豆腐柴葉總黃酮的提取、純化及抗氧化活性研究

胡 予,李旭升,馬 楠,張學(xué)敏,毛御波,陳黎萍,熊雙麗,薛朝貴

(1.西南科技大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院,四川綿陽 621010;2. 四川省生物質(zhì)資源利用與改性工程技術(shù)研究中心,四川綿陽 621010;x3.江油市春雨生態(tài)農(nóng)業(yè)科技有限公司,四川江油 621700)

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豆腐柴葉總黃酮的提取、純化及抗氧化活性研究

胡 予,李旭升,馬 楠,張學(xué)敏,毛御波,陳黎萍,熊雙麗,薛朝貴

(1.西南科技大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院,四川綿陽 621010;2. 四川省生物質(zhì)資源利用與改性工程技術(shù)研究中心,四川綿陽 621010;x3.江油市春雨生態(tài)農(nóng)業(yè)科技有限公司,四川江油 621700)

在單因素實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上,采用響應(yīng)面法優(yōu)化豆腐柴葉總黃酮提取工藝,并篩選適合于純化總黃酮的大孔吸附樹脂,最后進(jìn)行初步鑒定和自由基清除活性分析。結(jié)果表明:乙醇浸提總黃酮最佳工藝條件為:乙醇濃度84%、料液比1∶37(g/mL)、溫度81 ℃、時(shí)間3.4 h,該條件下總黃酮得率為7.29%。X-5型大孔吸附樹脂適用于提取豆腐柴葉總黃酮。紫外-可見光譜分析和顯色反應(yīng)初步鑒定其可能為二氫黃酮。豆腐柴葉總黃酮DPPH自由基和羥基自由基的清除率隨濃度的增加而增大,半數(shù)抑制濃度值分別為0.10 mg/mL和0.13 mg/mL。當(dāng)濃度為0.2 mg/mL和0.4 mg/mL時(shí),DPPH自由基和羥基自由基清除率分別為83.75%和80.08%,均接近于叔丁基羥基茴香醚。因此,豆腐柴總黃酮具有較好的抗氧活性,可作為抗氧化劑或者健康食品原料開發(fā)。

豆腐柴,總黃酮,提取工藝,優(yōu)化,抗氧化活性

豆腐柴,又名臭黃荊、觀音草,為馬鞭科豆腐柴屬多年生落葉灌木,高達(dá)2～6 m,生長(zhǎng)期為每年3～11月,主要分布于我國(guó)華南、華東、華中、四川、貴州等地區(qū),日本也有分布[1]。豆腐柴葉中不僅含有大量的果膠、粗纖維、粗蛋白、可溶性糖,還含有豐富的礦物質(zhì)和黃酮類物質(zhì)[2]。黃酮類化合具有抗病毒、抗菌、抗衰老、抗腫瘤和抗氧化等生物活性[3],豆腐柴植物顯著的抗炎作用和增強(qiáng)機(jī)體非特異性免疫功能的作用可能與其黃酮類成分有關(guān)[4-5]。近年來,多位學(xué)者對(duì)豆腐柴黃酮通過不同方式嘗試了提取,羅文謙等[6]用乙醇超聲波浸提測(cè)得秦巴山區(qū)豆腐柴葉總黃酮約為6.06%,曹穩(wěn)根等[7]用微波法提取測(cè)得安徽地區(qū)豆腐柴葉總黃酮為6.32%,而林穎華等[8]用響應(yīng)面優(yōu)化超聲輔助提取測(cè)得廣西地區(qū)豆腐柴葉總黃酮約為0.81%。四川綿陽江油地區(qū)豆腐柴資源豐富,且有用豆腐柴樹葉加工樹葉豆腐的傳統(tǒng)習(xí)慣。目前豆腐柴葉中總黃酮的提取工藝優(yōu)化雖有報(bào)道,但關(guān)于四川江油地區(qū)豆腐柴葉黃酮的提取、分離純化和抗氧化活性等研究很少報(bào)道。為更好的了解與利用江油地區(qū)豆腐柴資源,本文以江油豆腐柴為原料,首先優(yōu)化豆腐柴黃酮提取工藝,再采用大孔吸附樹脂對(duì)其進(jìn)行分離純化,最后進(jìn)行自由基清除活性研究,為江油豆腐柴葉綜合利用提供理論和應(yīng)用基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

豆腐柴 2015年10月中旬采摘于四川綿陽江油豆腐柴基地(江油市春雨生態(tài)農(nóng)業(yè)科技有限公司);蘆丁對(duì)照品 南京替斯艾么中藥研究所;DPPH自由基(二苯代苦味肼基自由基)、叔丁基羥基茴香醚(BHA)SIGMA ALDRICH公司;D101、D201、X-5、HZ-806 天津海光化工有限公司;乙醇、VC、氫氧化鈉、硝酸鋁、亞硝酸鈉等 均為分析純。

UV-5800PC紫外可見光分光光度計(jì) 上海元析儀器有限公司;MODUL YOD-230冷凍干燥機(jī) 美國(guó)Thermo Fisher Scientific公司;U-3900H紫外分光光度計(jì) 日本日立公司;SF-TDL-550臺(tái)式低速大容量離心機(jī) 上海菲恰爾分析儀器有限公司;Frontier紅外吸收光譜儀 美國(guó)Perkinelmer公司。

1.2 豆腐柴葉總黃酮的提取

1.2.1 工藝流程 洗凈的豆腐柴葉→50 ℃烘干,粉碎過40目篩→精密稱取5.000 g粉末→取一定濃度乙醇水溶液,按一定料液比、提取溫度及提取時(shí)間水浴浸提→離心(3800 r/min,10 min)→提取液總黃酮含量測(cè)定,計(jì)算總黃酮得率。

1.2.2 總黃酮的測(cè)定 按照參考文獻(xiàn)[9]中方法,繪制蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線,測(cè)定并計(jì)算提取液總黃酮含量與得率。標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=0.8814 x+0.0227,相關(guān)系數(shù)R2=0.9995,x為蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液濃度(mg/mL)。準(zhǔn)確吸取待測(cè)液1.00 mL,按照上述方法添加試劑,通過回歸方程算得總黃酮得率。公式如式(1)所示。

(1)

式中:A-樣品溶液的吸光值;M-提取前豆腐柴葉質(zhì)量,g。

1.2.3 總黃酮提取工藝單因素實(shí)驗(yàn) 在實(shí)驗(yàn)室研究和參考相關(guān)黃酮提取分離資料,主要探討乙醇濃度、料液比、溫度和提取時(shí)間對(duì)總黃酮得率的影響。

控制料液比1∶20、提取溫度80 ℃、提取時(shí)間2 h,考察乙醇濃度(55%、65%、75%、85%、95%)對(duì)總黃酮得率的影響。

控制乙醇濃度85%、提取溫度80 ℃、提取時(shí)間2 h,考察料液比(1∶10、1∶20、1∶30、1∶40、1∶50 g/mL)對(duì)總黃酮得率的影響。

控制乙醇濃度85%、料液比1∶20、提取時(shí)間2 h,考察提取溫度(50、60、70、80、90 ℃)對(duì)總黃酮得率的影響。

控制乙醇濃度85%、料液比1∶20、提取溫度80 ℃,考察提取時(shí)間(1、2、3、4、5 h)對(duì)總黃酮得率的影響。

1.2.4 響應(yīng)面分析法優(yōu)化總黃酮提取工藝 根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果,進(jìn)行響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)及分析,得到豆腐柴總黃酮最佳提取工藝,最后進(jìn)行驗(yàn)證。因素水平表見表1。

表1 因素水平編碼表

1.3 總黃酮的提取純化

1.3.1 總黃酮粗提液預(yù)處理 豆腐柴葉總黃酮提取液50 ℃真空濃縮至無醇味,得總黃酮粗提液,然后用石油醚對(duì)總黃酮提取液進(jìn)行兩次萃取,再取水層濃縮除去殘留石油醚及絕大多數(shù)水得總黃酮萃取液,加入95%乙醇溶解,低溫靜置過夜沉降多糖、蛋白質(zhì)等雜質(zhì),抽濾后濃縮除去乙醇,用去離子水稀釋得一定濃度的總黃酮純化液,測(cè)定其總黃酮濃度以備用[10-11]。

1.3.2 樹脂的預(yù)處理 樹脂先用95%乙醇浸泡4 h,再用乙醇洗至流出液加適量水至無白色渾濁現(xiàn)象,再用去離子水洗盡醇味后用5%鹽酸浸泡4 h,濾過后用去離子水洗至中性,用4%氫氧化鈉溶液浸泡4 h,最后用去離子水洗至中性備用。

1.3.3 樹脂的吸附性能和解吸附性能測(cè)定和樹脂篩選 精確稱取抽濾并經(jīng)濾紙吸干過的樹脂(D101、D201、X-5、HZ-806)各1.00 g于200 mL錐形瓶中,分別加入25 mL濃度為0.984 mg/mL的豆腐柴葉總黃酮純化液,放入水浴振蕩器中振蕩?kù)o態(tài)吸附24 h(30 ℃、100 r/min)后測(cè)定平衡液總黃酮濃度并計(jì)算吸附量和吸附率。依次抽濾后,將大孔樹脂移回錐形瓶中,精密加入25 mL 95%乙醇,再解吸附24 h,測(cè)定解吸液總黃酮濃度并計(jì)算解吸率。比較篩選出理想型大孔吸附樹脂。吸附量(Q)、吸附率(E)、解吸率(D)、回收率(R)分別按照以下公式計(jì)算:

式中:C0-溶液起始濃度,mg/mL;Ce-溶液平衡濃度,mg/mL;V0-吸附液體積,mL;m-樹脂質(zhì)量,g;Cd-解吸液濃度,mg/mL;Vd-解吸液體積,mL。

1.4 豆腐柴葉總黃酮的初步鑒定

1.4.1 紫外光譜掃描分析 以95%乙醇校準(zhǔn)基線,對(duì)經(jīng)大孔吸附樹脂分離后的豆腐柴葉總黃酮分離液,于190～450 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行紫外-可見光譜掃描分析。

1.4.2 顯色反應(yīng) 鹽酸-鋅粉反應(yīng)、四氫硼鈉反應(yīng)、鋁鹽反應(yīng)、鎂鹽反應(yīng)和濃硫酸反應(yīng)[12]。

1.5 總黃酮自由基清除活性的測(cè)定

DPPH自由基清除活性測(cè)定[13],羥基自由基清除活性測(cè)定[14]。

1.6 數(shù)據(jù)處理

響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)結(jié)果由軟件“Design-Expert 8.0.6”處理,其余數(shù)據(jù)由軟件“Excel 2013”處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 乙醇濃度對(duì)總黃酮得率的影響

由圖1可看出,總黃酮得率隨乙醇濃度的增大而增大,當(dāng)乙醇濃度達(dá)到85%時(shí),總黃酮得率可達(dá)6.31%,乙醇濃度繼續(xù)增大,總黃酮得率下降。這可能取決于黃酮類物質(zhì)的極性,總黃酮主要以糖苷與黃酮苷元的形式存在,糖苷型易溶于水,而苷元型易溶于乙醇[15],當(dāng)達(dá)到乙醇溶液中的乙醇和水達(dá)到最佳配比時(shí),得率可得到最大值。根據(jù)總黃酮得率隨乙醇濃度的變化趨勢(shì),后續(xù)Box-Behnken實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中乙醇濃度低水平選擇75%,高水平選擇95%。

圖1 乙醇濃度對(duì)總黃酮得率的影響Fig.1 Effects of ethanol concentration on extraction rate of total flavonoids

2.2 料液比對(duì)總黃酮得率的影響

由圖2可看出,總黃酮得率隨料液比增大而逐漸增大,當(dāng)料液比達(dá)到1∶30時(shí),總黃酮得率達(dá)6.93%,此后總黃酮得率趨于穩(wěn)定。這主要是因?yàn)殡S著提取液體積的增加,一方面增加了溶劑的擴(kuò)散速率,另一方面增加了黃酮物質(zhì)與溶劑的接觸面和保持了增加的濃度差,使得黃酮容易擴(kuò)散游離出來,進(jìn)一步提高了黃酮得率。但是當(dāng)體積增加至一定值時(shí),這種效應(yīng)降低至無,或者黃酮本身已經(jīng)最大程度游離。因此,在不影響總黃酮得率的情況下,從節(jié)約成本的角度考慮,后續(xù)Box-Behnken實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中液比低水平選擇1∶20,高水平選擇1∶40。

圖2 料液比對(duì)總黃酮得率的影響Fig.2 Effects of materia/liquid ratio on extraction rate of total flavonoids

2.3 提取溫度對(duì)總黃酮得率的影響

控制乙醇濃度85%、料液比1∶20、提取時(shí)間2 h。由圖3可看出,總黃酮得率隨溫度的升高而逐漸增大,當(dāng)溫度達(dá)到80 ℃時(shí),總黃酮得率達(dá)6.31%。此后總黃酮得率逐漸下降。這可能是由于溫度逐漸升高時(shí),提取液黏度系數(shù)逐漸減小,分子擴(kuò)散系數(shù)增大,加快了滲透和傳遞的速度,使得黃酮類化合物從細(xì)胞中轉(zhuǎn)移到溶劑中。當(dāng)溫度繼續(xù)升高,一方面可能由于乙醇揮發(fā),導(dǎo)致提取液乙醇濃度下降,總黃酮溶解度下降;另一方面,溫度過高導(dǎo)致黃酮被氧化,活性受到了破壞,雜質(zhì)的溶出也影響了浸提效果。因此后續(xù)Box-Behnken實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中提取溫度低水平選70 ℃,高水平選擇90 ℃

圖3 提取溫度對(duì)總黃酮得率的影響Fig.3 Effects of extraction temperature on extraction rate of total flavonoids

2.4 提取時(shí)間對(duì)總黃酮得率的影響

由圖4可知,總黃酮得率隨提取時(shí)間增長(zhǎng)而逐漸升高,當(dāng)提取時(shí)間達(dá)到3 h時(shí),總黃酮得率可達(dá)6.53%。此后總黃酮得率有減小趨勢(shì),4 h時(shí)總黃酮得率為6.42%。這可能因?yàn)殡S著時(shí)間的進(jìn)一步增加,黃酮氧化分解。因此后續(xù)Box-Behnken實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中提取時(shí)間低水平選擇2 h,高水平選擇4 h。

圖4 提取時(shí)間對(duì)總黃酮得率的影響Fig.4 Effects of extraction time on extraction rate of total flavonoids

2.5 響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)

2.5.1 提取工藝優(yōu)化 響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2,方差分析結(jié)果見表3。四個(gè)因子經(jīng)過擬合得到的回歸方程為:

Y=7.17-0.20A+0.078B+0.24C+0.18D+0.15AB+0.022AC-0.15AD+0.050BC-0.020CD-0.85A2-0.12B2-0.17C2-0.61D2

表2 響應(yīng)面分析方案及實(shí)驗(yàn)結(jié)果

由R2=0.9551表示方程擬合度較好,說明這種實(shí)驗(yàn)方法是可靠的。方差分析結(jié)果表明,該模型差異極顯著(p<0.01),失擬度不顯著(p>0.05),說明該模型很好地反映了實(shí)驗(yàn)的實(shí)際情況,能用于豆腐柴葉總黃酮的提取或生產(chǎn)中。由方差分析結(jié)果可知,四個(gè)因素對(duì)總黃酮得率的影響的顯著性依次是:料液比>乙醇濃度>提取溫度>提取時(shí)間。由料液比、乙醇濃度、提取溫度三種因素的p值均<0.01,可知,料液比、乙醇濃度、提取溫度三種因素對(duì)總黃酮得率的影響極顯著。

兩兩因素相互作用對(duì)總黃酮得率的影響見圖5。3D圖形變化的坡度表示總黃酮變化的快慢,坡度越大,變化越快,即實(shí)驗(yàn)條件對(duì)結(jié)果的影響越顯著。由兩兩因素交互作用的p值均>0.01可知,交互作用對(duì)總黃酮得率的影響不顯著。所以舍去不顯著項(xiàng)得到優(yōu)化模型方程

Y=7.17-0.20A+0.078B+0.24C+0.18D-0.85A2-0.17C2-0.61D2

2.5.2 最佳工藝確定 通過回歸模型預(yù)測(cè)的豆腐柴中總黃酮提取的最優(yōu)工藝條件為:乙醇濃度84%、料液比1∶37(g/mL)、提取溫度81 ℃、提取時(shí)間3.4 h。在此條件下進(jìn)行三次提取,實(shí)際測(cè)得總黃酮平均得率為7.33%,RSD%為0.55%,與理論值7.29%相差不大,說明響應(yīng)面優(yōu)化得到的提取工藝條件可靠。

2.6 大孔吸附樹脂對(duì)豆腐柴葉總黃酮的吸附效果

大孔吸附樹脂因價(jià)格便宜且易再生,現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于天然活性產(chǎn)物的分離[16-17]。由表4可知,從吸附率、解吸率及回收率考慮,X-5型大孔吸附樹脂較為理想。這與大孔樹脂的極性、平均孔徑和比表面積有關(guān)系。部分黃酮具有酚羥基和糖苷鏈,具有一定極性和親水性,生成氫鍵能力較強(qiáng),有利于極性和弱極性樹脂吸附。而X-5型大孔樹脂吸附率較大主要是因?yàn)槠浔缺砻娣e大,增大了與黃酮的接觸面積。綜合考慮,選擇用X-5型大孔樹脂吸附。豆腐柴總黃酮經(jīng)過醇沉和X-5大孔吸附樹脂分離后,以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品,檢測(cè)其黃酮純度達(dá)到了85.34%。

表3 方差分析表

表4 不同類型樹脂對(duì)總黃酮靜態(tài)吸附和解吸結(jié)果

2.7 豆腐柴葉總黃酮的初步鑒定

2.7.1 紫外-可見光譜掃描曲線 紫外-可見光掃描結(jié)果如圖6所示,豆腐柴總黃酮在300～400 nm之間和220～280 nm之間有吸收峰、肩峰,說明它們可能為異黃酮、二氫黃酮及二氫黃酮醇類。

圖6 豆腐柴葉總黃酮的紫外-可見掃描光譜曲線Fig.6 UV-visible spectrum of total flavonids from Premna microphylla Turcz leaves

2.7.2 顯色反應(yīng) 總黃酮可能含有黃酮、黃酮醇、查耳酮、二氫黃酮或二氫黃酮醇等。黃酮類化合物分子中酚羥基和γ-吡喃環(huán)的差異與不同化學(xué)試劑反應(yīng)后呈現(xiàn)不同的顏色,根據(jù)現(xiàn)象可以判斷黃酮類化合物的種類[12]。表5綜合顯示豆腐柴葉總黃酮主要為二氫黃酮。

表5 豆腐柴葉總黃酮的顯色反應(yīng)

2.8 總黃酮DPPH自由基和羥自由基清除活性

圖7 總黃酮對(duì)DPPH自由基的清除活性Fig.7 Scavenging rates of total flavonoids on DPPH free radicals

DPPH自由基為萬能自由基,而羥基自由基為生物體最毒的自由基,兩者廣泛應(yīng)用于抗氧化劑的抗氧化活性篩選[18-19]。如圖7和圖8所示,豆腐柴葉總黃酮、VC和BHA對(duì)DPPH自由基和羥自由基的清除率均隨質(zhì)量濃度的升高而逐漸增大,半數(shù)抑制濃度分別為0.10 mg/mL和0.13 mg/mL。對(duì)于DPPH自由基,當(dāng)濃度小于0.2 mg/mL時(shí),總黃酮純化液對(duì)DPPH自由基的清除率與BHA差距較大;當(dāng)濃度等于0.2 mg/mL時(shí),其清除率為83.75%與同濃度的BHA溶的清除率85.99%相近,但與同濃度VC的清除率92.01%差距較大;當(dāng)濃度大于0.2 mg/mL后,其清除率基本保持穩(wěn)定,不再增長(zhǎng),其清除率近與BHA?？傸S酮粗提液對(duì)DPPH自由基的清除率在濃度為0.2 mg/mL附近時(shí)達(dá)到穩(wěn)定,此時(shí)清除率為91.43%,接近VC的清除率,優(yōu)于BHA的清除率,同時(shí)也優(yōu)于黃酮純化液。對(duì)于羥自由基,在濃度低于0.1 mg/mL時(shí),總黃酮純化液及粗提液對(duì)羥基自由基的清除率要優(yōu)于VC。當(dāng)濃度達(dá)到0.4 mg/mL時(shí),總黃酮純化液及粗提液對(duì)羥基自由基的清除率趨于穩(wěn)定。此時(shí)總黃酮純化液對(duì)羥基自由基的清除率為80.08%,與BHA對(duì)羥基自由基的清除率相當(dāng),但清除效果遠(yuǎn)低于VC;總黃酮粗提液對(duì)羥基自由基的清除率為98.01%,與VC的98.38%相近,遠(yuǎn)優(yōu)于清除效果BHA。這可能是粗提液中含有其它類型黃酮類化物或者一些抗氧化活性較強(qiáng)的色素類成分。

圖8 不同抗氧化劑對(duì)羥自由基的清除活性Fig.8 Scavenging rates of total flavonoids on hydroxyl free radicals

3 結(jié)論

四川綿陽江油地區(qū)豆腐柴黃酮類化合物豐富。Box-Behnken實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化乙醇浸提總黃酮工藝,并采用及響應(yīng)面分析得到適合于總黃酮提取的模型方程。最佳提取工藝為乙醇濃度84%、料液比1∶37(g/mL)、提取溫度81 ℃、提取時(shí)間3.4 h,此條件下總黃酮得率為7.29%。X-5型大孔吸附樹脂適合純化豆腐柴葉總黃酮。顯色反應(yīng)和紫外光譜分析初步鑒定該黃酮主要為二氫黃酮?？傸S酮粗提物和純化物均具有較好的抗氧化活性,但粗提物效果更好,可能是因?yàn)樵诩兓^程中部分其它結(jié)構(gòu)黃酮丟失,或者有其他非黃酮類成分具有較強(qiáng)的抗氧化活性分析,有待進(jìn)一步精細(xì)分離和構(gòu)效關(guān)系研究。

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Extraction,purification and antioxidant activity of total flavonoids fromPremnamicrophyllaTurcz leaves

HU Yu1,LI Xu-sheng1,MA Nan,ZHANG Xue-min1,MAO Yu-bo1,CHEN Li-ping1,XIONG Shuang-li1,2,*,XUE Chao-gui3

(1.School of Life Science and Engineering,Southwest University of Science and Technology,Mianyang 621010,China;2.Engineering Research Center for Biomass Resource Utilization and Modification of Sichuan Province,Mianyang 621010,China;3.Jiangyou Chunyu Ecological Agricultural Science and Technology Company,Jiangyou 621700,China)

On the basis of the single factor experiment,this article firstly adopted response surface methodology to optimize the extraction technology of total flavonoids frompremnamicrophyllaturcz leaves,then screened macroporous adsorptive resins which were suitable for extracting total flavonoids,at last made the preliminary identification and analyzed free radical scavenging activity of them. The results showed that the optimal conditions of the ethanol extraction were as follows:ethanol concentration for 84%,solid-liquid ratio for 1∶37(g/mL),temperature for 81 ℃ and time for 3.4 h. Under these conditions,we could get 7.29% of the total flavonoids. Meanwhile,the macroporous adsorptive resin X-5 was suitable for the separation of total flavonoids. The colour reaction and UV-vis spectrum exhibited that dihydroflavone was probably the major components. The DPPH radical and hydroxyl radical scavenging rate of the premna leaves flavonoids increased with the increasing of the concentration and the IC50values were 0.10 mg/mL and 0.13 mg/mL,respectively. When the concentrations were 0.2 mg/mL and 0.4 mg/mL. The DPPH radical and hydroxyl radical scavenging rate were 83.75% and 80.08%,respectively,which were close to that of tert-butyl hydroxy anisole. These data suggested that flavonoids frompremnamicrophyllaturcz leaves were developed as antioxidant or raw materials of health food.

PremnamicrophyllaTurcz;total flavonoids;extraction technology;antioxidant activity

2016-03-23

胡予(1995-),女,在讀本科,研究方向:食品生物化學(xué),E-mail:643844210@qq.com。

*通訊作者:熊雙麗(1977-),女,教授,研究方向:功能性食品加工與安全,E-mail:372364129@qq.com。

四川省生物質(zhì)資源利用與改性工程技術(shù)研究中心專職科研創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)建設(shè)基金項(xiàng)目(14tdgc04)。

TS

A

1002-0306(2016)20-0000-00

10.13386/j.issn1002-0306.2016.20.000