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    中醫(yī)五季變化對胃黏膜免疫功能的影響

    2016-01-09 03:33:45黃曉宇,吳紅倩,王菁
    吉林中醫(yī)藥 2015年6期
    關(guān)鍵詞:長夏

    中醫(yī)五季變化對胃黏膜免疫功能的影響

    黃曉宇,吳紅倩,王菁,張兆國,劉曉燕*

    (北京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,北京 100029)

    摘要:目的從中醫(yī)“天人相應(yīng)”動(dòng)態(tài)生命觀的角度揭示胃的生理功能特點(diǎn)及其調(diào)節(jié)機(jī)制。方法觀察中醫(yī)五季(春、夏、長夏、秋、冬)變化下,對照組和松果腺摘除模型組大鼠胃黏膜IL-2、IL-10、PGE2和SIgA含量改變情況。結(jié)果1)正常對照組大鼠胃黏膜IL-2水平在春季[(43.41±6.34) ng/g]呈現(xiàn)出高峰(P<0.05);2)對照組大鼠在長夏季節(jié)胃黏膜IL-10[(15.56±2.59 ) ng/g]、PGE2[(47.23±23.09) ng/g]和SIgA[(3.62±1.50) μg/mg]水平最高,且與夏、冬季相比,均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,P<0.01,P<0.01);3)模型組大鼠摘除松果腺后,胃黏膜IL-2、IL-10的季節(jié)性節(jié)律消失,胃黏膜PGE2、SIgA含量變化不明顯。結(jié)論胃黏膜的免疫因子存在季節(jié)性節(jié)律變化,長夏季節(jié)胃黏膜免疫功能較其他季節(jié)存在著顯著的差異,而且松果腺在這一變化中起了重要的調(diào)節(jié)作用。

    關(guān)鍵詞:中醫(yī)五季;長夏;胃黏膜免疫;松果腺

    DOI::10.13463/j.cnki.jlzyy.2015.06.026

    中圖分類號:R226,R392.11文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A

    文章編號:1003-5699(2015)06-0614-04

    基金項(xiàng)目:國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81001482),國家支持計(jì)劃課題(2012BAJ02B05),北京中醫(yī)藥大學(xué)氣化學(xué)說與藏象理論研究創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)資助項(xiàng)目(522/0100603001)。

    作者簡介:黃曉宇(1990-),女,碩士研究生,主要從事“天人相應(yīng)”理論研究。

    收稿日期:(責(zé)任編輯:趙玉芝2014-09-19)

    *通信作者:劉曉燕,電話-13693318075,電子信箱-liuxy1088@sina.com

    Influence of traditional Chinese medicine five season changes on gastric immune function

    HUANG Xiaoyu,WU Hongqian,WANG Jing,ZHANG Zhaoguo,LIU Xiaoyan*

    (Preclinical Medicine Institute,Beijing University of Chinese Medicine,Beijing 100029,China)

    Abstract:ObjectiveTo reveal the physiological features and regulation mechanism of stomach from the perspective of TCM “Corresponding between man and nature”,a dynamic perspective view of life.MethodsRats in control group and model group (with the removal of pineal glands) were raised under TCM five seasons (spring,summer,late summer,autumn,winter) and content changes of IL-2,IL-10,PGE2 and SIgA in gastric mucosa were observed.Results1)IL-2 level of rat gastric mucosa in control group showed a peak(43.41±6.34 ng/g) in the spring (P<0.05);2)IL-10,[(15.56±2.59) ng/g] PGE2[(47.23±23.09) ng/g)]and SIgA[(3.62±1.50) μg/mg] in gastric mucosa of the control rats all reached the highest level in late summer,and were statistically significant (P<0.05,P<0.01,P<0.01 respectively) compared with those in summer and winter;3)After model rats’ pineal glands being removed,seasonal rhythms of IL-2 and IL-10 in gastric mucosa disappeared,while the content of gastric mucosa PGE2 and SIgA did not change significantly.Conclusion1)Seasonal changes of gastric mucosal immune factors exist;2)There are significant differences in the gastric mucosal immune function in late summer compared to other seasons;3)Pineal gland plays an important regulatory role in these changes.

    Keywords:TCM five seasons;late summer;gastric mucosal immune;pineal gland

    中醫(yī)“五臟應(yīng)時(shí)”理論體現(xiàn)了機(jī)體自發(fā)地、自組織地去適應(yīng)環(huán)境的過程[1],而這種從五季(春、夏、長夏、秋、冬)的動(dòng)態(tài)變化中認(rèn)識人體臟腑功能是中醫(yī)生命觀的特點(diǎn)之一。各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)研究也證實(shí)其具有臨床價(jià)值[2]。胃為“倉廩之官”,具有重要的臨床意義。現(xiàn)代流行病學(xué)調(diào)查[3-6]也表明,許多胃的疾病均存在季節(jié)性發(fā)病的特點(diǎn),因此有研究者相應(yīng)地提出發(fā)病季節(jié)等因素是慢性胃炎研究的重要考慮因素[7],但其中的機(jī)制尚不清楚。免疫功能在維持機(jī)體健康方面發(fā)揮著重要的作用,而胃的黏膜免疫的變化也直接影響著胃的免疫功能[8]。因此本研究通過觀察胃黏膜IL-2、IL-10、PGE2和SIgA等相關(guān)免疫因子在中醫(yī)五季的變化特點(diǎn),以及與季節(jié)調(diào)節(jié)密切相關(guān)的松果腺的影響,以期從中醫(yī)“天人相應(yīng)”動(dòng)態(tài)生命觀的角度揭示胃的生理功能特點(diǎn)及其調(diào)節(jié)機(jī)制。

    1材料

    雄性SD大鼠(180~200) g60只,購自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司,動(dòng)物合格證號:SCXK(京)2006-0009。Rat IL-2 ELISA Kit,Rat IL-10 ELISA Kit,Rat PGE2 ELISA Kit,Rat SIgA ELISA Kit(以上試劑盒均購自北京瑞格博科技發(fā)展有限公司)。

    2方法

    2.1大鼠松果腺摘除將大鼠麻醉固定后無菌操作,頭頂皮膚去皮,切開約2 cm,暴露顱骨矢狀縫和人字縫。用牙科鉆在人字縫和矢狀縫兩側(cè)鉆取圓形骨片,暴露矢狀靜脈、橫向靜脈竇、竇匯,用眼科彎鑷直接取出松果腺,明膠海綿止血,清創(chuàng),點(diǎn)適量青霉素干粉,縫合皮膚,創(chuàng)口再點(diǎn)青霉素干粉。

    2.2動(dòng)物飼養(yǎng)季節(jié)的選擇本研究選擇以春分、夏至、秋分、冬至前的1個(gè)月作為春、夏、秋、冬四季的動(dòng)物飼養(yǎng)時(shí)間,并選擇立秋前1個(gè)月為長夏季節(jié)的動(dòng)物飼養(yǎng)時(shí)間。

    2.3分組處理60只雄性SD大鼠分別于春分、夏至、秋分、冬至的前37 d,立秋的前38 d隨機(jī)分為對照組和模型組。模型組飼養(yǎng)1周后制備松果腺摘除動(dòng)物模型。2組大鼠在相同條件下分別飼養(yǎng)到春分、夏至、立秋前一天(長夏)、秋分、冬至進(jìn)行實(shí)驗(yàn)取材。飼養(yǎng)環(huán)境為普通清潔環(huán)境,保持自然光照及室溫,除冬季供暖,溫度保持在(18±1) ℃外,未有其他人工干預(yù),以保持與外界環(huán)境氣候一致。動(dòng)物自由攝食飲水,飼料為普通鼠全價(jià)顆粒飼料。

    2.4取材及指標(biāo)測定取材于晚上9點(diǎn)開始。大鼠麻醉固定后無菌操作,開腹刮取胃黏膜,-70 ℃凍存待測,指標(biāo)檢測采用ELISA法。

    3結(jié)果

    3.1中醫(yī)五季變化對大鼠胃黏膜IL-2、IL-10水平的影響見表1。

    ng/g

    注::與同組長夏比較,#P<0.05,##P<0.01;對照組與同一季節(jié)模型組比較,△P<0.05,△△P<0.01;與同組春季比較,▲P<0.05,▲▲P<0.01;與同組夏季比較,☆☆P<0.01

    3.2中醫(yī)五季變化對大鼠胃黏膜PGE2、SIgA水平的影響見表2。

    PGE2:ng/g,SIgA:μg/mg)

    注::與同組長夏比較,#P<0.05,##P<0.01;與同組冬季比較△P<0.05,△△P<0.01

    4討論

    《靈樞·歲露》曰:“人與天地相參也,與日月相應(yīng)也”。對于臟腑與天地的通應(yīng)規(guī)律,朱丹溪指出:“天地之氣,以五行更迭衰旺而成四時(shí),人之五臟六腑亦應(yīng)之而衰旺?!比欢渲芯唧w的生理機(jī)制變化,由于古人受時(shí)代的局限并未闡明,這也為中醫(yī)的現(xiàn)代研究提供了廣闊的空間。

    在中醫(yī)“五臟應(yīng)時(shí)”理論中有脾胃通應(yīng)長夏的觀點(diǎn)。通常人們更重視脾與長夏的關(guān)系,對于胃與長夏的關(guān)系則研究較少。本研究通過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),胃的黏膜免疫系統(tǒng)也存在著跟隨一年五季變化的規(guī)律,而且長夏季節(jié)各胃黏膜免疫指標(biāo)較其他季節(jié)有明顯不同,由此說明胃也存在與長夏季節(jié)相通應(yīng)的特點(diǎn)。具體的生理機(jī)制如下:

    4.1長夏季節(jié)的胃黏膜免疫Th1/Th2平衡不同于其他季節(jié)近年來研究發(fā)現(xiàn),輔助性T細(xì)胞亞群Th1/Th2平衡在維持細(xì)胞因子的動(dòng)態(tài)平衡,控制免疫應(yīng)答的走向,維持正常內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定中起了極其重要的作用[10]。其中,白介素2(IL-2)和白介素10(IL-10)分別是Th1和Th2的重要代表。

    本研究發(fā)現(xiàn),除長夏季節(jié)外,各季節(jié)胃黏膜的IL-2和IL-10變化趨勢均呈同向變化,而在長夏季節(jié)則表現(xiàn)為IL-2水平降低而IL-10水平升高。這表明在長夏季節(jié)胃黏膜Th1/Th2平衡處于不協(xié)調(diào)狀態(tài),免疫應(yīng)答嚴(yán)重失調(diào),這可能也是臨床上濕熱型胃炎、原發(fā)性膽汁反流性胃炎易出現(xiàn)在夏秋季節(jié)的原因。有流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)慢性胃炎在秋季高發(fā),其次是夏季,高發(fā)節(jié)氣在立秋[3]。一般來說,流行病學(xué)的夏季是指包括長夏在內(nèi)的整個(gè)夏季,而我們實(shí)驗(yàn)中的夏季僅指流行病學(xué)中夏季的前半段,而立秋正好是長夏季節(jié)(夏至-處暑)。另有研究表明,原發(fā)性膽汁反流性胃炎檢出率在夏季最高,冬季最低[4],并提示濕熱之氣在原發(fā)性發(fā)病中可能占重要地位,這也印證了本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。

    4.2長夏季節(jié)的胃黏膜細(xì)胞保護(hù)因子濃度明顯高于其他季節(jié)本研究表明,前列腺素E2(PGE2)的濃度在長夏季節(jié)明顯高于其他季節(jié)。PGE2是胃黏膜重要的細(xì)胞保護(hù)因子,能防止各種有害物質(zhì)對消化道上皮細(xì)胞的損傷,實(shí)驗(yàn)研究證實(shí),中藥可通過提高PGE2水平治療慢性萎縮性胃炎[11]。本研究顯示,長夏季節(jié)胃黏膜PGE2水平高表達(dá)的同時(shí)IL-2水平降低,IL-10水平升高,這很可能與PGE2可以抑制Th1型細(xì)胞因子的分泌,增強(qiáng)Th2型細(xì)胞因子分泌的調(diào)節(jié)功能有關(guān)。

    本研究還發(fā)現(xiàn),分泌型免疫球蛋白A(secretion IgA,SlgA)的免疫應(yīng)答在長夏季節(jié)也明顯高于其他季節(jié)。SIgA構(gòu)成了胃黏膜免疫的特異性保護(hù)屏障,能夠清除抗原而不激活系統(tǒng)免疫,在保護(hù)胃黏膜、防止胃潰瘍發(fā)生方面發(fā)揮了重要作用。臨床試驗(yàn)也證實(shí):輕度胃炎與中、重度胃炎患者隨著炎癥的加重,胃液中SIgA水平有增高趨勢[12],說明SIgA水平的高低與炎癥程度相關(guān)。因此,SIgA含量的變化直接反映著機(jī)體黏膜的局部免疫狀態(tài)。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),長夏季節(jié)胃黏膜SIgA水平最高,說明黏膜免疫功能在此時(shí)亢奮,這一特異性保護(hù)屏障機(jī)制被激活,同時(shí)還證明長夏季節(jié)炎性反應(yīng)的存在,這可能與長夏季節(jié)濕熱的氣候環(huán)境易導(dǎo)致細(xì)菌滋生有關(guān)[3]。 另外,不同于胃炎的發(fā)病,多數(shù)報(bào)道指出,消化道出血和潰瘍均呈現(xiàn)冬春寒冷季節(jié)多發(fā)、夏秋季發(fā)病率低的趨勢[13-15]。本研究則發(fā)現(xiàn),冬春季節(jié)PGE2和SIgA水平低下,表明其保護(hù)胃黏膜功能低下,加之季節(jié)變化劇烈,易造成免疫過度,對胃黏膜造成損傷,誘發(fā)消化道出血和潰瘍。而長夏季節(jié)明顯增強(qiáng)的SIgA可能在夏秋季節(jié)減少胃潰瘍的出現(xiàn)中發(fā)揮了重要保護(hù)作用。

    4.3胃黏膜免疫的五季變化與松果腺的調(diào)節(jié)有關(guān)松果腺是機(jī)體光敏感高位調(diào)節(jié)器官,它參與調(diào)節(jié)人體的季節(jié)節(jié)律變化,也可以通過分泌褪黑素(Melatonin,MT)而對機(jī)體免疫狀態(tài)產(chǎn)生影響。各類研究表明,MT可促進(jìn)IL-2和IL-10的生成[16-17]。本研究的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)胃黏膜的免疫因子存在季節(jié)性的變化規(guī)律,而摘除松果腺后,胃黏膜對于季節(jié)變化的感應(yīng)性降低,IL-2和IL-10的節(jié)律更是明顯消失,表明松果腺在胃黏膜免疫的季節(jié)變化中也發(fā)揮了重要的作用。同時(shí),本研究也發(fā)現(xiàn),松果體摘除后各季節(jié)PGE2、SIgA雖略有變化,但較正常組比較都不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),其水平隨季節(jié)的變化趨勢也與正常組類似,說明從季節(jié)調(diào)節(jié)上松果腺對胃黏膜PGE2、SIgA雖有影響,但影響不大。

    綜上所述,本研究從五臟應(yīng)時(shí)的角度出發(fā),通過觀察五季中胃黏膜免疫的變化,發(fā)現(xiàn)胃黏膜的免疫因子存在季節(jié)性節(jié)律變化,長夏季節(jié)胃腸黏膜免疫功能較其他季節(jié)存在著顯著的差異,而且松果腺在這一變化中起了重要的調(diào)節(jié)作用。本研究僅從免疫的角度揭示了胃與長夏相應(yīng)的生理機(jī)理,其深入機(jī)制尚待進(jìn)一步研究。

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