加工番茄潰瘍病藥劑防治的室內(nèi)毒力測(cè)定及田間藥效研究

司天桃，薛 林，賈會(huì)娟，楊德松

（1.石河子大學(xué)農(nóng)學(xué)院／新疆綠洲農(nóng)業(yè)病蟲(chóng)害治理與植保資源利用自治區(qū)普通高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，新疆石河子 832000；2.新疆石河子蔬菜研究所，新疆石河子 830000）

加工番茄潰瘍病藥劑防治的室內(nèi)毒力測(cè)定及田間藥效研究

司天桃1，薛 林2，賈會(huì)娟1，楊德松1

（1.石河子大學(xué)農(nóng)學(xué)院／新疆綠洲農(nóng)業(yè)病蟲(chóng)害治理與植保資源利用自治區(qū)普通高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，新疆石河子 832000；2.新疆石河子蔬菜研究所，新疆石河子 830000）

【目的】篩選出防治加工番茄潰瘍病高效、低毒的藥劑，為防治加工番茄細(xì)菌性潰瘍病提供科學(xué)依據(jù)。【方法】通過(guò)室內(nèi)毒力測(cè)定和田間藥效測(cè)定方法，測(cè)定9種殺菌劑防治加工番茄細(xì)菌性潰瘍病的效果?！窘Y(jié)果】供試9種殺菌劑中，46%氫氧化銅的抑菌效果最好，EC50最小，為15.1 μg／mL。氯溴異氰尿酸的抑菌效果最差，EC50最大，為682.3 μg／mL。田間試驗(yàn)結(jié)果表明，2 500μg／mL 46%的氫氧化銅（可殺得三千），氫氧化銅（53.8%）對(duì)番茄潰瘍病防治效果較好，達(dá)到50%～80%；400 μg／mL氯碘霉素，200 μg／mL N－N－二辛基二乙烯三肟，300 μg／mL農(nóng)用硫鏈霉素，效果次之，防效為50%左右，春雷霉素易對(duì)番茄產(chǎn)生藥害。【結(jié)論】施用46%的氫氧化銅（可殺得三千）、53.8%氫氧化銅，對(duì)番茄潰瘍病防治效果好，且對(duì)番茄安全，禁止施用春雷霉素。

加工番茄；殺菌劑；番茄潰瘍病菌；防效

0 引 言

【研究意義】新疆是中國(guó)最大的加工番茄產(chǎn)區(qū)，常年種植面積占全國(guó)90%以上［1］。近年來(lái)番茄潰瘍?。╰omato bacterial canker）日益嚴(yán)重，嚴(yán)重影響了加工番茄產(chǎn)量和品質(zhì)，給加工番茄產(chǎn)業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失，制約了區(qū)域經(jīng)濟(jì)的發(fā)展。番茄潰瘍病嚴(yán)重危害時(shí)，造成造成的損失可達(dá)80%以上。種植抗病品種是防治該病害最簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)、有效的方法，但是市場(chǎng)上目前尚對(duì)番茄細(xì)菌性潰瘍病表現(xiàn)出抗病、免疫、或者是耐病的品種，針對(duì)該病的防治，化學(xué)防治措施仍然占主導(dǎo)地位，也是最快捷、高效的措施，因此有必要針對(duì)市場(chǎng)上防治該病的殺菌劑進(jìn)行篩選，以便生產(chǎn)提供理論依據(jù)?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】李春等［2］報(bào)道了該病害，確定該病菌的菌落有兩種顏色—黃色和乳白色，并且都有較強(qiáng)的致病性。張國(guó)麗等［3］通過(guò)對(duì)供試菌株進(jìn)行致病性測(cè)定、PCR檢測(cè)確定了奎屯和石河子地區(qū)加工番茄上發(fā)生的病害為番茄潰瘍病，其病原為密執(zhí)安棒形桿菌密執(zhí)安亞種（Clavibacter michiganensis subsp. Michiganensis）。番茄潰瘍病是一種維管束系統(tǒng)病害，整個(gè)植株均可發(fā)病，典型的病株一側(cè)葉片或頂葉開(kāi)始萎蔫，葉緣上卷，葉片逐漸變褐枯死。莖、葉柄、枝條上產(chǎn)生褐色斑，表皮開(kāi)裂呈潰瘍狀，病莖髓部呈褐色、潰爛。果實(shí)受害，開(kāi)始呈現(xiàn)白色小皰狀斑，以后病斑中心變成褐色，粗糙略呈突起，邊緣為白色的暈圈似“鳥(niǎo)眼狀”葉片被害時(shí)產(chǎn)生白色小皰狀斑，后期變淡褐色［5］?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】目前沒(méi)有找到番茄潰瘍病的高抗品種，國(guó)內(nèi)外對(duì)該病主要依賴化學(xué)防治。常用的防治藥劑包括銅制劑、抗生素類(lèi)、代森錳鋅等［6］，但這些藥劑均限于發(fā)病初期使用，防治效果也不是很好。在抗病育種過(guò)程中，美國(guó)雖然在栽培番茄品種中發(fā)現(xiàn)了一些對(duì)潰瘍病有抗性或耐病性品種，但仍還沒(méi)有選育出具有商業(yè)價(jià)值的抗?jié)儾》哑贩N［7］?！緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】研究針對(duì)市場(chǎng)上防治植物病原細(xì)菌的常用藥劑，采用室內(nèi)毒力測(cè)定和田間試驗(yàn)的方法，篩選出高效、低毒、安全的藥劑。尋求最佳的化學(xué)防治措施，減少加工番茄潰瘍病危害造成的損失，為新疆加工番茄潰瘍病的防治實(shí)踐提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材 料

供試品種為加工番茄里格爾（87－5）；供試藥劑：2%春雷霉素水劑（陜西先農(nóng)生物科技有限公司）、72%農(nóng)用硫酸鏈霉素可溶性粉劑（成都惠普生物工程有限公司）、5%井岡霉素水劑（正紅（品牌）股份有限公司）、53.8%氫氧化銅水分散粒劑（鄭州志信農(nóng)化有限公司）、46%氫氧化銅水分散粒劑（可殺得三千，上海杜邦農(nóng)化有限公司）、78%波爾錳鋅可濕性粉劑（美國(guó)仙農(nóng)有限公司）、50%氯溴異氰尿酸可溶粉劑（河南銀田精細(xì)化工有限公司）、85%三氯異氰尿酸可溶粉劑（天津百勝化工有限公司）、1.8%辛菌胺水劑（山西美源化工有限公司）。供試藥劑設(shè)定 5個(gè)濃度。表1

表1 9種供試藥劑及濃度Table 1 Concentration of nine kinds of supplied test fungicides

1.2 方 法

1.2.1 室內(nèi)毒力測(cè)定

采用抑菌圈法進(jìn)行測(cè)定。將分離純化后在KB培養(yǎng)基上28℃培養(yǎng)48 h的病菌用無(wú)菌水制成108～109cfu／mL的菌懸液，取 3環(huán)于平板上涂抹均勻，然后將用無(wú)菌水配制的供試藥液用移液器取20 μL滴于直徑0.6cm的無(wú)菌濾紙片上，使濾紙片完全浸濕，再放置于涂有菌的平板上，每皿等距離放滴有不同濃度梯度藥液的濾紙片3片，28℃下培養(yǎng)48 h后，十字交叉法測(cè)量抑菌圈的直徑。以藥劑濃度轉(zhuǎn)換為對(duì)數(shù)值，抑菌圈的平均直徑為因變量，求出毒力回歸方程，并使抑菌圈直徑達(dá)到一定值（試驗(yàn)以1.0 mm為基準(zhǔn)）時(shí)的藥劑有效濃度進(jìn)行毒力比較。參照使用說(shuō)明中提供的田間用藥濃度，每種供試藥劑按有效成分設(shè)5個(gè)濃度，每個(gè)處理重復(fù)3次，以無(wú)菌水為對(duì)照［10］。

1.2.2 田間藥劑篩選

試驗(yàn)設(shè)置在石河子大學(xué)試驗(yàn)站和石河子北泉鎮(zhèn)，試驗(yàn)按照表1共設(shè)置5個(gè)濃度梯度，并有清水對(duì)照；每隔7 d噴藥1次，連續(xù)噴藥2次。噴藥前調(diào)查病級(jí)，分別于藥后7d、第2次噴藥后的10、25 d調(diào)查，共調(diào)查4次。采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，每個(gè)藥劑設(shè)3個(gè)重復(fù)，調(diào)查時(shí)每個(gè)小區(qū)選取5株調(diào)查，共48個(gè)小區(qū)，小區(qū)面積為20m2。試驗(yàn)從播種到收獲管理措施同大田一致。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

分別記錄番茄病害各級(jí)株數(shù)和總株數(shù)，計(jì)算病情指數(shù)和防治效果，病情分級(jí)采用5級(jí)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行［8］：

0級(jí)，不出現(xiàn)葉片萎蔫或莖壞死；

1級(jí)，葉片輕度萎蔫或變黃；

2級(jí)，葉片中度萎蔫或輕度壞死；

3級(jí)，葉片嚴(yán)重萎蔫或嚴(yán)重壞死；

4級(jí)，植株死亡；

病情指數(shù)＝Σ（各級(jí)病株×各級(jí)代表數(shù)值）× 100／（樣本總數(shù)×最高級(jí)代表數(shù)值）。

式中：T0為防治區(qū)初始病情指數(shù)，T為防治區(qū)終期病情指數(shù)，CK0為對(duì)照區(qū)初始病情指數(shù)，CK為對(duì)照區(qū)終期病情指數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 9種藥劑對(duì)加工番茄潰瘍病菌的室內(nèi)毒力測(cè)定

研究表明，各供試藥劑，隨著濃度的增加，抑菌圈逐漸增大，當(dāng)濃度達(dá)到一定程度，抑菌圈增大不明顯。其中46%的氫氧化銅（可殺得三千）、春雷霉素的抑菌圈最大，53.8%氫氧化銅次之，其他藥劑抑菌圈都較小，氯碘霉素和農(nóng)用硫鏈霉素?zé)o抑菌圈。表2

表2 9種藥劑對(duì)加工番茄細(xì)菌性潰瘍病菌的室內(nèi)毒力測(cè)定Table 2 The toxicity determination in lab for nine fungicide against bacterial canker pathogen of processing tomato

2.2 田間藥效試驗(yàn)

研究表明，除氯碘霉素與農(nóng)用硫鏈霉素外，各藥劑防效均隨時(shí)間的增加而降低，第一次噴藥后7 d 1 500 μg／mL 46%氫氧化銅（可殺得三千）效果最好，防效將近達(dá)到80%，除此以外，只有1 500 μg／mL氯溴異氰尿酸，防效大于70%，第二次噴藥7 d后，1 500 μg／mL 46%氫氧化銅（可殺得三千）效 果最好，只有 2 000 μg／mL氫 氧化 銅（53.8%）、1 500 μg／mL氯溴異氰尿酸、300 μg／mL農(nóng)用硫鏈霉素效果防效大于 60%，第三次噴藥7 d后，是1 500 μg／mL 46%氫氧化銅（可殺得三千）效果最好，防效為70%，其它藥劑防效均未達(dá)到 60%。400 μg／mL氯碘霉素、1 500 μg／mL波爾錳鋅N－N二辛基二乙烯三肟、1 500 μg／mL三氯異氰尿酸效果較差，每次調(diào)查防效均未高于50%。大多數(shù)參試藥劑施藥后初期藥效表現(xiàn)較好，但是隨著田間番茄潰瘍病的發(fā)生趨于嚴(yán)重，防效逐漸降低。表3

表3 供試藥劑田間防治效果比較Table 3 The control efficiency of eight kinds of fungicides supplied in the filed

3 討 論

由密執(zhí)安棒形桿菌密執(zhí)安亞種病原菌引起的加工番茄潰瘍病嚴(yán)重影響了加工番茄的產(chǎn)量。帶菌種子是遠(yuǎn)距離傳播主要途徑，種子帶菌率可達(dá)1%［9－10］。加強(qiáng)種子檢疫、種苗檢驗(yàn)是預(yù)防和控制該病發(fā)生的重要措施。目前，防治細(xì)菌性潰瘍的化學(xué)藥劑有農(nóng)用抗生素和銅制劑等，但是長(zhǎng)期使用抗生素，容易造成細(xì)菌對(duì)抗生素產(chǎn)生抗藥性，并且抗生素在農(nóng)產(chǎn)品和動(dòng)物制品中的富集從而威脅人類(lèi)健康問(wèn)題，人們?cè)絹?lái)越關(guān)注其潛在風(fēng)險(xiǎn)還要結(jié)合其他防治方法［11－12］，室內(nèi)測(cè)定春雷霉素抑菌效果較好，但是在田間效果表現(xiàn)不明顯。無(wú)論是高濃度還是低濃度的春雷霉素在大田中對(duì)番茄產(chǎn)生藥害，加工番茄都出現(xiàn)了葉片枯焦、植株死亡等癥狀，因此不能作為防治番茄潰瘍病的殺菌劑施用。供試藥劑中也發(fā)現(xiàn)了室內(nèi)結(jié)果和大田數(shù)據(jù)表現(xiàn)不一致的現(xiàn)象，例如300 μg／mL農(nóng)用硫鏈霉素在室內(nèi)抑菌試驗(yàn)中對(duì)潰瘍病病原菌無(wú)抑制效果，但在田間試驗(yàn)中卻表現(xiàn)出較好的防治效果。室內(nèi)數(shù)據(jù)和田間試驗(yàn)結(jié)果差異很大，其原因是室內(nèi)毒力測(cè)定僅僅是藥劑對(duì)病原菌作用的結(jié)果，是在環(huán)境比較穩(wěn)定的條件下進(jìn)行的測(cè)試；而田間試驗(yàn)受到溫度、濕度、光照、寄主植物等多種因素影響。室內(nèi)毒力測(cè)定可以作為農(nóng)藥選擇的指導(dǎo)；田間藥效是衡量實(shí)際效果的標(biāo)準(zhǔn)。因此，通過(guò)田間篩選出加工番茄細(xì)菌性潰瘍病的防治藥劑為保證加工番茄的安全生產(chǎn)提供了保證。

4 結(jié) 論

46%氫氧化銅（可殺得三千）抑菌效果最好，在田間試驗(yàn)中也是表現(xiàn)出同樣的效果。室內(nèi)測(cè)定400 μg／mL氯碘霉素?zé)o抑菌圈，在大田試驗(yàn)中防治效果也是最差。防治加工番茄細(xì)菌性潰瘍病推薦46%的氫氧化銅（可殺得三千）1 500 μg／mL進(jìn)行防治，其具有防效好、持效期長(zhǎng)的特點(diǎn)，且對(duì)加工番茄安全；不推薦使用氯碘霉素、波爾錳鋅、N－N二辛基二乙烯三肟、三氯異氰尿酸以及春雷霉素。番茄潰瘍病的化學(xué)防治，推薦氫氧化銅（53.8%）、46%的氫氧化銅（可殺得三千）這2種藥劑作為防治加工番茄細(xì)菌性潰瘍病的防治藥劑。

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Toxicity and Efficacy Evaluation of Nine Fungicides against Clavibacter michiganensis subsp．Michiganensis of Processing Tomato

SI Tian－tao1，XUE Lin2，JIA Hui－juan1，YANG De－song1
（1．College of Agronomy，Shihezi University／Key Laboratory for Oasis Agricultural Pest Management and Plant Resource Utilization at Universities of Xinjiang Uygur Autonomous Region，Shihezi Xinjiang 832003，China；2．Shihezi Vegetalte Institute of Xinjiang，Shihezi Xinjiang 832000）

【Objective】The experiment was designed to screen better prevention and treatment to Clavibacter michiganensis subsp.Michiganensis．【Method】The toxicity determination in lab and field efficacy test of six fungicides against C．michiganensis were conducted using by paper plates.【Result】Laboratory test results showed that 46%cupric hydroxide EC got minimum value of EC50（15.1μg／mL），while Chloroisobromine cyanuric acid EC got maximum value of EC50（682.3 μg／mL）.Field test results indicated the best control effect of fungicides was 46%cupric hydroxide（cocide thousand）and 53.8%cupric hydroxide was the best，which was 50%－80%.The control effect of chlorine Iodine neomycin，N－N－dioctyl ethylene three oxime，agricultural sulfur streptomycin was followed with the control efficiency about 50%.Kasugamycin may easily cause injury to Tomato.【Conclusion】Alternate use 46%or 53.8%cupric hydroxide was suggested for the control of C.michiganensis in processing tomato field，which had good control effect on Tomato ulcer disease and was safe to tomato，and kasugamycin was not recommended.

processing tomato；Fungicide；Clavibacter michiganensis subsp.Michiganensis；control effects

S482.2；S436.412.1

A

1001－4330（2016）09－1647－05

10.6048／j.issn.1001－4330.2016.09.011

2016－04－20

兵團(tuán)博士資金項(xiàng)目“麥后復(fù)播加工番茄主要病害的發(fā)病機(jī)制及防治研究”（2011BB007）

司天桃（1988－），女，碩士研究生，研究方向?yàn)檗r(nóng)藥毒理學(xué)，（E－mail）1643624740＠qq.com

（Cotresponding author）：楊德松（1977－），男，副教授，博士，研究方向?yàn)檗r(nóng)藥毒理學(xué)，（E－mail）yds_agr＠shzu.edu.cn

Fund project：Doctoral fund of the XPCC＂Study on the pathogenesis and control of main diseases in processing tomatoes after wheat harvest.（2011BB007）＂