硒蛋白R抑制銅離子介導(dǎo)的Aβ42聚集和細(xì)胞毒性

郭明，陳平，都秀波，劉瓊,

1. 深圳大學(xué) 生命與海洋科學(xué)學(xué)院，深圳 518000 2. 南陽理工學(xué)院，南陽 473000

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硒蛋白R抑制銅離子介導(dǎo)的Aβ42聚集和細(xì)胞毒性

郭明1，陳平2，都秀波1，劉瓊1,

1. 深圳大學(xué) 生命與海洋科學(xué)學(xué)院，深圳 518000 2. 南陽理工學(xué)院，南陽 473000

阿爾茨海默病(Alzheimer′s disease，AD)是一種神經(jīng)退行性疾病，其主要病理特征包括腦內(nèi)出現(xiàn)老年斑和神經(jīng)纖維纏結(jié)以及神經(jīng)元缺失。過渡金屬離子如Fe2+、Zn2+、Cu2+等會在AD病人腦中大量蓄集，從而促進(jìn)-淀粉樣多肽(Aβ)聚集并產(chǎn)生大量活性氧自由基，引起細(xì)胞功能改變。硒蛋白R(SelR)是一種蛋氨酸亞砜還原酶，可將蛋白中的蛋氨酸亞砜還原為蛋氨酸。然而SelR與金屬離子的關(guān)系尚無報(bào)道。文章對SelR的突變體SelR′(SelR中硒代半胱氨酸Sec95突變?yōu)榘腚装彼酑ys95)結(jié)合Cu+的性質(zhì)進(jìn)行了表征，同時也對SelR′調(diào)節(jié)Cu+/Cu2+誘導(dǎo)的Aβ42聚集和細(xì)胞毒性的能力進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，SelR′可與Cu+特異性螯合劑BCA競爭結(jié)合Cu+，說明SelR′具有較強(qiáng)的Cu+結(jié)合能力。采用硫磺素?zé)晒夥?ThT)，發(fā)現(xiàn)Cu+/Cu2+顯著性抑制Aβ42的纖維化、誘導(dǎo)其形成非纖維化聚集體，而SelR′則能夠顯著抑制Cu+/Cu2+誘導(dǎo)的Aβ42聚集形態(tài)的改變。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)表明：SelR′能顯著降低Cu+/Cu2+誘導(dǎo)的Aβ42的細(xì)胞毒性。上述結(jié)果提示：SelR在腦內(nèi)除了還原蛋氨酸亞砜，還可通過與銅離子的結(jié)合抑制其細(xì)胞毒性作用，從而干預(yù)AD的發(fā)展。

銅離子；β-淀粉樣蛋白；阿爾茨海默癥；硒蛋白R；細(xì)胞毒性

阿爾茨海默病(Alzheimer's disease，AD)是一種常見的神經(jīng)退行性疾病，其主要病理特征為β-淀粉樣蛋白(Aβ)聚集形成的老年斑和tau蛋白過度磷酸化形成的神經(jīng)纖維纏結(jié)。Aβ是由淀粉樣前體蛋白(APP)經(jīng)過β-和γ-分泌酶剪切而成，在體內(nèi)主要以Aβ40和Aβ42形式存在，Aβ42具有細(xì)胞毒性且容易聚集。過度金屬離子如Cu2+、Zn2+和Fe2+被發(fā)現(xiàn)與 AD病人腦中的老年斑密切相關(guān)[1]。有研究表明Cu2+能參與細(xì)胞膜上的氧化還原反應(yīng)并產(chǎn)生活性氧(ROS)，而高濃度的Cu2+在Aβ聚集過程中起重要作用[2]。在AD病人腦中發(fā)現(xiàn)Aβ與金屬離子(尤其是Cu2+)共定位[3]。Cu2+對Aβ的聚集和細(xì)胞毒性的影響已有廣泛討論[4]，但是Cu+的作用機(jī)制尚不明確。有報(bào)道Aβ的His13和His14能與Cu+結(jié)合[5]，Cu+-Aβ復(fù)合物可能是一種與AD病理相聯(lián)的重要物質(zhì)。傳統(tǒng)的金屬螯合劑如碘氯羥喹能調(diào)節(jié)金屬離子介導(dǎo)的Aβ聚集和細(xì)胞毒性，但長期使用碘氯羥喹會產(chǎn)生副作用，即亞急性髓視神經(jīng)病變[6]。因此，利用大腦內(nèi)源性的金屬結(jié)合蛋白來調(diào)節(jié)金屬內(nèi)穩(wěn)態(tài)、降低金屬介導(dǎo)的Aβ聚集和細(xì)胞毒性被認(rèn)為是一種新的跟好策略。

硒蛋白是一類序列中包含硒代半胱氨酸(Sec)的特殊蛋白[7]。SelR是硒蛋白家族中的一個成員，也稱為蛋氨酸亞砜還原酶B1(MsrB1)，能在多種生物體中表達(dá)[8]。SelR是通過生物信息學(xué)的方法被鑒定為硒蛋白的。它可以立體專一性地還原蛋白質(zhì)中的R型蛋氨酸亞砜(Met(O))為蛋氨酸(Met)[9]。Met對ROS的氧化十分敏感，SelR能通過還原被氧化的Met，發(fā)揮細(xì)胞抗氧化防御系統(tǒng)的功能[10]。Aβ中Met35的氧化與Aβ聚集和神經(jīng)毒性密切相關(guān)[11]。而SelR所介導(dǎo)的Met與Met(O)之間的可逆轉(zhuǎn)換與很多生理、病理進(jìn)程相關(guān)，如氧化應(yīng)激、細(xì)胞信號傳導(dǎo)、神經(jīng)退行性病理過程等[12]。另有報(bào)道，在Sec突變?yōu)镃ys所形成的突變體SelR′中，蛋氨酸亞砜還原酶(Msr)活性中心的催化環(huán)境沒有被破壞[13]。因此，用突變體SelR′替代SelR開展結(jié)構(gòu)和功能的研究是可行的。本實(shí)驗(yàn)室前期已對Cu+和Cu2+與硒蛋白P的結(jié)合性質(zhì)進(jìn)行了表征[14]，并對Cu+/Cu2+介導(dǎo)的Aβ42聚集和神經(jīng)細(xì)胞毒性進(jìn)行了研究。本文進(jìn)一步研究了SelR′對Cu+/Cu2+介導(dǎo)的Aβ42聚集和細(xì)胞毒性的影響。

1 材料與方法 (Materials and methods)

1.1 試劑與材料

pET-HSV-2-A載體、大腸桿菌菌株Top10、BL21和N2a細(xì)胞為本實(shí)驗(yàn)室保存；S-pfu高保真酶、DL 2 000 DNA Marker購自TAKARA公司；T4 連接酶購自Ferments公司；Aβ42購自上海強(qiáng)耀有限公司；六氟異丙醇(HFIP)、硫磺素(ThT)、青霉素、鏈霉素購自Sigma公司；DMSO、胰蛋白酶購自Amresco公司；二喹啉甲酸(BCA)定量試劑盒、細(xì)胞增殖與活性檢測試劑盒(CCK-8)購自碧云天生物技術(shù)研究所；DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基、OPTI-MEM細(xì)胞培養(yǎng)基、胎牛血清購自Gibco公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 SelR突變體的制備及相關(guān)試劑的配制

根據(jù)SelR基因(NM_016332.2)編碼序列及pET-HSV-2-A載體相關(guān)信息設(shè)計(jì)引物FP：5′-GCACTAGTATGTCGTTCTGCAG -3′，RP：5′-CCCAAGCTTCTAGTGACCCTGGGAG -3′。然后將SelR中的TGA碼突變?yōu)門GC碼，獲得突變體SelR′，再連接到pET- HSV-2-A載體上，經(jīng)過篩選和基因測序驗(yàn)證獲得重組質(zhì)粒pET-HSV-2-A-SelR′。將質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至E. Coli BL21感受態(tài)細(xì)胞，利用氨芐青霉素抗性篩選得到單克隆菌種，用IPTG誘導(dǎo)表達(dá)法擴(kuò)增并收集菌體，溶解于裂解緩沖液，超聲裂解后離心收集蛋白粗溶液，采用快速蛋白質(zhì)液相層析系統(tǒng)(TAKA FPLC)，通過鎳柱親和層析分離純化SelR′。Aβ42樣品的處理是按照已有的方法，使其濃度為2 mmol·L-1[15]。配制1 mol·L-1的CuSO4母液，用ICP-MS測其準(zhǔn)確濃度，存放4 ℃冰箱備用，Cu+是在所配的Cu2+中加入終濃度為1 mmol·L-1的抗壞血酸(H2Asc)而獲得，BCA直接從定量試劑盒中獲取。

1.2.2 BCA競爭結(jié)合法

用Cu+和BCA配制Cu2+-BCA-H2Asc原液，其中Cu+和BCA的終濃度分別為20 μmol·L-1和60 μmol·L-1，取原液100 μL，加入不同濃度的SelR′，用PBS 緩沖溶液補(bǔ)充到1 mL，分別加入96孔板中混合均勻，樣品放置30 min后，將以上各組樣品分別加入96孔板中，用全波長熒光化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀(Thermo Scientific)在450～700 nm波長下測定吸光度。

1.2.3 ThT熒光法

Aβ42的纖維化程度用ThT熒光法檢測。將Aβ42與Cu+/Cu2+以及Aβ42、Cu+/Cu2+與SelR′共同孵育，三者的終濃度均為10 μmol·L-1，每組密封好后置于溫控板中，溫控板參數(shù)設(shè)置：37 ℃，600 r·min-1，24 h后取出，用熒光分光光度計(jì)，在444 nm激發(fā)下，掃描各組樣品400～800 nm的熒光光譜。

1.2.4 細(xì)胞活力檢測

用含10%血清、100 U·mL-1青霉素和100 U·mL-1鏈霉素的DMEM培養(yǎng)基在37 ℃、5% CO2的條件下培養(yǎng)N2a細(xì)胞系。當(dāng)細(xì)胞生長處于對數(shù)期時，用胰酶消化至單細(xì)胞懸液，按5×103cells·孔-1的細(xì)胞密度轉(zhuǎn)移到96孔板中，培養(yǎng)24 h使其貼壁，無血清培養(yǎng)基重復(fù)洗滌3次后分7組加入處理好的樣品：PBS組；DMSO組；Aβ42組；Aβ42+Cu2+組；Aβ42+Cu2++SelR′組；Aβ42+Cu2++H2Asc組；Aβ42+Cu2++SelR′+H2Asc組。Aβ42、Cu2+及SelR′的終濃度均為10 μmol·L-1，繼續(xù)培養(yǎng)24 h。在孵育好的96孔板中每孔加入10 μL的CCK-8試劑，37 ℃孵育2 h，用SpecTRA MAX 190酶標(biāo)儀檢測450 nm和650 nm下的吸光值。

2 結(jié)果(Results)

2.1 SelR′競爭結(jié)合Cu+的性質(zhì)

2.1.1 SelR′的表達(dá)純化

為獲得重組SelR′蛋白，構(gòu)建pET-HSV-2-A-SelR′重組質(zhì)粒，測序成功后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株E. Coli BL21感受態(tài)細(xì)胞，挑取合適菌株進(jìn)行大量培養(yǎng)后，收菌，超聲裂解提取蛋白質(zhì)后，采用FPLC系統(tǒng)，通過鎳柱親和層析分離得到純化的融合蛋白(見圖1左圖)。對融合蛋白采用凝血酶酶切后再進(jìn)行純化分離(圖1右圖)，獲得足量純化的SelR′，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

2.1.2 SelR′競爭結(jié)合Cu+的性質(zhì)

有研究指出，在腦脊液中，胞外高濃度的抗壞血酸可使通常存在的Cu2+生成Cu+，推斷體內(nèi)單體Aβ42可能與Cu+而非Cu2+相結(jié)合。因此本文首先采用BCA競爭法研究SelR′與Cu+的結(jié)合情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在Cu+-(BCA)2體系中加入不同濃度的SelR′后，其光吸收譜圖均有不同程度的變化，此變化在加入高濃度的SelR′后更加明顯。在562 nm處的光吸收值與SelR′呈現(xiàn)明顯的濃度依賴性，隨著SelR′濃度的增加，562 nm處的光吸收值呈較大幅度的降低(圖2)，說明SelR從Cu+-(BCA)2復(fù)合物中攝取了Cu+，使得Cu+-(BCA)2復(fù)合物含量減少，因此SelR具有較強(qiáng)的與BCA競爭性結(jié)合Cu+的能力。結(jié)合實(shí)驗(yàn)室前期結(jié)果可知且SelR與Cu+的結(jié)合要強(qiáng)于Aβ42與Cu+的結(jié)合。

2.2 SelR′對Cu+/Cu2+誘導(dǎo)的Aβ42聚集的影響

制備各組樣品，并將樣品在37 ℃孵育24 h，在444 nm激發(fā)波長下，以熒光分光光度計(jì)掃描455～605 nm波段的熒光光譜，結(jié)果如圖3所示，在482 nm處出現(xiàn)最大的熒光發(fā)射峰，該處的熒光強(qiáng)度與Aβ42纖維體的含量成正比。Aβ42在37 ℃單獨(dú)孵育24 h后，在482 nm處出現(xiàn)特征性熒光發(fā)射峰，Aβ42可自發(fā)聚集形成纖維。當(dāng)Aβ42與Cu+或Cu2+共同孵育時，482 nm處的熒光強(qiáng)度顯著降低，Cu+和Cu2+抑制了Aβ42的纖維化聚集，誘導(dǎo)Aβ42形成非纖維聚集體。而當(dāng)Aβ42與Cu+/Cu2+及SelR′共同孵育時，482 nm處的熒光強(qiáng)度又有一定程度的回升，可見SelR′能夠抑制Cu+/Cu2+誘導(dǎo)的Aβ42的非纖維化聚集，誘導(dǎo)Aβ42形成一定量的纖維體，這一結(jié)果也與Tougu等[16]的結(jié)果相吻合。Tougu等[16]曾通過ThT檢測發(fā)現(xiàn)，Zn2+和Cu2+能夠抑制Aβ42的纖維化聚集、促進(jìn)其非纖維化聚集。結(jié)合文中結(jié)果不難看出，SelR′可通過與Cu+/Cu2+的結(jié)合，抑制銅離子誘導(dǎo)的Aβ42的非纖維化聚集。

2.3 SelR′對Cu+/Cu2+誘導(dǎo)的Aβ42細(xì)胞毒性的影響

采用CCK-8試劑盒檢測N2a細(xì)胞培養(yǎng)過程中，SelR′對Cu+/Cu2+誘導(dǎo)的Aβ42細(xì)胞毒性的作用。樣品于37 ℃孵育24 h，待其形成 Aβ42纖維體或Cu+/Cu2+- Aβ42無規(guī)則聚集體后，將其加入N2a細(xì)胞中孵育，結(jié)果如圖4所示。以Aβ42單獨(dú)孵育形成的纖維體處理細(xì)胞，細(xì)胞活力為對照組的82.5%，即Aβ42纖維體的細(xì)胞毒性很弱，而Aβ42與Cu+/Cu2+共同孵育24 h后處理的細(xì)胞，細(xì)胞活力分別為對照組的28.3%、28.9%，表明Cu+/Cu2+均能增加Aβ42對N2a細(xì)胞的毒性，這一結(jié)果也與前人所發(fā)現(xiàn)的在金屬離子的存在下Aβ42具有很高的神經(jīng)毒性的結(jié)果相吻合。為了檢測SelR′的作用，Aβ42先與Cu+或Cu2+在37 ℃共同孵育1 h后，加入等摩爾濃度的SelR′再共同孵育23 h后處理N2a細(xì)胞，測定細(xì)胞活力。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在復(fù)合物Cu+-Aβ42和Cu2+-Aβ42中加入SelR′后再作用于細(xì)胞，細(xì)胞活力均有顯著性的提高。結(jié)合前面的結(jié)果，可以看出：SelR′通過與Aβ42競爭性結(jié)合Cu+/Cu2+，抑制Cu+/Cu2+誘導(dǎo)的Aβ42非纖維化聚集，使得Aβ42生成一定量的纖維體，從而降低Aβ42的細(xì)胞毒性。

圖1 SelR′的分離純化及聚丙烯酰胺凝膠電泳分析 注：左圖，融合表達(dá)蛋白的分離純化；M，蛋白分子量標(biāo)記物；泳道1，純化前蛋白溶液；泳道2，穿透峰；泳道3，60 mmol·L-1咪唑洗脫峰；泳道4和5，500 mmol·L-1洗脫峰；右圖，SelR′的分離純化；泳道1，500 mmol·L-1洗脫峰；泳道2，凝血酶酶切后蛋白溶液；泳道3，酶切后穿透峰；泳道4，目的蛋白SelR′。Fig. 1 Isolation, purification and electrophoresis analysis of SelR′Note: M: M221-01 protein Marker; Lift, lane 1: pre-purified protein solution; lane 2: product eluted by balance buffer (i.e, unbound protein); lane 3: products eluted by 60 mmol·L-1 imidazole; lane 4 and lane 5: products eluted by 500 mmol·L-1 imidazole; Right, lane 1: product eluted by 500 mmol·L-1 imidazole; lane 2: protein solution after thrombin cleavage; lane 3: digested product eluted by balance buffer; lane 4: purpose protein SelR′.

圖2 不同濃度的SelR′ (0～100 μmol·L-1)滴入Cu+-(BCA)2復(fù)合物(20 μmol·L-1)的吸收光譜Fig. 2 The absorption spectrum of Cu+-(BCA)2 complex (20 μmol·L-1) added with different concentrations of SelR' (0-100 μmol·L-1)

圖3 SelR′對Cu+/Cu2+誘導(dǎo)的Aβ42非纖維化聚集的抑制作用Fig. 3 The inhibitory effect of SelR' on the nonfibrillar aggregation of Aβ42 induced by Cu+/Cu2+

圖4 CCK-8法檢測不同組分對N2a細(xì)胞生長活性的影響 注：***P<0.001，**P<0.01。Fig. 4 CCK-8 cell viability assay of N2a cells treated with different componentsNote: ***P<0.001；** P<0.01.

3 討論(Discussion)

Aβ中Met35易被體內(nèi)ROS氧化為蛋氨酸亞砜，使Aβ聚集并產(chǎn)生神經(jīng)毒性，這是AD病理發(fā)展過程中的關(guān)鍵問題之一[17]。SelR作為一種蛋氨酸亞砜還原酶，可特異性地還原R型的蛋氨酸亞砜，具有很強(qiáng)的還原性。當(dāng)SelR基因被沉默后，細(xì)胞ROS水平顯著增加，從而激活細(xì)胞保護(hù)機(jī)制，誘導(dǎo)Cu2+/Zn2+-超氧化物酶活性增強(qiáng)以清除ROS[18]。SelR還能通過與Clu相互作用來阻止Aβ的聚集，從而達(dá)到干預(yù)AD的效果[19]。由上可見SelR可通過多途徑參與AD的預(yù)防和治療過程，為此我們深入開展SelR與AD關(guān)系的研究，發(fā)現(xiàn)SelR還可通過與Cu+/Cu2+的結(jié)合來影響Aβ聚集形式，從而干預(yù)AD病理進(jìn)程。

越來越多的研究表明一些金屬離子，包括Fe2+、Cu2+、Mn2+、Zn2+等，它們濃度的變化與自由基的生成及其介導(dǎo)的神經(jīng)疾病密切相關(guān)[20]。在對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的研究中發(fā)現(xiàn)，過渡金屬可通過干擾突觸傳遞、記憶形成等過程來影響神經(jīng)系統(tǒng)[21]。Cu2+與Aβ結(jié)合后通過生物體內(nèi)的還原劑(如：膽固醇、抗壞血酸鹽、左旋多巴以及多巴胺等)被還原為Cu+[22]，進(jìn)而導(dǎo)致自由基的產(chǎn)生及Aβ的聚集。

我們的體外研究發(fā)現(xiàn)，Cu2+即使在沒有還原劑存在的情況下，也能促進(jìn)Aβ的聚集，導(dǎo)致自由基的產(chǎn)生和細(xì)胞毒性，推測Cu2+介導(dǎo)的Aβ的細(xì)胞毒性可能存在多種途徑。在血漿中，胞外銅離子多被認(rèn)為是以Cu2+的形式存在；而在腦脊液中，胞外高濃度的抗壞血酸很可能使Cu2+還原為Cu+，因此在腦內(nèi)Aβ單體可能結(jié)合的是Cu+而非Cu2+，也就是說在腦內(nèi)很可能是Cu+而非Cu2+誘導(dǎo)Aβ由可溶性的單體轉(zhuǎn)化為不可溶、毒性強(qiáng)的非纖維聚集體。

我們還發(fā)現(xiàn)SelR可通過競爭作用抑制Aβ42與Cu+和Cu2+的結(jié)合。Cu+和Cu2+能夠顯著促進(jìn)Aβ42形成非纖維聚集體并產(chǎn)生強(qiáng)細(xì)胞毒性，SelR通過與Cu+和Cu2+結(jié)合而不同程度地降低Aβ42形成非纖維聚集體，從而抑制其細(xì)胞毒性。這些結(jié)果提示我們：如果腦內(nèi)的Cu+/Cu2+超出正常所需范圍時，會促進(jìn)腦中Aβ42的聚集，產(chǎn)生神經(jīng)細(xì)胞毒性和造成氧化損傷，引發(fā)或加快AD的發(fā)生和發(fā)展。SelR不僅可以通過還原被氧化的蛋氨酸而發(fā)揮抗氧化作用，還由于其具有較高的銅離子結(jié)合特性，而抑制銅離子與Aβ42的結(jié)合，從而降低神經(jīng)細(xì)胞毒性。綜上所述，SelR在腦內(nèi)可通過調(diào)節(jié)金屬離子內(nèi)穩(wěn)態(tài)和氧化還原平衡來干預(yù)AD的病理過程、延緩AD的發(fā)生發(fā)展。

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Inhibitory Effect of Selenoprotein R on Cu+/Cu2+-Induced Aβ42Aggregation and the Corresponding Toxicity

Guo Ming1, Chen Ping2, Du Xiubo1, Liu Qiong1,*

1. College of Life Sciences and Oceanograohy, Shenzhen University, Shenzhen 518060, China 2. Nanyang Institute of Technology, Nanyang 473000, China

Received 30 November 2015 accepted 26 January 2016

Alzheimer's disease (AD) is a neurodegenerative disease characterized by the deposition of senile plaques and neurofibrillary tangles together with the loss of neurons in the brain. Previously, copper, iron and zinc ions were found with large amounts in the brains of AD patients. Metal ions can promote the aggregation of-amyloid peptide (Aβ) and lead to the formation of reactive oxygen species which further result in extensive impairment of cellular functions. Selenoprotein R (SelR) plays an important role in maintaining intracellular redox balance by reducing methionine sulfoxide to methionine. However, no report has been published on the relationship between SelR and metal ions. In this study, we characterized the Cu+binding property of SelR′ (a Sec-to-Cys mutation form of SelR) and investigated its ability to modulate the aggregation and neurotoxicity of Aβ42induced by Cu+/Cu2+. The results showed that SelR′ could compete for Cu+with bicinchoninic acid (BCA), a specific Cu+chelator, suggesting the high binding affinity between SelR′ and Cu+. Using thioflavine T fluorescence assay, it was observed that Cu+/Cu2+binding to Aβ42almost completely suppressed Aβ42fibrillization, leading to the non-fibrillar aggregation of Aβ42, which could be significantly restored by SelR′. Using living cells, SelR′ was also found to inhibit Cu+/Cu2+-Aβ42induced neurotoxicity. Results in this study indicated that SelR in the brain can not only reduce methionine sulfoxide, but also bind excessive copper ions to inhibit their toxic effects, which will be beneficial for the intervention of AD progress.

copper; β-amyloid; Alzheimer's disease; selenoprotein P; cytoxicity

10.7524/AJE.1673-5897.20151130008

國家自然科學(xué)基金(31470804，21271131，31500624)；深圳市科技研發(fā)資金項(xiàng)目(JCYJ20130408172946974，JSGG20140703163838793)

郭明(1990-)，男，碩士研究生，研究方向?yàn)槲鞍讓Π柶澓ＤY作用機(jī)理的研究，E-mail: gm15138757783@163.com

*通訊作者(Corresponding author)， E-mail: liuqiong@szu.edu.cn

2015-11-30 錄用日期：2016-01-26

1673-5897(2016)2-399-06

X171.5

A

簡介：劉瓊(1965-)，女，教授，博士生導(dǎo)師，主要從事阿爾茲海默癥的早期診斷與干預(yù)機(jī)制研究。發(fā)表學(xué)術(shù)論文80余篇，申請專利5項(xiàng)，合作編寫專著4本。

郭明，陳平，都秀波, 等. 硒蛋白R抑制銅離子介導(dǎo)的Aβ42聚集和細(xì)胞毒性[J]. 生態(tài)毒理學(xué)報(bào)，2016, 11(2): 399-404

Guo M, Chen P, Du X B, et al. Inhibitory effect of selenoprotein R on Cu+/Cu2+-induced Aβ42aggregation and the corresponding toxicity [J]. Asian Journal of Ecotoxicology, 2016, 11(2): 399-404 (in Chinese)