易氧化物檢測法在葡萄糖注射液設(shè)備清潔驗(yàn)證中的應(yīng)用

饒小平，劉建清，周承芳，柯志鴻，陳錦珊（解放軍第175醫(yī)院/廈門大學(xué)附屬東南醫(yī)院制劑科，福建漳州363000）

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易氧化物檢測法在葡萄糖注射液設(shè)備清潔驗(yàn)證中的應(yīng)用

饒小平＊，劉建清，周承芳，柯志鴻，陳錦珊#（解放軍第175醫(yī)院/廈門大學(xué)附屬東南醫(yī)院制劑科，福建漳州363000）

目的：探討易氧化物檢測法在葡萄糖注射液設(shè)備清潔驗(yàn)證中應(yīng)用的可行性。方法：建立淋洗水法清潔葡萄糖注射液生產(chǎn)設(shè)備的清潔規(guī)程，采用0.02 mol/L高錳酸鉀滴定液檢測清潔驗(yàn)證樣品中的易氧化物，并與總有機(jī)碳測定結(jié)果進(jìn)行比對。結(jié)果：葡萄糖殘留最低限度標(biāo)準(zhǔn)為10 mg/L；易氧化物檢測法檢測限為3 mg/L，在質(zhì)量濃度5～30 mg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r＝0.999 5）；0.02 mol/L高錳酸鉀滴定液消耗量不得大于0.35 ml，總有機(jī)碳最低限度標(biāo)準(zhǔn)為4 mg/L。批量生產(chǎn)后4次驗(yàn)證結(jié)果表明，各取樣點(diǎn)最終淋洗水高錳酸鉀滴定液消耗量均符合規(guī)定，總有機(jī)碳測定結(jié)果亦符合要求。結(jié)論：易氧化物檢測法操作簡便、成本低，可用于葡萄糖注射液設(shè)備的清潔驗(yàn)證，也可為其他含碳有機(jī)化合物生產(chǎn)設(shè)備的清潔驗(yàn)證提供參考。

易氧化物；清潔驗(yàn)證；葡萄糖注射液；淋洗水法

葡萄糖注射液是一種常用的靜脈注射液，在對其進(jìn)行生產(chǎn)時(shí)，需要優(yōu)化生產(chǎn)工藝流程。為防止殘留物對下一批產(chǎn)品產(chǎn)生交叉污染，必須建立穩(wěn)定有效的設(shè)備清潔方法，并對方法進(jìn)行驗(yàn)證。文獻(xiàn)[1-6]多以總有機(jī)碳（TOC）作為清洗殘留物指標(biāo)，但測定時(shí)采用的TOC分析儀設(shè)備昂貴、測定范圍窄，不具有廣泛適用性。本試驗(yàn)依據(jù)2015年版《中國藥典》（二部）[7]純化水易氧化物定性測定方法與2010年版《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》殘留物濃度限度規(guī)定[8]，采用定性方法檢測葡萄糖注射液生產(chǎn)設(shè)備的殘留物限度是否符合要求，并進(jìn)行清潔驗(yàn)證，以探討易氧化物檢測法在葡萄糖注射液設(shè)備清潔驗(yàn)證中應(yīng)用的可行性。

1 材料

1.1 儀器

DK-98-Ⅱ電子調(diào)溫萬用電爐（天津市泰斯特儀器有限公司）；HTY-DI1000型TOC分析儀（杭州泰林生物技術(shù)設(shè)備有限公司）。

1.2 藥品與試劑

5%葡萄糖注射液（批號：20150727、20150728、20150821）、10%葡萄糖注射液（批號：201507163）、葡萄糖均為河北圣雪大成制藥有限責(zé)任公司產(chǎn)品；0.02 mol/L高錳酸鉀溶液（分析純）、注射用水（解放軍第175醫(yī)院/廈門大學(xué)附屬東南醫(yī)院制劑科自制）；0.1 mol/L稀硫酸（解放軍第175醫(yī)院/廈門大學(xué)附屬東南醫(yī)院制劑科自制，分析純）。

2 方法與結(jié)果

2.1 殘留物限度的確定

發(fā)達(dá)國家與國內(nèi)的藥品生產(chǎn)企業(yè)一般將殘留物濃度限度定為10 mg/L[8-10]，即上一批產(chǎn)品殘留在設(shè)備中的物質(zhì)全部溶解到下一批產(chǎn)品中的濃度不得高于10 mg/L。葡萄糖注射液不屬于高活性、高敏感性藥品，該限度是足夠安全的。因此，本試驗(yàn)建立檢測標(biāo)準(zhǔn)：最終淋洗水樣品中殘留物的濃度L葡萄糖≤10 mg/L。最終淋洗水中TOC殘留限度LTOC≤L葡萄糖×ηC（ηC為殘留物成分中TOC百分比）[11]，即LTOC≤4 mg/L。

2.2 線性關(guān)系

參考2015年版《中國藥典》（二部）[7]，純化水易氧化物定性測定方法為：取100 ml樣品溶液，加0.1 mol/L稀硫酸10 ml，煮沸后，加0.02 mol/L高錳酸鉀滴定液適量，再煮沸10 min，粉紅色不得完全消失。

取注射用水空白液，按上述方法平行測定3次，0.02 mol/L高錳酸鉀滴定液用量平均值為0.03 ml。精密稱取葡萄糖50 mg，置于1 000 ml量瓶中，加入經(jīng)冷卻至室溫的注射用水溶解并定容至刻度，作為貯備液。量取上述貯備液60、40、20、16、10 ml分別置于100 ml量瓶中，加入經(jīng)冷卻至室溫的注射用水定容至刻度。緩慢滴加0.02 mol/L高錳酸鉀滴定液至粉紅色不褪色，并記錄其用量。以葡萄糖溶液質(zhì)量濃度（x，mg/L）為橫坐標(biāo)、樣品溶液與水空白液消耗高錳酸鉀滴定液體積之差（y，ml）為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為y＝0.054 4x－0.214 2（r＝0.999 5），表明葡萄糖溶液質(zhì)量濃度在5～30 mg/L范圍內(nèi)與高錳酸鉀滴定液用量呈良好的線性關(guān)系。

2.3 重復(fù)性試驗(yàn)

取限度濃度（10 mg/L）樣品溶液各6份，照上述法測定。結(jié)果高錳酸鉀滴定液用量平均值為0.35 ml，RSD為1.02%（n＝6），表明此法重復(fù)性良好。

2.4 檢測標(biāo)準(zhǔn)制訂

由“2.3”項(xiàng)下探討不同濃度葡萄糖溶液與高錳酸鉀滴定液用量的相關(guān)性可制訂標(biāo)準(zhǔn)，與含量為10 mg/L葡萄糖溶液相比，配制系統(tǒng)及輸液灌裝管道最終淋洗水殘留物（以易氧化物計(jì)算）：粉紅色未完全消失時(shí)，0.02 mol/L高錳酸鉀滴定液消耗量小于0.35 ml。

2.5 檢測限的確定

通過不同質(zhì)量濃度樣品的測定，找出能檢測出的最低質(zhì)量濃度，即為其檢測限。配制含葡萄糖質(zhì)量濃度為100 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)原液；取原液，分別配制含葡萄糖質(zhì)量濃度為1、2、3、4 mg/L的供試液，另配制不含葡萄糖的空白溶液。結(jié)果，易氧化物檢測法檢測葡萄糖的檢測限為3 mg/L。

2.6 取樣方式及取樣部位的確定

文獻(xiàn)[11]報(bào)道輸液產(chǎn)品設(shè)備清潔驗(yàn)證的取樣過程，多以淋洗水法與擦拭法相結(jié)合。我院現(xiàn)有輸液生產(chǎn)設(shè)備系全密閉系統(tǒng)，日常無法拆卸，只能用沖洗法進(jìn)行清潔[12]。所以，本實(shí)驗(yàn)以濃配罐與稀配罐取樣口、灌裝口的最終淋洗水為檢測樣品。

2.7 清潔最終淋洗水檢測

生產(chǎn)結(jié)束后，按照設(shè)備清潔規(guī)程清洗3遍，于第2、3遍清洗結(jié)束后，取最終淋洗水進(jìn)行測定。記錄當(dāng)粉紅色不褪色時(shí)高錳酸鉀滴定液的用量，并取第3遍樣品測定TOC值，測定結(jié)果見表1（表1中取樣點(diǎn)，1代表濃配罐最終淋洗水；2代表稀配罐最終淋洗水；3代表灌封機(jī)注嘴最終淋洗水）。

表1 最終淋洗水的檢測結(jié)果Tab 1 The test results of final rinse water

由表1可知，按照設(shè)備清潔規(guī)程清洗3遍后，0.02 mol/L高錳酸鉀滴定液的消耗量均遠(yuǎn)小于0.35 ml，TOC測定值亦小于4 mg/L，即殘留物含量遠(yuǎn)小于規(guī)定上限10 mg/L。

3 討論

3.1 關(guān)于藥品生產(chǎn)設(shè)備清潔驗(yàn)證

2010年版《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》規(guī)定：“清潔方法應(yīng)當(dāng)經(jīng)過驗(yàn)證，證實(shí)其清潔的效果，以有效防止污染和交叉污染。清潔驗(yàn)證應(yīng)當(dāng)綜合考慮設(shè)備使用情況、所使用的清潔劑和消毒劑、取樣方法和位置以及相應(yīng)的取樣回收率、殘留物的性質(zhì)和限度、殘留物檢驗(yàn)方法的靈敏度等因素”[8]。藥物生產(chǎn)清潔驗(yàn)證常用的手段有前瞻性驗(yàn)證、同步驗(yàn)證、回顧性驗(yàn)證和再驗(yàn)證[13]，本實(shí)驗(yàn)結(jié)合工作實(shí)際采用同步驗(yàn)證的方式。

3.2 關(guān)于淋洗水法在線清潔規(guī)程

筆者建立了淋洗水法在線清潔規(guī)程，即采用噴淋球先沖洗罐體，然后預(yù)放一定量注射用水沖洗濾器與灌裝前端管道，初洗液直接從灌裝口排放，再進(jìn)行回流沖洗回流管道。在回流清洗過程中，清洗水主要從灌裝口排放，并重復(fù)清洗3次。該方法可確?；亓髦僚渲乒拗械乃幰簹埩艨刂圃谧钚×?，與之前用注射用水直接回流循環(huán)一定時(shí)間再排放的清洗方法（重復(fù)操作5次）相比，清洗效果明顯提高，既縮短了清潔時(shí)間，提高了工作效率，也節(jié)省了用水，使成本降低。需要特別注意的是，首先應(yīng)將清潔規(guī)程納入文件管理體系，使其標(biāo)準(zhǔn)化；其次，應(yīng)對清潔操作人員進(jìn)行相關(guān)的培訓(xùn)與考核，防止人為因素導(dǎo)致的差錯(cuò)[14]；最后，應(yīng)定期進(jìn)行再驗(yàn)證，證明清潔狀態(tài)受控。

3.3 關(guān)于易氧化物檢測法

通過驗(yàn)證，易氧化物檢測法，即采用0.02 mol/L高錳酸鉀滴定液檢測清潔驗(yàn)證樣品中的易氧化物限度的方法成本低，操作簡便、快速。與TOC測定結(jié)果比對，該方法可行，結(jié)果穩(wěn)定可靠，可用于葡萄糖注射液生產(chǎn)設(shè)備的清潔驗(yàn)證。由于該檢測方法是利用高錳酸鉀的強(qiáng)氧化性與樣品中的有機(jī)碳發(fā)生氧化還原反應(yīng)，故該方法也可為其他含碳有機(jī)化合物生產(chǎn)設(shè)備的清潔驗(yàn)證提供參考。

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（編輯：余慶華）

Application of Easy Oxide Detection Method in Equipment Cleaning Validation for Glucose Injection

RAO Xiaoping，LIU Jianqing，ZHOU Chengfang，KE Zhihong，CHEN Jinshan（Dept.of Preparation，No.175 Hospital of PLA/The Affiliated Southeast Hospital of Xiamen University，F(xiàn)ujian Zhangzhou 363000，China）

OBJECTIVE：To investigate the feasibility of easy oxide detection method in equipment cleaning validation of Glucose injection.METHODS：The cleaning procedure of equipment for Glucose injection by rinse water method was established；potassium permanganate titration solution（0.02 mol/L）was used to detect easy oxide，and the results were compared with those of total organic carbon.RESULTS：The limits of residual glucose were 10 mg/L；the detection limit of easy oxide was 3 mg/L.The linear range were 5-30 mg/L（r＝0.999 5）.The consumption amount of potassium permanganate titration solution（0.02 mol/L）would not be greater than 0.35 ml，and the limits of residual total organic carbon were 4 mg/L.The results of 4 times of validation tests showed that the amount of potassium permanganate in rinse water of sample sites were in line with the requirements，and the determination result of total organic carbon was concordant with the standard.CONCLUSIONS：The method of easy oxides determination is easy in operation，low in cost，and can be used for equipment cleaning validation of Glucose injection and provide reference for equipment cleaning validation of other organic compounds containing carbon.

Easy oxide；Cleaning validation；Glucose injection；Rinse water method

R917

A

1001-0408（2016）31-4463-02

2016-01-29

2016-03-08）

＊藥師。研究方向：醫(yī)院制劑。電話：0596-2975797。E-mail：393881436@qq.com

#通信作者：副主任藥師。研究方向：醫(yī)院藥學(xué)。電話：0596-2975701。E-mail：cjs1223@sohu.com

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2016.31.41