黏膜者為對照組。60例觀察組年齡53～78歲，平均(61.8±5.6)歲，其中男32例，女28例，35例為結(jié)腸癌，25例為直腸癌，15例患者浸潤到黏膜及黏膜下，45例患者浸潤到肌層和外膜層，38例為中高分化，22例為低分化，43例發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，17例沒有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；對照組患者年齡36～69歲，平均(53.2±5.4)歲，男33例，女27例。兩組患者年齡和性別等一般資料的比較沒有顯著性差異(P>0.05)，因此具有可比性。

1.2 檢測方法

免疫組化檢測通過LSAB法進(jìn)行，陰性對照選擇PSB代替一抗，陽性對照選擇已知陽性標(biāo)本，檢測步驟如下所述：①常規(guī)石蠟切片二甲苯脫蠟，使用梯度酒精逐級水化[1]。②通過3%的雙氧水浸泡玻片5min實現(xiàn)阻斷類圓形過氧化物酶活性的目的。③使用乙二胺四乙酸(EDTA)修復(fù)液修復(fù)10min完成微波抗原修復(fù)[2]。④在溫室下孵育15min封閉非特異性抗原后，以1∶100稀釋度的第一抗體滴加，冰箱溫度設(shè)置4℃過夜。⑤分別將生物素標(biāo)記的第二抗體、LSAB復(fù)合物滴加到玻片[3]。⑥D(zhuǎn)AB顯色，蘇木素復(fù)染，60℃下烤箱烤60min，最后顯微鏡觀察表達(dá)結(jié)果。

1.3 評價指標(biāo)

比較兩組患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達(dá)情況，分析大腸癌患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達(dá)與浸潤深度的關(guān)系，分析大腸癌患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用統(tǒng)計軟件SPSS16.0分析，計數(shù)資料采取率(%)表示，組間率對比取χ2檢驗，P<0.05為具有統(tǒng)計學(xué)差異。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達(dá)

觀察組患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達(dá)率分別為55.67%、40.00%和58.33%，對照組患者分別為11.67%、81.67%和6.67%，觀察組患者P53和MMP-9基因表達(dá)遠(yuǎn)高于對照組，nm23-H1基因表達(dá)遠(yuǎn)低于對照組，兩組患者比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達(dá)情況比較(n=60)

2.2 大腸癌患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達(dá)與浸潤深度的關(guān)系

浸潤深度在黏膜及黏膜下患者的P53和MMP-9基因表達(dá)遠(yuǎn)高于肌層及外肌層組，nm23-H1基因表達(dá)遠(yuǎn)低于肌層及外肌層組，兩組患者比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 大腸癌患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達(dá)與浸潤深度的關(guān)系

2.3 大腸癌患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性

淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的P53和MMP-9基因表達(dá)遠(yuǎn)高于淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移患者，nm23-H1基因表達(dá)遠(yuǎn)低于淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移患者，兩組患者比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 大腸癌患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性

3 討論

大腸癌致病原因是患者結(jié)腸黏膜上皮在多因素作用下發(fā)生了基因改變，因此筆者研究了P53、nm23-H1和MMP-9三種基因的表達(dá)[4]。P53是細(xì)胞分裂和增殖負(fù)調(diào)控作用的重要參與者[5]，突變P53不具有細(xì)胞調(diào)控作用，突變P53和野生P53結(jié)合形成的寡聚蛋白可以導(dǎo)致癌變基因的轉(zhuǎn)錄失控[6]，從而引起腫瘤的發(fā)生。nm23-H1是人類17號染色體上的一個基因[7]，又稱為腫瘤的轉(zhuǎn)移抑制基因，產(chǎn)物為17kd的蛋白質(zhì)，包含152個氨基酸[8]，研究證明它的產(chǎn)物參與微管的集合和分解，通過影響細(xì)胞骨架狀態(tài)開控制細(xì)胞的運(yùn)動、黏連、傳遞信號以及增殖分化等活動[9]?；|(zhì)金屬蛋白酶是降解細(xì)胞外基質(zhì)的重要參與者，它能有效破壞腫瘤細(xì)胞侵襲的組織學(xué)屏障，促進(jìn)腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移[10]，腫瘤細(xì)胞中可以發(fā)現(xiàn)明顯的上調(diào)活性增強(qiáng)現(xiàn)象。

本研究通過對60例大腸癌患者和正常黏膜者進(jìn)行對照試驗發(fā)現(xiàn)。觀察組患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達(dá)率分別為55.67%、40.00%和58.33%，對照組患者分別為11.67%、81.67%和6.67%，觀察組患者P53和MMP-9基因表達(dá)遠(yuǎn)高于對照組，nm23-H1基因表達(dá)遠(yuǎn)低于對照組，兩組患者比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。浸潤深度在黏膜及黏膜下患者的P53和MMP-9基因表達(dá)遠(yuǎn)高于肌層及外肌層組，nm23-H1基因表達(dá)遠(yuǎn)低于肌層及外肌層組，兩組患者比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的P53和MMP-9基因表達(dá)遠(yuǎn)高于淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移患者，nm23-H1基因表達(dá)遠(yuǎn)低于淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移患者，兩組患者比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)果表明P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達(dá)與大腸癌的發(fā)生具有密切的相關(guān)性，在臨床上可以作為疾病侵入的生物學(xué)標(biāo)志物。

綜上所述，利用LSAB法檢測大腸癌患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達(dá)發(fā)現(xiàn)，P53和MMP-9基因表達(dá)高于正常，nm23-H1低于正常者，P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達(dá)與大腸癌患者的浸潤深度和淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移有直接相關(guān)性，對臨床疾病和預(yù)后判斷有重要意義。

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黑龍江省衛(wèi)生和計劃生育委員會科研項目，編號：2016-301。

王莉(1974～)女，黑龍江佳木斯人，學(xué)士，主管技師。

辛華(1970～)女，黑龍江佳木斯人，碩士，主任技師，碩士研究生導(dǎo)師。E-mail:xh70128@163.com。

R735.3+4

A

1008-0104(2016)06-0042-02

2016-06-12)