平臥菊三七提取物體外抗氧化活性研究

孟 醒 李安平 余江帆 黃敦元

(1. 中南林業(yè)科技大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，湖南 長沙 410004；2. 江西省林業(yè)科技培訓(xùn)中心，江西 南昌 330038；3. 江西環(huán)境工程職業(yè)學(xué)院，江西 贛州 341000)

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平臥菊三七提取物體外抗氧化活性研究

孟 醒1李安平1余江帆2黃敦元3

(1. 中南林業(yè)科技大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，湖南 長沙 410004；2. 江西省林業(yè)科技培訓(xùn)中心，江西 南昌 330038；3. 江西環(huán)境工程職業(yè)學(xué)院，江西 贛州 341000)

研究平臥菊三七植株不同部位、干燥方式和提取溶劑對其提取液中生物活性物質(zhì)含量和抗氧化活性的影響。結(jié)果表明：平臥菊三七植株根部相比于莖部和葉部，酚類化合物和黃酮類化合物含量較高且抗氧化性較強，鐵離子還原/抗氧化能力、DPPH自由基清除能力和ABTS+·清除能力測定的抗氧化值(抗氧化能力TEAC值)分別達(dá)到(21.25±0.31)，(35.27±0.26)，(56.20±0.22 ) μg Trolox/mL。干燥方式對平臥菊三七植物根部提取液的生物活性物質(zhì)含量有顯著性影響，冷凍干燥和60 ℃熱風(fēng)干燥方式獲得的提取液具有更強的抗氧化活性。溶劑對平臥菊三七植株根部提取液的生物活性物質(zhì)含量和抗氧化活性有顯著性影響(P<0.05)，其抗氧化活性(FRAP法、DPPH法和ABTS法)與總酚、總黃酮和綠原酸含量顯著相關(guān)(P<0.05)，與總酚相關(guān)系數(shù)R分別為0.919，0.848，0.907，與總黃酮含量相關(guān)系數(shù)R分別為0.915，0.793，0.823，與綠原酸含量相關(guān)系數(shù)R分別為0.887，0.927，0.900，與VC含量相關(guān)性較低。

平臥菊三七；多酚；溶劑提??；抗氧化活性

平臥菊三七又名平臥土三七、蛇接骨，為菊科(Asteraceae)菊三七屬多年生草本植物，主要分布在東南亞地區(qū)和中國南方等地[1]。研究[2-4]表明，平臥菊三七中含有綠原酸、生物堿、萜烯類、香豆素類及黃酮類等生物活性成分，是一種集營養(yǎng)價值和藥理作用為一身的新食品資源[5-7]，具有很好開發(fā)和應(yīng)用潛力。

目前，國內(nèi)外對平臥菊三七的研究主要集中在整株綠原酸[8]及黃酮等[9-11]的提取工藝、粗提物的降血糖[12-13]和抗菌活性[14]方面。Niwat Kaewseejan等[15]在平臥菊三七的乙酸乙酯分餾物中檢測到楊梅酮、槲皮素、芹黃素、山奈酚等黃酮類化合物的存在。但有關(guān)平臥菊三七提取物抗氧化活性及其與活性成分含量之間的相關(guān)性研究尚未見報道。

本研究擬比較平臥菊三七植株不同部位、不同的干燥方式和提取溶劑對生物活性物質(zhì)含量及其抗氧化活性的影響，以及活性成分含量和抗氧化活性之間的關(guān)系，旨在為平臥菊三七資源的開發(fā)利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

平臥菊三七：采自江西贛州(2015年10月下旬采收)；

沒食子酸、水溶性維生素E(Trolox)、1,1-二苯基-2-三硝基苯(DPPH)、Folin-Ciocalteu試劑、ABTS：分析純，美國Sigma公司；

總抗氧化能力(T-AOC)試劑盒：蘇州科銘生物技術(shù)有限公司；

正丁醇、乙酸乙酯、三氯甲烷、無水乙醇、丙酮、甲醇等：均為分析純。

高速萬能粉碎機：qe-100型，浙江屹立工貿(mào)有限公司；

超聲波清洗機：JRC-2000型，濟寧市潤通超聲電子有限公司；

醫(yī)用離心機：TGL-16型，長沙平凡儀器儀表有限公司；

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：YRE-5299型，鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司；

真空冷凍干燥機：LGJ-10型，北京松源華興科技發(fā)展有限公司；

紫外可見光分光光度計：UV-1800型，日本島津公司。

1.2 平臥菊三七植株不同部位提取液的制備

平臥菊三七全植株采摘，除去雜質(zhì)，清水漂洗瀝干，然后按葉部、莖部和根部分開，分別將其置于60 ℃的鼓風(fēng)干燥箱中干燥72 h，粉碎，過60目篩，石油醚脫色脫脂3 h，然后放入通風(fēng)櫥中風(fēng)干至恒重，分別得到葉部、莖部和根部的粉體樣品。準(zhǔn)確稱取平臥菊三七葉部、莖部和根部粉末各1份，每份1.0 g，按料液比1∶30(g/mL)加入蒸餾水混合，并用21 kHz的超聲波輔助提取60 min，提取液用速度為4 000 r/min的離心機離心10 min，殘渣再按相同的試驗條件提取1次，合并上清液，過濾，用提取溶劑定容至100 mL，得提取液，然后用其檢測成分含量和抗氧化性。

1.3 平臥菊三七植株根部不同干燥方式提取液的制備

將分割出來的新鮮平臥菊三七植株的根部分別采用陰干、冷凍干燥和熱風(fēng)干燥處理。陰干：將樣品放置于干燥、通風(fēng)良好的室內(nèi)，溫度約為20～25 ℃的條件下干燥至恒重；真空冷凍干燥：將樣品于-80 ℃冰箱中預(yù)凍后，在冷阱溫度為-40 ℃、隔板加熱溫度為20 ℃、真空度為12 Pa條件下干燥至恒重；熱風(fēng)干燥：在電熱鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)進(jìn)行，溫度分別為60，70，80，90，100 ℃，干燥至恒重。干燥完后，粉碎過60目篩，按1.2條件提取，得提取液。

1.4 平臥菊三七植株根部不同溶劑提取液的制備

準(zhǔn)確稱取7份60 ℃熱風(fēng)干燥處理后的平臥菊三七根部粉末，分別用蒸餾水、甲醇、無水乙醇、丙酮、正丁醇、乙酸乙酯和三氯甲烷按1∶30(g/mL)料液比混合，并用21 kHz的超聲波進(jìn)行輔助提取60 min，提取液經(jīng)速度為4 000 r/min的離心機離心10 min，得上清液。殘渣按相同的試驗條件再提取1次，合并上清液，用提取溶劑定容至200 mL。

1.5 檢測方法

1.5.1 提取物得率的測定 提取液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)后濃縮，用蒸餾水洗入培養(yǎng)皿中，于50 ℃下烘干至恒重，按式(1)計算不同溶劑所得提取物得率：

(1)

式中：

c——提取物得率，%；

m1——濃縮干燥后培養(yǎng)皿和樣品的質(zhì)量，g；

m2——濃縮前培養(yǎng)皿的質(zhì)量，g；

m3——平臥菊三七樣品質(zhì)量，g。

1.5.2 總酚含量的測定 以沒食子酸為對照品，F(xiàn)C(Folin-Ciocalteu)比色法測定系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度[16-18]，以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度C為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。樣品中總酚含量標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：A=16.331C+0.010 4，R2=0.999 0?？偡雍恳愿晌镔|(zhì)質(zhì)量計，單位為mg GAE/g。1.5.3 總黃酮含量的測定 采用硝酸鋁比色法[19]。以蘆丁為標(biāo)樣作標(biāo)準(zhǔn)曲線，樣品中類黃酮含量以達(dá)到同樣吸光度所需的蘆丁的質(zhì)量濃度表示。以吸光度A對蘆丁標(biāo)樣濃度C作圖，獲得標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程A=0.008 7C-0.001 7，R2=0.999 3。蘆丁含量在0.01～0.09 mg/mL時與吸光度呈良好線性關(guān)系。

1.5.4 綠原酸含量的測定 參考胡鮮寶等[20]的方法和向福[21]的方法，稍作修改。稱取綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品2 mg，用70%(體積分?jǐn)?shù))甲醇溶解，定容于25 mL容量瓶中，搖勻，得濃度為80 μg/mL的綠原酸標(biāo)準(zhǔn)液，于200～550 nm波長范圍內(nèi)全程掃描。在327 nm波長處有最大吸收，且空白對照無干擾。然后用移液管分別取上述標(biāo)準(zhǔn)溶液1，2，3，4，5 mL置于25 mL容量瓶中，用70%(體積分?jǐn)?shù))甲醇溶液定容，配成濃度C分別為3.2，6.4，9.6，12.8，16.0 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。用紫外可見分光光度計在波長327 nm下測定吸光度A，得到綠原酸標(biāo)準(zhǔn)曲線方程：A=0.030 8C+0.006 8，R2=0.999 1。

1.5.5 抗壞血酸含量的測定 按GB/T 6195—1986執(zhí)行。

1.5.6 鐵離子還原/總抗氧化能力分析法(ferric reducing antioxidant power，F(xiàn)RAP) 在100 mL的醋酸鹽緩沖液(0.3 mol/L，pH 3.6)中加入10 mL 2,4,6-三吡啶基三嗪(TPTZ)的鹽酸溶液(10 mmol/L)和10 mL的FeCl3溶液(20 mmol/L)，混合制成FRAP工作液，用前預(yù)溫至37 ℃。取30 μL樣品，然后加入90 μL蒸餾水和0.9 mL FRAP工作液，混勻后在37 ℃下反應(yīng)10 min，用紫外分光光度計測定在593 nm處的吸光度，每個樣品平行測定3次，吸光度變化值越大，說明總還原能力越強。

標(biāo)準(zhǔn)曲線制作：取不同濃度的Trolox溶液(0，5，10，15，20，25，30 μg/mL)，按上述條件處理，于593 nm處測定吸光度。以反應(yīng)后的吸光度變化值ΔA為縱坐標(biāo)，以Trolox濃度C為橫坐標(biāo)，做FRAP法標(biāo)準(zhǔn)曲線，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為ΔA=0.017 5C+0.005 0，R2=0.999 3。在標(biāo)準(zhǔn)曲線上求得相應(yīng)Tolox的濃度(μg/mL)，得出抗氧化能力值(trolox equivalent antioxidant capacity，TEAC)。計算公式：

(2)

式中：

TEAC——抗氧化能力值，μg/mL；

A0——空白樣品吸光度；

Ai——樣品樣品吸光度。

1.5.7 抗氧化能力評價(DPPH·法) 參照文獻(xiàn)[22]的方法，稍作改動。取0.5 mL 各組樣品溶液分別與 2.5 mL DPPH·溶液(0.05 mg/mL)混合。避光反應(yīng) 30 min 后，于517 nm測定樣品的吸光度，用蒸餾水代替樣品溶液作為空白。根據(jù)Trolox的DPPH· 清除能力標(biāo)準(zhǔn)曲線，樣品的自由基清除能力以 Trolox 當(dāng)量抗氧化能力(Trolox equivalent antioxidant capacity，TEAC)表示，即每毫升提取液具有相同抗氧化能力所需 Trolox 的微克數(shù)。

以Trolox濃度為橫坐標(biāo)，清除率為縱坐標(biāo)，制備DPPH標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到Trolox標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度X(μg/mL) 與樣品清除率Y(%) 的回歸方程為Y=0.016 4X+0.009 9，R2=0.999 1。DPPH·法清除率(Y)和抗氧化能力值(TEAC)的計算公式：

(3)

(4)

式中：

Y—— DPPH·清除率，%；

A0——空白管吸光值，A；

Ai——樣品管吸光值，A。

TEAC——抗氧化能力值，μg/mL；

Ctrolox——Trolox標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度，μg/mL；

M樣品——樣品質(zhì)量，μg。

1.5.8 抗氧化能力評價(ABTS+·法) 參照文獻(xiàn)[23]的方法，稍作改動。配制10 mL ABTS+·溶液(7 mmol/L)，加入過硫酸鉀溶液(140 mmol/L)88 μL，然后將該混合溶液在37 ℃下避光反應(yīng)12～16 h。用pH為 7.4的磷酸緩沖液(phosphate buffer solution, PBS)稀釋ABTS+·混合溶液至適當(dāng)濃度，使其在波長734 nm條件下的吸光度值為0.700±0.02，得到ABTS+·工作液。稱取0.003 8 g的Trolox用60%乙醇溶液溶解，分別配成濃度為0.0，2.5，12.5，25.0，37.5，50.0 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液。

將Trolox標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液或樣品(稀釋后)與ABTS+·工作液混合，靜置反應(yīng)10 min，用紫外分光光度計在734 nm處測吸光度，計算樣品清除率和TEAC值。

以Trolox濃度為橫坐標(biāo)，清除率(吸光值變化量)為縱坐標(biāo)，制備Trolox標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到Trolox標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度X(mmol/L)與樣品清除率Y(%) 的回歸方程為Y=0.017 5X+0.005 0，R2=0.999 3。ABTS+·法清除率Y(%)的計算公式同式(3)?？寡趸芰χ?TEAC)的計算公式：

(5)

式中：

TEAC——抗氧化能力值，μg/mL；

Ctrolox——Trolox標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度 ，μg/mL；

M樣品——樣品質(zhì)量，μg。

1.6 數(shù)據(jù)分析

每組試驗重復(fù)3 次，結(jié)果表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，采用Origin 8.0繪圖軟件繪圖，SPSS 19.0進(jìn)行方差分析和相關(guān)性分析。樣品間的差異顯著性采用單因素方差分析鄧肯氏檢驗法測驗。相關(guān)性分析使用 Pearson correlation coefficient。

2 結(jié)果分析

2.1 平臥菊三七植株不同部位提取液抗氧化活性比較

以水為溶劑，對平臥菊三七植株的根部、莖部和葉部分別提取，提取液的主要生物活性物質(zhì)含量和抗氧化活性檢測結(jié)果見圖1和表1。

由圖1可知，平臥菊三七植株根部具有最高的總酚(25.96 mg GAE/g±1.23 mg GAE/g)和總黃酮(2.16 mg/g±0.37 mg/g)含量，其次是葉部，莖部含量最少。根部、葉部和莖部之間的綠原酸含量差異不顯著(P>0.05)。根部、葉部和莖部的VC含量之間有顯著性差異(P<0.05)，含量分別為(108.12±0.73)，(72.71±0.10)，(39.22±0.02) μg/g。

由表1可知，F(xiàn)RAP、DPPH和ABTS 3種抗氧化活性測定方法均顯示平臥菊三七植株的3個部位間的抗氧化活性有顯著性差異(P<0.05)，其中根部具有最強的抗氧化活性，葉部次之，莖部抗氧化活性最弱。平臥菊三七植株3個部位的總酚和總黃酮含量大小與其FRAP抗氧化活性值的大小是相一致的。它們之間呈極顯著相關(guān)(P<0.05)，相關(guān)系數(shù)R分別達(dá)到0.98和0.95。Krishnan V等[24]研究結(jié)果也表明，平臥菊三七植株根部的總酚和總黃酮含量最高，且具有最高的抗氧化活性。平臥菊三七植株所含的總酚和總黃酮是其具有抗氧化活性的主要因素，而且主要集中在根部。Jaleel C A[25]在比較了南非醉茄根部和葉子的酶類和非酶類抗氧化物質(zhì)的含量后，得出其根部抗氧化活性物質(zhì)含量最高，與本研究結(jié)果類似。

相同物質(zhì)含量圖上的不同字母表示不同部位間差異顯著(P<0.05)

圖1 平臥菊三七植株不同部位提取液總酚、總黃酮、綠原酸和VC含量

Figure 1 Total phenols, flavonoids and chlorogenic acid content of extracts from different parts ofGynuraprocumbens(Lour.) Merr

表1 平臥菊三七不同部位提取液的抗氧化能力(TEAC值)比較?

Table 1 Comparison of antioxidant capacity of the extract from different parts ofGynuraprocumbens(Lour.) Merr μg/mL

植株部位FRAPDPPHABTS根部21.25±0.31c35.27±0.26c56.20±0.22c葉部18.47±0.12b24.21±0.18b39.42±0.17b莖部8.39±0.19a10.97±0.21a2.31±0.23a

? 同列小寫字母不同表示差異顯著(P<0.05)。

2.2 干燥方式對平臥菊三七植株根部提取液抗氧化活性的影響

新鮮平臥菊三七植株根部分別采用陰干、冷凍干燥和熱風(fēng)干燥處理，經(jīng)粉碎和水溶劑萃取獲得根部的提取液，再檢測其主要生物活性物質(zhì)含量和抗氧化活性，結(jié)果見表2、3。

由表2可知，3種干燥方式中，以60 ℃的熱風(fēng)干燥和凍干所獲得的平臥菊三七植株根部提取液含有最高的總酚、總黃酮、綠原酸和VC含量。熱風(fēng)干燥溫度越高，干燥時間越短，但植株中生物活性物質(zhì)被破壞也越多。當(dāng)在溫度為100 ℃的條件下干燥(2.23±0.31) h后，總酚、總黃酮、綠原酸和VC含量分別僅剩余(14.82±0.61) mg GAE/g、(0.93±0.61) mg QE/g、(0.95±0.72) mg/g、(18.10±0.72) μg/g，接近于60 ℃干燥所得樣品的一半。陰干雖然溫度較低，但陰干處理時間較長，平臥菊三七樣品與氧氣長時間接觸，而且微生物會大量繁殖，因此對其成分破壞也較大，導(dǎo)致其生物活性物質(zhì)含量降低。

表2 不同干燥方式平臥菊三七植株根部水提液中總酚、總黃酮、綠原酸和VC含量?

? 同列小寫字母不同表示差異顯著(P<0.05)。

表3 平臥菊三七根部不同干燥方式提取物的抗氧化活性(TEAC值)?

Table 3 Antioxidant value of extracts ofGynuraprocumbens(Lour.) Merr roots by different drying methods μg/mL

干燥方式溫度/℃FRAPDPPHABTS陰干 2515.29±0.25c21.36±0.12c40.20±0.21d凍干 -4020.88±0.15f32.19±0.23e55.71±0.18f6021.25±0.25f35.27±0.24f56.20±0.31f7018.80±0.12e28.32±0.15d43.92±0.22e熱風(fēng)干燥8016.19±0.17d21.91±0.24c31.38±0.15c9014.89±0.26b17.29±0.17b28.73±023b10012.93±0.13a13.09±0.19a23.19±0.21a

? 同列小寫字母不同表示差異顯著(P<0.05)。

由表3可知，不同干燥方式所獲得的平臥菊三七植株根部的提取液均具有一定的抗氧化活性，F(xiàn)RAP、DPPH和ABTS 3種抗氧化活性測定方法能一致地反映平臥菊三七植株根部提取液的抗氧化活性的大小，而且其大小排序與其總酚、總黃酮和綠原酸含量大小排序基本一致。其中，60 ℃的熱風(fēng)干燥和凍干所獲得的平臥菊三七根部提取液具有最高的抗氧化活性，陰干、90 ℃熱風(fēng)干燥和100 ℃熱風(fēng)干燥所獲得的提取液具有較低的抗氧化活性。熱風(fēng)干燥溫度越高，抗氧化活性越低。尚紅梅等[26]在研究干燥方式對菊苣根多酚含量和抗氧化活性的影響中，得出了相同的結(jié)論。

2.3 平臥菊三七植株根部的不同溶劑提取液的抗氧化活性比較

新鮮平臥菊三七植株根部用60 ℃的熱風(fēng)干燥，經(jīng)粉碎，過60目篩，得粉末，然后分別用蒸餾水、甲醇、無水乙醇、丙酮、正丁醇、乙酸乙酯和三氯甲烷7種溶劑進(jìn)行提取，測試提取液的主要生物活性物質(zhì)含量和抗氧化活性，結(jié)果見表4、5。提取液中生物活性物質(zhì)含量與其抗氧化活性之間的相關(guān)性見表6。

由表4可知，7種溶劑提取液間的生物活性物質(zhì)含量有顯著性差異(P<0.05)。平臥菊三七植株根部水提物具有最高的粗提物得率，其次是丙酮，無水乙醇的提取物得率最低。根部水提物中總酚、總黃酮、綠原酸和VC含量較高，分別達(dá)到了(6.91±1.03) mg GAE/g、(2.64±0.17) mg QE/g、(2.39±0.13) mg/g和(7.22±0.02)μg/g，其次是甲醇、丙酮和無水乙醇，正丁醇和三氯甲烷提取物中含量最低。溶劑極性越大，提取物中總酚和總黃酮含量越大。極性較低的溶劑與酚類化合物間的極性差異較大，因此酚類化合物溶出量減少。Mohdaly等[27]比較了土豆皮、甜菜和芝麻的6種不同溶劑提取物的總酚含量和抗氧化活性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)使用高極性溶劑所獲得的提取物中酚類化合物含量更高，具有更好的自由基清除效果，與本試驗結(jié)果相似。

表4 平臥菊三七植株根部不同溶劑提取液中總酚、總黃酮、綠原酸和VC含量?

? 同列小寫字母不同表示差異顯著(P<0.05)。

表5 平臥菊三七植株根部不同溶劑提取液的抗氧化活性(TEAC值)?

Table 5 Antioxidant value of extracts ofGynuraprocumbens(Lour.)Merrroots by different solvent

μg/mL

? 同列小寫字母不同表示差異顯著(P<0.05)。

由表5可知，平臥菊三七植株根部不同溶劑提取液抗氧化能力存在顯著性差異(P<0.05)。FRAP法和ABTS法檢測結(jié)果顯示水提物抗氧化能力最強，TEAC值分別達(dá)到(21.25±0.45)，(56.20±0.21) μg/mL，甲醇次之，正丁醇和三氯甲烷最弱。DPPH法測定結(jié)果表明甲醇提取物抗氧化能力最強，TEAC值為(42.22±0.35) μg/mL，水提物次之，正丁醇和三氯甲烷最弱。

由表6可知，3種抗氧化活性檢測方法之間呈極顯著相關(guān)(P<0.01)。FRAP法與DPPH法和ABTS法的相關(guān)系數(shù)R分別為0.948和0.927，DPPH法與ABTS法之間的相關(guān)系數(shù)R為0.915。此3種檢測方法能基本一致地反映平臥菊三七植株根部不同溶劑提取液的抗氧化活性大小。

平臥菊三七植株根部綠原酸含量與DPPH法、FRAP法和ABTS法檢測的抗氧化活性間呈極顯著相關(guān)，相關(guān)系數(shù)R分別為0.927，0.887，0.900。這與金瑩等[28]發(fā)現(xiàn)蘋果多酚中綠原酸是清除DPPH自由基的主要活性物質(zhì)的結(jié)果是一致的。由此證明綠原酸含量對平臥菊三七的抗氧化能力的貢獻(xiàn)很大。平臥菊三七植株根部不同溶劑提取液中總酚含量與FRAP法和ABTS法檢測的抗氧化活性間呈極顯著相關(guān)(相關(guān)系數(shù)R為0.919，0.907)，與DPPH檢測結(jié)果間呈顯著相關(guān)(相關(guān)系數(shù)R為0.848)。這說明平臥菊三七根部的總酚含量可能是其有較強抗氧化活性的重要原因之一。平臥菊三七植株根部總黃酮含量與FRAP法檢測結(jié)果間呈極顯著相關(guān)(R=0.915)，與DPPH法和ABTS法之間呈顯著相關(guān)(R=0.793和0.823)。由此說明總黃酮含量對平臥菊三七的抗氧化能力有較大貢獻(xiàn)。這與曹清明等[29]發(fā)現(xiàn)油茶葉黃酮具有很強的DPPH·、ABTS+清除活性結(jié)果相類似。平臥菊三七植株根部VC含量與FRAP法和DPPH法檢測結(jié)果間的呈不顯著相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.670和0.637。這說明VC不是平臥菊三七植株根部抗氧化活性的主要成分，但VC對抗氧化活性具有一定的輔助協(xié)同作用。

表6 平臥菊三七根部生物活性成分與抗氧化能力之間的相關(guān)性?

? **表示在0.01水平上顯著相關(guān)；*表示在0.05水平上顯著相關(guān)。

3 結(jié)論

整株含有豐富的生物活性成分對平臥菊三七不同部位的營養(yǎng)價值作出對比研究后發(fā)現(xiàn)：根部利用價值較高，總酚、總黃酮、綠原酸和VC含量分別達(dá)到(25.96±1.23) mg/g、(2.16±0.37) mg/g、(2.43±0.07) mg/g、(0.39±0.02) μg/g。不同的干燥方式對平臥菊三七植株根部的生物活性成分含量有顯著性影響，其中以冷凍干燥和60 ℃熱風(fēng)干燥所獲得的根部提取液具有最高的抗氧化活性。熱風(fēng)干燥溫度越高，酚類化合物和黃酮類化合物破壞越大，抗氧化活性越低。溶劑不同將影響平臥菊三七植株根部提取液的生物活性物質(zhì)含量，使用蒸餾水等極性較高的溶劑作為溶劑能獲得更高含量的酚類化合物，具有更好的自由基清除效果。平臥菊三七植株的抗氧化活性(FRAP法、DPPH法和ABTS法)與其總酚含量顯著相關(guān)(相關(guān)系數(shù)R分別為0.919，0.848，0.907)，與總黃酮含量有較強相關(guān)性(相關(guān)系數(shù)R分別為0.915，0.793，0.823)，與綠原酸含量顯著相關(guān)(相關(guān)系數(shù)R分別為0.887，0.927，0.900)，與VC含量相關(guān)性較低。

本研究利用平臥菊三七驗證了前人對于酚類物質(zhì)與抗氧化性之間的顯著相關(guān)性的研究結(jié)果。但本研究的提取方法存在一定的缺陷，并未將結(jié)合態(tài)的酚類物質(zhì)提取完全。

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Study on vitro-antioxidant activities of extracts ofGynuraprocumbens(Lour.) merr

MENGXing1LIAn-ping1YUJiang-fan2HUANGDun-yuan3

(1.CollegeofFoodScienceandEngineering,CentralSouthUniversityofForestryandTechnology,Changsha，Hunan410004,China; 2.JiangxiForestryScienceandTechnologyTrainingCenter,Nanchang,Jiangxi330038,China3.JiangxiEnvironmentalEngineeringVocationalCollege,Ganzhou,Jiangxi341000,China)

The effects was studied on the biologically active substances content and antioxidant activity ofG.procumbensextracts, which was from different parts ofGynuraprocumbens(Lour.) Merr, by different drying methods, and with different kinds of solvents. The results showed that:G.procumbensroots compared to its stems and leaves had higher content of phenolic and flavonoids and the antioxidant activity was also stronger, and the ferric reducing ability and ABTS+·scavenging capacity and DPPH·scavenging capacity were 21.25±0.31, 35.27±0.26, 56.20±0.22 TEAC(trolox equivalent antioxidant capacity)value (μg Trolox/mL), respectively. Drying methods had significant effect on the content of the biologically active substance ofG.procumbensroots extracts, freeze drying and 60 ℃ hot air drying obtained with strong antioxidant activity. Extraction solvents had significant effect on the content of the biologically active substance ofG.procumbensroots extracts, and the antioxidant activity (FRAP ferric reducing ability, DPPH·scavenging capacity and ABTS+·scavenging capacity) of extracts and their total phenolic content were significantly correlated, with the correlation coefficientRof 0.919, 0.848 and 0.907, respectively. The antioxidant activity (FRAP, DPPH and ABTS) of extracts and their total flavonoids content were significantly correlated, too, with the correlation coefficient R of 0.915, 0.793 and 0.823, respectively. The antioxidant activity (FRAP, DPPH and ABTS) and chlorogenic acid content correlation coefficient R were 0.887, 0.927 and 0.900, respectively, but had less relevant with the vitamin C content was.

Gynuraprocumbens(Lour.) Merr; polyphenol; solvent extraction; antioxidant activity

2014年江西科技廳科技支撐項目(編號：20142BBF60030)

孟醒，女，中南林業(yè)科技大學(xué)在讀碩士研究生。

李安平(1967—)，男，中南林業(yè)科技大學(xué)教授，博士。

E-mail：912336799@qq.com

2016—07—19

10.13652/j.issn.1003-5788.2016.10.034