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    小漿果抗氧化能力的研究

    2016-12-23 06:03:16李佳少王偉宏
    釀酒科技 2016年12期
    關(guān)鍵詞:黑加侖漿果樹莓

    李佳少,王偉宏,苑 偉

    (山東黑尚莓生物技術(shù)發(fā)展股份有限公司,山東煙臺264000)

    小漿果抗氧化能力的研究

    李佳少,王偉宏,苑 偉

    (山東黑尚莓生物技術(shù)發(fā)展股份有限公司,山東煙臺264000)

    選取了釀制樹莓(覆盆子)酒的原料紅樹莓、黑莓、桑葚、枸杞、黑加侖、沙棘,市售蘋果、石榴、無花果及常見的幾款葡萄(巨峰、金手指、玫瑰香等),對其清除DPPH·自由基的能力及ABTS+·自由基的能力進行了比較,結(jié)果表明,沙棘、桑葚、紅樹莓等小漿果都有較強的清除自由基的能力。沙棘清除DPPH·自由基的能力最強,為15.82μmol/g±0.2007μmol/g,紅樹莓清除ABTS+·自由基的能力為86.12μmol/g±0.26μmol/g,位居本研究的幾種小漿果之首。

    沙棘; 紅樹莓; 抗氧化能力; DPPH·自由基; ABTS+·自由基

    抗氧化和抗衰老是近年來食品領(lǐng)域研究的潮流,抗氧化劑主要是通過終止自由基鏈反應(yīng)而清除自由基,許多研究發(fā)現(xiàn),多種蔬菜和水果都對DPPH·自由基ABTS+·自由基有較強的清除能力,原因可能是水果中的生物類黃酮、原花青素等可抑制氧化過程和化學(xué)致癌[1]。

    目前醫(yī)療和食品行業(yè)領(lǐng)域使用較多的是合成抗氧化劑[2],但動物實驗表明合成抗氧化劑對生物體有潛在的毒害作用,因此,從天然食材中尋找高效、廉價、低毒的抗氧化劑逐漸會成為研究領(lǐng)域的熱點[3]。

    本研究比較了釀制樹莓(覆盆子)酒的原料小漿果與食用葡萄及蘋果、無花果、石榴等清除自由基的能力,以便為合理膳食提供指導(dǎo)。

    1 材料與方法

    1.1 材料、試劑及儀器

    樹莓、黑加侖凍果:購自黑龍江尚志市;桑葚凍果:購自河北省泊頭市茍村;枸杞干果:購自寧夏中寧縣;無花果、石榴、巨峰、玫瑰香、金手指鮮果:購自煙臺市芝罘區(qū)鳳凰臺市場。

    儀器:KQ22000DE型超聲波清洗器,昆山超聲儀器有限公司;T6新世紀紫外可見分光光度計,上海普析通用儀器有限責(zé)任公司;BS2202S型電子天平,賽多利斯;XW-80A微型渦旋混勻器,上海滬西分析儀器廠有限公司;TG16-WS臺式高速離心機,湖南湘儀離心機儀器有限公司。

    試劑:ABTS+·、DPPH·、Trolox試劑(上海源葉生物科技有限公司),其他試劑市售。

    1.2 實驗方法

    1.2.1 漿果提取液的制備

    取漿果果實可食用部分2~5 g,精密稱定,置于具塞錐形瓶中,加入體積分數(shù)95%的乙醇16m L,稱定質(zhì)量,超聲處理30m in,冷卻再稱定質(zhì)量,用體積分數(shù)95%的乙醇補足失去的質(zhì)量。于3500 r/m in條件下離心5m in,取上清液稀釋后備用[4-5]。

    1.2.2 DPPH·法測定抗氧化活性

    DPPH·溶液的配制:準確稱取0.00315 g DPPH,用95%的乙醇溶液定容至100m L(臨用現(xiàn)配)[6]。

    1.2.3 提取液清除DPPH·自由基能力的測定

    (1)取植物提取稀釋液1m L及DPPH·液500μL于10m L具塞試管中,再加入3.5m L 95%乙醇,渦旋混勻,暗處放置40min,于波長517 nm[7]處測定吸光度。根據(jù)下列公式(1)計算漿果提取稀釋液對DPPH·自由基的抑制率,即:

    其中:Ai為加入樣品的吸光度值,Aj為樣品本底的吸光度值,Ac為不加樣品的吸光度值[8]。

    DPPH·自由基的清除作用是通過抗氧化劑把電子和質(zhì)子傳遞給DPPH·自由基,反應(yīng)如下:

    (2)標準曲線的繪制:測定濃度分別為60μmol/L、80μmol/L、120μmol/L、160μmol/L、200μmol/L trolox的DPPH·清除率,并繪制標準曲線。

    (3)抗氧化能力計算如下:

    其中:c為由trolox標準曲線計算得的漿果提取液的濃度;V為提取溶劑體積;D為稀釋倍數(shù);m0為樣品質(zhì)量。

    1.2.4 ABTS+·法測定抗氧化活性

    ABTS+·測定溶液的配制:準確稱取0.384 g ABTS+·溶解定容至100m L;準確稱取0.066 g過硫酸鉀水溶后定容至100m L;上述兩種溶液按體積比1∶1混合搖勻后,暗處放置12~16 h,用無水乙醇稀釋至吸光度小于0.7。

    1.2.5 提取液清除ABTS+·自由基能力的測定

    (1)吸取樹莓提取液400μL,加入ABTS測定溶液3.6m L,靜置5m in,于波長734 nm[9]處測定吸光度,漿果提取稀釋液對ABTS+·自由基的抑制率參照公式(1)。

    (2)標準曲線的繪制:測定濃度分別為為20μmol/L、40μmol/L、60μmol/L、80μmol/L、100μmol/L trolox的ABTS+·清除率,并繪制標準曲線。

    (3)抗氧化能力計算公式(3)如下:

    其中:c為由trolox標準曲線計算得的漿果提取稀釋液的濃度,V為提取溶劑體積,D為稀釋倍數(shù),m0為樣品質(zhì)量。

    2 結(jié)果與討論

    2.1 DPPH·自由基能力的測定(見表1)

    樹莓(覆盆子)酒的原料:沙棘、桑葚、黑加侖、紅樹莓、黑莓等凍果清除DPPH·自由基的能力較食用葡萄、無花果等鮮果的強,沙棘清除DPPH·自由基的能力為15.82μmol/g±0.2007μmol/g,在本實驗研究的水果中居首位;黑加侖、紅樹莓、黑莓、石榴等清除自由基的能力相當;葡萄等品種清除自由基的能力較弱,玫瑰香品種清除DPPH·自由基的能力僅為0.57μmol/g±0.006μmol/g,是研究的水果中最低的;枸杞干果清除自由基的能力不強,這可能是由于提取方法的限制,超聲波提取30min,并不能充分提取枸杞干果中的抗氧化成分。

    表1 樣品漿果中DPPH·自由基能力的測定 (μmol/g)

    2.2 ABTS+·自由基能力的測定(見表2)

    表2 漿果中ABTS+·自由基能力的測定 (μmol/g)

    作為釀制復(fù)方樹莓(覆盆子)酒的主要原料,紅樹莓凍果清除ABTS+·自由基的能力是本實驗研究的水果中最強的,可達86.12μmol/g±0.26μmol/g;其他原料如黑加侖、桑葚等的清除能力也較強,這可能是由于這三者都含有大量的花青素,有研究表明,花青素是一種強有力的抗氧化劑和自由基清除劑,其清除能力是維生素C的20倍,維生素E的30倍[10]。但市售的葡萄鮮果清除ABTS+·自由基的能力則較弱,金手指葡萄清除自由基的能力僅為5.40μmol/g±0.690μmol/g;無花果清除自由基的能力也一般,為10.28μmol/g±1.62μmol/g。

    3 結(jié)論

    玫瑰香葡萄清除DPPH·自由基的能力在研究的小漿果中最弱,但是清除ABTS+·自由基的能力卻是幾種葡萄中最高的,雖然DPPH·自由基反應(yīng)后的產(chǎn)物都是DPPH2[11],但是不同抗氧化物質(zhì)清除自由基的機理不同,可能是ET機制,也可能是HAT機制,或者是兩者共同作用的結(jié)果[12],因此清除不同自由基的能力也不同,若要評價某種水果的抗氧化性不能用單一的指標來評判,要多項指標綜合考慮。

    [1] 呂雙雙,李書國.植物源天然食品抗氧化劑及其應(yīng)用的研究[J].糧油食品科技,2013,21(5):60-65.

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    Antioxidant Ability of Raspberry and Other SmallBerries

    LIJiashao,WANGWeihong and YUANWei
    (HeishangmeiBiotechnology DevelopmentCo.Ltd.,Yantai,Shandong 264000,China)

    In this study,the raw materials of raspberry w ine including red raspberry,blackberry,mulberry,wolfberry,blackcurrant,sea buckthorn,apple,pomegranate,fig and several common grapes(Kyoho,Gold Finger,Muscat)were selected,and their scavenging ability of DPPH· free radical and ABTS+·free radicalwere compared.The results showed that,small berries such as sea buckthorn,red raspberry andmulberry etc.had strong scavenging ability,sea buckthorn had the strongestscavenging ability of DPPH·free radicalof 15.82μmol/g±0.2007μmol/g, and red raspberry had the strongestscavenging ability ofABTS+·free radicalof 86.12μmol/g±0.26μmol/g.

    seabuckthorn;red raspberry;antioxidantability;DPPH·free radical;ABTS+·free radical

    TS262.7;TS261.4

    A

    1001-9286(2016)12-0069-02

    10.13746/j.njkj.2016317

    2016-10-31

    李佳少(1986-),女,助理工程師,碩士研究生。

    優(yōu)先數(shù)字出版時間:2016-11-21;地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/52.1051.TS.20161121.1714.013.htm l。

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