• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    藤茶泡水前后的抗菌活性和抗氧化活性比較

    2016-12-22 06:22:56劉熠杭馬玉杰商艷君尹健鐸
    安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) 2016年33期
    關(guān)鍵詞:藤茶泡水提取物

    劉熠杭,馬玉杰,商艷君,尹健鐸

    (1.河北省石家莊市第一中學(xué),河北石家莊 050010;2.河北經(jīng)貿(mào)大學(xué)生物科學(xué)與工程學(xué)院,河北石家莊 050061)

    ?

    藤茶泡水前后的抗菌活性和抗氧化活性比較

    劉熠杭1,馬玉杰2*,商艷君2,尹健鐸2

    (1.河北省石家莊市第一中學(xué),河北石家莊 050010;2.河北經(jīng)貿(mào)大學(xué)生物科學(xué)與工程學(xué)院,河北石家莊 050061)

    [目的] 比較藤茶泡水前后乙醇提取物的抗菌活性和抗氧化活性。[方法] 采用福林酚法進(jìn)行酚含量的測定,抑菌圈法進(jìn)行抗細(xì)菌活性測定,菌餅法進(jìn)行抗真菌活性測定,并采用DPPH法進(jìn)行抗氧化活性測定。[結(jié)果] 藤茶泡水前后乙醇提取物的多酚含量分別為168和56 kg/g,藤茶泡水前乙醇提取物對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、灰葡萄孢霉、膠孢炭疽菌和葡萄白腐病菌均有抑制作用,泡水后的乙醇提取物對枯草芽胞桿菌不再有抑制作用,對其他5種菌仍有抑制活性但活性均有不同程度的降低。藤茶泡水前乙醇提取物的DPPH清除活性IC50分別為5.09和36.01 μg/mL。[結(jié)論] 藤茶泡水后的殘渣仍具有一定的抗菌和抗氧化活性,可被繼續(xù)開發(fā)利用。

    藤茶;抗細(xì)菌活性;抗真菌活性;抗氧化活性;總酚含量

    藤茶又名長壽茶,是我國民間比較廣泛使用的代茶飲料,同時又是一味傳統(tǒng)中藥材,其原植物為葡萄科蛇葡萄屬顯齒蛇葡萄(Ampelopsisgrossedentata)[1-2]。作為藥用植物資源,藤茶是一種極具開發(fā)潛力的中草藥。藤茶中多酚含量高(在20%左右),多酚類化合物具有廣泛的生理活性[3]。近代醫(yī)學(xué)研究表明,藤茶及其提取物具有增強(qiáng)和調(diào)節(jié)免疫、降血脂、降血壓、降血糖、抗炎、抑菌、抗腫瘤、抗氧化、保肝、護(hù)肝以及減輕乙醇中毒等功效[4-5]。無論作為飲品、保健品還是藥用植物資源,藤茶均具有較高的開發(fā)利用價值。目前有大量關(guān)于藤茶抗菌活性和抗氧化活性的報道[6-9],但關(guān)于藤茶泡水前后的抗菌活性和抗氧化活性比較的研究還鮮見報道。該試驗通過比較藤茶泡水前后乙醇提取物的抗菌活性和抗氧化活性差異,旨在為藤茶殘茶的綜合利用提供依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 試材。藤茶購自市場。細(xì)菌:枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、大腸桿菌(EscherichiaColi),均來自河北經(jīng)貿(mào)大學(xué)微生物學(xué)實驗室。真菌:灰葡萄孢霉(Botrytiscinerea)、膠孢炭疽菌(Colletotrichumgloeosporioides)、葡萄白腐病菌(Coniothyriumdiplodiella),均來自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所。

    1.1.2 試劑。水楊酸、硫酸鋰、鎢酸鈉、鉬酸鈉、磷酸溶液、濃鹽酸溶液、Na2CO3溶液、維生素C、95%酒精、福林酚試劑、沒食子酸、去離子水、DPPH等。

    1.1.3 儀器。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、水浴鍋、超凈工作臺、紫外分光光度計(7230G可見分光光度計)等。

    1.2 方法

    1.2.1 粗提取提取方法。泡水前后(應(yīng)用后茶葉為泡水3次后茶葉)干燥的藤茶,用95%乙醇浸提3次,每次1 d,合并減壓蒸干得乙醇粗提取物。

    1.2.2 總酚含量測定。

    圖1 總酚標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.1 Calibration curve of total phenolic

    1.2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。精密稱取 5 mg的沒食子酸對照品,置50 mL容量瓶用蒸餾水溶解并定容,得0.1 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別取標(biāo)準(zhǔn)溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mL于10 mL 棕色容量瓶中,加蒸餾水補至10 mL,搖勻,再加1 mL 的 Folin-Ciocalteu 試劑,充分搖勻。1 min后,加入7.5%(W/V)碳酸鈉溶液 2 mL,混勻,用蒸餾水定容,在50 ℃水浴加熱15 min,于765 nm處測定吸光度[10]。標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖1,得出回歸方程為:y=143.24x+ 0.037 8(R2= 0.998)。1.2.2.2 藤茶乙醇提取物多酚含量的測定。取1 mL樣品液加至10 mL比色管中,依次加入1 mL去離子水,后面同“1.2.2.1”方法,在765 nm下測定其吸光度。酚含量根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線確定的方程進(jìn)行計算。

    1.2.3 抗細(xì)菌活性。

    1.2.3.1 抑菌圈的測定。采用打孔法進(jìn)行測定。每皿加入約25 mL冷卻至50~60 ℃滅菌后的牛肉膏蛋白培養(yǎng)基,凝固后,取0.1 mL(1×106~1×107CFU/mL)菌懸液加到平板培養(yǎng)基表面,涂布均勻。用打孔器(直徑為0.8 cm)在涂布均勻的平板上打孔,無菌牙簽挑取上層培養(yǎng)基。每孔加入100 μL樣品(100 mg/mL),每樣品3個平行板,37 ℃倒置培養(yǎng)24 h,觀察抑菌圈。測量抑菌圈的直徑時,十字交叉,分別測量后,取平均值。取3次測量的平均值。青霉素為陽性對照(5 mg/mL)。

    1.2.3.2 最小抑菌濃度的測定。制備菌體濃度為107CFU/mL的菌懸液,放置4 ℃冰箱,備用。測定時,與適量的液體細(xì)菌培養(yǎng)基混勻至細(xì)菌終濃度約為105CFU/mL。將甲醇溶解的不同濃度的樣品100 μL和指示菌100 μL加入96孔細(xì)胞板中,37 ℃培養(yǎng)24 h,肉眼觀察,無肉眼可見菌生長的最小的樣品濃度即為樣品對該菌的最小抑菌濃度(Mininum inhibitory concentration,MIC)。未加待測樣品只含指示菌的為陰性對照,只含培養(yǎng)基的為空白對照,陽性對照用青霉素。

    1.2.4 抗真菌活性。將200 mg提取物溶解到1 mL甲醇中,在PDA培養(yǎng)基冷卻至50~60 ℃,將待測溶液加入至100 mL培養(yǎng)基中,充分搖勻,迅速倒入無菌培養(yǎng)皿中(每皿20 mL),放置待其凝固。將供試病原真菌接到PDA平板上,28 ℃培養(yǎng)4 d,在培養(yǎng)皿邊緣菌絲生長旺盛處用打孔器打取直徑為

    0.8 cm的菌餅。待測樣品對真菌的抑制作用采用菌絲生長速率法[11]。用接種針將0.8 cm的菌餅接至帶藥培養(yǎng)基上,有菌絲的一面向下與培養(yǎng)基貼合,每個培養(yǎng)皿中中央接一個菌餅,28 ℃培養(yǎng)4 d后,用十字交叉法測菌落直徑,計算相對抑制率。試驗設(shè)空白對照、陽性對照(克霉唑,濃度為0.10 mg/mL)、加藥處理(泡水前后的藤茶乙醇提取物,濃度為1 mg/mL),每個處理設(shè)3個重復(fù)。相對抑制率的計算公式為:

    1.2.5 抗氧化活性研究。DPPH自由基清除活性的測定參照文獻(xiàn)[12-13],用酶標(biāo)儀在517 nm 下測量吸光度(A)。水溶性抗氧化劑VC為陽性對照。DPPH自由基清除活性計算公式[14]如下:

    式中,A對照為對照的吸光值,A樣品為加樣品反應(yīng)液的吸光值。每個樣品測3次,取平均值。IC50是清除率為50%時對應(yīng)的樣品濃度,值越大,表明清除活性越弱;反之,越強(qiáng)。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 藤茶泡水前后乙醇提取物的總酚含量 泡水前后藤茶乙醇提取物的多酚含量差異比較明顯,分別為168和56 kg/g,表明藤茶具有較高含量的多酚,且泡水后的殘茶仍有一定的多酚存在。

    2.2 藤茶泡水前后乙醇提取物的抗細(xì)菌活性比較 從表1可看出,泡水前藤茶乙醇提取物在濃度為100 mg/mL時對金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的抑制活性大于濃度為5 mg/mL 的青霉素。藤茶泡水后乙醇提取物(100 mg/mL)抑菌活性小于青霉素(5 mg/mL)。藤茶泡水前后對金黃色葡萄球菌和大腸桿菌均有一定的抑制活性,且泡水前乙醇提取物的抑制活性大于泡水后乙醇提取物,泡水后乙醇提取物對枯草芽胞桿菌無抑制活性。

    表1 藤茶泡水前后乙醇提取物抗細(xì)菌活性

    2.3 藤茶泡水前后乙醇提取物的抗真菌活性比較 從表2可看出,藤茶泡水前后對3種葡萄植物病原菌均有一定的抑制活性。藤茶泡水前對葡萄白腐病菌和灰葡萄孢霉有較好的抑制活性,在濃度為1 mg/mL時抑制率分別為75.5%和82.8%,低于0.10 mg/mL的陽性對照制霉菌素。藤茶泡水后的乙醇提取物對葡萄白腐病菌和灰葡萄孢霉仍有很好的抑制活性,在濃度為1 mg/mL時抑制率分別為49.0%和55.5%。2.4 藤茶泡水前后乙醇提取物的抗氧化活性比較 由圖2可知,藤茶泡水前乙醇提取物具有很明顯的清除作用,其IC50值為5.09 μg/mL與VC差異不顯著(P>0.05,5.04 μg/mL),且呈量效關(guān)系,藤茶泡水后其乙醇提取物仍具有一定的DPPH清除活性,其IC50為36.01 μg/mL。

    表2 藤茶泡水前后乙醇提取物抗真菌活性

    圖2 藤茶泡水前后乙醇提取物的DPPH自由基清除活性Fig.2 DPPH radical scavenging ability of the ethanol extract of Ampelopsis grossedentata before and after soaking in water

    3 結(jié)論

    比較藤茶泡水前后乙醇提取物的抗菌活性和抗氧化活性發(fā)現(xiàn),藤茶泡水前后乙醇提取物的多酚含量分別為168和56 kg/g;藤茶泡水前乙醇提取物對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、灰葡萄孢霉、膠孢炭疽菌和葡萄白腐病菌均有抑制作用,泡水后的乙醇提取物對枯草芽胞桿菌不再有抑制作用,對其他5種菌仍有抑制活性但活性均有不同程度的降低;藤茶泡水前乙醇提取物的DPPH清除活性IC50分別為5.09和36.01 μg/mL。表明藤茶泡水后的乙醇提取物仍

    具有一定的抗菌和抗氧化活性。參考文獻(xiàn)

    [1] 吳瑛,吳彬,萬婧,等.藤茶提取物改善2型糖尿病大鼠胰島素抵抗的作用[J].第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報,2015,37(5):454-458.

    [2] 中國科學(xué)院中國植物志編輯委員會.中國植物志[M].北京:科學(xué)出版社,1998:48.

    [3] 熊璞,姚茂君,肖凱軍.藤茶中二氫楊梅素的提取工藝研究[J].現(xiàn)代食品科技,2009,25(8):907-910.

    [4] MATSUMOTO T,TAHARA S.Ampelopsin,a major antifungal constituent fromSalixsachalinensis,and its methyl ethers[J].Journal of the agricultural chemical society of Japan,2001,75(6):659-668.

    [5] 劉暢,鄧薇,劉小英,等.藤茶生物活性成分及其制備工藝研究進(jìn)展[J].食品工業(yè),2015,36(4):233-237.

    [6] 歐賢紅,葉勇,黃秋潔,等.藤茶抗氧化活性研究[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā),2013,25(25):245-248.

    [7] 丁友昌.藤茶總多酚的提取及其抗氧化活性研究[J].中國公共衛(wèi)生,1998,14(9):573.

    [8] 曾春暉,楊柯,林啟云,等.廣西藤茶提取物APS抗菌機(jī)制研究[J].山東中醫(yī)雜志,2007,26(6):415-417.

    [9] 曾春暉,楊柯,徐明光,等.廣西藤茶總黃酮對金黃色葡萄球菌抗菌機(jī)制研究[J].中國實驗方劑學(xué)雜志,2013,19(10):249-252.

    [10] 胡君萍,楊建華,王新玲,等.新疆沙棗果實不同部位總酚的含量測定[J].食品科學(xué),2010,31(6):220-222.

    [11] 方中達(dá).植病研究方法[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,1998:179-210.

    [12] LIU K,WANG J,ZHAO L,et al.Anticancer,antioxidant and antibiotic activities of mushroomRamariaflava[J].Food and chemical toxicology,2013,58:375-380.

    [13] 聶健,楊水蓮,莫美華,等.7種不同來源靈芝熱水提物體外抗氧化活性研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2016,44(18):134-136,174.

    [14] TEPE B,SOKMEN M,AKPULAT H A,et al.In vitro antioxidant activities of the methanol extracts of five Allium species from Turkey[J].Food chemistry,2005,92(1):89-92.

    Antimicrobial Activity and Antioxidant Activity Comparison ofAmpelopsisgrossedentatabefore and after Soaking in Water

    LIU Yi-hang1, MA Yu-jie2*, SHANG Yan-jun2et al

    (1.Shijiazhuang No.1 High School, Shijiazhuang, Hebei 050010;2.College of Biology Science and Engineering, Hebei University of Economics and Business, Shijiazhuang, Hebei 050061)

    [Objective] To compare antibacterial activity and antioxidant activity of ethanol extracts fromAmpelopsisgrossedentatabefore and after soaking in water.[Method]The folin-ciocalteu method was used to make the total phenolic content, antibacterial and antifungal activities were done by the inhibition zone method and the fungus cake method respectively, and antioxidant activity was done by DPPH method.[Result]The total phenolic contents of ethanol extract ofAmpelopsisgrossedentata(EEAG) before and after soaking in water were 168 and 56 kg/g. EEAG before soaking in water showed antimicrobial activity againstEscherichiacoli,Staphylococcusaureus,Bacillussubtilis,Botrytiscinerea,ColletotrichumgloeosporioidesandConiothyriumdiplodiella. EEAG after soaking in water exhibited no antimicrobial activity against Bacillus subtilis and lower antimicrobial activities against the other five microbes. TheIC50values of DPPH radical scavenging ability of EEAG before and after soaking in waer were 5.09 and 36.01 μg/mL respectively.[Conclution]There are certain antimicrobial and antioxidant activities of the residue ofAmpelopsisgrossedentataafter soaking in water, so it should still be exploited.

    Ampelopsisgrossedentata; Antibacterial activity;Antifungal activity;Antioxidant activity;Total phenolic content

    2016年博士科研啟動經(jīng)費(0112160225);2014省教育廳項目(2311002027)。

    劉熠杭(2000-),女,河北石家莊人,高中生。*通訊作者,碩士研究生,研究方向:天然產(chǎn)物的分離與提取。

    2016-09-30

    S 567.9;R 284.1

    A

    0517-6611(2016)33-0113-03

    猜你喜歡
    藤茶泡水提取物
    手腳泡水為啥外表皮膚會起皺
    蟲草素提取物在抗癌治療中顯示出巨大希望
    中老年保健(2022年2期)2022-08-24 03:20:44
    中藥提取物或可用于治療肥胖
    中老年保健(2021年5期)2021-12-02 15:48:21
    金銀花泡水別天天喝
    中老年保健(2021年2期)2021-12-02 00:50:10
    黃芪泡水 到底是升壓還是降壓?
    恩施藤茶乙醇提取物對高溫煮熟魚肉腐敗菌的抑制作用研究
    保鮮與加工(2021年1期)2021-02-06 06:43:14
    藤茶助力來鳳縣“脫貧摘帽”
    神奇的落葉松提取物
    藤茶不同繁殖方式有效成分測定及抗氧化酶活性分析
    中成藥(2018年2期)2018-05-09 07:19:54
    大黃泡水治便秘靠譜嗎?
    益壽寶典(2018年4期)2018-01-26 14:22:40
    国产黄a三级三级三级人| 人妻一区二区av| 免费观看av网站的网址| 丰满人妻一区二区三区视频av| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 高清毛片免费看| 内射极品少妇av片p| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 亚洲av福利一区| 最后的刺客免费高清国语| 如何舔出高潮| 99久久九九国产精品国产免费| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 少妇的逼好多水| 午夜福利视频1000在线观看| 欧美一级a爱片免费观看看| 成人亚洲欧美一区二区av| 日韩伦理黄色片| 超碰av人人做人人爽久久| 免费黄色在线免费观看| 亚洲国产精品999| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 午夜激情久久久久久久| 精品人妻熟女av久视频| 国产又色又爽无遮挡免| 国产精品福利在线免费观看| 日本爱情动作片www.在线观看| 三级国产精品片| 国产在线男女| 黄片无遮挡物在线观看| 欧美zozozo另类| 美女视频免费永久观看网站| 不卡视频在线观看欧美| 精品国产乱码久久久久久小说| 日韩成人av中文字幕在线观看| 国产乱来视频区| 97超碰精品成人国产| 男女边摸边吃奶| 精品久久国产蜜桃| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 国产精品偷伦视频观看了| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 狠狠精品人妻久久久久久综合| 伦精品一区二区三区| 蜜臀久久99精品久久宅男| 精品一区在线观看国产| 女人被狂操c到高潮| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 久久久午夜欧美精品| 日韩强制内射视频| 免费看日本二区| 特级一级黄色大片| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 国产av国产精品国产| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 久久精品久久久久久久性| 国产精品人妻久久久久久| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 久久久精品94久久精品| 国产乱来视频区| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 久久久久精品久久久久真实原创| 亚洲欧美清纯卡通| 成人一区二区视频在线观看| 日韩一本色道免费dvd| 男女边吃奶边做爰视频| 国产亚洲一区二区精品| 特级一级黄色大片| www.色视频.com| 能在线免费看毛片的网站| 日日啪夜夜爽| 国产乱人视频| 欧美另类一区| 亚洲精品456在线播放app| 亚洲在久久综合| av国产免费在线观看| 最近中文字幕高清免费大全6| 又爽又黄无遮挡网站| 精品少妇黑人巨大在线播放| 免费av毛片视频| 性色avwww在线观看| 老女人水多毛片| 天堂中文最新版在线下载 | 丝瓜视频免费看黄片| 看十八女毛片水多多多| 国产一区亚洲一区在线观看| 亚洲精品成人av观看孕妇| 97超碰精品成人国产| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 午夜亚洲福利在线播放| 老女人水多毛片| 亚洲av日韩在线播放| 国产黄a三级三级三级人| 少妇人妻精品综合一区二区| 亚洲精品一二三| 日本与韩国留学比较| 天美传媒精品一区二区| 成人亚洲精品av一区二区| 国产精品.久久久| 日本wwww免费看| 插阴视频在线观看视频| 精品一区二区三卡| 91aial.com中文字幕在线观看| 日韩成人av中文字幕在线观看| 亚洲国产成人一精品久久久| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 欧美成人a在线观看| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 久久热精品热| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 一级av片app| 伊人久久精品亚洲午夜| 精品国产三级普通话版| 色播亚洲综合网| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| av.在线天堂| 国产男女内射视频| 亚洲精品456在线播放app| 亚洲成色77777| 97超视频在线观看视频| 男人爽女人下面视频在线观看| 波多野结衣巨乳人妻| 亚洲精品,欧美精品| 国产黄片视频在线免费观看| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 国产高潮美女av| 91久久精品国产一区二区三区| 少妇熟女欧美另类| 波野结衣二区三区在线| 国产成人精品婷婷| 欧美 日韩 精品 国产| 成人亚洲精品一区在线观看 | 嫩草影院精品99| 男人狂女人下面高潮的视频| av.在线天堂| 欧美另类一区| 高清毛片免费看| 制服丝袜香蕉在线| 亚洲色图综合在线观看| 99热这里只有是精品50| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 国产在线一区二区三区精| 身体一侧抽搐| 91在线精品国自产拍蜜月| 亚洲精品一区蜜桃| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 精品久久久久久久末码| 久久久欧美国产精品| eeuss影院久久| 最后的刺客免费高清国语| 亚洲三级黄色毛片| 日韩伦理黄色片| 日本欧美国产在线视频| 99re6热这里在线精品视频| 一区二区av电影网| 亚洲精品第二区| 亚洲最大成人中文| 777米奇影视久久| 国产亚洲一区二区精品| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 欧美另类一区| 国产爽快片一区二区三区| 亚洲欧美精品自产自拍| 嫩草影院新地址| 又爽又黄a免费视频| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 免费观看性生交大片5| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 亚洲av欧美aⅴ国产| 国产综合精华液| 中文字幕制服av| 亚洲欧美日韩东京热| 麻豆成人av视频| 91精品国产九色| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 天堂网av新在线| 欧美日韩综合久久久久久| 国产精品av视频在线免费观看| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 嘟嘟电影网在线观看| 亚洲无线观看免费| 神马国产精品三级电影在线观看| 高清av免费在线| 好男人在线观看高清免费视频| 日日啪夜夜爽| 欧美日韩综合久久久久久| 久久久成人免费电影| 六月丁香七月| 国产久久久一区二区三区| 亚洲欧美日韩东京热| 国产精品无大码| 免费大片18禁| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 午夜激情久久久久久久| 热99国产精品久久久久久7| 在线观看人妻少妇| 高清午夜精品一区二区三区| 99久久中文字幕三级久久日本| 好男人视频免费观看在线| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 亚洲国产日韩一区二区| av免费观看日本| 日本爱情动作片www.在线观看| 欧美3d第一页| 亚洲性久久影院| 2021天堂中文幕一二区在线观| 亚洲精品国产色婷婷电影| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 人妻 亚洲 视频| 亚洲精品亚洲一区二区| 男女国产视频网站| 97精品久久久久久久久久精品| 国产欧美日韩精品一区二区| 永久免费av网站大全| 国产成人精品婷婷| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 精品久久久噜噜| 三级国产精品欧美在线观看| 国产男人的电影天堂91| 国产成人aa在线观看| av专区在线播放| 久久久久久九九精品二区国产| 夫妻午夜视频| 亚洲精品成人av观看孕妇| 91狼人影院| 久久精品国产自在天天线| 国产综合精华液| 人妻系列 视频| 日韩成人伦理影院| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 我要看日韩黄色一级片| 国产亚洲一区二区精品| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 免费观看a级毛片全部| 日日摸夜夜添夜夜爱| 亚洲不卡免费看| 99精国产麻豆久久婷婷| 97超视频在线观看视频| 男人爽女人下面视频在线观看| 久久久精品免费免费高清| 亚洲真实伦在线观看| 久久国内精品自在自线图片| 香蕉精品网在线| 国产探花极品一区二区| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 激情 狠狠 欧美| 日韩一区二区三区影片| 欧美+日韩+精品| 午夜福利在线在线| 偷拍熟女少妇极品色| 亚洲国产成人一精品久久久| 欧美最新免费一区二区三区| 免费电影在线观看免费观看| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 97精品久久久久久久久久精品| 国产精品不卡视频一区二区| 黄片无遮挡物在线观看| 观看美女的网站| 国产91av在线免费观看| 欧美日韩综合久久久久久| 亚洲av福利一区| 97精品久久久久久久久久精品| 伊人久久精品亚洲午夜| 国产精品av视频在线免费观看| 最近手机中文字幕大全| 可以在线观看毛片的网站| 日日啪夜夜撸| 一本色道久久久久久精品综合| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 看黄色毛片网站| av国产免费在线观看| 午夜老司机福利剧场| 免费人成在线观看视频色| 午夜福利高清视频| 18禁在线播放成人免费| 亚洲精品456在线播放app| av福利片在线观看| 国产av不卡久久| 国产淫片久久久久久久久| 看黄色毛片网站| 国产黄色免费在线视频| 在线观看美女被高潮喷水网站| 免费黄色在线免费观看| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 亚洲av国产av综合av卡| 超碰av人人做人人爽久久| 亚洲不卡免费看| 天堂中文最新版在线下载 | 少妇 在线观看| 天天一区二区日本电影三级| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 午夜老司机福利剧场| 一级毛片aaaaaa免费看小| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 午夜亚洲福利在线播放| 久久精品国产a三级三级三级| 国内精品美女久久久久久| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 欧美3d第一页| 五月开心婷婷网| 嫩草影院精品99| 秋霞伦理黄片| 男女边吃奶边做爰视频| 国产伦精品一区二区三区四那| 成人国产av品久久久| eeuss影院久久| 日韩免费高清中文字幕av| 亚洲精品一二三| 少妇被粗大猛烈的视频| 国产亚洲精品久久久com| 免费av观看视频| 亚洲av成人精品一二三区| 亚洲国产色片| 久久精品国产亚洲av涩爱| 精品久久久久久电影网| 亚洲欧美一区二区三区国产| 国产一区二区三区综合在线观看 | eeuss影院久久| 男插女下体视频免费在线播放| 欧美变态另类bdsm刘玥| 成人国产麻豆网| 丝袜脚勾引网站| 亚洲av成人精品一区久久| 国产男女超爽视频在线观看| 免费电影在线观看免费观看| 秋霞在线观看毛片| 五月开心婷婷网| 九色成人免费人妻av| 成人二区视频| 精品熟女少妇av免费看| 超碰av人人做人人爽久久| 别揉我奶头 嗯啊视频| 在线观看av片永久免费下载| 丝袜美腿在线中文| 国产免费又黄又爽又色| 日本与韩国留学比较| 婷婷色综合www| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | 亚洲不卡免费看| av国产免费在线观看| 又爽又黄无遮挡网站| 2021天堂中文幕一二区在线观| 韩国av在线不卡| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 国产乱来视频区| 婷婷色麻豆天堂久久| 久久久久国产精品人妻一区二区| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 久久精品夜色国产| av在线观看视频网站免费| 51国产日韩欧美| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 精品人妻熟女av久视频| 男的添女的下面高潮视频| 亚洲,一卡二卡三卡| 男人狂女人下面高潮的视频| 欧美人与善性xxx| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 美女被艹到高潮喷水动态| 亚洲成人中文字幕在线播放| 久久久久精品性色| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 久久人人爽人人爽人人片va| 国产精品蜜桃在线观看| 日本黄大片高清| 最近中文字幕高清免费大全6| 成人综合一区亚洲| 少妇被粗大猛烈的视频| 亚洲成人久久爱视频| 亚洲av二区三区四区| 嫩草影院精品99| 久久久久久久亚洲中文字幕| 亚洲精品日韩av片在线观看| 在线免费十八禁| 99久久九九国产精品国产免费| 久久久精品94久久精品| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| av在线观看视频网站免费| 亚洲欧美日韩无卡精品| 国模一区二区三区四区视频| 国产精品不卡视频一区二区| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 如何舔出高潮| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 亚洲va在线va天堂va国产| 伊人久久精品亚洲午夜| 男女边吃奶边做爰视频| 欧美成人午夜免费资源| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 欧美日韩国产mv在线观看视频 | 看十八女毛片水多多多| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 午夜福利网站1000一区二区三区| 国产免费视频播放在线视频| 成人欧美大片| 久久久久久伊人网av| 青春草国产在线视频| 成年版毛片免费区| 亚洲av免费在线观看| 国产精品久久久久久久久免| 男的添女的下面高潮视频| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 特级一级黄色大片| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 日本三级黄在线观看| 2022亚洲国产成人精品| 在现免费观看毛片| 一个人看的www免费观看视频| 偷拍熟女少妇极品色| 国产欧美日韩精品一区二区| 高清日韩中文字幕在线| 18禁动态无遮挡网站| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 一本久久精品| 五月开心婷婷网| 久久人人爽av亚洲精品天堂 | 不卡视频在线观看欧美| av一本久久久久| 免费少妇av软件| 久久99热这里只有精品18| 亚洲成人一二三区av| 国产乱人视频| 亚洲四区av| 色网站视频免费| 欧美激情在线99| 中文资源天堂在线| 久久久国产一区二区| 高清在线视频一区二区三区| 五月伊人婷婷丁香| 久久人人爽人人片av| 身体一侧抽搐| 春色校园在线视频观看| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 久久ye,这里只有精品| 亚洲在线观看片| 亚洲综合色惰| 熟妇人妻不卡中文字幕| 国产乱人视频| 亚洲四区av| 黄色日韩在线| av在线播放精品| 中国美白少妇内射xxxbb| 亚洲精品乱久久久久久| 成年av动漫网址| 日韩欧美精品v在线| 国产精品国产三级国产专区5o| 在线看a的网站| 国产在视频线精品| 成人亚洲精品一区在线观看 | 免费电影在线观看免费观看| 极品教师在线视频| 日产精品乱码卡一卡2卡三| av女优亚洲男人天堂| 熟女电影av网| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 精品少妇黑人巨大在线播放| 久久ye,这里只有精品| 人妻 亚洲 视频| 久久人人爽人人爽人人片va| 最近最新中文字幕大全电影3| 亚洲国产精品专区欧美| 国产探花在线观看一区二区| 男女国产视频网站| 国产毛片a区久久久久| 插阴视频在线观看视频| 男女边摸边吃奶| 极品教师在线视频| 各种免费的搞黄视频| 看黄色毛片网站| av在线播放精品| 国产有黄有色有爽视频| 午夜激情福利司机影院| 日韩精品有码人妻一区| 在线观看一区二区三区激情| 激情 狠狠 欧美| 五月开心婷婷网| 国产精品熟女久久久久浪| 国产精品国产三级专区第一集| 国产91av在线免费观看| 久久人人爽人人爽人人片va| 内射极品少妇av片p| 午夜老司机福利剧场| 在线观看av片永久免费下载| 亚洲国产成人一精品久久久| 在线观看三级黄色| 久久久久久久久久成人| 一个人观看的视频www高清免费观看| 精品酒店卫生间| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 亚洲av不卡在线观看| 亚洲成色77777| 一区二区三区免费毛片| 国产高清不卡午夜福利| 久久6这里有精品| 国产毛片在线视频| 深爱激情五月婷婷| av在线亚洲专区| 青春草亚洲视频在线观看| 国产毛片在线视频| 精品少妇久久久久久888优播| 99re6热这里在线精品视频| 欧美国产精品一级二级三级 | 一级片'在线观看视频| 欧美一级a爱片免费观看看| 国产一区亚洲一区在线观看| 久久久久久久亚洲中文字幕| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 亚洲天堂国产精品一区在线| 七月丁香在线播放| 老女人水多毛片| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 日本一本二区三区精品| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 99热这里只有是精品50| xxx大片免费视频| 黄色欧美视频在线观看| 2018国产大陆天天弄谢| 成人欧美大片| a级毛片免费高清观看在线播放| 人妻 亚洲 视频| 搡老乐熟女国产| 亚洲性久久影院| 一区二区三区四区激情视频| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 成人无遮挡网站| 久久久久久久久久人人人人人人| 熟女人妻精品中文字幕| 日韩伦理黄色片| 亚洲丝袜综合中文字幕| 在线观看免费高清a一片| av网站免费在线观看视频| 18禁动态无遮挡网站| 2018国产大陆天天弄谢| 亚洲色图av天堂| 久久精品夜色国产| 亚洲综合色惰| 国产毛片在线视频| 日本欧美国产在线视频| 日本午夜av视频| 免费人成在线观看视频色| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 久久精品国产亚洲av天美| 精品一区在线观看国产| 最近中文字幕2019免费版| 韩国av在线不卡| 色吧在线观看| 久久精品国产亚洲av涩爱| 在线 av 中文字幕| 久久久久精品久久久久真实原创| 赤兔流量卡办理| 亚洲国产最新在线播放| 亚洲真实伦在线观看| 国产色爽女视频免费观看| 黄色怎么调成土黄色| 国产精品一区二区性色av| 欧美极品一区二区三区四区| 一级毛片电影观看| 九九在线视频观看精品| 干丝袜人妻中文字幕| 国产伦在线观看视频一区| 国产在视频线精品| 亚洲熟女精品中文字幕| 亚洲丝袜综合中文字幕| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 免费看a级黄色片| 久久久a久久爽久久v久久| 久久久久久久精品精品| 两个人的视频大全免费| 国产爽快片一区二区三区| 亚洲精品国产色婷婷电影| 熟女电影av网| 美女视频免费永久观看网站| 一级a做视频免费观看| 亚洲av二区三区四区| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 五月玫瑰六月丁香| 女人久久www免费人成看片| 秋霞在线观看毛片| 亚洲精品色激情综合| 大香蕉久久网| 久久精品国产亚洲网站| av又黄又爽大尺度在线免费看| 天天一区二区日本电影三级| 亚洲欧美一区二区三区国产| 色吧在线观看| 国产欧美亚洲国产| 99热6这里只有精品| 亚洲av免费在线观看| 精品酒店卫生间| 麻豆乱淫一区二区| 精品午夜福利在线看| 国产毛片a区久久久久| 久久人人爽人人片av| 五月玫瑰六月丁香| 三级经典国产精品| 国产精品国产三级国产专区5o| 亚洲国产欧美在线一区| 一个人看的www免费观看视频| 色视频www国产| 国产成人福利小说| 亚洲成人av在线免费| 秋霞在线观看毛片| 亚洲av福利一区| 夫妻性生交免费视频一级片| 成年免费大片在线观看| 国产成人精品婷婷| 国产高清不卡午夜福利| 亚洲精品456在线播放app| 男女国产视频网站| 制服丝袜香蕉在线|