3種不同產(chǎn)地靈芝子實體粗多糖體外抗氧化活性比較研究

陳 杰,董 揚,魯吉珂,陳 強,耿戰(zhàn)輝,張黎明,郝利民,*,賈士儒,*

(1.天津科技大學,工業(yè)發(fā)酵微生物教育部重點實驗室,天津 300457;2.總后勤部軍需裝備研究所,北京 100010;3.鄭州大學生命科學學院,河南鄭州 450001)

?

3種不同產(chǎn)地靈芝子實體粗多糖體外抗氧化活性比較研究

陳 杰1,董 揚1,魯吉珂2,3,陳 強2,耿戰(zhàn)輝2,張黎明1,郝利民1,*,賈士儒1,*

(1.天津科技大學,工業(yè)發(fā)酵微生物教育部重點實驗室,天津 300457;2.總后勤部軍需裝備研究所,北京 100010;3.鄭州大學生命科學學院,河南鄭州 450001)

采用2,2′-聯(lián)氮基雙(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二銨鹽(ABTS)自由基清除法、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除法、羥基自由基清除法和鐵氰化鉀法4種方法,分別對3種不同產(chǎn)地(安徽金寨、吉林通化、吉林蛟河)靈芝子實體粗多糖的體外抗氧化活性進行評價。結果表明,3種靈芝子實體粗多糖均具有抗氧化能力。安徽金寨靈芝子實體粗多糖對ABTS自由基、DPPH自由基的清除能力最強,其對應EC50值分別為1.50 mg/mL和2.09 mg/mL,同時也具有最強的總還原力;吉林通化靈芝子實體粗多糖對羥基自由基的清除能力最強,其EC50值是2.13 mg/mL;吉林蛟河靈芝子實體粗多糖的體外抗氧化活性均最低。因此,不同產(chǎn)地靈芝子實體粗多糖的抗氧化活性不同。

靈芝子實體,粗多糖,抗氧化活性,自由基

靈芝(Ganodermalucidum)是擔子菌綱多孔菌科靈芝屬真菌,在中國古稱瑞草,也叫長生草,仙草、靈草等,是我國傳統(tǒng)的扶正固本、滋補強壯的名貴中藥[1]。靈芝的主要活性組份有多糖類、三萜類、多肽類和核苷類等。多糖是由至少10個以上的單糖結合組成的聚合糖高分子碳水化合物,是生命有機體的重要組成部分。靈芝多糖是靈芝的主要活性成份,具有抗腫瘤、抗炎[2]、抗氧化[3]、調(diào)節(jié)機體免疫[4]等多種生物活性。近年來,靈芝多糖的抗氧化活性已有廣泛的研究。游麗君等[5]比較了傳統(tǒng)熱水提取法、超聲波法、超聲波結合纖維素酶法和超聲波結合胰酶法四種方法提取的靈芝多糖的抗氧化活性差異,結果表明超聲波結合胰酶法提取的靈芝多糖具有較好的抗氧化活性。游育紅等[6]研究了靈芝多糖對人臍靜脈內(nèi)皮細胞株ECV304氧化損傷的保護作用,結果顯示靈芝多糖可減少氧自由基對細胞器的損傷,能很好地抑制細胞凋亡,證實了靈芝多糖具有保護細胞氧化損傷的作用。盡管已有研究表明靈芝多糖具有良好的抗氧化作用,但對不同產(chǎn)地靈芝子實體多糖體外抗氧化活性的比較研究相對較少。因此,從不同產(chǎn)地的靈芝子實體中提取多糖,并對其體外抗氧化活性進行比較,可為不同產(chǎn)地靈芝多糖功能食品的進一步開發(fā)提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

靈芝子實體 均為人工栽培的赤芝,分別采自安徽金寨靈芝種植基地、吉林通化靈芝種植基地、吉林蛟河靈芝種植基地。

葡萄糖、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、水楊酸 天津市北方天醫(yī)化學試劑廠;過硫酸鉀、30%H2O2、三氯乙酸、2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)、維生素C(VC) 國藥集團化學試劑有限公司;無水乙醇 天津市四通化工廠;鐵氰化鉀 天津大茂化學試劑廠;氯化鐵 天津市雙船化學試劑廠;硫酸亞鐵 天津市新欣化工廠;苯酚 北京鼎國生物有限責任公司;2,2′-聯(lián)氮基雙(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二銨鹽(ABTS)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH) 美國Sigma-Aldirch公司。以上試劑均為分析純。

UVmini-1240型紫外可見分光光度計 島津國際貿(mào)易(上海)有限公司;JA12002型電子天平 上海精科天平儀器廠;RE-3000型旋轉蒸發(fā)儀 上海亞榮生化儀器廠;QL-902型漩渦振蕩器 海門市其林貝爾儀器制造有限公司;TF-J型冷凍干燥機 北京諾比鄰電子信息技術有限公司;TDA-8002型恒溫水浴鍋 天津市中環(huán)實驗電爐有限公司;SBS Z100型數(shù)控計滴自動部份收集器 上海滬西儀器總廠;SH-D(Ⅲ)型真空泵 河南予華儀器有限公司;WND-200型高速中藥粉碎機 浙江省蘭溪市偉能達電器有限公司;Rapid N CUBE型杜馬斯燃燒定氮儀 德國Elementar公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 標準曲線的繪制 以葡萄糖為標準品,采用苯酚硫酸法繪制標準曲線[7]。

1.2.2 多糖得率的測定 采用付立忠[8]的方法提取靈芝子實體粗多糖:靈芝子實體在60 ℃下烘干至恒重,粉碎,過20目篩。準確稱取0.5 g樣品,加入35 mL蒸餾水,沸水浴加熱3 h,冷卻至室溫后離心,收集上清液備用,殘渣按上述方法進行二次提取。合并兩次上清液,準確吸取5.0 mL置于50 mL離心管中,加入20 mL無水乙醇,混勻后在4 ℃下靜置約6 h。然后4000 r/min離心20 min,棄去上清液,取沉淀并用無水乙醇潤洗3次。再將沉淀用水充分溶解,定容到25 mL。吸取2.0 mL樣品,加入6%苯酚1.0 mL,混勻后加入5.0 mL濃硫酸,拌勻。室溫放置5 min,然后在沸水浴中保溫15 min,用自來水冷卻5 min,混勻后于波長490 nm處測定吸光度。根據(jù)苯酚硫酸法標準曲線,先計算出提取液中的多糖質量濃度,然后按式(1)計算出靈芝子實體的多糖得率。

多糖得率(%)=多糖質量濃度×體積×稀釋倍數(shù)/原料質量×100

式(1)

1.2.3 粗多糖中總糖含量的測定 分別稱取3種靈芝子實體粗多糖0.005 g,加適量蒸餾水溶解,再定容到100 mL,搖勻,即得供試品溶液。吸取2.0 mL樣品,按照1.2.2的方法進行苯酚硫酸法測定。根據(jù)標準曲線計算出溶液的多糖質量濃度,然后由式(2)計算出粗多糖中的總糖含量。

總糖含量(%)=多糖質量濃度×體積×稀釋倍數(shù)/粗多糖質量×100

式(2)

1.2.4 粗多糖中蛋白質含量的測定 采用杜馬斯燃燒法[9]測定靈芝子實體粗多糖中蛋白質的含量,方法如下:分別稱取3種靈芝子實體粗多糖約0.25 g,用錫箔紙包好,制成錫箔藥片,置于自動進樣盤里。將杜馬斯定氮儀設置成如下條件:一級燃燒管溫度為960 ℃;二級燃燒管溫度為800 ℃;還原管溫度為815 ℃。樣品進入儀器中,先在純氧條件下充分燃燒生成氮氧化合物,然后氮氧化合物在還原管中被還原為氮氣,進入TC檢測器中檢測。根據(jù)儀器檢測得出測試樣品的總氮含量,按式(3)計算出粗多糖中的蛋白質含量。

蛋白質含量(%)=總氮含量×6.25

式(3)

1.2.5 粗多糖中水分含量的測定 分別稱取3種靈芝子實體粗多糖約2.0 g,按照GB/T 5009.3-2010《食品中水分的測定》中的減壓干燥法測定[10]。

1.2.6 粗多糖體外抗氧化活性的測定 將提取的靈芝子實體粗多糖凍干樣品分別配制成1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mg/mL的水溶液。陽性對照VC和BHT作同樣處理。

1.2.6.1 ABTS自由基清除能力測定 ABTS經(jīng)過硫酸鉀氧化后會生成穩(wěn)定的藍綠色陽離子自由基ABTS+·,其在734 nm處有最大吸收。自由基清除劑與ABTS+·發(fā)生反應使反應體系褪色,可根據(jù)褪色程度判斷其抗氧化能力[11]。

步驟如下:將相同體積的7 mmol/L的ABTS和 2.45 mmol/L過硫酸鉀混合,避光反應 12～16 h,得到ABTS+·溶液。用水稀釋該溶液使其在734 nm下的吸光度值在(0.70±0.02)。試管中加入 0.5 mL靈芝子實體粗多糖溶液,然后加ABTS+·溶液定容到10 mL,搖勻,在室溫下放置6 min,于734 nm處測吸光度。以VC和BHT作為陽性對照。按式(4)計算ABTS自由基清除率:

式(4)

式中:A0-空白對照吸光度(0.5mL水,加ABTS+·溶液定容到10mL);Ai-樣品組吸光度(0.5mL樣品,加ABTS+·溶液定容到10mL);Aj-樣品本底吸光度(0.5mL樣品,加水定容到10mL)。

1.2.6.2DPPH自由基清除能力測定DPPH自由基是一種穩(wěn)定的以氮為中心的質子自由基,可用來測定抗氧化劑的抗氧化能力。DPPH自由基乙醇溶液呈紫色,在517nm處有強烈吸收。自由基清除劑能提高電子與DPPH的孤對電子配對,使其溶液褪色,其褪色程度與其接受的電子呈定量關系,可根據(jù)褪色程度判斷抗氧化能力[12]。

步驟如下:試管中加入1.0mL0.6mmol/L的DPPH自由基乙醇溶液和1.0mL靈芝子實體粗多糖溶液,再用60%乙醇定容至10mL,混勻后避光反應30min,于517nm處測吸光度。以VC和BHT作為陽性對照。按式(5)計算DPPH自由基清除率:

式(5)

式中:A0-空白對照吸光度(60%乙醇代替樣品溶液);Ai-樣品組吸光度;Aj-樣品本底吸光度(無水乙醇代替DPPH自由基溶液)。

1.2.6.3 羥基自由基清除能力測定 Fe2+和H2O2混合后會發(fā)生Fenton反應,產(chǎn)生·OH。當加入水楊酸后,能有效地捕捉·OH產(chǎn)生紫紅色產(chǎn)物。該產(chǎn)物在510 nm處有強吸收,自由基清除劑的加入會與水楊酸競爭,從而使有色產(chǎn)物的生成量減少,采用固定反應時間法,在510 nm處測定反應液吸光度,便能確定被測物對羥基自由基的清除率[13]。

表1 靈芝子實體的粗多糖得率及其粗多糖組成(%)Table 1 Extraction yield and the composition of crude polysaccharide of three Ganoderma lucidum(%)

步驟如下:試管中依次加入9.0 mmol/L水楊酸-乙醇溶液1.0 mL、9.0 mmol/L FeSO4溶液1.0 mL、靈芝子實體粗多糖溶液1.0 mL。之后再加8.8 mmol/L H2O2溶液1.0 mL啟動反應,37 ℃水浴反應30 min,在510 nm處測吸光度。以VC和BHT作為陽性對照。按式(6)計算羥基自由基清除率:

式(6)

式中:A0-空白對照吸光度(蒸餾水代替樣品溶液);Ai-樣品組吸光度值;Aj-樣品本底吸光度值(蒸餾水代替H2O2)。

1.2.6.4 總還原力測定 赤血鹽(K3Fe(CN)6)先被還原劑還原為黃血鹽(K4Fe(CN)6),然后黃血鹽與Fe3+反應,生成普魯士藍。普魯士藍的生成量可以通過測定700 nm處吸光度來表征,吸光度越大,普魯士藍的生成量越多,表明還原劑的總還原力越大?？寡趸瘎┦峭ㄟ^給出電子發(fā)揮總還原力進而達到清除自由基的目的,總還原力越強,其抗氧化能力就越強。因此,可以通過測定總還原力來表征其抗氧化能力[14]。

步驟如下:試管中依次加入靈芝子實體粗多糖溶液2.5 mL、鐵氰化鉀溶液(1.0%,w/v)2.5 mL、0.2 mol/L磷酸鹽緩沖液(pH6.6)2.5 mL,混合均勻。然后將混合液50 ℃水浴反應20 min,接著向混合液中加入2.5 mL的三氯乙酸溶液(10%,w/v),5000 r/min離心10 min后取5.0 mL上清液,再加入0.5 mL的三氯化鐵溶液(0.1%,w/v)在700 nm處測吸光度。以VC和BHT作為陽性對照。按式(7)計算總還原力:

總還原力=Ai-Aj

式(7)

式中:Ai-樣品組吸光度值;Aj-樣品本底吸光度值(蒸餾水代替三氯化鐵溶液)。

1.2.7 統(tǒng)計分析方法 實驗重復3次,實驗結果用X±SD表示,實驗數(shù)據(jù)采用SPSS11.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。

2 結果與分析

2.1 標準曲線的繪制

以葡萄糖為標準品,繪制苯酚硫酸法標準曲線,得線性回歸方程:A=0.0102C-0.0044,r=0.9988。式中,A為吸光度,C為葡萄糖質量濃度/(mg/mL),吸光度和葡萄糖質量濃度在0～90 mg/mL范圍內(nèi)有良好的線性關系。

2.2 靈芝子實體的粗多糖得率及其組成

靈芝多糖是靈芝中的主要活性物質,也是靈芝產(chǎn)品質量控制的重要指標[15]。3種靈芝子實體的粗多糖得率及其組成結果見表1。由表1可知,在實驗提取條件下,安徽金寨靈芝子實體的粗多糖得率(1.55%)高于另外兩種靈芝子實體,吉林通化靈芝子實體的粗多糖得率最低,為1.38%。3種靈芝子實體粗多糖的總糖含量比較接近,在80%左右。水提粗多糖中常含有部分游離蛋白質和糖蛋白,蛋白質含量也是粗多糖的一個重要檢測指標[16]。由于本研究中沒有除蛋白步驟,3種靈芝子實體粗多糖中均含有一定的蛋白質,但含量均不高,在5%左右。此外,3種靈芝子實體粗多糖均含有一定的水分,其中吉林蛟河靈芝子實體粗多糖的水分含量最高(10.57%)。

2.3 靈芝子實體粗多糖體外抗氧化活性

2.3.1 ABTS自由基清除能力 不同濃度下靈芝子實體粗多糖對ABTS自由基的清除率如圖1所示。由圖1可知,3種靈芝子實體粗多糖對ABTS自由基都具有清除作用,且其清除能力呈現(xiàn)一定的劑量依賴性。在濃度為2 mg/mL時,安徽金寨靈芝子實體粗多糖、吉林通化靈芝子實體粗多糖對ABTS自由基的清除率都達到50%以上,而吉林蛟河靈芝子實體粗多糖的清除率為29.14%。在濃度為5 mg/mL時,安徽金寨靈芝子實體粗多糖、吉林通化靈芝子實體粗多糖對ABTS自由基的清除率都接近100%,而吉林蛟河靈芝子實體粗多糖的清除率為70.56%。在所測濃度范圍內(nèi),VC和BHT對ABTS自由基的清除率都接近100%,整體上高于3種靈芝子實體粗多糖。安徽金寨靈芝子實體粗多糖對ABTS自由基清除能力最強,吉林蛟河靈芝子實體粗多糖最弱(圖1)。

圖1 靈芝子實體粗多糖對ABTS自由基的清除作用(n=3)Fig.1 ABTS radical scavenging activity of crude polysaccharides of three Ganoderma lucidum(n=3)

2.3.2 DPPH自由基清除能力 不同濃度下靈芝子實體粗多糖對DPPH自由基的清除率如圖2所示。由圖2可知,3種靈芝子實體粗多糖對DPPH自由基均具有清除作用,且其清除能力呈現(xiàn)一定的劑量依賴性。在濃度為1～3 mg/mL范圍內(nèi),3種靈芝子實體粗多糖的清除率接近;在濃度為5 mg/mL時,吉林通化靈芝子實體粗多糖的清除能力高于另外兩種靈芝子實體粗多糖。在所測濃度范圍內(nèi),VC和BHT對DPPH自由基的清除率基本上保持不變,高于3種靈芝子實體粗多糖。

圖2 靈芝子實體粗多糖對DPPH自由基的清除作用(n=3)Fig.2 DPPH radical scavenging activity of crude polysaccharides of three Ganoderma lucidum(n=3)

2.3.3 羥基自由基清除能力 不同濃度下靈芝子實體粗多糖對羥基自由基的清除率如圖3所示。由圖3可知,在相同濃度下,對羥基自由基清除能力由強到弱的順序依次是吉林通化靈芝子實體粗多糖、安徽金寨靈芝子實體粗多糖、吉林蛟河靈芝子實體粗多糖。在所測濃度范圍內(nèi),VC對羥基自由基的清除率接近100%,而BHT對羥基自由基的清除率最低。

圖3 靈芝子實體粗多糖對羥基自由基的清除作用(n=3)Fig.3 Hydroxyl radical scavenging activity of crude polysaccharides of three Ganoderma lucidum(n=3)

2.3.4 總還原力 不同濃度下靈芝子實體粗多糖總還原力如圖4所示。由圖4可知,粗多糖濃度在1～4 mg/mL范圍內(nèi)時,3種靈芝子實體粗多糖的總還原力隨濃度提高而增加;但當粗多糖濃度高于4 mg/mL后,其隨濃度提高增速減緩。VC和BHT的總還原力相近,高于3種靈芝子實體粗多糖。在5 mg/mL時,安徽金寨靈芝子實體粗多糖和吉林通化靈芝子實體粗多糖的總還原力與VC、BHT相近,分別為2.56和2.55,均高于吉林蛟河靈芝子實體粗多糖。在相同濃度下,3種粗多糖總還原力由高到低的順序依次是安徽金寨靈芝子實體粗多糖、吉林通化靈芝子實體粗多糖、吉林蛟河靈芝子實體粗多糖。

圖4 靈芝子實體粗多糖的總還原力(n=3)Fig.4 Total reducing power of crude polysaccharides of three Ganoderma lucidum(n=3)

2.3.5 三種抗氧化指標的EC50值比較 將3種靈芝子實體粗多糖對ABTS自由基、DPPH自由基和羥基自由基3種自由基的抗氧化曲線分別進行曲線擬合后得到各樣品各指標的EC50值,結果見表2。

表2 靈芝子實體粗多糖抗氧化活性指標的EC50值Table 2 EC50 index of antioxidant activities of crude polysaccharides of three Ganoderma lucidum

ABTS自由基清除能力比較:安徽金寨靈芝子實體粗多糖的EC50值最小,為1.50 mg/mL,對ABTS自由基的清除能力最強,然后依次為吉林通化靈芝子實體粗多糖、吉林蛟河靈芝子實體粗多糖。

DPPH自由基清除能力比較:3種靈芝子實體粗多糖的EC50值分別為2.09 mg/mL(安徽金寨)、2.24 mg/mL(吉林通化)、2.54 mg/mL(吉林蛟河),說明3種靈芝子實體粗多糖對DPPH自由基的清除能力不同。真菌多糖清除DPPH自由基的研究結果顯示,田野蘑菇、羅馬尼斯蘑菇、白林地菇、林地蘑菇、雙孢蘑菇粗多糖清除DPPH自由基的EC50值分別為15.85、6.22、6.39、5.37、9.61 mg/mL[17],均遠高于這3種靈芝子實體粗多糖的EC50值。因此靈芝子實體粗多糖對DPPH自由基的清除能力可能優(yōu)于上述幾種食用菌粗多糖。此外,3種靈芝子實體粗多糖對DPPH自由基清除能力還優(yōu)于松乳菇、灰褐紋口蘑提取物[17]。

羥基自由基清除能力比較:3種靈芝子實體粗多糖的EC50值依次為2.13 mg/mL(吉林通化)、2.55 mg/mL(安徽金寨)、3.05 mg/mL(吉林蛟河)。王峰等[18]測定了金頂側耳、大球蓋菇、姬菇、柳松菇四種食用菌粗多糖的羥基自由基清除率,其EC50值分別是2.36、3.71、2.60、3.95 mg/mL,這3種靈芝子實體粗多糖對羥基自由基的清除能力與上述幾種食用菌粗多糖接近。

3 結論

3種靈芝子實體粗多糖得率比較接近,其中安徽金寨靈芝子實體粗多糖得率為1.55%,略高于其它2種靈芝子實體。3種靈芝子實體粗多糖的總糖含量均在80%左右,蛋白質的含量均在5%左右,水分含量均在10%左右。粗多糖中的主要成分是多糖,蛋白質的含量較低。

另外,3種靈芝子實體粗多糖均具有抗氧化活性。安徽金寨靈芝子實體粗多糖清除ABTS自由基、DPPH自由基和總還原力優(yōu)于其他2種靈芝子實體粗多糖;吉林通化靈芝子實體粗多糖對羥基自由基的清除能力最強;吉林蛟河靈芝子實體粗多糖的抗氧化活性均最低。綜合比較,安徽金寨靈芝子實體粗多糖的體外抗氧化活性最強。

[1]林志彬.靈芝的現(xiàn)代研究[M].北京:北京醫(yī)科大學、中國協(xié)和醫(yī)科大學聯(lián)合出版社,1996:145-146.

[2]Joseph S,Sabulal B,George V,et al. Antitumor and anti-inflammatory activities of polysaccharides isolated fromGanodermalucidum[J]. Acta Pharmaceutica,2011,61(3):335-342.

[3]Chen Y,Xie M Y,Nie S P,et al. Purification,composition analysis and antioxidant activity of a polysaccharide from the

fruiting bodies of Ganoderma atrum[J]. Food Chemistry,2008,107(1):231-241.

[4]Wang Y Y,Khoo K H,Chen S T,et al. Studies on the immune-modulating and antitumor activities ofGanodermalucidum(Reishi)polysaccharides:Functional and proteomic analyses of a fucose-containing glycoprotein fraction responsible for the activities[J]. Bioorganic and Medicinal Chemistry,2002,10(4):1057-1062.

[5]游麗君,馮夢瑩,劉鈞發(fā),等.不同提取方法對靈芝多糖性質的影響研究[J].現(xiàn)代食品科技,2013,29(6):1207-1212.

[6]游育紅,林志彬.靈芝多糖肽對ECV304細胞氧化損傷的保護作用[J].中國藥理學通報,2007,23(11):1510-1513.

[7]魏兆軍,胡海梅,柏曉輝,等.桑葚多糖提取工藝的優(yōu)化[J].食品科學,2007,28(11):261-264.

[8]付立忠,吳學謙,李明焱,等.靈芝品種子實體多糖和三萜含量分析與評價[J].中國食用菌,2009,28(4):38-40.

[9]王欽權,翁佳妍,黃誠,等.凱氏定氮法和杜馬斯燃燒法測定食品中蛋白質含量的比較研究[J].輕工科技,2014,184(3):13-14.

[10]中華人民共和國衛(wèi)生部.GB 5009.3-2010食品中水分的測定[S].北京:中國標準出版社,2010:1-6.

[11]Miller N J,Rice-Evans C A. A novel method for mearing antioxidant capacity and its application to monitoring the antioxidant status in premature neonates[J]. Clinical Science,1993,84:407-412.

[12]聶少平,謝明勇,羅珍.用清除有機自由基DPPH法評價茶葉多糖的抗氧化活性[J].食品科學,2006,27(3):34-36.

[13]曾軍,石國榮.天然產(chǎn)物抗氧化活性的測定方法和原理[J].安徽農(nóng)學通報,2008,14(22):35.

[14]Yen G C,Duh P D,Tsai H L. Antioxidant and pro-oxidant properties of ascorbic acid and gallic acid[J]. Food Chemistry,2002,79(3):307-313.

[15]黃小琴,鄭林用,彭衛(wèi)紅.靈芝多糖與三萜類的提取純化工藝研究進展[J].食用菌學報,2005,12(3):56-62.

[16]張安強,張勁松,潘迎捷.食藥用菌多糖的提取、分離純化與結構分析[J].食用菌學報,2005,12(2):62-68.

[17]Lillian B,Soraia F,Paula B,et al. Antioxidant activity of Agaricussp. mushrooms by chemical,biochemical and electrochemical assays[J]. Food Chemistry,2008,111:61-66.

[18]王峰,陶明煊,程光宇,等.4種食用菌提取物自由基清除作用及降血糖作用的研究[J].食品科學,2009,30(21):343-347.

Study oninvitroantioxidant activities of crude polysaccharides of threeGanodermalucidumfrom different origins

CHEN Jie1,DONG Yang1,LU Ji-ke2,3,CHEN Qiang2,GENG Zhan-hui2,ZHANG Li-ming1,HAO Li-min1,2,*,JIA Shi-ru1,*

(1.Key Laboratory of Industrial Fermentation Microbiology,Ministry of education,Tianjin University of Science and Technology,Tianjin 300457,China;2.The Quartermaster Equipment Institute of General Logistics Department of People’s Liberation Army,Beijing 100010,China;3.School of Life Sciences,Zhengzhou University,Zhengzhou 450001,China)

Inordertocomparethein vitroantioxidantactivitiesofcrudepolysaccharidesofthreeGanoderma lucidumfromdifferentorigins,ABTSradicalscavengingactivities,DPPHradicalscavengingactivities,hydroxylradicalscavengingactivitiesandK3Fe(CN)6reductionmethodswereemployed.Theresultsshowedthatthethreedifferentcrudepolysaccharideshadcertainabilitiesofantioxidantactivities.ThecrudepolysaccharideextractedfromJinZhai(AnhuiProvince)showedthestrongestcapacityforscavengingABTSandDPPHradical(EC50of1.50mg/mLand2.09mg/mL)andtotalreducingactivity.ThecrudepolysaccharideobtainedfromTongHua(JilinProvince)showedthemostpotentcapacityforscavenginghydroxylradicalwithEC50valueof2.13mg/mL.TheantioxidantcapacityofthecrudepolysaccharidefromJiaoHe(JilinProvince)wasthelowestamongthreecrudepolysaccharides.Therefore,theantioxidantactivitiesofcrudepolysaccharidesofGanoderma lucidumfromdifferentoriginsweredifferent.

Ganoderma lucidum;crudepolysaccharides;antioxidantproperty;freeradical

2016-04-21

陳杰(1990-)，男，碩士研究生，研究方向:發(fā)酵工程原理,E-mail:chenjie19900326@126.com。

*通訊作者:郝利民(1969-)，男，博士，教授，高工，研究方向:軍用功能食品與食品生物技術，E-mail:hlm2005@163.com。 賈士儒(1954-)，男，博士，教授，研究方向:生物反應工程,E-mail:jiashiru@tust.edu.cn。

TS201.2

A

1002-0306(2016)21-0100-05

10.13386/j.issn1002-0306.2016.21.011