植物源農(nóng)藥蓖麻堿微乳劑技術(shù)指標(biāo)的建立

吳瑩，李希

·炮制制劑·

植物源農(nóng)藥蓖麻堿微乳劑技術(shù)指標(biāo)的建立

吳瑩1，李希2

目的：建立植物源農(nóng)藥蓖麻堿微乳劑的技術(shù)指標(biāo)及測(cè)定方法。方法：參照中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《農(nóng)藥乳液穩(wěn)定性測(cè)定方法》GB/T1603-2001進(jìn)行。結(jié)果：蓖麻堿微乳劑技術(shù)指標(biāo)為：50%以上去離子水；pH為7.43；有效成分含量為100 ml∶1.69 g;透明溫度區(qū)域范圍為-5～52 ℃：稀釋倍數(shù)為200倍時(shí)穩(wěn)定性良好；持久起泡性測(cè)定1 min后泡沫體積為46 mL；經(jīng)時(shí)穩(wěn)定性0.5 a；低溫穩(wěn)定性(0±2) ℃下貯存7 d；熱貯穩(wěn)定性在(54±2) ℃下貯存14 d，有效成分分解率為3.7%。結(jié)論：該方法穩(wěn)定可靠，可為蓖麻堿微乳劑的質(zhì)量控制提供參考。

蓖麻堿微乳劑；質(zhì)量技術(shù)指標(biāo)；測(cè)定方法

近年來，我國(guó)農(nóng)藥研制發(fā)展迅速，懸浮劑、水乳劑、微乳劑、水分散性粒劑等水基化新劑型成為炙手可熱的研究和使用對(duì)象[1]。其中微乳劑在有效利用率、成本、操作環(huán)境、環(huán)境相容性、穩(wěn)定性、安全性等方面都有良好的優(yōu)勢(shì)[1,2]。

目前微乳劑在殺蟲領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用，但在植物源殺蟲劑領(lǐng)域卻鮮有報(bào)道[2,3]。蓖麻是生物農(nóng)藥研究具有潛力的植物之一，其主要?dú)⑾x成分蓖麻堿容易進(jìn)入昆蟲體內(nèi)，觸殺胃毒效果高[4]，制成的殺蟲劑配制方便，成本低廉，對(duì)作物植株還具有葉面追加有機(jī)肥源的功效[5,6]。因此，本試驗(yàn)選用蓖麻堿作為蓖麻植物源殺蟲劑研制的主要活性成分，建立了蓖麻堿微乳劑質(zhì)量技術(shù)指標(biāo)及其測(cè)定方法。

1 材料與儀器

1.1 材料

蓖麻堿微乳劑、蓖麻堿標(biāo)準(zhǔn)品（自制），蒸餾水，去離子水，自來水，碳酸鈣、氯化鎂六個(gè)結(jié)晶水（使用前在200 ℃下烘2 h，成都臨江化工廠），鹽酸（成都市科龍化工試劑廠），乙腈、甲醇（色譜純，美國(guó)fisher公司）

1.2 儀器

Agilent1260高效液相色譜儀（美國(guó)安捷倫）；KQ-300DE型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；BCD-228WBSS低溫冰箱(青島海爾股份有限公司)；XMTD-4000電熱恒溫水浴鍋（北京永光明醫(yī)療器械有限公司）；BT125D電子天平（北京賽多利斯儀器有限公司）；PHS-3C精密酸度計(jì)（上海精密儀器有限公司）；具塞量筒250 mL（分度值2 mL，0～250 mL,刻度線20～21.5 cm，250 mL刻度線到塞子底部4～6 cm）

2 方法與結(jié)果

2.1 水質(zhì)與用量的篩選

2.1.1 標(biāo)準(zhǔn)硬水的配制

稱取2.740 g碳酸鈣及0.276 g氧化鎂，用少量2 mol．L-1鹽酸溶解，在水浴上蒸干除去多余的鹽酸。然后用蒸餾水將殘留物完全轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中，并用蒸餾水稀釋至刻度，再取出10 mL該溶液于1000 mL的容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度即得。

2.1.2 水質(zhì)的篩選 微乳劑中含有大量的水，水的硬度會(huì)影響油珠粒子在水中的分散效果，使體系的穩(wěn)定性降低，因此要對(duì)水質(zhì)進(jìn)行篩選。取蓖麻堿微乳劑，分別加入蒸餾水、去離子水、自來水、標(biāo)準(zhǔn)硬水，觀察初始、常溫24 h、冷藏[(0±2) ℃，7 d]、熱貯[(54±2) ℃，14 d]體系的外觀性狀。結(jié)果見表1。

表1 水質(zhì)的篩選

結(jié)果表明，蒸餾水、去離子水、自來水對(duì)制劑外觀無明顯的影響。但在實(shí)際生產(chǎn)中自來水含有不同含量的金屬離子及其他未知因子，又鑒于成本和技術(shù)要求，選用生產(chǎn)設(shè)備簡(jiǎn)單易行、經(jīng)濟(jì)又穩(wěn)定的去離子水制備蓖麻堿微乳劑。

2.1.3 用量的篩選 農(nóng)藥微乳劑定義為水包油的微乳液，所以要達(dá)到一定的用水量才行。若用水量太少，則成為油包水的微乳液，對(duì)保護(hù)環(huán)境亦沒有意義。蓖麻堿微乳劑用水量篩選結(jié)果見表2。

表2 用水量的篩選

結(jié)果表明，當(dāng)用水量為50%以上時(shí)，蓖麻堿微乳劑可保持穩(wěn)定狀態(tài)，但具體用量還有待進(jìn)一步研究。

2.2 含量測(cè)定

蓖麻堿微乳劑的含量測(cè)定采用高效液相色譜法，方法如下：

標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備 精密稱取蓖麻堿標(biāo)準(zhǔn)品5.12 mg，置于10 mL量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，再量取5 mL置于10 mL量瓶中，加甲醇定容至刻度，作為標(biāo)準(zhǔn)品溶液(質(zhì)量濃度0.256 mg．mL-1)。

供試品溶液的制備 精密量取三批蓖麻堿微乳劑樣品各10 ml，加入50%甲醇40 mL，稱定重量，加熱回流2 h，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

色譜條件 色譜柱：AtlantisTMd C18柱（5 um,4.6×150 nm）；檢測(cè)波長(zhǎng)308 nm；流動(dòng)相[乙腈∶水（15∶85）]；柱溫25 ℃；進(jìn)樣量20 μL；流速1.0 ml．min-1。

標(biāo)準(zhǔn)品溶液、供試品溶液的色譜圖見下圖

圖1 標(biāo)準(zhǔn)品溶液色譜圖

圖2 供試品溶液色譜圖

通過測(cè)定得，蓖麻堿微乳劑樣品中蓖麻堿的平均含量為100 ml∶1.69 g，與前期試驗(yàn)所定標(biāo)示量（100 ml∶1.8 g）相對(duì)偏差為93.9%，滿足標(biāo)示量90%～110%的范圍要求。

2.3 PH測(cè)定

根據(jù)微乳劑的pH值6～9范圍內(nèi)，微乳劑熱貯分解率會(huì)相當(dāng)穩(wěn)定[11]，因此須對(duì)蓖麻堿微乳劑的樣品進(jìn)行pH值測(cè)定。取三批蓖麻堿微乳劑樣品用PH計(jì)測(cè)定后，平均值為7.43，合格。

2.4 透明溫度區(qū)域的測(cè)定

取三批蓖麻堿微乳劑樣品各10 mL于25 mL試管中，用攪拌棒上下攪動(dòng)，于冰浴上漸漸降溫，至出現(xiàn)混濁或凍結(jié)為止，此轉(zhuǎn)折點(diǎn)的溫度為透明溫度下限；再將試管置于水浴中，以20 ℃．min-1的速度慢慢加溫，記錄出現(xiàn)混濁時(shí)的溫度，即透明溫度上限。下限與上限之間的溫度范圍即為透明溫度區(qū)域。測(cè)定結(jié)果該制劑的平均透明溫度區(qū)域?yàn)?5～52 ℃，滿足0～40 ℃保持透明不變的標(biāo)準(zhǔn)要求，合格。

2.5 分散性與乳液穩(wěn)定性測(cè)定

在200 mL具塞量筒中，加入190 mL(25±1) ℃標(biāo)準(zhǔn)硬水，用10.0 mL移液管吸取三批蓖麻堿微乳劑樣品溶液各10.0 mL，在距離硬水液面高度約2 cm處自然滴入，觀察到微乳劑呈云霧狀自動(dòng)快速分散，得藍(lán)色透明乳狀液，表明微乳劑自動(dòng)分散性良好。然后蓋住瓶塞，上下顛倒手工搖動(dòng)15次置于(25±1) ℃恒溫水浴鍋中，靜置60 min，觀察體系均為藍(lán)色透明乳狀液，沒有沉淀或浮油，并能與水以任意比例混合，說明該制劑穩(wěn)定性良好。

2.6 持久起泡性

向量筒內(nèi)加標(biāo)準(zhǔn)硬水（15～25 ℃）至180 mL刻度線處，置量筒于天平上，稱入三批樣品各1.0 g，分別加硬水至距離量筒塞底部9±0.1 cm的刻度線處，蓋上塞子，以量筒中部為中心，上下180度顛倒30次（每次2 s）。垂直放在試驗(yàn)臺(tái)上，靜置；記在1 min±10 s時(shí)的泡沫體積（精確至2 mL）。重復(fù)測(cè)定3次，取其算術(shù)平均值，作為該樣品的持久起泡性測(cè)定結(jié)果。測(cè)定得該制劑的泡沫平均體積為46 mL，滿足泡沫體積應(yīng)≤60 mL的要求。

2.7 經(jīng)時(shí)穩(wěn)定性試驗(yàn)

取三批樣品各10 mL裝安剖瓶密封后，于室溫條件下保存半年，觀察制劑外觀隨時(shí)間的變化情況，并且測(cè)試產(chǎn)品的各項(xiàng)指標(biāo)。結(jié)果表明，蓖麻堿微乳劑經(jīng)時(shí)穩(wěn)定性良好。

2.8 低溫穩(wěn)定性試驗(yàn)

取三批樣品各10 mL，裝在安剖瓶中密封后，置于(0±2) ℃冰箱中冷藏，7 d后取出，在室溫下放置，觀察制劑外觀。結(jié)果表明，蓖麻堿微乳劑具有良好的低溫穩(wěn)定性。

2.9 熱貯穩(wěn)定性試驗(yàn)

取三批樣品各10 mL，裝入安剖瓶中密封，在(54±2) ℃的恒溫箱里貯存14 d，檢測(cè)有效成分的分解率，以及制劑的外觀。外觀要求保持均相透明，若出現(xiàn)分層，于室溫震蕩后能恢復(fù)原狀；有效成分的分解率應(yīng)≤5%。結(jié)果表明，蓖麻堿微乳劑熱貯穩(wěn)定性良好，分解率為3.7%。

以上結(jié)果均見表3。

表3 蓖麻堿微乳劑的技術(shù)指標(biāo)

透明溫度區(qū)域（℃） -5～52 0～40 合格乳液穩(wěn)定性能與水以任意比例混溶，200倍稀釋液仍為透明均相液體，24 h內(nèi)保持透明能與水以任意比互溶，釋液為透明均相液體，3 h內(nèi)保持透明合格持久起泡性 1 min后泡沫體積為46 mL 1 min后泡沫體積應(yīng)≤60 mL合格經(jīng)時(shí)穩(wěn)定性透明，無結(jié)晶、渾濁、沉淀透明，無結(jié)晶、渾濁、沉淀合格低溫穩(wěn)定性 渾濁，常溫下自動(dòng)恢復(fù)透明渾濁，常溫下自動(dòng)恢復(fù)透明合格熱貯穩(wěn)定性分層，室溫振搖后恢復(fù)原狀，分解率3.7%均相透明，出現(xiàn)分層，室溫震蕩后能恢復(fù)原狀；分解率≤5%合格

3 結(jié)論

與傳統(tǒng)化學(xué)農(nóng)藥相比，植物源農(nóng)藥具有環(huán)境相容性好、生物活性多樣、對(duì)高等動(dòng)物及害蟲天敵安全、不易使有害生物產(chǎn)生抗藥性等諸多優(yōu)點(diǎn)[7-11]。本試驗(yàn)以植物源農(nóng)藥蓖麻堿微乳劑為研究對(duì)象，建立了其技術(shù)指標(biāo)及測(cè)定方法，為蓖麻堿微乳劑的質(zhì)量控制提供了參考。通過實(shí)驗(yàn)得出，蓖麻堿微乳劑的技術(shù)指標(biāo)為：50%以上去離子水；有效成分含量為100 ml∶1.69 g；pH為7.43；透明溫度區(qū)域范圍為-5～52 ℃：稀釋倍數(shù)為200倍時(shí)穩(wěn)定性良好；持久起泡性測(cè)試1 min后泡沫體積為46 mL；經(jīng)時(shí)穩(wěn)定性

0.5 a；低溫穩(wěn)定性(0±2) ℃下貯存7 d；熱貯穩(wěn)定性在(54±2) ℃下貯存14 d，有效成分分解率為3.7%。

實(shí)驗(yàn)過程中，經(jīng)時(shí)穩(wěn)定性試驗(yàn)參照中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《農(nóng)藥乳液穩(wěn)定性測(cè)定方法》至少應(yīng)放置2年，但由于時(shí)間關(guān)系，本試驗(yàn)只放置了半年，因此需要進(jìn)一步的研究。

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(責(zé)任編輯：傅舒)

Establishment of technical indicators for botanical pesticides ricinine microemulsion/

WU Ying1, LI Xi2//(1.School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 611137, Sichuan; 2.Sichuan Academy of Traditional Chinese Medicine sciences, Institute of TCM, Chengdu 610031, Sichuan)

Objective: To establish technical indicators and determination method of botanical pesticides ricinine microemulsion. Method: The study was carried out according to national standards of People's Republic of China "Determination of emulsion stability of pesticide" GB/T1603-2001. Result: The technical indicators of ricinine microemulsion were as follows: deionized water content more than 50%; pH 7.43; effective composition content was 100 mL∶1.69 g; transparent at temperatures -5 ～ 52 ℃; emulsion stability dilution rate was 1∶200; bubble volume of persistent foaming determination was 46 mL after 1 min; stable for 0.5 years; stable for 7 days at low temperature (0±2) ℃; high temperature stability at (54±2) ℃ for l4 days with active ingredient decomposition of 3.7%. Conclusion: This method is stable and reliable, and can provide a reference for the quality control of ricinine microemulsion.

Ricinine microemulsion; quality of technical indicators; determination methods

R 283.3

A

1674-926X(2016)03-009-04

1.成都中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院，四川 成都 611137

2. 四川省中醫(yī)藥科學(xué)院中醫(yī)研究所，四川 成都 610031

吳瑩（1989-），女，在讀碩士，主要研究方向：中藥新制劑、新劑型與新技術(shù)

Tel:18384258516 Email:1127059921@qq.com

李希（1969-），女，碩士研究生導(dǎo)師，研究員，主任中藥師，主要從事中藥新制劑、新劑型 與新技術(shù)方向研究

Tel:028-68890148，Email:1836820767@qq.com

2015-7-20