免疫固定電泳及免疫球蛋白定量在多發(fā)性骨髓瘤診斷和分型中的應(yīng)用

陳云峰，葛 亮，沈建江

(江蘇省中醫(yī)院 檢驗科，江蘇 南京210029)

?

*通訊作者

免疫固定電泳及免疫球蛋白定量在多發(fā)性骨髓瘤診斷和分型中的應(yīng)用

陳云峰，葛 亮*，沈建江

(江蘇省中醫(yī)院 檢驗科，江蘇 南京210029)

目的 探討免疫固定電泳和免疫球蛋白定量在多發(fā)性骨髓瘤診斷和分型中的應(yīng)用。方法 采用血清蛋白電泳技術(shù)、免疫固定電泳技術(shù)、免疫比濁法對87例多發(fā)性骨髓瘤患者進行分析。結(jié)果 87例患者血清蛋白電泳77例檢出M蛋白，陽性率為88.5%，免疫固定電泳均為陽性，免疫分型IgGκ 29例，占33.3%；IgGλ 22例，占25.3%；IgAκ 10例，占11.5%；IgAλ12例，占13.8%；IgMκ 4例，占4.6%；IgMλ 3例，占3.4%；κ輕鏈2例，占2.3%；λ輕鏈5例，占5.7%；同時相應(yīng)類型的免疫球蛋白和輕鏈增高伴其它組分降低。結(jié)論 免疫固定電泳和免疫球蛋白定量對多發(fā)性骨髓瘤的診斷和分型具有重要的臨床應(yīng)用價值。

多發(fā)性骨髓瘤；血清蛋白電泳；免疫固定電泳；免疫球蛋白

(ChinJLabDiagn,2016,20:1881)

多發(fā)性骨髓瘤(MM )是惡性漿細胞病中最常見的一種類型，是單克隆漿細胞惡性增殖并分泌大量單克隆免疫球蛋白的一種血液系統(tǒng)惡性腫瘤。近年來發(fā)病率逐年上升，發(fā)病年齡呈年輕化趨勢。其臨床表現(xiàn)多樣、輕重程度不一、受累的靶器官各不相同，極易造成漏診、誤診[1,2]，對該疾病的及時診斷、治療以及預(yù)后都造成很大影響。隨著免疫固定電泳(IFE)分析的廣泛應(yīng)用，使MM的診斷及分型日益完善，其快速準確、高度特異性和敏感性的優(yōu)勢使其成為目前臨床實驗室診斷MM的常規(guī)首選方法之一[3]。我們對87例 MM患者進行血清蛋白電泳、血清免疫固定電泳和免疫球蛋白定量檢測，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象 87例MM患者均來自2013年7月至2014年6月我院門診和住院的病人，其中男58例，女29例，年齡在28-90歲，平均年齡68.9歲，全部病例均符合MM的診斷標準[4]。正常對照組30例，男15例，女15例，平均年齡62.7歲，排除肝病、血液病、腎臟病、腫瘤、風濕病等影響免疫球蛋白檢測結(jié)果的病例，空腹采集靜脈血3 ml，2 h內(nèi)分離血清，避免溶血和脂血。

1.2 實驗儀器、試劑和方法 采用法國Serbia Hydras 全自動電泳分析儀和配套試劑進行血清蛋白電泳和血清免疫固定電泳檢測，根據(jù)檢測結(jié)果進行免疫球蛋白分型。采用美國Beckman Immage特定蛋白分析儀和原裝試劑，用透射免疫比濁法進行免疫球蛋白定量測定，實驗前均對儀器進行校準并嚴格按試劑盒說明書進行操作。

2 結(jié)果

2.1 87例MM患者經(jīng)免疫固定電泳均檢出M蛋白，檢出陽性率為100%，經(jīng)血清蛋白電泳檢出77例M蛋白，檢出陽性率為88.5%。10例血清蛋白電泳未檢出M帶的，經(jīng)免疫固定電泳分析后，確定其中4例為IgA型，6例為輕鏈型。

2.2 血清免疫固定電泳結(jié)果的判斷 單克隆條帶(M帶)是呈狹窄、致密、濃染、界限分明的沉淀帶，與參考泳道(ELP)上的M帶處于同一個水平位置。以下為常見類型的電泳圖譜，見圖1-4。

圖1 正常人 圖2 IgG-κ型

圖3 IgA-λ型 圖4 單純λ輕鏈型

2.3 87例MM經(jīng)免疫固定電泳分析，IgG型 51例，占58.6%，為最多，IgA型次之，22例，占25.3%。IgG κ型29例，占33.3%，IgG λ型22例，占25.3%；IgA κ型10例，占11.5%，IgA λ型12例，占13.8%；IgM κ型4例，占4.6%，IgM λ型3例，占3.4%；單純輕鏈κ型2例，占2.3%，單純輕鏈λ型5例，占5.7%，免疫固定電泳對單克隆蛋白檢出率為100%。其結(jié)果見表1。

表1 87例MM患者血清免疫固定電泳分型結(jié)果

2.4 各種類型多發(fā)性骨髓瘤患者的免疫球蛋白與正常對照組免疫球蛋白相比較，IgG型MM中，IgG含量明顯升高，IgA、IgM降低，與正常對照組相比P<0.05；IgA型MM中，IgA含量明顯升高，IgG、IgM降低，與正常對照組相比P<0.05；IgM型MM中，IgM含量明顯升高，IgG、IgA降低，與正常對照組相比P<0.05；輕鏈型MM中，IgG、IgA、IgM的含量均明顯降低，與正常對照組相比P<0.05。結(jié)果見表2。

表2 87例MM患者和正常對照組血清免疫球蛋白定量結(jié)果

注：*P<0.05

3 討論

多發(fā)性骨髓瘤(MM ) 是發(fā)生于B淋巴細胞的惡性漿細胞疾病，患者體內(nèi)出現(xiàn)單克隆的異常免疫球蛋白或本周蛋白。MM好發(fā)于中老年，但近年發(fā)病率逐漸增高且發(fā)病年齡有提前趨勢，由于本病患者早期無明顯臨床表現(xiàn)的改變，后期可因發(fā)熱、尿液改變、腰腿痛等被誤診為呼吸系統(tǒng)感染、腎炎或骨病而延誤病情，臨床上MM的誤診率可高達40-50%。因此，許多MM患者錯過了最佳治療時機，在臨床診治中應(yīng)給予足夠重視[5]。隨著科學技術(shù)發(fā)展，免疫電泳技術(shù)在分子生物學和醫(yī)學領(lǐng)域內(nèi)廣泛應(yīng)用，成為臨床檢驗和分析研究中不可缺少的技術(shù)，免疫固定電泳(IFE)是靈敏度較高的分離及鑒定蛋白質(zhì)的方法，具有較強的特異性。IFE是應(yīng)用單克隆抗體檢測單克隆免疫球蛋白，可檢出含量極少量的單克隆成分，早期診斷效果較好。免疫球蛋白定量檢測可見一種或幾種球蛋白增高，而其他幾種相應(yīng)降低。因此單用免疫球蛋白定量不能很好的提示MM，需要結(jié)合IFE來鑒別有無單克隆成分的存在[6]。

本文采用免疫固定電泳和免疫球蛋白定量對多發(fā)性骨髓瘤患者進行檢測，結(jié)果顯示，IFE對單克隆蛋白檢出率為100%，較血清蛋白電泳的檢出率(88.5%)高，由此可見血清蛋白電泳圖譜中未出現(xiàn)M 蛋白峰也不能排除MM，分析原因，一方面，當M帶位于β與γ之間或β區(qū)，與β球蛋白重合，或因IgA聚集形成M峰變寬，不典型時容易造成結(jié)果的誤讀，特別是單純輕鏈型和IgA型；另一方面，單純輕鏈型常由于大量單克隆免疫球蛋白輕鏈從尿中排出，血中含量減少，血清蛋白電泳的敏感性較低而漏檢。此外，本實驗還采用免疫固定電泳對87例MM 患者血清M蛋白進行分型鑒定，結(jié)果顯示IgG型占58.6%，其中κ型33.3%，λ型25.3%；IgA型占25.3%，其中κ型11.5%，λ型13.8%；IgM型占8.0%，其中κ型4.6%，λ型3.4%；單純輕鏈型占8.0%，其中κ型2.3%，λ型5.7%。提示IFE可直接判斷M蛋白的類型，有較高的敏感性和特異性，可作為MM的常規(guī)檢測方法，另外，由于MM患者經(jīng)治療好轉(zhuǎn)后，M蛋白可減輕或消失，因此IFE還可用來評估MM患者的病情和療效，以便及時調(diào)整治療方案[7]。

免疫球蛋白定量對于發(fā)病早期的患者，敏感性較低，容易漏檢，且不能提示單克隆成分的存在，但對于已經(jīng)確診的患者，測定免疫球蛋白含量有助于臨床判斷病情和觀察療效。本實驗中，在各型MM患者中，其相應(yīng)類型的免疫球蛋白和游離輕鏈含量均有不同程度的增高，同時伴有其他類型免疫球蛋白含量的降低和輕鏈比值的改變，與文獻報道一致[8]。

免疫固定電泳技術(shù)由于結(jié)合了抗原抗體反應(yīng)的特異性和蛋白質(zhì)電泳的高分辨率，具有高度的敏感性、特異性[9]，在MM的鑒別診斷、指導(dǎo)治療、療效監(jiān)測、預(yù)后判斷都有重要的臨床意義[10]。隨著MM發(fā)病率逐年升高、發(fā)病年齡的年輕化的趨勢，早期明確診斷顯得格外重要。所以我們在進行MM的診斷時，應(yīng)將免疫固定電泳作為常規(guī)方法，并結(jié)合血清蛋白電泳、免疫球蛋白定量和其它指標，進行綜合分析，提高對多發(fā)性骨髓瘤的診斷和鑒別診斷能力，從而降低MM的漏診率、誤診率。

[1]陳廣化，林鳳茹．多發(fā)性骨髓瘤的誤診因素分析[J].臨床薈萃，2015，30(10)：1120．

[2]林志美，朱煥玲，饒 進,等．多發(fā)性骨髓瘤127例首發(fā)表現(xiàn)和首診科室分析[J].臨床誤診誤治，2013，26(4)：25．

[3]沈 霞．電泳技術(shù)的現(xiàn)狀和發(fā)展[J].中華檢驗醫(yī)學雜志，2001，24(5):263．

[4]張之南，沈 悌,主編．血液病診斷及療效標準(第3版)[M].北京：科學出版杜，2007：232-235．

[5]魯真真，欒 芳，鞠 瑛,等.免疫固定電泳在多發(fā)性骨髓瘤輔助診斷中的價值應(yīng)用[J].臨床輸血與檢驗，2014,16(2)：125.

[6]劉 青.血清免疫固定電泳和免疫球蛋白定量對多發(fā)性骨髓瘤的診斷價值分析[J].河南醫(yī)學研究，2014,23(11)：50.

[7]崇慧峰，孫 蕓，王傳發(fā),等.免疫固定電泳和骨髓細胞形態(tài)學檢查在多發(fā)性骨髓瘤臨床分期中的價值比較[J].檢驗醫(yī)學，2015,30(7)：720.

[8]蔡惠興，蘇 榮，黃惠萍,等．多發(fā)性骨髓瘤免疫球蛋白M蛋白測定的結(jié)果分析[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2014，30(10):1441．

[9]劉汐盈，孫淑艷，宋媛媛．血清免疫固定電泳、蛋白電泳、免疫球蛋白及輕鏈定量對多發(fā)性骨髓瘤臨床診斷價值探討[J].中國實驗診斷學，2010，14(5):680．

[10]楊 璐，徐俊榮，顧 兵．免疫固定電泳技術(shù)對多發(fā)性骨髓瘤的分型診斷及預(yù)后判斷價值[J].檢驗醫(yī)學與臨床，2011，8(16):1975．

Application of serum immunofixation electrophoresis and immunoglobulin quantitative in diagnosis and clinical typing of multiple myeloma

CHENYun-feng，GELiang,SHENJian-jiang.

(DepartmentofClinicalLaboratory,JiangsuProvinceHospitalofTraditionalChineseMedicine,Nanjing210029,China)

Objective To investigate the application of immunofixation electrophoresis (IFE) and immunoglobulin quantitative in diagnosis and clinical typing of multiple myeloma(MM)．Methods 87 MM patients are detected serum protein electrophoresis,IFE and immunoturbidimetry.Results Among 87 cases of MM patients,77 cases for serum protein electrophoresis test were M protein,the positive of rate was 88.5%.IFE test for all 87cases were positive.Moreover，In cases of 87 MM patients,there were 29 cases of IgGκ,22 IgG λ,10 IgAκ,12 IgAλ,4 IgMκ,3 IgMλ,2 κ light chain and 5 λ light chain.Furthermore,corresponding type of immunoglobulin and light chain increased,accompanying with other type of immunoglobulin decreased.Conclusion IFE has important value on clinical application in diagnosing and clinical typing of MM.

Multiple myeloma；Serum protein electrophoresis；Immunofixation electrophoresis；Immunoglobulin

1007-4287(2016)11-1881-03

R446.62

A

陳云峰(1972-)，女，副主任技師，主要從事臨床免疫學檢驗。

2016-01-19)