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      滇金絲猴腸道寄生線蟲的生防捕食線蟲真菌篩選

      2016-12-09 05:32:09林慧彪李延鵬段繼霞夏豐雨熊和菊王嘉寶楊曉燕肖文
      四川動物 2016年1期
      關鍵詞:生防金絲猴黏性

      林慧彪, 李延鵬, 段繼霞, 夏豐雨, 熊和菊, 王嘉寶, 楊曉燕*, 肖文

      (1. 大理大學農學與生物科學學院,云南大理671003; 2. 大理大學東喜瑪拉雅資源與環(huán)境研究所,云南大理671003)

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      滇金絲猴腸道寄生線蟲的生防捕食線蟲真菌篩選

      林慧彪1, 李延鵬2, 段繼霞1, 夏豐雨1, 熊和菊1, 王嘉寶2, 楊曉燕1*, 肖文2

      (1. 大理大學農學與生物科學學院,云南大理671003; 2. 大理大學東喜瑪拉雅資源與環(huán)境研究所,云南大理671003)

      據(jù)報道,靈長類動物體內寄生線蟲感染情況嚴重。我國特有珍稀靈長類動物——滇金絲猴Rhinopithecusbieti腸道也受到寄生線蟲感染,其健康極受影響。滇金絲猴數(shù)量稀少,極需保護。捕食線蟲真菌是線蟲的天敵,具較高的生防動物寄生線蟲的潛力。為提供應用捕食線蟲真菌生防滇金絲猴腸道寄生線蟲的科學依據(jù),本研究從滇金絲猴糞便分離捕食線蟲真菌,量化測定及比較不同捕食器官類型和來自不同生境的捕食線蟲真菌的捕食率,從中篩選有較高捕食率的菌株。結果顯示,從滇金絲猴糞便及其他不同生境共篩選到3株捕食率較高的捕食線蟲真菌菌株:Dactylellinagephyropaga(331-1),Dac.drechsleri(84-1),Drechslerelladactyloides(342-2),其捕食率分別為:81.10%,76.17%,81.33%,其中331-1分離自滇金絲猴糞便,該菌株具有高效生防滇金絲猴腸道寄生線蟲的潛力;來自不同生境或同一生境同種不同株的捕食線蟲真菌的捕食率差異較大;產黏性菌網的捕食線蟲真菌其捕食率普遍低于產收縮環(huán)、黏性分枝和黏性球的捕食線蟲真菌;捕食線蟲真菌的捕食率與捕食器官生成速度呈負相關關系。

      滇金絲猴; 寄生線蟲; 捕食線蟲真菌; 生防菌株; 捕食率

      滇金絲猴Rhinopithecusbieti又名黑白仰鼻猴,隸屬于靈長目Primates猴科Cercopithecidae疣猴亞科Colobinae仰鼻猴屬Rhinopithecus,是我國特有靈長類之一,分布于金沙江和瀾滄江間云嶺山脈的一個狹小區(qū)域內(98°37′~99°41′E,26°14′~29°20′N),是目前發(fā)現(xiàn)棲息地最高的非人靈長類,我國Ⅰ級保護動物,世界自然保護聯(lián)盟(International Union for the Conservation of Nature,IUCN)將之確立為瀕危(EN)等級,數(shù)量稀少,極需保護(白壽昌等,1988;Longetal.,1994;龍勇誠等,1996;李學友等,2008)。

      野生動物寄生蟲感染情況不容樂觀,特別是靈長類,各種群間都存在交叉感染狀況(Huffman & Chapman,2009)。據(jù)李延鵬等(2014)報道,滇金絲猴體內受到毛首線蟲Trichurissp.、鉤蟲Ancylostomasp.、結節(jié)線蟲Oesophagostomumsp.、蛔蟲Ascarissp.、肝毛細線蟲Capillariahepatica等多種線蟲的感染,其健康受到嚴重威脅。目前,對動物寄生線蟲病的防治主要依賴于化學藥物,但由此產生的線蟲耐藥性問題及藥物殘留導致的環(huán)境污染問題也日漸受到人們的廣泛關注(明安宇,1991;張宏偉等,2002;孫建華,姜中其,2004;蔡葵蒸,2007;郝成,2007;姜波等,2007;蒲文兵,2009)。因此,從自然界發(fā)掘寄生線蟲的天敵逐漸成為國內外研究的熱點(Duddington,1951;Rubner,1996;李天飛等,2000;張克勤,莫明和,2006),但目前還未見有關滇金絲猴寄生線蟲生物防治的研究報道。

      捕食線蟲真菌是以菌絲特化形成黏性菌網(adhesive nets)、黏性分枝(adhesive branches)、無柄黏性球(sessile adhesive knobs)、有柄黏性球(stalked adhesive knobs)、非收縮環(huán)(non-constricting rings)、收縮環(huán)(constricting rings)等捕食器官捕殺線蟲的一類菌物,是自然界中控制線蟲數(shù)量的主要方法之一,因此是生物防治線蟲的重要資源(Duddington,1951;Rubner,1996;李天飛等,2000;張克勤,莫明和,2006)。

      盡管國內外對糞生捕食線蟲真菌有一定的調查(Ghanfarolehietal.,2004;蘇鴻雁,2006;蘇錫鈞等,2014),但高原野生靈長類的糞生捕食線蟲真菌資源卻一直無人問津。本研究從滇金絲猴糞便中直接分離捕食線蟲真菌,并通過自制可量化的設備測定來自不同生境的捕食線蟲真菌的捕食率,以篩選滇金絲猴腸道寄生線蟲的高效生防菌株。本實驗結果對利用捕食線蟲真菌生防滇金絲猴體內寄生線蟲的研究具有重要應用價值,對其他動物寄生線蟲的生防研究具有一定的指導意義。

      1 材料與方法

      1.1 捕食線蟲真菌的分離鑒定

      1.1.1 樣品采集 滇金絲猴新鮮糞便由大理大學東喜瑪拉雅資源與環(huán)境研究所在云南省迪慶州維西縣塔城滇金絲猴保護基地采集,共采集21份糞樣,樣品置于4 ℃冰箱保存,并在2周內完成撒樣工作。

      1.1.2 玉米瓊脂培養(yǎng)基(CMA)的配制 稱取40 g新鮮玉米粉,加入1000 mL蒸餾水,微火煮沸30 min,補足水分至1000 mL,用紗布過濾后,取濾液10 mL,加990 mL蒸餾水,然后加入20 g瓊脂粉,經121 ℃ 20 min高壓滅菌后,傾注于直徑為90 mm和60 mm的滅菌玻璃培養(yǎng)皿中備用。

      1.1.3 誘餌線蟲的制備 采用貝爾曼氏法(Giuma & Cooke,1972)制備全齒復活線蟲Panagrellusredivivus幼蟲混懸液,每0.1 mL約含線蟲500條,備用。

      1.1.4 撒樣培養(yǎng) 采用誘餌平板法。用無菌牙簽將采回的糞便和土樣均勻地撒在CMA培養(yǎng)基上,撒樣時樣品之間要留有適當空隙,樣品距培養(yǎng)皿邊緣空1 cm左右以便于觀察,且單孢分離時可減少污染,每個樣品設3個重復。每個撒樣平板中加入線蟲2000~5000條做誘餌,室溫培養(yǎng)30 d左右(李天飛等,2000)。

      1.1.5 分離純化 在體視顯微鏡下對每個平板進行鏡檢,并用無菌牙簽挑取單個被檢出的捕食線蟲真菌孢子,轉接到CMA培養(yǎng)基中,置于25 ℃培養(yǎng)箱恒溫培養(yǎng)6~7 d,得到目的菌的純培養(yǎng)(李天飛等,2000)。

      1.1.6 鑒定 采用黏片法,用透明的塑料膠帶黏取菌落,黏在滴有一滴呂氏美藍染色液的載玻片上,加蓋蓋玻片,制成臨時裝片,顯微鏡(40×)下鏡檢,確定分生孢子和菌絲形態(tài)及分生孢子梗的類型,并測定100個分生孢子的大小和分隔數(shù),分生孢子梗的頂寬、基寬和長度以及菌絲的寬度,計算出最小值、最大值和平均值。誘導捕食器官,在純培養(yǎng)的CMA平板中央切除1 cm×1 cm的培養(yǎng)基作為捕食器官觀察室,待菌絲鋪滿觀察室后滴加誘餌線蟲懸液(約200條線蟲),置于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 h后,在體視顯微鏡下觀察形成的各種捕食器官類型。對不易在CMA平板上產生捕食器官的菌株,轉接至水瓊脂培養(yǎng)基,于25 ℃恒溫培養(yǎng)3 d后再接入誘餌線蟲,待捕食器官生成后再觀察捕食器官類型。結合菌株形態(tài)特征(李天飛等,2000)及捕食器官類型(Lietal.,2005)進行分類和鑒定。

      1.1.7 數(shù)據(jù)處理 檢出率(occurrence frequency,OF)=某個種出現(xiàn)的土樣數(shù)/總的土樣數(shù)×100%。

      1.2 標準模具設計與制作

      用于捕食率測定的標準模具的設計主要符合3點基本要求:可標準化測定捕食率;可用于高壓蒸汽滅菌;可多次重復使用?;谝陨?點,模具設計如下:以直徑為66 mm,厚度為7 mm不銹鋼圓盤為主體,在直徑為62~56 mm處挖一個寬3 mm,深5 mm的環(huán)形凹槽,用于卡住60 mm的平板邊緣,以達到準確定位的效果;在直徑為35 mm的圓周上等距分布4個點,分別以這4個點為中心,以螺紋的形式打一個貫穿整個圓盤的直徑為6 mm的圓孔,圓孔處擰上一根一端是漸細的圓臺形的螺絲,用于培養(yǎng)基上標定4個等距的加入捕食線蟲真菌分生孢子的位點(以下簡稱加孢位點),螺絲的高度是可以調節(jié)的,以保證在培養(yǎng)基上所留下記號的痕跡的深度一致;在直徑為25 mm處嵌上一個外徑為25 mm的不銹鋼圓管,用于在培養(yǎng)基上切下一個直徑為25 mm的觀察室。該模具由興化市銀萊不銹鋼制品有限公司制作。

      1.3 捕食線蟲真菌菌株來源

      除本次分離所得菌株外,其余待測菌株(9株)由大理大學農學與生物科學學院微生物實驗室的菌種庫提供,分別為Arthrobotrys屬的A.oligospora(HA135-2和66-1)2株,A.conoides(67-1)1株,A.musiformis(ZB15-1)1株;Dactylellina屬的Dac.gephyropaga(83-3)1株,Dac.drechsleri(84-1和317-1)2株;Drechslerella屬的Dre.dactyloides(342-2和14-1)2株。

      1.4 捕食線蟲真菌菌株最適生長溫度的測定

      將目的菌株在25 ℃下純培養(yǎng)7 d,用已滅菌的內徑6 mm、外徑7 mm的標準不銹鋼圓管將菌塊切成等大的圓柱形,接種于60 mm的CMA平板中央,分別置于22 ℃、24 ℃、26 ℃、28 ℃、30 ℃的恒溫培養(yǎng)箱中恒溫培養(yǎng),每組設3個平行。每隔24 h測量一次菌落直徑,5 d后統(tǒng)計數(shù)據(jù)。

      1.5 捕食線蟲真菌菌株捕食率的量化測定和比較

      1.5.1 捕食率量化測定培養(yǎng)基的制備 取直徑60 mm,培養(yǎng)基厚度剛好是平板一半的CMA平板,在無菌操作下用已滅菌的標準模具在培養(yǎng)基中央切出直徑為25 mm的圓形觀察室,并標定4個加孢位點。

      1.5.2 菌種的定量轉接、培養(yǎng)及生長率測定 在每個加孢位點依次加入3個分生孢子。然后將已接菌的平板分別置于各自的最適生長溫度下恒溫培養(yǎng),每組設3個平行。每隔24 h測量一次菌落直徑,直至相鄰2個菌落相接觸。

      1.5.3 捕食器官的生成時間及捕食率測定 將上述用于生長率測定的培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)至第15天后加50 μL線蟲懸浮液(約150條線蟲),再將已接菌的平板分別置于各自的最適生長溫度下恒溫培養(yǎng)。每隔5 h在體視顯微鏡下觀察捕食器官生成情況并計數(shù)死活線蟲量。連續(xù)觀察至第5天??瞻讓φ眨涸诮o實驗平板加入線蟲懸浮液的同時,在未接線蟲的標準化CMA平板中央觀察室加50 μL線蟲懸浮液(約150條線蟲),并與實驗平板同時進行恒溫培養(yǎng)和計數(shù)。

      1.5.4 捕食率的計算公式 R=X/(X+Y)×100%-N,其中:R為捕食率;X為被捕獲的蟲體數(shù);Y為自由活動的蟲體數(shù),N為空白對照的自然死亡率。

      1.5.5 數(shù)據(jù)的處理與分析 數(shù)據(jù)使用Excel 2013進行初步整理,SPSS 19.0軟件進行統(tǒng)計分析。對各菌株的生長率、加入線蟲后至捕食器官生成時間、捕食率采用鄧肯氏新復極差法進行差異性分析。對捕食器官的生成時間與捕食率的相關關系采用Pearson系數(shù)法進行相關性分析。顯著性水平設為α=0.05。

      2 結果

      2.1 捕食線蟲真菌資源調查結果

      本次調查共從21份滇金絲猴新鮮糞便樣品中分離到2屬6種共27株捕食線蟲真菌,其中Arthrobotrys4種,Dactylellina2種,產黏性菌網的捕食線蟲真菌占86.37%,為優(yōu)勢菌群(表1)。

      基于對滇金絲猴糞便中捕食線蟲真菌的資源調查結果,本次滇金絲猴腸道寄生線蟲的生防捕食線蟲真菌篩選實驗共選用了滇金絲猴糞生菌5株,其中Arthrobotrys屬的A.oligospora(315-1)1株,A.musiformis(314-1)1株,A.conoides(316-1)1株,Dactylellina屬的Dac.gephyropaga(329-1,331-1)2株。加上1.3中9株菌,本實驗共用14株菌。

      2.2 標準模具的設計與制作結果

      標準模具成品如圖1。

      2.3 生長率的測定結果

      生長率的測定結果顯示各捕食線蟲真菌菌株的最適生長溫度為24 ℃~28 ℃;Arthrobotrys屬捕食線蟲真菌在最適溫度下的生長率大于Dactylellina屬和Drechslerella屬的菌株(表2)。

      表1 滇金絲猴糞便中捕食線蟲真菌的資源調查結果

      圖1 標準模具成品

      2.4 捕食率的量化測定和比較結果

      2.4.1 捕食器官類型與捕食率的關系 應用標準模具對來自不同生境、產不同捕食器官的捕食線蟲真菌的捕食率進行測定后發(fā)現(xiàn):來自滇金絲猴糞便、產黏性菌網的捕食線蟲真菌(316-1、314-1和314-1)的捕食率明顯低于產黏性分枝(331-1和329-1)的捕食線蟲真菌,其中Dac.gephyropaga(331-1)的捕食率(81.10%±3.24%)較高,僅次于分離自大理洱海的Dre.dactyloides(342-2);同種捕食線蟲真菌菌株的捕食率存在生境差異;同種異株間,生長率較高的菌株捕食率相對較低,反之亦然;除317-1,83-3和14-1外,其余菌株在觀測時間內都未產生捕食器官。僅從捕食器官類型來看,捕食率較高的捕食器官為收縮環(huán)、黏性分枝和有柄黏性球,黏性菌網的捕食率整體偏低(表3)。

      3.4.2 捕食器官的生成時間與捕食率的相關關系加入線蟲至捕食器官生成的時間與捕食率的相關關系如圖2所示,二者的Pearson相關系數(shù)r=-0.772(P=0.005),呈明顯的負相關關系。捕食器官的生成時間越短,菌株捕食率越高,反之亦然。83-3、317-1、14-1在觀測時間內未產生捕食器官,這3株菌株的捕食率明顯低于其他菌株。

      3 分析與討論

      3.1 捕食器官類型與捕食率的相關關系

      關于捕食器官的演化過程與捕食效力強弱之間的關系,研究學者們的觀點一直存在分歧。李天飛等(2000)認為黏性菌網捕食效力低,是一種較其他黏性捕食器官原始的捕器類型。Li等(2005)應用分子系統(tǒng)發(fā)育學研究后提出:黏性球是最早形成的捕食器官,由此分兩支分別演化為收縮環(huán)和黏性菌網,黏性菌網被認為是進化地位和捕食效力較強的捕食器官,而Yang等(2007)卻認為黏性網是一種比較古老的捕器類型。Yang等(2012)則認為捕食線蟲真菌的總體進化趨勢是增加黏性面積和延長黏性結構以提高捕食效力。這些研究都將捕食效力強弱作為判定不同捕食器官進化地位高低的主要依據(jù)之一,但對有關不同捕食器官的捕食效力強弱的研究卻一直沒有實現(xiàn)可量化的測定。本研究通過標準模具定量比較來自不同生境、產不同捕食器官的捕食線真菌的捕食率,發(fā)現(xiàn)僅從捕食器官類型來看,捕食率較高的捕食器官為收縮環(huán)、黏性分枝和黏性球,黏性菌網的捕食率整體偏低,而來自不同生境或相同生境的同種異株捕食線蟲真菌的捕食率均存在較明顯的菌株差異,再結合生長速度與捕食關系的研究結果分析,我們認為捕食器官的捕食能力強弱與捕食線蟲真菌的腐生能力有關,因此把捕食器官的捕食效力作為判斷捕食線蟲真菌演化地位的依據(jù)的科學性還有待更加系統(tǒng)的研究。

      表2 捕食線蟲真菌在各溫度下的生長率(平均值±標準差)

      表3 捕食率測定結果(平均值±標準差)

      圖2 捕食器官的生成時間與捕食率的關系

      3.2 捕食器官的生成時間與捕食率的相關關系

      捕食線蟲真菌的捕食率與加入線蟲后其產生捕食器官的時間呈明顯的負相關關系(Pearson相關系數(shù)r=-0.772,P=0.005)。收縮環(huán)、黏性球及黏性分枝類產生菌產生捕食器官的時間明顯早于黏性菌網產生菌,且捕食率均顯著高于后者。其原因可能是因為捕食線蟲真菌所產生的捕食器官能夠增強真菌捕殺線蟲的主動性及殺傷力,因此,如果采取相應措施加快捕食線蟲真菌捕食器官生成速度,可顯著提高捕食線蟲真菌的捕食率。有研究發(fā)現(xiàn):某些多肽類物質可誘導A.oligospora捕食器官的形成(Nordbring-Hertz,1973);不同生長期的秀麗隱桿線蟲Caenorhabditiselegans對捕食線蟲真菌捕食器官的誘導效果存在顯著性差異(劉珅坤,2008);一些細菌的發(fā)酵產物可加快捕食線蟲真菌捕食器官的形成(馬名川,2012);用低能氮離子束可使A.oligospora對線蟲的捕食率等方面產生正突變(王軍等,2012)。因此,在捕食線蟲真菌生防菌株的構建中,可以將環(huán)境適應能力強的菌株進行定向改造,提高捕食器官的生成速度,則可獲得較為優(yōu)秀的生防菌株。

      3.3 捕食線蟲真菌生防滇金絲猴腸道寄生線蟲的展望

      目前,國內外共報道捕食線蟲真菌近100種(Zhangetal.,2014)。利用捕食線蟲真菌對寄生線蟲進行生物防治的研究始于1938年,Linford和Yap(1938)首次將捕食線蟲真菌作為制劑放入土壤中防治線蟲,從此拉開了用生防菌劑防治線蟲的序幕。對動物寄生線蟲的生物防治研究也取得了一定進展,如:Larsen等(1995),Gr?nvold等(1996)和楊曉野等(2005)的研究顯示,給放牧羊、牛、馬等家畜服用捕食線蟲真菌后,多種寄生線蟲的感染強度下降,牧場中感染性幼蟲數(shù)量顯著降低,從而使放牧家畜的胃腸道寄生蟲數(shù)量和糞便中蟲卵數(shù)量減少,臟器病變減輕,體質量明顯增加,達到了生防線蟲的目的;Fernández等(1999)和Sarkunas等(2000)研究了真菌水平對減少幼蟲數(shù)量有無差異的實驗,結果表明:孢子量的多少與感染性幼蟲數(shù)量的增減有關;Waller等(2001a,2001b)已能利用捕食線蟲真菌的孢子制成片劑,羊群服用后,其寄生線蟲感染率顯著降低。

      野生動物種類多,活動范圍廣,交叉感染寄生蟲的概率比較高,野生動物寄生蟲感染情況不容樂觀,特別是靈長類,各種群間都存在交叉感染(王根紅等,2002;蔡娟等,2009;Huffman & Chapman,2009;明珠,2010;李延鵬等,2014)。因此,寄生蟲病嚴重危害著野生動物的健康,更威脅瀕危動物的生存,是瀕危動物保護工作中亟待解決的一大難題。采用化學藥物防治寄生線蟲存在的問題已經被廣泛認識。因此,生物防治寄生線蟲的研究也就逐漸成為研究熱點,但針對野生動物寄生線蟲的生物防治研究卻一直未被相關學者關注。從自然界中篩選適合野生動物寄生線蟲病防治的高效生防菌株,是研發(fā)生防菌劑的重要工作基礎。

      本次調查從21份滇金絲猴糞便中分離到Arthrobotrys屬和Dactylellina屬共27株捕食線蟲真菌。通過定量比較,發(fā)現(xiàn)分布其中的產黏性分枝的331-1和329-1捕食率均較高,其中331-1(Dac.gephyropaga)的捕食率(81.10%)僅稍低于分離自大理洱海的342-2(Dre.dactyloides),說明滇金絲猴腸道中存在豐富的捕食線蟲真菌資源和捕食效力較強的捕食線蟲真菌菌株,捕食線蟲真菌能夠適應滇金絲猴腸道環(huán)境。結合已有的利用捕食線蟲真菌孢子制成菌劑并有效防治牛、羊腸道寄生線蟲的成功案例(Walleretal.,2001a,2001b),從滇金絲猴糞便中直接篩選捕食效力較強的生防菌株用于滇金絲猴腸道寄生線蟲的生物防治是確實可行的。開展滇金絲猴腸道寄生線蟲的生物防治研究不僅對滇金絲猴保護意義重大,同時可為其他野生動物寄生線蟲進行生物防治提供參考。

      由于本研究還未對其他生境來源菌株進行滇金絲猴腸道環(huán)境適應能力測試,因此尚不確定非滇金絲猴腸道生境菌株是否能夠用于滇金絲猴腸道寄生線蟲的防治,我們將對此進行更加系統(tǒng)的研究。

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      Screening of Nematode-trapping Fungi for Biocontrol Intestinal Parasitic Nematode of Yunnan Snub-nosed Monkey

      LIN Huibiao1, LI Yanpeng2, DUAN Jixia1, XIA Fengyu1,XIONG Heju1, WANG Jiabao2, YANG Xiaoyan1*, XIAO Wen2

      (1. College of Agriculture and Biology, Dali University, Dali, Yunnan Province 671003, China;2. Institute of Eastern-Himalaya Biodiversity Research, Dali University, Dali, Yunnan Province 671003, China)

      The parasitic nematodes infection in primates was serious. The endemic rare primate species, Yunnan snub-nosed monkey (Rhinopithecusbieti), has also been subjected to parasitic nematodes infection in the intestinal and badly affected its health. As a natural enemy against nematodes, nematode-trapping fungi were important biological resources for parasitic nematode biocontrol. To figure out the scientific basis for the application of nematode-trapping fungi in biocontrol of parasitic nematodes, this study screened the nematode-trapping fungi strains with high predation capacity from the feces of Yunnan snub-nosed monkey, and the trapping efficacy was quantitatively compared with the strains obtained from different habitats by a homemade tool. The results showed that three nematode-trapping fungi strains isolated from the feces of Yunnan snub-nosed monkey and the habitats, had the higher predation capacity. The three strains were identified asDactylellinagephyropaga(331-1),Dac.drechsleri(84-1),Drechslerelladactyloides(342-2), and their trapping efficacies were 81.10%, 76.17%, and 81.33%, respectively. Among of which, the strain 331-1, isolated from the feces of Yunnan snub-nosed monkey, might be the most promising candidate for the biocontrol of Yunnan snub-nosed monkey intestinal parasitic nematodes. The trapping efficacies of nematode-trapping fungi strains from different habitats or the strains from the same habitat were quite different. Generally, nematode-trapping fungi that produced adhesive networks had lower trapping efficacy than those produced contracting rings, adhesive branches and adhesive knobs, in addition, the trapping efficacies were negatively correlated with formation rate of the trapping devices.

      Yunnan snub-nosed monkey (Rhinopithecusbieti); parasitic nematodes; nematode-trapping fungi; biocontrol strains; trapping efficacy

      10.11984/j.issn.1000-7083.20150200

      2015-06-03 接受日期:2015-09-14

      國家自然科學基金項目(31100093, 31360013, 31260149); 云南省高校滇西北生物多樣性科技創(chuàng)新團隊基金項目(云教函[2011]93號)

      林慧彪(1993—), 男, 動物科學專業(yè)在讀本科生, 研究方向: 捕食線蟲真菌及其生防應用

      *通信作者Corresponding author, E-mail:yangxy.dlu@gmail.com

      S855.9; Q959.8

      A

      1000-7083(2016)01-0031-07

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