• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    納米二氧化鈰對(duì)蛋白核小球藻和大型溞的毒性及其在大型溞體內(nèi)的形態(tài)轉(zhuǎn)化

    2016-12-06 06:11:36王婧坤馬宇輝趙鑫馮承蓮朱維晃張智勇
    生態(tài)毒理學(xué)報(bào) 2016年1期
    關(guān)鍵詞:小球藻納米材料葉綠素

    王婧坤,馬宇輝,趙鑫,馮承蓮,朱維晃,張智勇

    1.西安建筑科技大學(xué),西安710055

    2.中國(guó)科學(xué)院高能物理研究所,北京100049 3.中國(guó)環(huán)境科學(xué)研究院,北京100012

    納米二氧化鈰對(duì)蛋白核小球藻和大型溞的毒性及其在大型溞體內(nèi)的形態(tài)轉(zhuǎn)化

    王婧坤1,2,3,馬宇輝2,*,趙鑫3,#,馮承蓮3,朱維晃1,張智勇2

    1.西安建筑科技大學(xué),西安710055

    2.中國(guó)科學(xué)院高能物理研究所,北京100049 3.中國(guó)環(huán)境科學(xué)研究院,北京100012

    隨著納米技術(shù)的飛速發(fā)展,納米材料的應(yīng)用日益廣泛。同時(shí),這類具有獨(dú)特物理化學(xué)特性的微小顆粒對(duì)環(huán)境和健康的影響引起了人們的關(guān)注。本工作參考國(guó)際經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織(OECD)化學(xué)品生態(tài)毒理測(cè)試方法,以蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)和大型溞(Daphnia magna)為受試生物,研究了CeO2納米顆粒暴露對(duì)小球藻生長(zhǎng)、葉綠素含量和細(xì)胞內(nèi)活性氧水平以及大型溞運(yùn)動(dòng)能力的影響,分析了大型溞體內(nèi)鈰的形態(tài)。隨著暴露濃度的升高和時(shí)間延長(zhǎng),CeO2納米顆粒逐漸抑制小球藻的生長(zhǎng),導(dǎo)致葉綠素水平的降低和活性氧水平升高。暴露96 h后,CeO2納米顆粒對(duì)小球藻生長(zhǎng)的EC50為30.4mg·L-1,而對(duì)大型溞活動(dòng)抑制的24 h、48 h-EC50分別為430.2mg·L-1和142.7mg·L-1。根據(jù)中華人民共和國(guó)環(huán)境保護(hù)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中的毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn),CeO2納米顆粒對(duì)小球藻屬于中毒性物質(zhì),對(duì)大型溞屬于低毒性物質(zhì)。CeO2納米顆粒在大型溞體內(nèi)主要以Ce(IV)的形式存在,約有3%轉(zhuǎn)化為Ce(III)。對(duì)CeO2納米顆粒的水生態(tài)效應(yīng)給予足夠重視并深入研究其毒性作用機(jī)制。

    納米二氧化鈰;小球藻;大型溞;毒性

    隨著納米科技的快速發(fā)展,納米材料的應(yīng)用越來(lái)越廣泛。與此同時(shí),納米材料可以通過(guò)生產(chǎn)設(shè)備、污水處理、商品使用等途徑直接或間接進(jìn)入水環(huán)境,對(duì)水生生物造成危害,其中ZnO、CuO、TiO2等納米材料對(duì)藻類的毒性主要表現(xiàn)在對(duì)其光合作用的影響[1],如改變?nèi)~綠素含量或是干擾光合電子運(yùn)轉(zhuǎn),使藻類消耗大量能量;多種金屬納米材料對(duì)大型溞的死亡率、繁殖能力、細(xì)胞毒性及生理變化(如跳躍頻率、后腹彎曲運(yùn)動(dòng)、心跳速率)等[2-4]均有影響;魚(yú)類毒性研究表明Ag、ZnO、nC60等納米材料會(huì)對(duì)胚胎發(fā)育情況(孵化時(shí)間、畸形、幼魚(yú)體長(zhǎng)等)、死亡率、病理學(xué)分析及抗氧化基因的表達(dá)等產(chǎn)生影響[5-6]。

    CeO2納米顆粒是一種典型的納米材料,因其獨(dú)特的儲(chǔ)存和釋放氧的能力及高溫快速氧空位擴(kuò)散能力而被廣泛應(yīng)用于氧化還原反應(yīng)中,成為極具應(yīng)用前景的催化材料[7-9]、pH傳感材料[10]、高溫氧敏材料[11-12]、固體氧化物燃料電池中的電極材料[13-14]、化學(xué)機(jī)械拋光研磨料[8,15]以及電化學(xué)池中的膜反應(yīng)器材[16]等。最近,CeO2納米顆粒正越來(lái)越多地應(yīng)用在汽車行業(yè),既可用于減少燃燒尾氣微粒含量的柴油添加劑,又可用于催化轉(zhuǎn)換器[11]。然而,隨著用量的逐漸增大,CeO2納米顆粒不可避免的被釋放到環(huán)境中,給環(huán)境物種帶來(lái)潛在影響[17],因此迫切需要對(duì)CeO2納米顆粒的環(huán)境生態(tài)效應(yīng)進(jìn)行研究。

    浮游生物是水生態(tài)系統(tǒng)的重要功能類群,具有種類多、分布廣、豐度高等特點(diǎn),對(duì)于維持生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)與功能起到關(guān)鍵作用[18]。關(guān)于CeO2納米顆粒對(duì)浮游生物中的藻類和大型枝角類的影響已有一些報(bào)道。例如,Ismael等[19]研究了CeO2納米顆粒對(duì)藍(lán)藻(Anabaena)和月牙藻(Pseudokirchneriella subcapitata)的毒性,在純水中暴露24 h后EC50值分別為0.27~6.3mg·L-1和2.4~29.6mg·L-1。類似的研究表明,10~20 nm CeO2和微米級(jí)CeO2對(duì)月牙藻暴露72 h的IC50值分別為(10.3±1.7)mg·L-1和(66±22)mg·L-1[14,20]。 Hoecke等[21]研究了尺寸分別為 14、20、29 nm的CeO2納米顆粒對(duì)3種不同營(yíng)養(yǎng)級(jí)的水生生物的毒性。暴露24 h后,CeO2納米顆粒對(duì)月牙藻(Pseudokirchneriella subcapitata)、大型溞(Daphnia magna)和斑馬魚(yú)胚胎(zebrafish embryos)沒(méi)有明顯的毒性,暴露72 h后3種尺寸的納米顆粒對(duì)綠藻的半數(shù)抑制濃度為7.6~28.8mg·L-1。Gaiser等[22]的研究表明10mg·L-1的CeO2納米顆粒對(duì)大型溞的存活率沒(méi)有影響,其毒性遠(yuǎn)低于相同濃度的納米銀。同樣的,Jemec等[23]的研究也表明低于 500mg·L-1的CeO2納米顆粒對(duì)大型溞沒(méi)有毒性。另外,Artells等[24]對(duì)其他枝角類生物的研究結(jié)果顯示,CeO2納米顆粒對(duì)同形溞(Daphnia similis)和蚤狀溞(Daphnia pulex)48 h的EC50分別為0.26mg·L-1和91.79mg·L-1。上述研究使我們初步了解了CeO2納米顆粒對(duì)部分藻類和枝角類的毒性作用,但考慮到不同物種之間的差異,還需要對(duì)CeO2納米顆粒對(duì)水生態(tài)毒性的進(jìn)行更廣范圍的研究并開(kāi)展毒性機(jī)制的探討。

    本工作選取自然界廣泛分布的浮游生物蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)和大型溞(Daphnia magna)為受試對(duì)象,采用國(guó)際經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織(OECD)化學(xué)品生態(tài)毒性測(cè)試的標(biāo)準(zhǔn)方法研究CeO2納米顆粒進(jìn)入水環(huán)境后的生態(tài)毒理效應(yīng)。研究結(jié)果有助于全面評(píng)價(jià)CeO2納米顆粒的水生毒性,同時(shí)將為減少納米材料對(duì)生態(tài)環(huán)境的影響和納米材料的合理應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

    1 材料與方法(Materials and methods)

    1.1 藻液培養(yǎng)

    取長(zhǎng)勢(shì)良好的蛋白核小球藻藻種在無(wú)菌的條件下接種到盛有OECD 201培養(yǎng)基的錐形瓶中,在人工氣候箱中培養(yǎng)(PRX-450D,寧波賽福實(shí)驗(yàn)儀器有限公司,寧波),培養(yǎng)溫度控制在(24±1)℃,光暗比為12 h:12 h,設(shè)置光照強(qiáng)度為(3 000±10%)lx。盡可能保證對(duì)藻液光照均勻,每天按時(shí)搖晃培養(yǎng)瓶數(shù)次,避免小球藻細(xì)胞團(tuán)聚和貼壁現(xiàn)象。每隔10天重新接種一次避免藻種老化。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的小球藻進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

    1.2 小球藻暴露實(shí)驗(yàn)

    CeO2納米顆粒采用沉淀法合成[25-27]。調(diào)節(jié)顆粒濃度為2 000mg·L-1作為母液,室溫超聲震蕩20 min,使CeO2納米顆粒均勻分散。實(shí)驗(yàn)前使用小球藻培養(yǎng)基稀釋,使實(shí)驗(yàn)組所加入的CeO2納米顆粒終濃度為:0.1、1、10、50和200mg·L-1,使用小球藻培養(yǎng)基作為實(shí)驗(yàn)對(duì)照組。在50 mL錐形瓶中分別加入各濃度梯度的CeO2納米顆粒懸液和藻液,調(diào)節(jié)小球藻細(xì)胞密度為2×106cell·mL-1,溶液終體積為15 mL,每組設(shè)3個(gè)平行,實(shí)驗(yàn)結(jié)果取平均值。將錐形瓶置于恒溫?fù)u床,維持光照強(qiáng)度為120μE·m-2·s-1,調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速為(90±5)r·min-1,分別于24、48、72、96 h后測(cè)定相應(yīng)的指標(biāo)。

    1.3 小球藻生長(zhǎng)抑制檢測(cè)方法

    小球藻EC50的測(cè)定:分別于暴露后的第24、48、72、96小時(shí)使用酶標(biāo)儀測(cè)定各濃度組在680 nm處的吸光度,計(jì)算小球藻細(xì)胞個(gè)數(shù)。由于CeO2納米顆粒的濁度會(huì)影響吸光度的測(cè)定,因此測(cè)得的吸光度需要扣除納米材料的背景值。使用SPSS概率單位法計(jì)算暴露96 h的EC50。

    葉綠素含量測(cè)定:取50μL的綠藻暴露液加入200μL的乙醇溶液,混勻后加入96孔板中,孔板避光震蕩3 h,使用酶標(biāo)儀測(cè)定其熒光強(qiáng)度(Ex/Em: 420 nm/671 nm)。

    活性氧(ROS)的測(cè)定:分別于暴露后24、48、72、96 h使用熒光探針二氯二氫熒光素-乙酰乙酸酯(DCFH-DA)(分析純,Sigma)檢測(cè)各組細(xì)胞內(nèi)ROS的水平。DCFH-DA進(jìn)入細(xì)胞后在細(xì)胞內(nèi)酯酶的作用下轉(zhuǎn)化為DCFH,DCFH被細(xì)胞內(nèi)ROS氧化生成有熒光的DCF,通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)DCF的熒光強(qiáng)度來(lái)反映ROS的水平。取180μL小球藻暴露液,加入20μL的DCFH-DA,DCFH-DA終濃度為10μmol·L-1,混勻后加入黑色96孔板中,于37℃孵育20 min,酶標(biāo)儀(spectraMax M2,Molecular Devices Corporation,USA)測(cè)定各組熒光強(qiáng)度(Ex/Em:488 nm/ 525 nm)。

    1.4 大型溞培養(yǎng)

    大型溞受贈(zèng)于中國(guó)科學(xué)院生態(tài)環(huán)境研究中心,并在實(shí)驗(yàn)室中培養(yǎng)超過(guò)一年。實(shí)驗(yàn)室中連續(xù)培養(yǎng)5代以上孤雌生殖得到純品系,馴化用水為OECD 202培養(yǎng)基。人工氣候箱培養(yǎng),光照強(qiáng)度為800 lx,培養(yǎng)溫度為(20±1)℃,隔天更換培養(yǎng)液。實(shí)驗(yàn)前使用重鉻酸鉀檢測(cè)大型溞的敏感性。結(jié)果顯示,重鉻酸鉀暴露24 h后EC50為0.884mg·L-1,符合實(shí)驗(yàn)要求。

    1.5 大型溞活動(dòng)抑制實(shí)驗(yàn)

    分別在每個(gè)燒杯中放置溞齡為6~24 h的純化3代以上新生溞10只,加入終濃度分別為1、10、50、100、200、500和1 000mg·L-1的納米CeO2,每組設(shè)3個(gè)平行。實(shí)驗(yàn)期間大型溞不喂食。分別于暴露后24 h和48 h觀察大型溞的活動(dòng)情況。以大型溞活動(dòng)受抑制作為觀察標(biāo)準(zhǔn),輕輕晃動(dòng)實(shí)驗(yàn)容器,若15 s之內(nèi)大型溞不能游動(dòng),認(rèn)為其運(yùn)動(dòng)能力受到抑制。使用SPSS概率單位法計(jì)算EC50值。

    1.6 組織中Ce化學(xué)種態(tài)分析

    將納米CeO2處理的大型溞清洗干凈,在-50℃、0.06 mbar下冷凍干燥,然后將干樣用研缽磨成粉末,壓片后用于XANES分析。利用北京同步輻射裝置(BSRF)1W1B XAFS實(shí)驗(yàn)站進(jìn)行圖譜采集。儲(chǔ)存環(huán)電子能量2.5 GeV,流強(qiáng)~200 mA。標(biāo)準(zhǔn)樣品納米CeO2、CePO4、Ce(CH3COO)3采用透射模式,大型溞樣品采用19元高純鍺固體陣列探測(cè)器檢測(cè)。所得譜圖用Athena軟件進(jìn)行歸一化,采用線性擬合(linear combination fitting,LCF)對(duì)各組分比例進(jìn)行分析。

    1.7 數(shù)據(jù)分析

    每種試驗(yàn)均重復(fù)3次,結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析,采用Tukey’s檢測(cè)各處理組與對(duì)照組之間的差異顯著性,P<0.05表示有顯著性差異,P<0.01表示有極顯著差異。

    2 結(jié)果與討論(Results and discussion)

    2.1 CeO2納米顆粒的表征

    TEM(透射電子顯微鏡)結(jié)果顯示,合成的CeO2納米顆粒形貌穩(wěn)定,為缺角的八面體結(jié)構(gòu)。粒徑均一,平均粒徑為(6.44±0.42)nm(圖1)。DLS結(jié)果顯示(表1),CeO2納米顆粒在二次水中的水動(dòng)力學(xué)直徑顯著大于TEM測(cè)定結(jié)果,說(shuō)明在水中會(huì)發(fā)生一定程度的團(tuán)聚。但在綠藻培養(yǎng)基、大型溞培養(yǎng)基中團(tuán)聚更明顯。Zeta電位測(cè)定結(jié)果顯示,CeO2納米顆粒在二次水的Zeta電位為+(44.6±1.0)mV;在綠藻培養(yǎng)基、大型溞培養(yǎng)基中,CeO2納米顆粒的Zeta電位顯著下降,Zeta電位測(cè)定結(jié)果與DLS測(cè)定得到的水和動(dòng)力學(xué)直徑結(jié)果一致。

    圖1 CeO2納米顆粒的TEM圖片F(xiàn)ig.1 TEM images of CeO2NPs

    2.2 CeO2納米顆粒對(duì)小球藻生長(zhǎng)的影響

    從圖2中可以看出,濃度為0.1mg·L-1時(shí),CeO2納米顆粒對(duì)小球藻細(xì)胞的生長(zhǎng)沒(méi)有明顯抑制。隨著濃度升高,在暴露初期(t≤48 h)CeO2納米顆粒對(duì)小球藻細(xì)胞的抑制作用不明顯;但是隨著時(shí)間延長(zhǎng),抑制作用逐漸增強(qiáng)。濃度為200mg·L-1時(shí),小球藻細(xì)胞生長(zhǎng)基本停滯,藻體顏色變淺,甚至發(fā)白,抑制率高達(dá)90%。通過(guò)概率單位法計(jì)算得到CeO2納米顆粒對(duì)小球藻96 h的EC50為30.4mg·L-1,95%置信區(qū)間為(13.5,40.3),根據(jù)原國(guó)家環(huán)境保護(hù)總局發(fā)布的中華人民共和國(guó)環(huán)境保護(hù)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)[28]中藻類生長(zhǎng)抑制毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn),CeO2納米顆粒對(duì)小球藻屬于中毒性物質(zhì)。

    納米材料可能因?yàn)檎诠庑?yīng)使實(shí)驗(yàn)體系的實(shí)際光強(qiáng)下降,從而抑制藻類的生長(zhǎng)。本實(shí)驗(yàn)中采用50 mL的錐形瓶裝15 mL的溶液,液層厚度約為1.4 cm,使用搖床在一定轉(zhuǎn)速下保證溶液處于紊流狀態(tài),并隨機(jī)變換錐形瓶在搖床的位置使藻類均勻受光,同時(shí)在底部或側(cè)面加以輔光,以此得到比較理想的結(jié)果。Baun等[29]的結(jié)果表明,在采取諸如降低光徑和保持湍流混合等光強(qiáng)補(bǔ)償措施后,藻類生長(zhǎng)抑制實(shí)驗(yàn)可用于濃度≤10mg·L-1的污染土壤懸浮液的生態(tài)毒性檢測(cè)。

    圖2 CeO2納米顆粒對(duì)小球藻的生長(zhǎng)抑制Fig.2 Effects of CeO2NPs on the growth of Chlorella pyrenoidosa

    表1 水中和培養(yǎng)基中CeO2納米顆粒的物理化學(xué)性質(zhì)Table 1 The physicochemical characteristics of CeO2NPs in water and culture media

    2.3 CeO2納米顆粒對(duì)小球藻葉綠素含量的影響

    葉綠素是小球藻細(xì)胞進(jìn)行光合作用的物質(zhì)基礎(chǔ),可以通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)葉綠素的含量來(lái)反映細(xì)胞的生長(zhǎng)狀況。不同濃度CeO2納米顆粒處理后,細(xì)胞內(nèi)葉綠素的含量變化如圖3所示。濃度為0.1mg·L-1時(shí),細(xì)胞內(nèi)葉綠素含量隨時(shí)間的延長(zhǎng)先增加后減小,但與對(duì)照組相比沒(méi)有顯著性差異。隨著暴露濃度的升高及暴露時(shí)間,小球藻細(xì)胞內(nèi)的葉綠素含量逐漸降低。濃度為200mg·L-1時(shí),暴露細(xì)胞48 h后葉綠素含量?jī)H是同時(shí)刻對(duì)照組的25.1%(P<0.01), 96 h后,與對(duì)照組相比減少了90%以上(P<0.01)。

    2.4 CeO2納米顆粒對(duì)小球藻體內(nèi)活性氧(ROS)的影響

    圖4結(jié)果顯示了納米CeO2暴露后,小球藻細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)水平的改變。由圖中可以看出,0.1mg·L-1組小球藻細(xì)胞內(nèi)ROS的水平與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異,但隨納米顆粒濃度的增加和暴露時(shí)間的延長(zhǎng),細(xì)胞內(nèi)ROS的水平與對(duì)照組相比顯著升高。濃度為50mg·L-1和200mg·L-1的納米顆粒暴露細(xì)胞96 h,小球藻體內(nèi)的活性氧水平分別為對(duì)照組的2.5倍和4倍。因此,我們推測(cè)納米顆粒暴露細(xì)胞后可以誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)ROS的產(chǎn)生,增加細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激的程度,從而影響細(xì)胞的存活。

    圖3 CeO2納米顆粒暴露后小球藻葉綠素水平的變化Fig.3 Effects of CeO2NPson the chlorophyll contents ofChlorella pyrenoidosa

    圖4 CeO2納米顆粒對(duì)小球藻細(xì)胞內(nèi)ROS水平的影響Fig.4 Effects of CeO2NPs on the ROS level of Chlorella pyrenoidosa

    2.5 納米顆粒對(duì)大型溞的急性毒性

    CeO2納米顆粒對(duì)大型溞的24 h和48 h EC50分別為430.2mg·L-1和142.7mg·L-1,95%置信區(qū)間分別為239.8~587.4mg·L-1和85.7~210.9mg·L-1。其48 h EC50值大于100mg·L-1,根據(jù)原國(guó)家環(huán)境保護(hù)總局發(fā)布的中華人民共和國(guó)環(huán)境保護(hù)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)[28]中溞類急性活動(dòng)抑制毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn),實(shí)驗(yàn)中所用CeO2納米顆粒對(duì)大型溞屬于低毒性物質(zhì),這與Gaiser[22]和Hoecke等[21]的研究結(jié)果相似;而Artells等[24]研究發(fā)現(xiàn),CeO2納米顆粒對(duì)同形溞和蚤狀溞的48 h-EC50分別為0.26mg·L-1和91.79mg·L-1。以上結(jié)果說(shuō)明,納米顆粒的物化性質(zhì)不同,采用的溞類品種不同,表現(xiàn)出的生物效應(yīng)可能會(huì)有明顯的差異。

    圖5 在CeO2納米顆粒懸液中暴露不同時(shí)間的大型溞注:A,0 h;B,24 h;C,48 h。Fig.5 The photographs ofDaphnia magnaafter exposure to CeO2NPsNote:A,0 h;B,24 h;C,48 h.

    大型溞是濾食性生物,能濾食水中的藻類和碎屑,同時(shí)也會(huì)攝入CeO2納米顆粒。如圖5所示箭頭所指消化道,CeO2納米顆粒暴露24 h就可以看到大型溞對(duì)納米顆粒的攝取,且隨著時(shí)間的延長(zhǎng),大型溞對(duì)納米顆粒的攝入量顯著增加,充滿整個(gè)消化道。此外,大型溞體表具有疏水性,其表面也能夠吸附大量CeO2納米顆粒(如圖6C右下角箭頭),納米顆粒吸附于大型溞體表后能夠顯著抑制其活動(dòng)能力。納米顆粒暴露48 h后,不僅能夠在大型溞的體內(nèi)觀察到大量的納米顆粒的存在,而且在大型溞的體表也有吸附的納米顆粒,尤其在觸角上吸附的納米顆粒的數(shù)量較多(見(jiàn)圖6C),顯著抑制了大型溞的活動(dòng)。

    2.6 大型溞體內(nèi)Ce的化學(xué)形態(tài)分析

    基于同步輻射的XANES是分析元素化學(xué)形態(tài)的有力手段,它可以靈敏地區(qū)分元素的價(jià)態(tài)和局域結(jié)構(gòu)。如圖6所示,Ce(III)在低能處有一尖峰(圖中實(shí)線),Ce(IV)在高能處有2個(gè)寬峰(圖中虛線)。對(duì)比樣品與標(biāo)準(zhǔn)化合物XANES譜圖可以看出,納米CeO2處理48 h后,大型溞體內(nèi)Ce的XANES譜與Ce(IV)O2本身十分接近,通過(guò)線性擬合(LCF)得到大型溞體內(nèi)的 Ce主要以 IV價(jià)形式存在,轉(zhuǎn)化為Ce(III)的比例約為3%。LCF擬合曲線和XAENS譜吻合良好,結(jié)合擬合參數(shù)(R-factor=0.000177)可以證明該擬合的結(jié)果可靠。

    CeO2納米顆粒的作用有可能來(lái)自吸附在體表的納米顆粒對(duì)大型溞活動(dòng)的抑制、攝入大型溞體內(nèi)的CeO2納米顆粒自身或釋放的Ce3+離子引發(fā)的毒性效應(yīng)等,其確切機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

    圖6 暴露于CeO2納米顆粒后大型溞中Ce的XANES譜圖Fig.6 XANES spectra of Ce inDaphnia magna after exposure to CeO2NPs

    綜上可知:

    (1)高濃度CeO2納米顆粒水懸浮液可以抑制小球藻的生長(zhǎng)和大型溞的活動(dòng),并引起大型溞的死亡。

    (2)CeO2納米顆粒對(duì)小球藻生長(zhǎng)96 h的EC50值為30.4mg·L-1,屬于中毒性物質(zhì);對(duì)大型溞的48 h EC50值為142.7mg·L-1,屬于低毒性物質(zhì)。

    (3)根據(jù)XANES結(jié)果,處理48 h后CeO2納米顆粒在大型溞體內(nèi)主要以Ce(IV)存在,轉(zhuǎn)化為Ce(III)的比例很低。

    致謝:感謝中國(guó)科學(xué)院生態(tài)環(huán)境研究中心李兆利老師的幫助。

    [1]Aruoja V,Dubourguier H C,Kasemets K,et a1.Toxicity of nanoparticles of CuO,ZnO and TiO2to microalgae Pseudokirchneriella subcapitata[J].Science of the Total Environment,2009,407:1461-1468

    [2]Tao X,Fortner J D,Zhang B,et al.Effects of aqueous stable fullerene nanocrystals(nC60)onDaphnia magna: Evaluation of sub-lethal reproductive responses and accumulation[J].Chemosphere,2009,77(11):1482-1487

    [3]Yang X,Edelmann R,Oris J.Suspended C60nanoparticles protect against short-term UV and fluoranthene photo-induced toxicity,but cause long-term cellular damage in Daphnia magna[J].Aquatic Toxicology,2010,100(2): 202-210

    [4]Lovern S B,Strickler J R,Klaper R.Behavioral and physiological changes inDaphnia magnawhen exposed to nanoparticle suspensions(titanium dioxide,nano-C60,and C60HxC70Hx)[J].Environmental Science&Technology, 2007,41(12):4465-4470

    [5]Klaine S J,Alvarez P J,Batley G E,et al.Nanomaterials in the environment:Behavior,fate,bioavailability,and effects[J].Environmental Toxicology and Chemistry, 2008,27(9):1825-1851

    [6]Zhu X,Zhu L,Li Y,et al.Developmental toxicity in zebrafish(Danio rerio)embryos after exposure to manufactured nanomaterials: Buckminsterfullerene aggregates (nC60)and fullerol[J].Environmental Toxicology and Chemistry,2007,26(5):976-979

    [7]Palmqvist A,Johansson E,J?r?s S,et al.Total oxidation of methane over doped nanophase cerium oxides[J].Catalysis Letters,1998,56(1):69-75

    [8]Tsch?pe A,Birringer R.Oxyreduction studies on nano-structured cerium oxide[J].Nanostructured Materials, 1997,9(1):591-594

    [9]Barbier J,Oliviero L,Renard B,et al.Catalytic wet air oxidation of ammonia over M/CeO2catalysts in the treatment of nitrogen-containing pollutants[J].Catalysis Today,2002,75(1-4):29-34

    [10]Shuk P,Ramanujachary K,Greenblatt M.New metal-oxide-type pH sensors[J].Solid State Ionics,1996,86: 1115-1120

    [11]Izu N,Shin W,Murayama N,et al.Resistive oxygen gas sensors based on CeO2fine powder prepared using mist pyrolysis[J].Sensors and Actuators B:Chemical,2002, 87(1):95-98

    [12]杜新華,劉振祥,謝侃,等.CeO2/Nb2O5界面效應(yīng)對(duì)提高CeO2氧敏特性的XPS研究[J].物理學(xué)報(bào),1998,47 (12):2025-2030 Du X H,Liu Z X,Xie K,et al.XPS studies of CeO2/ Nb2O5intreface effect of the improvement of the oxygen sensiivity of CeO2layer[J].Acta Physica Sinica,1998,47 (12):2025-2030(in Chinese)

    [13]Mori T,Drennan J,Wang Y,et al.Influence of nanostructure on electrolytic properties in CeO2based system [J].Journal of Thermal Analysis and Calorimetry,2002, 70(2):309-319

    [14]Katsuki M,Wang S,Yasumoto K,et al.The oxygen transport in Gd-doped ceria[J].Solid State Ionics,2002, 154:589-595

    [15]宋曉嵐,楊振華,邱冠周,等.納米氧化鈰在高新技術(shù)領(lǐng)域中的應(yīng)用及其制備研究進(jìn)展[J].材料導(dǎo)報(bào),2003, 17(12):36-39 Song X L,Yang Z H,Qiu G Z,et al.Developments in synthesis and application of CeO2nanoparticles[J].Materials Review,2003,17(12):36-39(in Chinese)

    [16]Zhang Y,Andersson S,Muhammed M.Nanophase catalytic oxides:I.Synthesis of doped cerium oxides as oxygen storage promoters[J].Applied Catalysis B:Environmental,1995,6(4):325-337

    [17]Milt V,Querini C,Miró E,et al.Abatement of diesel exhaust pollutants:NOx adsorption on Co,Ba,K/CeO2catalysts[J].Journal of Catalysis,2003,220(2):424-432

    [18]張文靜,魏繼雨,羅會(huì)濤,等.池塘浮游生物優(yōu)勢(shì)種組成與DNA指紋的關(guān)系[J].應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào),2010, 16(5):672-677 Zhang W J,Wei J Y,Luo H T,et al.Relations between DNA fingerprinting data and dominant species composition of pond plankon communities[J].Chinese Journal of applied and Environmental Bilogy,2010,16(5):672-677 (in Chinese)

    [19]Rodea-Palomares I,Boltes K,Fernández-Pi?as F,et al. Physicochemical characterization and ecotoxicological assessment of CeO2nanoparticles using two aquatic microorganisms[J].Toxicological Sciences,2011,119(1):135-145

    [20]Rogers N J,Franklin N M,Apte S C,et al.Physicochemical behaviour and algal toxicity of nanoparticulate CeO2in freshwater[J].Environmental Chemistry,2010,7 (1):50-60

    [21]Hoecke K V,Quik J T,Mankiewicz-Boczek J,et al.Fate and effects of CeO2nanoparticles in aquatic ecotoxicity tests[J].Environmental Science&Technology,2009,43 (12):4537-4546

    [22]Gaiser B K,Fernandes T F,Jepson M A,et al.Interspecies comparisons on the uptake and toxicity of silver and cerium dioxide nanoparticles[J].Environmental Toxicology and Chemistry,2012,31(1):144-154

    [23]Jemec A,Djinovic'P,Tis'ler T,et al.Effects of four CeO2nanocrystalline catalysts on early-life stages of zebrafish Danio rerioand crustaceanDaphnia magna[J].Journal of Hazardous Materials,2012,219:213-220

    [24]Artells E,Issartel J,Auffan M,et al.Exposure to cerium dioxide nanoparticles differently affect swimming performance and survival in twoDaphnidspecies[J].Plos One,2013,8(8):e71260

    [25]Schubert D,Dargusch R,Raitano J,et al.Cerium and yttrium oxide nanoparticles are neuroprotective[J].Biochemical and BiophysicalResearch Communications, 2006,342(1):86-91

    [26]He X,Zhang H,Ma Y,et al.Lung deposition and extrapulmonary translocation of nano-ceria after intratracheal instillation[J].Nanotechnology,2010,21(28):285103

    [27]Ma Y,Kuang L,He X,et al.Effects of rare earth oxide nanoparticles on root elongation of plants[J].Chemosphere,2010,78(3):273-279

    [28]國(guó)家環(huán)境保護(hù)總局.中華人民共和國(guó)環(huán)境保護(hù)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)[S].北京:國(guó)家環(huán)境保護(hù)總局,2006

    [29]Baun A,Justesen K B,Nyholm N.Algal tests with soil suspensions and elutriates:A comparative evaluation for PAH-contaminated soils[J].Chemosphere,2002,46(2): 251-258

    *共同通訊作者(Co-),E-mail:zhaoxin@craes.org.cn

    Toxicity of CeO2Nanoparticles to Chlorella pyrenoidosa and Daphnia magna,and Its Transformation Inside the Daphnia magna

    Wang Jingkun1,2,3,Ma Yuhui2,*,Zhao Xin3,#,Feng Chenglian3,Zhu Weihuang1,Zhang Zhiyong2
    1.Xian University of Architecture and Technology,Xi’an 710055,China
    2.Institute of High Energy Physics,Chinese Academy of Sciences,Beijing 100049,China
    3.China Research Academy of Environmental Sciences,Beijing 100012,China

    16 April 2015 accepted 6 July 2015

    With the rapid development of nanotechnology,nanomaterials have been used in many applications. Meanwhile,the potential impacts of these tiny particles with unique physicochemical properties on the environment and human health have attracted increasing attention from the public.In accordance with the standard OECD Guidelines for the testing of chemicals(OECD 201 and 202),we studied the ecotoxicity of CeO2nanoparticles(nCeO2)with the size of 6.44 nm to green algae(Chlorella pyrenoidosa)and water-flea(Daphnia magna).Effects of nCeO2on the algal biomass,chlorophyll content,and cellular reactive oxygen species(ROS)level as well as daphnia acute immobilization were investigated.With the increase of exposure concentration and time,the growth of chlorella cell was gradually inhibited.The content of chlorophyll in the algae decreased,whereas the cellular ROS level increased under the stress of nCeO2.The 96 h EC50of nCeO2on the growth ofChlorella pyrenoidosa was 30.4mg·L-1and the 24 and 48 h-EC50of nCeO2onDaphnia magnawere 430.2 and 142.7mg·L-1,respectively.According to the grading standards of the People's Republic of China on environmental protection industry, nCeO2can be assumed to be of moderate and low toxicity forChlorella pyrenoidosaandDaphnia magna,respectively.The majority of Ce inDaphnia magnawas present as Ce(IV),while about 3%was transformed into Ce(III). Further research on the toxic mechanisms of nCeO2is highly needed in order to minimize the adverse ecological effects.

    CeO2nanoparticles;Chlorella pyrenoidosa;Daphnia magna;toxicity

    2015-04-16 錄用日期:2015-07-06

    1673-5897(2016)1-362-07

    X171.5

    A

    10.7524/AJE.1673-5897.20150416003

    王婧坤,馬宇輝,趙鑫,等.納米二氧化鈰對(duì)蛋白核小球藻和大型溞的毒性及其在大型溞體內(nèi)的形態(tài)轉(zhuǎn)化[J].生態(tài)毒理學(xué)報(bào),2016,11(1):362-368

    Wang J K,Ma Y H,Zhao X,et al.Toxicity of CeO2nanoparticles toChlorella pyrenoidosaandDaphnia magna,and its transformation inside theDaphnia magna[J].Asian Journal of Ecotoxicology,2016,11(1):362-368(in Chinese)

    環(huán)保部環(huán)保公益項(xiàng)目(201209012)

    王婧坤(1990-),女,碩士研究生,研究方向?yàn)榄h(huán)境毒理,E-mail:wangjingkun1990@163.com;

    ),E-mail:mayh@ihep.ac.cn

    簡(jiǎn)介:馬宇輝(1978—),女,博士,副研究員,主要研究方向納米材料的毒理效應(yīng)。

    趙鑫(1980—),女,碩士,工程師,主要研究方向?yàn)榄h(huán)境標(biāo)準(zhǔn)。

    猜你喜歡
    小球藻納米材料葉綠素
    武器中的納米材料
    學(xué)與玩(2022年8期)2022-10-31 02:41:56
    二維納米材料在腐蝕防護(hù)中的應(yīng)用研究進(jìn)展
    提取葉綠素
    桃樹(shù)葉綠素含量與SPAD值呈極顯著正相關(guān)
    葉綠素家族概述
    正負(fù)極互換式小球藻光合微生物燃料電池性能
    MoS2納米材料的制備及其催化性能
    不同溶劑萃取小球藻油脂結(jié)構(gòu)及組分差異
    由松針制取三種葉綠素鈉鹽及其穩(wěn)定性的研究
    抗輻照納米材料的研究進(jìn)展
    久久精品亚洲熟妇少妇任你| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 极品人妻少妇av视频| 最近最新免费中文字幕在线| 亚洲成人久久性| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 亚洲精品在线观看二区| 精品一区二区三区四区五区乱码| 久久久精品欧美日韩精品| 国产精品久久久久久精品电影 | 欧美不卡视频在线免费观看 | 少妇被粗大的猛进出69影院| 一进一出抽搐gif免费好疼| 国产乱人伦免费视频| 午夜日韩欧美国产| 啦啦啦 在线观看视频| 亚洲色图av天堂| bbb黄色大片| 叶爱在线成人免费视频播放| 超碰成人久久| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 午夜影院日韩av| 国产激情欧美一区二区| 欧美成狂野欧美在线观看| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 一级a爱视频在线免费观看| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 国产1区2区3区精品| 久久影院123| 大码成人一级视频| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 久久午夜亚洲精品久久| 一个人免费在线观看的高清视频| 成人特级黄色片久久久久久久| 搡老妇女老女人老熟妇| 日本免费一区二区三区高清不卡 | 亚洲av片天天在线观看| 高清毛片免费观看视频网站| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 久久精品国产综合久久久| 日韩欧美在线二视频| 一本久久中文字幕| 黄色视频,在线免费观看| av在线播放免费不卡| 九色国产91popny在线| 免费高清视频大片| 久久婷婷成人综合色麻豆| 精品卡一卡二卡四卡免费| 后天国语完整版免费观看| 99在线人妻在线中文字幕| 麻豆久久精品国产亚洲av| 亚洲电影在线观看av| 男男h啪啪无遮挡| 国产av又大| 天天添夜夜摸| 亚洲激情在线av| av欧美777| av在线播放免费不卡| 色老头精品视频在线观看| 一级毛片精品| 一区二区三区国产精品乱码| 丝袜美足系列| 欧美精品啪啪一区二区三区| 在线播放国产精品三级| 狂野欧美激情性xxxx| 久99久视频精品免费| 人成视频在线观看免费观看| 成人亚洲精品一区在线观看| АⅤ资源中文在线天堂| 欧美激情 高清一区二区三区| 在线观看免费视频网站a站| 国产不卡一卡二| 一区二区三区国产精品乱码| 国产单亲对白刺激| 免费看十八禁软件| 美女大奶头视频| 亚洲一区二区三区不卡视频| 久久草成人影院| 久久久久久久久久久久大奶| 97人妻精品一区二区三区麻豆 | 亚洲一码二码三码区别大吗| 欧美日本中文国产一区发布| 国产一区二区在线av高清观看| 国产午夜精品久久久久久| 亚洲精品美女久久av网站| 亚洲男人天堂网一区| 男女做爰动态图高潮gif福利片 | 国产黄a三级三级三级人| 日本欧美视频一区| 亚洲专区字幕在线| www国产在线视频色| 18禁美女被吸乳视频| 在线天堂中文资源库| 欧美在线黄色| 亚洲精品av麻豆狂野| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 国产国语露脸激情在线看| 久久性视频一级片| 51午夜福利影视在线观看| 亚洲成人国产一区在线观看| 搡老岳熟女国产| 国产欧美日韩一区二区三| 国产精品精品国产色婷婷| 丁香欧美五月| 午夜老司机福利片| 一级毛片女人18水好多| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | or卡值多少钱| 十八禁人妻一区二区| 国产麻豆69| 久久久久精品国产欧美久久久| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 高潮久久久久久久久久久不卡| 大码成人一级视频| 少妇 在线观看| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 看片在线看免费视频| 99精品在免费线老司机午夜| 国产av一区在线观看免费| 成年女人毛片免费观看观看9| 69精品国产乱码久久久| av福利片在线| 99精品久久久久人妻精品| 成人手机av| 久久久久久久午夜电影| 国产伦人伦偷精品视频| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 久久精品国产清高在天天线| 99热只有精品国产| 欧美黑人欧美精品刺激| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 色精品久久人妻99蜜桃| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 国产精品,欧美在线| 99re在线观看精品视频| 男人舔女人下体高潮全视频| 黄色女人牲交| 国产亚洲精品第一综合不卡| 午夜影院日韩av| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 日韩欧美一区视频在线观看| 精品一品国产午夜福利视频| 国产一卡二卡三卡精品| 欧美黄色片欧美黄色片| 啦啦啦 在线观看视频| 午夜福利免费观看在线| 久久久久久久久久久久大奶| 国产欧美日韩一区二区精品| 国内精品久久久久久久电影| www.熟女人妻精品国产| 91大片在线观看| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 热99re8久久精品国产| 国产区一区二久久| 99国产精品一区二区蜜桃av| 国产精品,欧美在线| 久久香蕉国产精品| 亚洲国产精品sss在线观看| 亚洲电影在线观看av| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 精品久久久久久久久久免费视频| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 亚洲男人的天堂狠狠| 日本三级黄在线观看| 99精品在免费线老司机午夜| 亚洲国产欧美网| 美女国产高潮福利片在线看| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 大香蕉久久成人网| 在线观看午夜福利视频| 午夜免费激情av| 一夜夜www| 国产精品二区激情视频| 国产91精品成人一区二区三区| 亚洲片人在线观看| 日韩精品青青久久久久久| 久久人人97超碰香蕉20202| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 亚洲成人久久性| 免费在线观看影片大全网站| 老熟妇仑乱视频hdxx| 嫩草影视91久久| 色在线成人网| avwww免费| 久久精品国产清高在天天线| 美女高潮到喷水免费观看| 亚洲无线在线观看| 一个人免费在线观看的高清视频| 一区二区三区高清视频在线| 成人特级黄色片久久久久久久| 老熟妇仑乱视频hdxx| 色在线成人网| 成人国产一区最新在线观看| 婷婷精品国产亚洲av在线| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 亚洲久久久国产精品| 夜夜爽天天搞| x7x7x7水蜜桃| 久久伊人香网站| 国产精品野战在线观看| 女性被躁到高潮视频| 亚洲精品在线美女| 色哟哟哟哟哟哟| 亚洲国产高清在线一区二区三 | 亚洲七黄色美女视频| 日日干狠狠操夜夜爽| 在线观看午夜福利视频| 91国产中文字幕| 国产麻豆69| 亚洲天堂国产精品一区在线| 又黄又粗又硬又大视频| 丝袜在线中文字幕| 午夜a级毛片| av在线天堂中文字幕| av视频在线观看入口| av福利片在线| 国产av一区在线观看免费| 热re99久久国产66热| 国产视频一区二区在线看| 日韩欧美国产一区二区入口| 国产精品久久久人人做人人爽| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 最好的美女福利视频网| 悠悠久久av| 国产亚洲av高清不卡| 亚洲专区国产一区二区| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 国产伦一二天堂av在线观看| 午夜久久久久精精品| 久久久久国内视频| 色精品久久人妻99蜜桃| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 成熟少妇高潮喷水视频| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 美女国产高潮福利片在线看| 精品人妻1区二区| 精品乱码久久久久久99久播| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 国产av又大| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 在线av久久热| 国产av又大| 成年人黄色毛片网站| 极品人妻少妇av视频| 国产精品亚洲av一区麻豆| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 人人妻人人澡人人看| 99久久综合精品五月天人人| 中文字幕最新亚洲高清| 丝袜美足系列| 国产精品1区2区在线观看.| 好男人电影高清在线观看| 午夜a级毛片| 久久久国产精品麻豆| 亚洲五月天丁香| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 欧美一级毛片孕妇| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 亚洲一区二区三区不卡视频| 女同久久另类99精品国产91| 亚洲精品中文字幕在线视频| 国产三级在线视频| 99精品欧美一区二区三区四区| 日韩三级视频一区二区三区| 久久亚洲真实| 性欧美人与动物交配| 看黄色毛片网站| 亚洲一区二区三区色噜噜| 国产又色又爽无遮挡免费看| 亚洲人成77777在线视频| 一级作爱视频免费观看| 国产精品一区二区在线不卡| 国产99久久九九免费精品| 啦啦啦观看免费观看视频高清 | 精品人妻1区二区| 一进一出好大好爽视频| 男女之事视频高清在线观看| 中国美女看黄片| 99riav亚洲国产免费| 国产成人欧美在线观看| 久久国产亚洲av麻豆专区| 欧美成人午夜精品| 在线观看免费视频网站a站| 久久精品人人爽人人爽视色| 成人手机av| 亚洲精品国产色婷婷电影| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 97碰自拍视频| 欧美激情极品国产一区二区三区| 又大又爽又粗| 色综合欧美亚洲国产小说| 中文字幕久久专区| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 午夜福利18| videosex国产| 国产精品日韩av在线免费观看 | 国产亚洲欧美精品永久| 91大片在线观看| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 欧美不卡视频在线免费观看 | 岛国视频午夜一区免费看| 国产一区二区在线av高清观看| 色精品久久人妻99蜜桃| 国产区一区二久久| 成人欧美大片| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 婷婷六月久久综合丁香| 精品免费久久久久久久清纯| 桃色一区二区三区在线观看| 在线国产一区二区在线| 久久久久久人人人人人| 亚洲激情在线av| 久久亚洲真实| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 国产成+人综合+亚洲专区| 动漫黄色视频在线观看| 日韩成人在线观看一区二区三区| 男女做爰动态图高潮gif福利片 | 国产欧美日韩精品亚洲av| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 嫁个100分男人电影在线观看| 三级毛片av免费| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 欧美性长视频在线观看| 18禁观看日本| 国产精品一区二区三区四区久久 | 国产精品99久久99久久久不卡| 亚洲美女黄片视频| 日韩视频一区二区在线观看| 欧美乱妇无乱码| 亚洲精品国产一区二区精华液| 国产亚洲欧美98| 国产精品一区二区在线不卡| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 在线观看www视频免费| 亚洲专区国产一区二区| 亚洲国产精品999在线| 亚洲伊人色综图| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 极品人妻少妇av视频| 91九色精品人成在线观看| 午夜免费成人在线视频| 亚洲人成77777在线视频| av片东京热男人的天堂| 无限看片的www在线观看| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 一进一出抽搐动态| 在线播放国产精品三级| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 少妇熟女aⅴ在线视频| 亚洲伊人色综图| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 最近最新免费中文字幕在线| 美女扒开内裤让男人捅视频| 在线观看www视频免费| 日韩三级视频一区二区三区| 在线观看日韩欧美| 热re99久久国产66热| 精品久久久久久,| 免费搜索国产男女视频| 人妻久久中文字幕网| 亚洲国产精品合色在线| 日韩欧美一区视频在线观看| a级毛片在线看网站| 黄色丝袜av网址大全| 久久久久久免费高清国产稀缺| 午夜福利,免费看| 久久这里只有精品19| 欧美日韩精品网址| 99国产精品一区二区三区| 国产精品亚洲美女久久久| 国产一区二区三区综合在线观看| 国产精品亚洲av一区麻豆| 精品国产亚洲在线| 女性生殖器流出的白浆| 亚洲精品国产色婷婷电影| 波多野结衣av一区二区av| 日韩高清综合在线| 少妇熟女aⅴ在线视频| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 午夜精品久久久久久毛片777| 欧美乱码精品一区二区三区| 国产野战对白在线观看| 叶爱在线成人免费视频播放| 国产精品久久久人人做人人爽| 18美女黄网站色大片免费观看| 久久人妻av系列| av天堂在线播放| 极品教师在线免费播放| 久久久久九九精品影院| xxx96com| 精品福利观看| 精品国产一区二区三区四区第35| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 日韩国内少妇激情av| 亚洲精品在线美女| 国产又色又爽无遮挡免费看| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 在线观看免费午夜福利视频| 欧美乱色亚洲激情| 亚洲国产精品sss在线观看| www国产在线视频色| 757午夜福利合集在线观看| 色在线成人网| 久久亚洲真实| 精品高清国产在线一区| 在线观看一区二区三区| 三级毛片av免费| 亚洲熟女毛片儿| 国产91精品成人一区二区三区| 国产国语露脸激情在线看| 咕卡用的链子| 精品一品国产午夜福利视频| 黄片大片在线免费观看| 中文字幕av电影在线播放| 国产av在哪里看| cao死你这个sao货| 9色porny在线观看| 18禁观看日本| 亚洲七黄色美女视频| av天堂久久9| 纯流量卡能插随身wifi吗| а√天堂www在线а√下载| av天堂久久9| 在线视频色国产色| 久久亚洲真实| 欧美国产日韩亚洲一区| 亚洲精品在线美女| 啦啦啦 在线观看视频| 亚洲成a人片在线一区二区| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 成人三级黄色视频| 久久精品91无色码中文字幕| 久久 成人 亚洲| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| а√天堂www在线а√下载| 国产精品99久久99久久久不卡| 一边摸一边做爽爽视频免费| 90打野战视频偷拍视频| 我的亚洲天堂| 亚洲第一青青草原| 国产精品永久免费网站| 国产在线观看jvid| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 一区二区三区高清视频在线| 真人一进一出gif抽搐免费| 精品福利观看| 午夜亚洲福利在线播放| 麻豆一二三区av精品| 午夜福利18| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 精品国产亚洲在线| 99riav亚洲国产免费| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 最近最新中文字幕大全免费视频| 黄色丝袜av网址大全| 999久久久国产精品视频| 夜夜爽天天搞| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 香蕉丝袜av| 国产精品久久电影中文字幕| 午夜精品国产一区二区电影| 一夜夜www| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 国产真人三级小视频在线观看| a级毛片在线看网站| 免费在线观看日本一区| 婷婷六月久久综合丁香| 日韩有码中文字幕| 波多野结衣巨乳人妻| avwww免费| 69精品国产乱码久久久| 国产乱人伦免费视频| 嫩草影院精品99| 高清在线国产一区| 国产男靠女视频免费网站| 在线观看免费日韩欧美大片| 女性被躁到高潮视频| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 国产精品久久电影中文字幕| 精品人妻1区二区| 久久性视频一级片| 不卡av一区二区三区| 亚洲熟妇熟女久久| 久久伊人香网站| 免费看a级黄色片| 国产色视频综合| 美国免费a级毛片| АⅤ资源中文在线天堂| 高清在线国产一区| 国产亚洲精品第一综合不卡| 女警被强在线播放| 身体一侧抽搐| 99国产精品一区二区蜜桃av| 亚洲精品av麻豆狂野| 亚洲成人国产一区在线观看| 国产精品亚洲av一区麻豆| 国产一级毛片七仙女欲春2 | 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 亚洲精品久久国产高清桃花| 亚洲专区字幕在线| 亚洲精品粉嫩美女一区| www.熟女人妻精品国产| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 69精品国产乱码久久久| 女同久久另类99精品国产91| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 精品国内亚洲2022精品成人| 欧美在线黄色| 亚洲人成伊人成综合网2020| 麻豆成人av在线观看| 免费观看人在逋| 久久国产亚洲av麻豆专区| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 色av中文字幕| 免费看a级黄色片| bbb黄色大片| 麻豆久久精品国产亚洲av| 国产亚洲精品久久久久5区| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 久久久国产欧美日韩av| 色精品久久人妻99蜜桃| 真人做人爱边吃奶动态| 国产精品久久久av美女十八| 高清毛片免费观看视频网站| 国产伦一二天堂av在线观看| 国产欧美日韩一区二区三| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 999精品在线视频| 视频在线观看一区二区三区| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 人人妻人人澡人人看| 国产一区二区三区视频了| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 国产亚洲精品一区二区www| 99在线人妻在线中文字幕| 亚洲国产中文字幕在线视频| 国产亚洲精品第一综合不卡| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 国产午夜福利久久久久久| 夜夜爽天天搞| 日韩国内少妇激情av| 亚洲性夜色夜夜综合| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 中文字幕色久视频| 神马国产精品三级电影在线观看 | 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 亚洲全国av大片| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 久久国产乱子伦精品免费另类| 成年女人毛片免费观看观看9| av欧美777| 午夜福利成人在线免费观看| 日本五十路高清| 无人区码免费观看不卡| ponron亚洲| 波多野结衣一区麻豆| 亚洲精品国产区一区二| 久久精品91无色码中文字幕| 91九色精品人成在线观看| 久久久水蜜桃国产精品网| 黄片播放在线免费| 免费av毛片视频| 多毛熟女@视频| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 大型黄色视频在线免费观看| 久久香蕉激情| 黄色 视频免费看| 久久九九热精品免费| 亚洲欧美激情在线| 亚洲精品久久国产高清桃花| 老司机在亚洲福利影院| 久久久久久久精品吃奶| 欧美精品啪啪一区二区三区| 日本a在线网址| 亚洲专区字幕在线| 久久久精品欧美日韩精品| 真人做人爱边吃奶动态| АⅤ资源中文在线天堂| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 国产精品二区激情视频| xxx96com| 男女床上黄色一级片免费看| 精品第一国产精品| 亚洲男人天堂网一区| 九色国产91popny在线| 他把我摸到了高潮在线观看| 多毛熟女@视频| 一进一出好大好爽视频| 久久影院123| 亚洲,欧美精品.| 精品第一国产精品| 亚洲第一青青草原| 九色国产91popny在线| 99热只有精品国产| 黄色a级毛片大全视频| 99精品欧美一区二区三区四区| 久久热在线av| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 91精品三级在线观看| 日日爽夜夜爽网站| 久久久久久国产a免费观看| 看黄色毛片网站|