王 博,王 琳
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低強(qiáng)度循環(huán)載荷訓(xùn)練對(duì)髕骨髕腱結(jié)合部損傷和髕骨微細(xì)結(jié)構(gòu)的影響
王 博,王 琳
目的:本研究利用循環(huán)載荷動(dòng)物模型,比較休息和低強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)對(duì)髕骨髕腱結(jié)合部(patella-patella tendon junction, PPTJ)損傷及對(duì)髕骨的影響。實(shí)驗(yàn)方法:12只成年雌性新西蘭大白兔,隨機(jī)篩選分組分為4周循環(huán)載荷組(LD-RST,n=6),8周循環(huán)載荷組(LD-LI,n=6),左后肢進(jìn)行實(shí)驗(yàn),右后肢為空白對(duì)照。實(shí)驗(yàn)過程中,前4周兩組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物統(tǒng)一接受強(qiáng)度為7.17N/S共24小時(shí)的循環(huán)載荷。在實(shí)驗(yàn)的第4周后,LD-RST組停止實(shí)驗(yàn),LD-LI組將強(qiáng)度改為4.2N/共24小時(shí)的循環(huán)載荷。8周后所有動(dòng)物統(tǒng)一進(jìn)行取材,將取材后組織進(jìn)行Micro-CT進(jìn)行并進(jìn)行H&E染色,使用圖像采集系統(tǒng)進(jìn)行組織學(xué)分析。結(jié)果:H&E染色測(cè)量纖維軟骨帶厚度LD-LI組和LD-RST組沒有顯著差異,LD-LI組的膠原排列比LD-RST組更加緊密整齊。骨量和骨小梁結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組沒有顯著差異。結(jié)論:4周休息不能促進(jìn)髕腱結(jié)合部損傷的恢復(fù)。4周低強(qiáng)度的循環(huán)載荷沒有加重?fù)p傷和髕骨增生,并且對(duì)肌腱的重建修復(fù)具有促進(jìn)作用。
髕骨髕腱結(jié)合部損傷;循環(huán)載荷;損傷修復(fù)
髕骨髕腱結(jié)合部(patella-patella tendon junction, PPTJ)損傷是一種在籃球等長(zhǎng)期半蹲位發(fā)力的運(yùn)動(dòng)項(xiàng)目高發(fā)運(yùn)動(dòng)損傷,對(duì)運(yùn)動(dòng)員的運(yùn)動(dòng)成績(jī)和生活質(zhì)量都有較大影響。目前認(rèn)為,高強(qiáng)度的過度使用是導(dǎo)致其損傷的主要原因。髕骨作為膝關(guān)節(jié)屈伸的力量支點(diǎn),在垂直方向長(zhǎng)時(shí)間受到力量的牽拉作用,因此髕骨與髕腱的結(jié)合部被是損傷的好發(fā)區(qū)域[1]。髕腱結(jié)合部損傷的主要組織學(xué)表現(xiàn)為纖維軟骨帶厚度增加、纖維軟骨與鈣化軟骨之間的潮線出現(xiàn)鋸齒狀的“漲潮”和模糊的現(xiàn)象,以及肌腱中膠原纖維的排列出現(xiàn)紊亂等,甚至出現(xiàn)髕腱結(jié)合部的骨質(zhì)增生與鈣化的問題[1-2]。與此同時(shí),骨組織在受到外界力學(xué)條件變化后,會(huì)根據(jù)相應(yīng)的力學(xué)變化改變自身的微細(xì)結(jié)構(gòu)和組織密度,以適應(yīng)力學(xué)條件的變化[3]。目前在對(duì)髕腱結(jié)合部損傷的治療方法中,低強(qiáng)度的離心運(yùn)動(dòng)被認(rèn)為可效減輕末端病中的紅腫熱痛等癥狀[4-6],同時(shí)也有研究指出低強(qiáng)度的向心運(yùn)動(dòng)雖然治療效果不如離心運(yùn)動(dòng),但是同樣具有減輕相應(yīng)癥狀的效果[7-8]。這些研究主要集中臨床方面,缺少相關(guān)的組織學(xué)方面研究,且休息或運(yùn)動(dòng)是否可以促進(jìn)組織修復(fù)目前依舊存在爭(zhēng)論。由于低強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)會(huì)對(duì)肌腱病的治療具有積極的影響,因此我們假設(shè)通過低強(qiáng)度的循環(huán)載荷訓(xùn)練會(huì)改善髕腱結(jié)合部的組織學(xué)損傷,并且對(duì)于骨的微細(xì)結(jié)構(gòu)重建產(chǎn)生影響。本研究通過建立動(dòng)物損傷模型,運(yùn)用組織學(xué)和Micro-CT技術(shù)比較休息和低強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)對(duì)髕腱結(jié)合部損傷及對(duì)髕骨的影響。
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組
12只成年18周齡體重為2 400±200g的雌性新西蘭大白兔,隨機(jī)分為4周載荷4周休息組(LD-RST,6只);4周載荷4周低強(qiáng)度訓(xùn)練組(LD-LI,6只)。6個(gè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的左后肢為實(shí)驗(yàn)腿,隨機(jī)選取6個(gè)右后肢為對(duì)照組。
1.2 運(yùn)動(dòng)負(fù)荷
在之前的實(shí)驗(yàn)中,刺激兔股四頭肌產(chǎn)生節(jié)律性收縮的最大電壓為12V,超過12V則會(huì)產(chǎn)生肌肉震顫。本實(shí)驗(yàn)依據(jù)之前所建立的動(dòng)物損傷模型[9],并已知兔股四頭肌在12V下電刺激所產(chǎn)生的最大伸膝力為23.5N±2.4N[9]。實(shí)驗(yàn)中采用30%最大負(fù)荷既7.17N(±0.3N)進(jìn)行4周的循環(huán)載荷實(shí)驗(yàn)可以確保造模成功。從第五周開始采用10%最大伸膝力量測(cè)試低強(qiáng)度循環(huán)載荷訓(xùn)練對(duì)髕腱結(jié)合部損傷的影響。
1.3 循環(huán)載荷損傷運(yùn)動(dòng)
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物根據(jù)體重進(jìn)行腹腔注射戊巴比妥鈉(批號(hào):018K0754;CAS注冊(cè)號(hào):57-33-0,SIGMA,美國(guó)。濃度:2.5%;劑量:40mg/kg。)麻醉。兔子完全麻醉后仰臥固定于兔架臺(tái)上,雙膝屈曲90度。將連接正極與電刺激輸出裝置(型號(hào):YC-2,成都儀器廠,中國(guó))的刺激針刺入兔子雙側(cè)股直肌中部,負(fù)極刺入股直肌髕骨止點(diǎn)上20mm處。實(shí)驗(yàn)時(shí)左下肢作為實(shí)驗(yàn)組接通電刺激肌肉運(yùn)動(dòng),而右下肢不接通電刺激作為對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)過程中通過調(diào)電壓的強(qiáng)度(1-12V)來控制并維持兔子伸膝力的強(qiáng)度,伸膝力通過張力轉(zhuǎn)換器(型號(hào):YP100,北京新航業(yè)科貿(mào)有限公司,中國(guó))將力學(xué)脈沖信號(hào)傳導(dǎo)到多通道信號(hào)采集處理器(型號(hào):RM-6240C,成都儀器廠,中國(guó)),以監(jiān)控整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程的伸膝力強(qiáng)度。
在前4周,LD-RST組和LD-LI組兔子的伸膝力強(qiáng)度控制在7.17N(±0.3N),骨四頭肌每分鐘收縮20次,每次訓(xùn)練2小時(shí),每周訓(xùn)練3次,即兩組均進(jìn)行24小時(shí)循環(huán)載荷訓(xùn)練。LD-RST組在第四周后停止訓(xùn)練,繼續(xù)飼養(yǎng),籠中自由活動(dòng)。同時(shí)8周組從第五周開始伸膝力強(qiáng)度控制在最大伸膝力的10%即4.2N(±0.3N),每次訓(xùn)練2小時(shí),每周訓(xùn)練3次,LD-LI組共進(jìn)行48小時(shí)載荷訓(xùn)練(圖1)。
圖1 循環(huán)載荷損傷模型
1.4 樣本取材
第九周對(duì)所有動(dòng)物注射過量戊巴比妥鈉處死,離斷股四頭肌止點(diǎn),剪斷內(nèi)外側(cè)副韌帶和膝關(guān)節(jié)內(nèi)的十字韌帶,剝離髕腱下脂肪墊,將整個(gè)髕骨和髕腱結(jié)合部區(qū)域完整取下。
1.5 Micro-CT掃描
取材后標(biāo)本立即進(jìn)行Micro-CT掃描(skyscan 1072,美國(guó)GE公司)。掃描參數(shù)設(shè)定為:射線管電壓59KV,電流159 uA,掃描分辨率9um,曝光時(shí)間600ms,采用180度掃描,采用NRecon軟件(V1.6.1.0,美國(guó)GE公司)對(duì)原始圖像中髕骨下緣至髕骨中部480層圖像進(jìn)行重建。隨后對(duì)重建后所得的連續(xù)橫切面灰度圖像使用CTAn(V2.11, 美國(guó)GE公司)進(jìn)行綜合分析。根據(jù)Wang等[10]文獻(xiàn)報(bào)道,重建圖像灰度值區(qū)間設(shè)定為70-200可以有效清除清楚組織內(nèi)部雜質(zhì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾。隨后得到完整的髕骨3D圖像,并計(jì)算髕骨體積(BV)、髕骨面積(BS)、骨小梁厚度(Tb.th)、骨小梁數(shù)量(Tb.N)。(圖2)。
圖2 A髕腱的三維圖像 B髕骨的三維圖像
1.6 組織學(xué)H&E染色
Micro-CT掃描后樣本放入10%甲醛溶液內(nèi)固定48小時(shí),之后使用4%甲酸溶液進(jìn)行為期三周時(shí)間的脫鈣。脫鈣之后,沿髕骨矢狀面對(duì)PPTJ組織縱向切開,進(jìn)行組織脫水、石蠟包埋。待石蠟塊成型后,使用石蠟切片機(jī)沿縱切面將組織切為5 um厚的石蠟切片,并對(duì)其進(jìn)行伊紅蘇木精(H&E)染色。
對(duì)圖像纖維軟骨厚度帶的測(cè)量采用之前已經(jīng)建立的方法[11]。將整個(gè)纖維軟骨帶視為一個(gè)近似的矩形,使用MetaMorph Premier Offline(V7.7,美國(guó))在100倍圖像上位于軟骨和肌腱之間一個(gè)帶狀區(qū)域中選取纖維與軟骨細(xì)胞的交界部分,將其范圍準(zhǔn)確劃出并計(jì)算出其面積。然后將纖維軟骨帶的中線劃分出圖像的長(zhǎng)軸,將纖維軟骨帶的面積除以長(zhǎng)軸的長(zhǎng)度,得到纖維軟骨帶的厚度。
1.7 統(tǒng)計(jì)分析
對(duì)各組結(jié)果間纖維軟骨帶厚度、髕骨體積(BV)、髕骨面積(BS)、骨小梁厚度(Tb.th)、骨小梁數(shù)量(Tb.N),采用ANOVA進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析差異性檢驗(yàn),P<0.05證明存在顯著差異性。
2.1 H&E染色結(jié)果
H&E組織學(xué)染色結(jié)果顯示,對(duì)照組纖維軟骨帶與肌腱之間的潮線清晰明顯,膠原排列整齊、分布比較均勻,呈波浪形。LD-RST組出現(xiàn)了潮線輪廓模糊甚至局部消失的現(xiàn)象,膠原纖維的排列呈波浪狀,但排列紊亂;LD-LI組髕腱結(jié)合部的潮線輪廓出現(xiàn)鋸齒狀變化,肌腱膠原纖維排列平坦且致密。(圖3)
與對(duì)照組相比,LD-RST組纖維軟骨帶厚度明顯高于對(duì)照組(190.99±21.72um2,154.22±27.78 um2,P<0.05),LD-LI組纖維軟骨帶厚度也明顯高于對(duì)照組(195.91±12.01um2,154.22±27.78 um2,P<0.05)。LD-RST組纖維軟骨帶厚度與LD-LI組纖維軟骨帶厚度無(wú)明顯變化(190.99±21.72um2,195.91±12.01um2,P>0.05)。(表2)
圖3 100倍鏡下的髕腱結(jié)合部的H&E染色和偏振光切片
表1 H&E染色測(cè)量纖維軟骨厚度Table 1 The thickness of the fibrocartilage by H&E staining
2.2 髕骨體積面積
使用Micro-CT計(jì)算髕骨體積(BV)、髕骨面積(BS)和總體積(TV),結(jié)果顯示:對(duì)照組BV為36.31±6.05mm3,BS為98.71±18.75mm2,TV為116.24±21.49mm3;LD-RST組BV為34.67±7.68mm3,BS為95.58±21.73mm2,TV為116.77±18.70mm3;LD-LI組BV為:33.01±6.04mm3,BS為:95.37±20.16 mm2,TV為:108.57±16.90mm3。差異性檢驗(yàn)結(jié)果顯示LD-LI組、LD-RST組和對(duì)照組在 BV、BS、TV未見顯著差異(P>0.05)。(見表2)
表2 髕骨體積與髕骨面積Table 2 The patella volume and patellar area
2.3 骨小梁數(shù)量與厚度
使用Micro-CT計(jì)算骨小梁厚度(Tb.th)和數(shù)量(Tb.N),結(jié)果顯示:對(duì)照組Tb.th為1.06±0.14mm,Tb.N為0.23±0.01 (1/mm);LD-RST組的Tb.th為1.03±0.26mm,Tb.N為0.28±0.03(1/mm);LD-LI組Tb.th為1.04±0.11mm,Tb.N為0.31±0.02(1/mm);差異性檢驗(yàn)結(jié)果顯示,LD-LI組、LD-RST組和對(duì)照組在Tb.th、Tb.N未見顯著差異(P>0.05)。見表3。
表3 骨小梁的數(shù)量和厚度Table 3 The trabecular number and thickness
根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道[1-2,9,12],對(duì)于髕腱結(jié)合部損傷的H&E染色組織學(xué)表現(xiàn)為:肌腱纖維紊亂;潮線呈現(xiàn)“火焰狀”變化,模糊甚至消失;纖維軟骨帶增厚。通過鏡下觀察H&E染色結(jié)果顯示,LD-RST組出現(xiàn)了腱纖維結(jié)構(gòu)紊亂,潮線模糊,部分乃至消失;LD-LI組出現(xiàn)了潮線鋸齒狀的變化。通過H&E染色測(cè)量纖維軟骨帶厚度,結(jié)果LD-LI組和LD-RST組的纖維軟骨帶厚度明顯大于對(duì)照組。
3.1 髕腱結(jié)合部組織學(xué)變化
髕腱結(jié)合部損傷多為外力作用肌腱進(jìn)行反復(fù)的牽拉。肌腱組織在收到牽拉后導(dǎo)致炎癥因子升高引起紅腫熱痛等炎癥反應(yīng),同時(shí)肌腱組織自身進(jìn)行重建和修復(fù)。而在長(zhǎng)期反復(fù)的牽拉過程中,肌腱一直處于不斷的損傷,重建、修復(fù)狀態(tài),從而導(dǎo)致過度修復(fù)和肌腱細(xì)胞凋亡。久而久之,這種過度修復(fù)作用會(huì)形成瘢痕愈合,影響肌腱原有的特性,導(dǎo)致髕腱結(jié)合部損傷的發(fā)生[2,13]。纖維軟骨帶厚度的增加被認(rèn)為是由于髕腱結(jié)合部受到反復(fù)牽拉后產(chǎn)生的一系列細(xì)胞凋亡與增殖的結(jié)果,H&E染色切片中的LD-RST和LD-LI的纖維軟骨帶厚度顯著高于照組,其纖維軟骨帶的厚度分別是對(duì)照組的123.8%和122.5%(P均<0.05),并且出現(xiàn)了潮線輪廓的變化,根據(jù)過往之前的研究結(jié)果[1-2,9,14],可以確定4周總計(jì)24小時(shí)的循環(huán)載荷訓(xùn)練有效造成髕骨髕腱結(jié)合部造模損傷。LD-LI組對(duì)比LD-RST組的纖維軟骨帶厚度無(wú)顯著性差異,說明傷后休息4周和4周的閾下強(qiáng)度循環(huán)載荷訓(xùn)練均未對(duì)纖維軟骨帶厚度產(chǎn)生影響。
LD-LI組在低強(qiáng)度的循環(huán)載荷運(yùn)動(dòng)的作用下,肌腱膠原排列平坦而緊密,而LD-RST組的膠原排列雖然已經(jīng)恢復(fù)膠原中原有的波紋形態(tài),但肌纖維的排列依舊呈現(xiàn)出紊亂。肌腱的重建與外界的力學(xué)變化具有緊密的聯(lián)系,當(dāng)肌腱受到的應(yīng)力作用增加時(shí),肌腱細(xì)胞大量合成現(xiàn)金屬蛋白酶對(duì)肌腱中的膠原纖維進(jìn)行水解[15],同時(shí)生成新的膠原纖維對(duì)組織進(jìn)行重建,而低強(qiáng)度的力學(xué)作用會(huì)促使組織釋放如VEGF、TGF-β等因子,加速損傷的修復(fù)進(jìn)行[16]。肌腱膠原纖維波紋排列的消失被認(rèn)為是肌腱在牽拉力作用下所產(chǎn)生結(jié)構(gòu)改變[12],LD-LI由于在四周后依舊受到持續(xù)低強(qiáng)度的力學(xué)牽拉作用,肌腱膠原排列雖然呈現(xiàn)平坦,但膠原的排列緊密;LD-RST組在沒有額外牽拉力的情況下,膠原纖維排列重現(xiàn)呈現(xiàn)出波紋狀,但膠原排列紊亂。由此可見,雖然閾下強(qiáng)度循環(huán)載荷運(yùn)動(dòng)加強(qiáng)不能影響髕腱結(jié)合部纖維軟骨帶厚度,但相對(duì)LD-RST組的膠原纖維結(jié)構(gòu),LD-LI組的膠原纖維重新形成了緊密的結(jié)構(gòu),因此我們認(rèn)為低強(qiáng)度循環(huán)載荷訓(xùn)練可以促進(jìn)肌腱的重建。
3.2 骨量與骨微細(xì)結(jié)構(gòu)變化
髕骨下緣作為髕腱通附著點(diǎn),承受著從髕腱傳遞而來的縱向牽拉力作用,由于長(zhǎng)期受到牽拉作用,髕尖區(qū)域是骨質(zhì)增生的好發(fā)區(qū)域,也是髕腱結(jié)合部損傷后期的常見癥狀之一,而低強(qiáng)度的牽拉力是否會(huì)引起髕骨下緣的骨質(zhì)增生尚不明確。通過Micro-CT計(jì)算結(jié)果顯示,LD-RST組、LD-LI組與對(duì)照組的髕骨體積(BV)與髕骨面積(BS)無(wú)顯著差異;骨小梁厚度(Tb.th)與骨小梁數(shù)量(Tb.N)結(jié)果無(wú)顯著差異。骨小梁是骨重建的重要指標(biāo),其變化是指示骨組織中成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞活性以及骨組織應(yīng)對(duì)外界力學(xué)條件變化的結(jié)果;骨體積和骨面積的變化是骨小梁重建的最終結(jié)果,是整個(gè)骨重建的宏觀體現(xiàn)[10]。在一般情況下,骨骼的成骨和破骨處于一個(gè)相對(duì)的穩(wěn)定的動(dòng)態(tài)平衡。而外界壓力和牽拉力的長(zhǎng)時(shí)間增高并超出閾值時(shí),這種平衡關(guān)系就會(huì)被打破。此時(shí),成骨細(xì)胞的活性大大超過破骨細(xì)胞,使骨小梁密度增高,骨量增加。在對(duì)大鼠骨小梁結(jié)構(gòu)與力學(xué)關(guān)系的研究中[17],懸吊大鼠進(jìn)行每天進(jìn)行1小時(shí)的站立可以改善骨小梁數(shù)量和厚度降低的情況,但與對(duì)照組依舊存在顯著差異,而且懸吊組和1小時(shí)站立組的骨小梁數(shù)量和密度沒有顯著差異。在前一階段的實(shí)驗(yàn)結(jié)果中顯示[13]在髕骨髕腱結(jié)合部損傷造模后,會(huì)出現(xiàn)局部骨質(zhì)增生的情況。而在本研究中,LD-RST和LD-LI組與對(duì)照組髕骨下緣區(qū)域的骨量和骨小梁結(jié)構(gòu)均沒有顯著差異。由此我們推測(cè),LD-RST組在進(jìn)行4周實(shí)驗(yàn)后,在后4周由于停止載荷訓(xùn)練,骨的微細(xì)結(jié)構(gòu)恢復(fù)到對(duì)照組水平;而在LD-LI組由于后4周處于損傷閾下強(qiáng)度訓(xùn)練,其載荷強(qiáng)度不足以維持骨小梁已經(jīng)重建的結(jié)構(gòu),且由于肌腱牽拉力的降低,導(dǎo)致已經(jīng)重建的骨微細(xì)結(jié)構(gòu)對(duì)外界力學(xué)變化進(jìn)行再次進(jìn)行重建,使得骨微細(xì)結(jié)構(gòu)恢復(fù)到接近對(duì)照組水平。髕腱結(jié)合部髕骨骨質(zhì)增生是骨腱結(jié)合部損傷后期常見的癥狀,而損傷閾下強(qiáng)度的循環(huán)載荷訓(xùn)練并沒有增加髕骨的骨密度以及骨小梁厚度和數(shù)量。由此我們認(rèn)為損傷閾下強(qiáng)度的循環(huán)載荷運(yùn)動(dòng)不會(huì)引起髕骨骨質(zhì)增生。
本研究通過4周循環(huán)載荷進(jìn)行損傷造模,通過組織學(xué)角度證明4周休息不能促進(jìn)髕腱結(jié)合部損傷的恢復(fù)。4周損傷閾下強(qiáng)度的循環(huán)載荷沒有加重?fù)p傷和髕骨增生,并且對(duì)肌腱的重建修復(fù)具有促進(jìn)作用。低強(qiáng)度訓(xùn)練對(duì)促進(jìn)髕腱結(jié)合部傷后早期恢復(fù)具有可行性,其效果有待進(jìn)一步研究。
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(編輯 孫君志)
The Effect of Low Intensity Cyclical Load on the Patella-patella Tendon Junction Injury and Patella Microstructure
WANG Bo, WANG Lin
Objective: This study was to compare the effects of rest and low intensity exercise on tendon patella-patella junction (PPTJ) injury and patella with a cyclic loading animal injury model. Experiment design: 12 adult female New Zealand white rabbits were randomly assigned to a four-week cyclical load group (LD-RST,n=6) and a 8-week cyclical load group (LD-LI, n=6). During the experiment in the first 4 weeks, the two groups of rabbits received cyclical load of 7.17N/S·24 hours. After four weeks, the experiment on the LD-RST group was stopped and the load on the LD-LI group was changed into 4.2N/S·24 hours. After 8 weeks, tissues were collected from all the rabbits. The collected tissues were first scanned by Micro-CT and treated by H&E staining and then used for histological analysis by the image acquisition system. Results: There was no significant difference between the LD-LI group and the LD-RST group in the thickness of the fibrocartilage by H&E staining, and the collagen array in the LD-LI group is tighter and more regular than the LD-RST group. There is no significant difference in patellar microstructure between the experimental group and the control group. Conclusion: 4 weeks of rest can not promote the recovery of bone tendon junction injury. 4 weeks of low intensity of cyclic loading did not aggravate the damage and patella hyperplasia, and can promote the tendon reconstruction and repair.
TendonPatella-patellaJunction(PPTJ)Injury;CyclicalLoad;TendonRepair
G804.5 Document code:A Article ID:1001-9154(2016)02-0088-05
國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(30871209)。
王博,北京體育大學(xué)在讀博士,研究方向:運(yùn)動(dòng)損傷與肌腱末端病,E-mail:wangbodc002@163.com。
北京體育大學(xué)運(yùn)動(dòng)康復(fù)系,北京 100084 Beijing Sports University, Beijing 100084
2015-10-29
2016-01-29
G804.5
A
1001-9154(2016)02-0088-05
成都體育學(xué)院學(xué)報(bào)2016年2期