兒童和成人下呼吸道感染病原菌分布及耐藥性差異分析

周 聰，柯文才，錢雪琴，胡 娟，劉亞雋，張 慧，申春梅

(1.上海市第五人民醫(yī)院檢驗科 200240；2.上海市公共衛(wèi)生臨床中心檢驗科 201058)

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·論 著·

兒童和成人下呼吸道感染病原菌分布及耐藥性差異分析

周 聰1，柯文才1，錢雪琴2，胡 娟1，劉亞雋1，張 慧1，申春梅1

(1.上海市第五人民醫(yī)院檢驗科 200240；2.上海市公共衛(wèi)生臨床中心檢驗科 201058)

目的 研究兒童和成人下呼吸道感染病原菌分布及耐藥性，比較兩者差異，為臨床合理用藥提供依據(jù)，減緩耐藥病原菌的產(chǎn)生。方法 采集2014年1月至2015年10月兒童和成人下呼吸道感染患者的痰標本和支氣管肺泡灌洗液，進行細菌鑒定及藥敏試驗，比較兩者差異。結(jié)果 兒童和成人患者分離的病原菌均以革蘭陰性桿菌為主，分別占62.4%和89.7%，革蘭陽性球菌分別占37.6%和10.3%。兒童患者分離的革蘭陰性桿菌排名依次為流感嗜血桿菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動桿菌、卡他莫拉菌、陰溝腸桿菌、銅綠假單胞菌；分離的革蘭陽性球菌排名依次為金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌。成人分離的革蘭陰性桿菌排名依次為肺炎克雷伯菌、鮑曼不動桿菌、銅綠假單胞菌、嗜麥芽窄食單胞菌、黏質(zhì)沙雷菌、大腸埃希菌、陰溝腸桿菌；分離的革蘭陽性球菌排名依次為金黃色葡萄球菌、無乳鏈球菌、肺炎鏈球菌。兒童和成人患者耐甲氧西林金黃色葡萄球菌分別為12.8%和53.9%。兒童分離的革蘭陰性桿菌對碳青霉烯類藥耐藥率較低，小于5.0%；成人對碳青霉烯類藥耐藥率較高，尤其是鮑曼不動桿菌，其對碳青霉烯類藥耐藥率大于50.0%。結(jié)論 兒童和成人病原菌株分布和耐藥性差異較顯著，臨床用藥應充分考慮，為患者早期治療提供依據(jù)，同時盡快進行藥敏試驗，科學合理用藥。

兒童； 成人； 下呼吸道感染； 病原菌分布； 耐藥性分析

下呼吸道感染是臨床常見、多發(fā)的感染性疾病，隨著臨床廣譜抗菌藥物的濫用，細菌耐藥性呈上升趨勢。兒童呼吸道發(fā)育不完善，免疫力低下，定植菌容易引起下呼吸道感染，預后較差，是年齡小于5歲兒童的主要死亡原因之一。本研究將研究兒童和成人下呼吸道病原菌分布和耐藥性，比較2組人群結(jié)果的異同，為臨床合理用藥提供依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 兒童菌株來源于2014年1月至2015年10月上海市第五人民醫(yī)院兒科病房和門診兒童的痰標本和支氣管肺泡灌洗液標本共1 239例，剔除重復株，分離病原菌423株。成人菌株來源于2014年1月至2015年10月上海市第五人民醫(yī)院住院和門診成人的痰標本和支氣管肺泡灌洗液標本共7 599例，剔除重復株，分離病原菌3 182株。所有菌株均采自臨床診斷為下呼吸道感染患者。

1.2 儀器與試劑 儀器采用法國生物梅里埃Vitek 2 compact細菌鑒定與藥敏分析儀，以及與之配套的革蘭陰性桿菌、革蘭陽性球菌、酵母菌、苛養(yǎng)菌鑒定卡。培養(yǎng)基血平板、巧克力和中國藍平板購自科瑪嘉，抗菌藥敏紙片由北京天壇公司提供。質(zhì)控菌株大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、金黃色葡萄球菌ATCC25923均由上海市臨床檢驗中心提供。

1.3 方法 痰合格標本應白細胞≥25/LP，上皮細胞≤10/LP。痰和支氣管肺泡灌洗液標本2 h內(nèi)接種于血平板、巧克力和中國藍平板，放5.0%CO2培養(yǎng)箱35 ℃培養(yǎng)18～24 h，若無致病菌生長，則延長培養(yǎng)至48 h觀察結(jié)果。按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》分離病原菌[1]，細菌鑒定采用上機做鑒定，嚴格按照操作規(guī)程。藥敏分析采用紙片擴散法(K-B法)，嚴格按照2014版美國臨床和實驗室標準協(xié)會(CLSI)操作和判讀。

1.4 統(tǒng)計學處理 采用WHONET 5.6軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料以率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 病原菌分布 兒童采集的1 239例標本中，分離出402株病原菌，分離陽性率為32.4%。其中革蘭陰性桿菌為251株(占62.4%)，革蘭陽性球菌為151株(占37.6%)。成人采集的7 599例標本中，分離出2 856株病原菌，分離陽性率為37.6%。其中革蘭陰性桿菌為2 562株(占89.7%)，革蘭陽性球菌為294株(占10.3%)。成人分離陽性率略高于兒童，兒童和成人分離的病原菌株都以革蘭陰性桿菌為主，但兒童分離的革蘭陽性球菌比例顯著高于成人。見表1、2。兒童分離的革蘭陰性桿菌排名依次為流感嗜血桿菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動桿菌、卡他莫拉菌、陰溝腸桿菌、銅綠假單胞菌；分離的革蘭陽性球菌排名依次為金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌。成人分離的革蘭陰性桿菌排名依次為肺炎克雷伯菌、鮑曼不動桿菌、銅綠假單胞菌、嗜麥芽窄食單胞菌、黏質(zhì)沙雷菌、大腸埃希菌、陰溝腸桿菌；分離的革蘭陽性球菌排名依次為金黃色葡萄球菌、無乳鏈球菌、肺炎鏈球菌?？梢妰和统扇讼潞粑栏腥揪悍植加泻艽蟛煌?，尤其是革蘭陰性桿菌。

2.2 兒童和成人常見菌株耐藥率分析 總體來看，兒童常見菌株耐藥率比成人低。革蘭陰性桿菌耐藥率方面，流感嗜血桿菌占兒童患者所分離革蘭陰性桿菌第1位，其對碳青霉烯類藥美羅培南、喹諾酮類藥環(huán)丙沙星和左氧氟沙星、頭孢曲松、阿奇霉素的耐藥率最低，均為0。兒童患者分離的其他常見革蘭陰性桿菌對碳青霉烯類藥美羅培南和亞胺培南、氨基糖苷類藥阿米卡星、頭孢哌酮/舒巴坦耐藥率較低，均小于5.0%。成人患者分離的常見革蘭陰性桿菌對氨基糖苷類、碳青霉烯類，頭孢哌酮/舒巴坦耐藥率較高，尤其是鮑曼不動桿菌容易出現(xiàn)多重耐藥。

革蘭陽性球菌方面，兒童和成人分離革蘭陽性球菌占首位的均為金黃色葡萄球菌，兒童分離的耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)占比為12.8%，成人分離的MRSA占比高達53.9%，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。兒童和成人分離的革蘭陽性球菌對萬古霉素、替考拉寧、利奈唑胺的耐藥率均為0。分離的革蘭陽性球菌對紅霉素和克林霉素的耐藥率較高，尤其是肺炎鏈球菌對紅霉素和克林霉素耐藥率達到了100.0%。肺炎鏈球菌對苯唑西林耐藥較低，耐藥率小于16.0%。見表3、4。

表1 兒童下呼吸道感染病原菌分布百分比

表2 成人下呼吸道感染病原菌分布百分比

表3 兒童和成人患者常見革蘭陰性桿菌的耐藥率(%)

續(xù)表3 兒童和成人患者常見革蘭陰性桿菌的耐藥率(%)

注：-表示無數(shù)據(jù)。

表4 兒童和成人患者常見革蘭陽性球菌的耐藥率(%)

注：-表示無數(shù)據(jù)。

3 討 論

本研究顯示，金黃色葡萄球菌占兒童和成人患者分離革蘭陽性球菌的首位，與相關學者研究結(jié)果類似[2-3]。本研究中，兒童MRSA檢出率為12.8%，成人MRSA檢出率高達53.9%，兒童對β-內(nèi)酰胺類、頭孢菌素類、碳青霉烯類藥敏感性尚可，而成人對β-內(nèi)酰胺類、頭孢菌素類、碳青霉烯類藥敏感性差，已不宜采用；兒童和成人分離的金黃色葡萄球菌均對紅霉素和克林霉素的耐藥率較高，兩者均未發(fā)現(xiàn)對萬古霉素、替考拉寧、利奈唑胺的耐藥。

流感嗜血桿菌是兒童患者分離的主要菌株，占分離革蘭陰性桿菌的第1位，而在成人患者中所占比例較少，可能是兒童和成人體質(zhì)差異，兒童呼吸系統(tǒng)發(fā)育不完全，免疫力低下，抵抗力差，流感嗜血桿菌作為定植菌容易感染[4]，此與陳國英等[5]的研究結(jié)果相似。而王曉麗等[6]研究顯示，流感嗜血桿菌并非兒童分離革蘭陰性桿菌的主要菌株，其主要菌株為腸桿菌科細菌，原因可能由地區(qū)差異性造成，流感嗜血桿菌菌落特征不典型，容易與其他細菌混淆，容易引起漏診。氨芐西林作為一線抗流感嗜血桿菌藥，其耐藥率已達65.4%，可能由于氨芐西林使用率較高及不規(guī)范用藥造成耐藥率升高。流感嗜血桿菌對碳青霉烯類藥美羅培南、喹諾酮類藥環(huán)丙沙星和左氧氟沙星、頭孢曲松、阿奇霉素的耐藥率最低，均為0，喹諾酮類藥對軟骨發(fā)育有不良反應，故臨床此類藥對兒童采用較少，可能導致兒童患者對此類藥的耐藥率低。

肺炎克雷伯菌和鮑曼不動桿菌是成人患者分離菌株的前2位，與周沁怡[7]研究結(jié)果相似。成人患者肺炎克雷伯菌和鮑曼不動桿菌對碳青霉烯類藥的耐藥率正在上升[8]，耐藥率分別已達7.8%、58.7%。鮑曼不動桿菌對各類藥的耐藥率均較高，容易引發(fā)多重耐藥，肺炎克雷伯菌對碳青霉烯類藥亞胺培南、美羅培南和頭孢哌酮/舒巴坦耐藥率較低，均小于10.0%。與成人比較，兒童患者感染的肺炎克雷伯菌和鮑曼不動桿菌耐藥率較低，對碳青霉烯類藥美羅培南和亞胺培南、氨基糖苷類藥阿米卡星、慶大霉素、頭孢哌酮/舒巴坦耐藥率較低，均小于5.0%。

綜上所述，兒童和成人病原菌株分布和耐藥差異比較顯著。兩者菌株分布最大的差異為兒童分離革蘭陰性桿菌中流感嗜血桿菌占第1位，而成人為肺炎克雷伯菌和鮑曼不動桿菌。兒童比成人耐藥率普遍偏低。兒童MRSA檢出率為12.8%，成人MRSA檢出率53.9%。兒童分離的革蘭陰性桿菌對碳青霉烯類藥耐藥率較低，小于5.0%；成人對碳青霉烯類藥耐藥率較高，尤其是鮑曼不動桿菌對碳青霉烯類藥耐藥率大于50.0%。

根據(jù)兒童和成人病原菌株分布和耐藥性不同，在對兒童分離標本時，應審慎注意有無流感嗜血桿菌，以防漏檢；臨床用藥應根據(jù)兒童和成人的特點，制訂個性化治療方案，通過做藥敏試驗，科學合理用藥，避免盲目用藥，延緩細菌耐藥率的上升。

[1]葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學出版社,2006:745.

[2]李建華,姜曉云,毛惠珍,等.成人與兒童下呼吸道感染患者的病原菌分布及耐藥性分析[J].中華醫(yī)院感染學雜志,2015,25(20):4610-4612.

[3]沈麗珍,張愛鳴,陳素菜,等.成人與兒童下呼吸道標本病原菌分布差異的比對與耐藥性分析[J].中國微生態(tài)學雜志,2012,24(5):419-421.

[4]趙呈元,鄒強,遲富麗,等.南京地區(qū)兒童與成人下呼吸道感染病原菌分布及耐藥性對比分析[J].國際檢驗醫(yī)學雜志,2015,36(1):93-97.

[5]陳國英,韓善梅,黃憮.兒童下呼吸道感染病原菌分布及耐藥性與成人對比分析[J].中國實用醫(yī)藥,2013,8(25):15-17.

[6]王曉麗,俞趙軍,繆琪.兒科患兒醫(yī)院呼吸道感染病原菌分布及耐藥性分析[J].中華醫(yī)院感染學雜志,2014,24(22):5673-5675.

[7]周沁怡.下呼吸道感染病原菌分布及耐藥性分析[D].蘭州：蘭州大學,2013:1-57.

[8]汪復,朱德妹,胡付品,等.2012年中國CHINET細菌耐藥性監(jiān)測[J].中華感染與化療雜志,2013,13(5):321-330.

Analysis on differences in distribution and drug resistance of lower respiratory tract infection pathogenic bacteria between children and adults

ZHOUCong1,KEWencai1,QIANXueqin2,HUJuan1,LIUYajuan1,ZHANGHui1,SHENChunmei1

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,ShanghaiMunicipalFifthPeople′sHospital,Shanghai200240,China; 2.DepartmentofClinicalLaboratory,ShanghaiMunicipalPublicHealthClinicalCenter,Shanghai201058,China)

Objective To investigate the distribution and drug resistance of pathogenic bacteria causing lower respiratory tract infection in children and adult patients and to compare their differences in order to provide a basis for reasonable drug usein clinic and slowing down the generation of drug resistant pathogenic bacteria.Methods The sputum samples and bronchial alveolar lavage fluid were collected in children and adult patients with lower respiratory tract infection from January 2014 to October 2015,then the bacterial identification and drug sensitivity test were performed for comparing the differences between them.Results The isolated pathogenic bacteria in children and adult patients were dominated by Gram-negative bacilli,accounting for 62.4% and 89.7% respectively,and Gram-positive cocci accounting for 37.6% and 10.3% respectively.Gram negative bacilli isolated from children ranked as in turn Haemophilus influenzae(Hin),Escherichia coli(Eco),Klebsiella pneumoniae(Kpn),Acinetobacter baumannii(Aba),Moraxella catarrhalis(Mc),enterobacter cloacae(Ecl),Pseudomonas aeruginosa(Pae);the isolated Gram positive cocci were ranked as in turn staphylococcus aureus(Sau) andstreptococcus pneumoniae(Spn).Gram negative bacilli isolated from adults were ranked asin trun Kpn,Aba,Pae,Pma,Sma,Eco,Ecl;Gram positive cocci were ranked as in turn Sau,streptococcus agalactiae(Sgc) and Spn.The detection rates of methicillin resistant Staphylococcus aureus(MRSA) in children and adults were 12.8% and 53.9% respectively.Gram negative bacilli isolated form children had the low resistance to carbapenem,which was less than 5.0%;For adults,the resistance of Gram negative bacilli to carbapenem was higher,especially Aba,which was more than 50.0%.Conclusion The differences in drug resistance of pathogenic bacterial strains between children and adults are more obvious,therefore which should be fully considered in clinical medication to provide the basis for the early treatment of patients,meanwhile the drug sensitivity test should be carried out as soon as possible for conduct the scientific and rational medication.

children; adults; lower respiratory tract infection; pathogenic bacteria distribution; drug resistance analysis

周聰，男，技師，主要從事臨床微生物方面的研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.22.008

A

1673-4130(2016)22-3113-04

2016-04-13

2016-06-19)