紅花籽油對D-半乳糖致衰老小鼠模型的抗衰老作用

韓小苗 吳蘇喜,2 吳美芳 馬 斌,2

(1. 長沙理工大學(xué)化學(xué)與生物工程學(xué)院，湖南 長沙 410114；2. 長沙昊瑞生物科技有限公司，湖南 長沙 410114)

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紅花籽油對D-半乳糖致衰老小鼠模型的抗衰老作用

韓小苗1吳蘇喜1,2吳美芳1馬 斌1,2

(1. 長沙理工大學(xué)化學(xué)與生物工程學(xué)院，湖南 長沙 410114；2. 長沙昊瑞生物科技有限公司，湖南 長沙 410114)

為了研究紅花籽油的抗衰老作用，采用紅花籽油灌胃D-半乳糖致衰老小鼠模型，利用試劑盒測定這些小鼠腦肝組織的丙二醛(MDA)含量，單胺氧化酶(MAO)、谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)及超氧化物歧化酶(SOD)活性。統(tǒng)計(jì)分析各組之間與衰老和抗衰老有關(guān)成分含量的差異顯著性。結(jié)果表明：紅花籽油組小鼠腦肝組織MDA含量和MAO活性顯著(P<0.05)或極顯著(P<0.01)低于衰老模型組；GSH-Px、總超氧化物歧化酶(T-SOD)、銅鋅超氧化物歧化酶 (CuZn-SOD)和錳超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活性極顯著高于衰老模型組。紅花籽油的抗衰老機(jī)制可能是：通過清除自由基，抑制自由基誘導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，減少脂質(zhì)過氧化物產(chǎn)生；通過改善機(jī)體新陳代謝，促進(jìn)D-半乳糖分解和代謝，改善物質(zhì)能量代謝，調(diào)節(jié)與衰老有關(guān)的基因表達(dá),抑制MAO基因表達(dá)，降低腦肝組織的MAO含量；促進(jìn)GSH-Px、CuZn-SOD和Mn-SOD基因表達(dá)，提高腦肝組織GSH-Px、CuZn-SOD和Mn-SOD含量。紅花籽油能顯著降低衰老模型小鼠腦肝組織MDA含量和MAO活性，顯著提高GSH-Px、SOD-1和SOD-2活性，具有顯著的抗老作用。

紅花籽油；抗衰老；D-半乳糖；超氧化物歧化酶

紅花籽為傳統(tǒng)中藥紅花的種子，《本草綱目》中記載“紅花出自西域，味甘無毒，其籽功能與花同”[1]。紅花籽油是從紅花籽中提取的一種草本植物油，含有豐富的不飽和脂肪酸，其中亞油酸含量高達(dá)73%～85%[2-4]。此外紅花籽油還含有維生素、甾醇等活性物質(zhì)[5-6]。研究[7]表明，紅花籽油具有降血脂、軟化血管及促進(jìn)微循環(huán)等功效。藺新英等[8]發(fā)現(xiàn)，紅花籽油可有效調(diào)節(jié)家兔血脂及阻止家兔體內(nèi)脂質(zhì)過氧化物產(chǎn)生。韓榮等[9]發(fā)現(xiàn)紅花籽油可有效提高細(xì)胞對氧化應(yīng)激損傷的耐受性，減少細(xì)胞氧化損傷。但目前對紅花籽油體內(nèi)抗氧化、抗衰老作用尚未進(jìn)行系統(tǒng)而深入研究，缺少動(dòng)物試驗(yàn)數(shù)據(jù)。

由D-半乳糖誘導(dǎo)的衰老動(dòng)物模型是根據(jù)衰老過程中代謝紊亂原理設(shè)計(jì)的綜合動(dòng)物模型。其每一個(gè)器官都表現(xiàn)不同程度的衰老癥狀，體內(nèi)與衰老有關(guān)的生化成分也發(fā)生相應(yīng)的變化。這種衰老動(dòng)物模型是研究抗衰老效應(yīng)的理想工具，已被廣泛用于藥物和功能食品的抗衰老作用研究[10-13]。例如王麗梅等[14]利用衰老動(dòng)物模型研究了紫蘇油對衰老大鼠的體能、學(xué)習(xí)記憶能力、SOD活力、MDA含量的影響。 劉叢彬等[15]利用衰老動(dòng)物模型研究了牡丹籽油體內(nèi)外抗氧化作用。衰老期間，機(jī)體的丙二醛(MDA )含量和單胺氧化酶(MAO)活性增加，而超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性減少。通過檢測MDA的含量及MAO、SOD和GSH-Px的活性，可以評判機(jī)體衰老和健康的程度[16-18]。本試驗(yàn)利用D-半乳糖建立衰老小鼠模型，用現(xiàn)代藥理學(xué)方法探討了紅花籽油的體內(nèi)抗氧化、抗衰老作用，旨在為紅花籽油的開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

紅花籽油：壓榨一級油，新疆察布查爾西伯自治縣沁源油脂有限責(zé)任公司；

丙二醛(MDA)、單胺氧化酶(MAO)、超氧化物歧化酶(SOD)分型、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、總蛋白(TP)測定試劑盒：南京建成生物工程研究所；

D-半乳糖、無水乙醇、冰醋酸均為分析純；

紫外可見分光光度計(jì)：UV752N型，上海儀電分析儀器有限公司；

氣相色譜儀：GC-14C PF型，Shimadzu Suzhou Instruments Mfg.Co.Ltd，145 Huashan Road。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 紅花籽油的脂肪酸組成及含量測定 采用氣相色譜法。檢測條件：色譜柱為 DB-WAX(30 m×0.25 mm×0.25 μm)毛細(xì)管柱，柱溫190 ℃，恒溫20 min；進(jìn)樣口溫度250 ℃，不分流進(jìn)樣；載氣(氮?dú)?9.995%)流速1 mL/min，柱壓2.291×10-3Pa；檢測器：FID氫離子火焰檢測器，溫度240 ℃進(jìn)樣量1 μL。

1.2.2 試驗(yàn)動(dòng)物及分組

(1) KM(昆明)小鼠：SPF(清潔健康)級，雄性，月齡4月，體重(30±5) g，長沙天勤生物技術(shù)有限公司。

(2) 受試動(dòng)物分組：KM小鼠40只，適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d后，隨機(jī)分為4組，每組10只，即正常對照組、衰老模型組、紅花籽油低劑量組、紅花籽油高劑量組。

1.2.3 紅花籽油用量的確定 參照中國營養(yǎng)學(xué)會膳食平衡寶塔內(nèi)推薦的食用油的食用量為每人每天25 g，根據(jù)余德林等[19]的研究結(jié)果，每公斤體重給予3 mL紅花籽油可有效降低高脂血癥小鼠的膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量(P<0.01)以及顯著降低低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)含量(P<0.05)。故本研究采用3 mL/(kg·d)劑量為紅花籽油的低劑量；高劑量為低劑量的2倍，即6 mL/(kg·d)。

1.2.4 衰老動(dòng)物模型的建立和抗衰老飼養(yǎng)試驗(yàn) 衰老模型組、紅花籽油低劑量組、紅花籽油高劑量組的小鼠每日頸背部皮下注射5%D-半乳糖125 mg/(kg·d)(0.2 mL)，建立衰老動(dòng)物模型。正常對照組每日頸背部皮下注射0.2 mL生理鹽水。注射D-半乳糖后，給紅花籽油低劑量組小鼠灌胃紅花籽油3 mL/(kg·d)，高劑量組小鼠灌胃紅花籽油6 mL/(kg·d)。給衰老模型組和正常對照組小鼠灌胃6 mL/(kg·d)的蒸餾水。以上每只老鼠的灌胃劑量始終相同。每日同一時(shí)間段進(jìn)行注射和灌胃處理，連續(xù)進(jìn)行42 d。飼養(yǎng)期間，讓受試小鼠自由攝取飼料和飲用水。

1.2.5 觀察與記錄 試驗(yàn)期間觀察和記錄試驗(yàn)小鼠皮毛狀態(tài)、行為表現(xiàn)、糞尿情況、攝食量(次/每天)、體重(次/每周)等。

1.2.6 腦組織和肝臟組織勻漿制備及生化指標(biāo)測定 飼養(yǎng)試驗(yàn)?zāi)?第42天)，受試小鼠禁食12 h。摘除眼球取血用于生化分析。處死小鼠，迅速取腦組織和肝臟，用4 ℃生理鹽水沖洗干凈，用濾紙擦干，稱重，剪碎，放入勻漿器內(nèi)，按1∶9(g/mL)比例加入生理鹽水，冰浴條件下勻漿10 min，分別制備10%的腦組織和肝臟組織勻漿，離心10 min(2 500 r/min)，取上清液，置-60 ℃下保存?zhèn)溆?。然后，按照試劑盒說明書，采用紫外可見分光光度計(jì)分別測定腦肝組織的總蛋白(TP)、丙二醛(MDA)的含量及單胺氧化酶(MAO)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)、銅鋅超氧化物歧化酶[CuZn-SOD(SOD-1)]活性，用T-SOD含量減去CuZn-SOD含量得到錳超氧化物歧化酶 [Mn-SOD(SOD-2)]含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 紅花籽油脂肪酸組成及含量的氣相色譜測定

紅花籽油的脂肪酸組成和含量見表1。

2.2 試驗(yàn)小鼠的外觀、體重和攝食量的變化

試驗(yàn)期間，受試小鼠無一死亡。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，衰老模型組小鼠行動(dòng)遲緩、毛發(fā)稀疏、發(fā)黃而無光澤、性情暴躁、大便較稀(輕度腹瀉)，表現(xiàn)明顯衰老癥狀；正常對照組小鼠狀態(tài)良好、反應(yīng)靈敏、毛色光澤、耳色紅潤、大便正常；紅花籽油低、高劑量組小鼠的皮毛略有發(fā)黃，大便濕潤但無腹瀉，與對照組小鼠無明顯差異。各組小鼠體重與攝食量的變化見表2、3。

表1 紅花籽油的脂肪酸組成和含量

表2 各組小鼠體重的變化?

? a表示與正常對照組相比，a1為P<0.05，a2為P<0.01；b表示與衰老模型組相比，b1為P<0.05，b2為P<0.01；c表示高劑量組與低劑量組相比，c3為P>0.05。

? a表示與正常對照組相比，a1為P<0.05，a3為P>0.05；b表示與衰老模型組相比，b3為P>0.05；c表示高劑量組與低劑量組相比，c3為P>0.05。

由表2可知，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)衰老模型組小鼠體重總增加量顯著性低于正常對照組(P<0.05)。低、高劑量組小鼠體重總增加量都極顯著性高于正常對照組及衰老模型組(P>0.01)，但低、高劑量組兩組間小鼠體重總增加量無顯著性差異。

由表3可知，衰老模型組、紅花籽油高劑量組小鼠總攝食量顯著低于正常對照組(P<0.05)。但低劑量組與對照組無顯著差異(P>0.05)。低、高劑量組小鼠攝食量與衰老模型組無顯著差異；低、高劑量組之間小鼠攝食量也無顯著差異(P>0.05)。由此可知，紅花籽油的劑量高低對小鼠的攝食量不會產(chǎn)出明顯影響?？赡苁羌t花籽油的添加并不會影響小鼠的食欲，所以攝食量沒有明顯變化。

2.3 紅花籽油對小鼠腦及肝臟組織中MDA含量的影響

利用MDA試劑盒測定各組小鼠腦及肝臟組織中MDA含量，結(jié)果見表4。

本試驗(yàn)選用小鼠腦、肝組織的MDA含量作為檢測抗衰老的指標(biāo)，主要依據(jù)是Harman D 于1956年提出的氧化自由基學(xué)說[20]。該學(xué)說認(rèn)為，人體細(xì)胞代謝過程中不斷產(chǎn)生氧化能力極強(qiáng)的自由基，過量的自由基易與細(xì)胞膜中的不飽和脂肪酸發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)形成LPO(脂質(zhì)過氧化物)，LPO的降解產(chǎn)物MDA能使膜蛋白、酶等發(fā)生交聯(lián)反應(yīng)，使膜通透性降低，影響細(xì)胞物質(zhì)交換，繼而使之破裂、死亡；自由基還可氧化核酸、蛋白、糖等生命物質(zhì)，使其形態(tài)、結(jié)構(gòu)、功能發(fā)生改變進(jìn)而導(dǎo)致機(jī)體衰老[21]。由表4可知，衰老模型組小鼠腦、肝組織的MDA含量顯著(P<0.05)或極顯著高于正常對照組(P<0.01)。紅花籽油低、高劑量組小鼠腦肝組織的MDA含量略高于正常對照組，但差異不顯著。紅花籽油低、高劑量組小鼠肝組織MDA含量都顯著低于衰老模型組(P<0.05)，但腦組織MDA含量略低于衰老模型組，但差異不顯著。低、高劑量組兩組間小鼠腦、肝組織的MDA含量無顯著性差異。因此添加紅花籽油可以減少小鼠腦、肝組織的MDA的含量，具有抗衰老作用。這可能與紅花籽油富含VE有關(guān)。VE是一種天然抗氧化劑， 對小鼠的細(xì)胞分裂、延緩衰老有著重要作用。

表4 各組小鼠腦及肝組織的MDA含量比較?

? a表示與正常對照組相比，a2為P<0.01，a3為P>0.05；b表示與衰老模型組相比，b1為P<0.05；c表示高劑量組與低劑量組相比，c3為P>0.05。

2.4 紅花籽油對小鼠腦、肝組織MAO、GSH-PX活性的影響

利用 MAO和GSH-Px試劑盒測定各組小鼠腦、肝組織MAO和GSH-Px的活性，結(jié)果見表5。

腦、肝組織是體內(nèi)氧負(fù)荷最大的器官之一。MAO的活性與機(jī)體的衰老有密切關(guān)系，MAO的升高與體內(nèi)“生化損傷”呈正相關(guān)，是機(jī)體損傷的重要標(biāo)記酶之一[22]。GSH-Px即谷胱甘肽過氧化物酶，可以清除活性氧和OH-誘發(fā)的脂質(zhì)過氧化物，保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能的完整性。故MAO和GSH-Px活性是研究衰老模型的重要指標(biāo)。由表5可知，衰老模型組小鼠腦、肝組織MAO活性極顯著高于正常對照組(P<0.01)；而GSH-Px活性極顯著低于正常對照組(P<0.01)。除腦組織的GSH-Ps活性顯著低于正常對照組(P<0.05)以外，紅花籽油低、高劑量組小鼠腦、肝組織MAO和GSH-Ps活性與正常對照組沒有顯著差異。紅花籽油低、高劑量組小鼠腦、肝組織MAO活性極顯著低于衰老模型組(P<0.01)，而GSH-Px活性顯著或極顯著高于衰老模型組(P<0.05或P<0.01)。低、高劑量組兩組間小鼠腦肝組織的MAO和GSH-Px活性無顯著性差異。由此可知，紅花籽油具有抗衰老作用。這可能是紅花籽油抑制衰老小鼠MAO基因表達(dá)，促進(jìn)GSH-Px基因表達(dá)的結(jié)果。

表5 各組小鼠腦、肝組織的MAO及GSH-Px活性比較?

? a表示與正常對照組相比，a1為P<0.05，a2為P<0.01，a3為P>0.05；b表示與衰老模型組相比，b1為P<0.05，b2為P<0.01；c表示高劑量組與低劑量組相比，c3為P>0.05。

2.5 紅花籽油對小鼠腦、肝組織T-SOD、CuZn-SOD、Mn-SOD活性的影響

采用SOD分型試劑盒測定各組小鼠腦、肝組織T-SOD和CuZn-SOD的活性，利用T-SOD含量減去CuZn-SOD含量得到Mn-SOD含量，結(jié)果見表6、7。

表6 各組小鼠腦組織的T-SOD、CuZn-SOD和Mn-SOD活性比較?

? a表示與正常對照組相比，a2為P<0.01，a3為P>0.05；b表示與衰老模型組相比，b1為P<0.05；c表示高劑量組與低劑量組相比，c3為P>0.05。

表7 各組小鼠肝組織的T-SOD、CuZn-SOD和Mn-SOD活性與比較?

? a表示與正常對照組相比，a1為P<0.05，a2為P<0.01，a3為P>0.05；b表示與衰老模型組相比，b1為P<0.05；c表示高劑量組與低劑量組相比，c3為P>0.05。

SOD作為體內(nèi)重要的抗氧化酶，它能使超氧化陰離子自由基變?yōu)檫^氧化氫和氧離子，從而減少脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，使機(jī)體組織和細(xì)胞免受損害。測定抗氧化酶SOD的活性可了解機(jī)體衰老的程度。因此，本試驗(yàn)選取T-SOD、CuZn-SOD及Mn-SOD作為研究對象。由表6和表7可知，衰老模型組小鼠腦、肝組織的T-SOD、CuZn-SOD及Mn-SOD活性顯著低于正常對照組(P<0.01)。紅花籽油低、高劑量組小鼠腦、肝組織的T-SOD、CuZn-SOD及Mn-SOD活性與正常對照組沒有顯著差異，但顯著高于衰老模型組(P<0.05)。低劑量組小鼠腦、肝組織的T-SOD、CuZn-SOD及Mn-SOD活性與高劑量組小鼠無顯著性差異。衰老機(jī)體內(nèi)存在大量的自由基。SOD作為抗氧化酶之一，能夠清除氧自由基從而保護(hù)細(xì)胞不受損傷。SOD因清除自由基而過度消耗，導(dǎo)致SOD含量相應(yīng)減少，但是添加紅花籽油后可以顯著增加小鼠腦肝組織的T-SOD、CuZn-SOD及Mn-SOD含量，增加機(jī)體的抗氧化能力，從而達(dá)到抗衰老的目的。

3 討論與結(jié)論

本試驗(yàn)給小鼠頸部皮下連續(xù)注射D-半乳糖42 d后，衰老模型組小鼠體內(nèi)MDA含量和MAO活性比對照組小鼠顯著升高，GSH-Px和SOD-1和SOD-2活性顯著降低。因此，本試驗(yàn)所造衰老小鼠模型是成功的，并證明D-半乳糖能夠誘導(dǎo)小鼠快速衰老。紅花籽油能顯著降低小鼠機(jī)體的MDA含量與MAO活性、顯著提高小鼠機(jī)體GSH-Px、T-SOD、CuZn-SOD及Mn-SOD活性，具有顯著的抗衰老作用。

紅花籽油的抗衰老作用機(jī)制可能是：紅花籽油含有豐富的亞油酸。亞油酸是人體必需脂肪酸，其化學(xué)結(jié)構(gòu)中含有多個(gè)不飽和化學(xué)鍵，在體外能夠捕捉自由基，或與過氧化物結(jié)合，消除過氧化物的有害作用。它還能促進(jìn)膽固醇代謝，清除血管壁上的沉積物，具有抑制脂代謝紊亂的效果[23-25]。紅花籽油含有豐富的VE、植物甾醇、黃酮等活性物質(zhì)。它們通過清除自由基，抑制自由基誘導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，從而降低腦、肝組織的MDA含量[26-28]；紅花籽油具有很強(qiáng)的活血通經(jīng)作用[29]，通過擴(kuò)張血管、改善微循環(huán)，促進(jìn)機(jī)體新陳代謝，加速D-半乳糖分解和代謝，防止D-半乳糖轉(zhuǎn)化為半乳糖醇。調(diào)節(jié)與衰老有關(guān)的基因表達(dá)：一方面抑制能引起機(jī)體衰老的MAO基因表達(dá)，從而降低腦、肝組織的MAO活性，防止單胺類物質(zhì)(神經(jīng)遞質(zhì))被過度分解，以保持機(jī)體健康，延緩衰老；另一方面促進(jìn)抗氧化酶(抗衰老酶)GSH-Px、SOD-1和SOD-2基因表達(dá)[30-32]，從而提高組織細(xì)胞的GSH-Px、SOD-1和SOD-2活性以及SOD總活性，增強(qiáng)機(jī)體清除自由基和過氧化物的能力，降低腦、肝組織的MDA含量，提高機(jī)體的抗衰老作用。

若要清楚地了解紅花籽油的抗衰老機(jī)制還需從分子水平對其進(jìn)行更深入的研究，比如研究紅花籽油對衰老相關(guān)基因的表達(dá)譜等。隨著人們對紅花籽油功能的不斷探索與研究，紅花籽油新功能及其作用機(jī)制將逐步被闡明。

結(jié)論：紅花籽油能顯著降低小鼠機(jī)體的MDA含量與MAO活性、顯著提高小鼠機(jī)體GSH-Px、T-SOD、CuZn-SOD及Mn-SOD活性，具有顯著的抗衰老作用。

[1] 李時(shí)珍. 本草綱目: 上冊[M]. 北京: 人民衛(wèi)生出版社, 1977: 1 029-1 030.

[2] 周震, 李娟. 紅花油脂肪酸的質(zhì)譜分析[J]. 中成藥, 1995, 17(6): 35-36.

[3] BRATCHER Sharon S, KEMMERER A R, RUBIS D D. Oxidative stability of safflower oil[J]. Journal of the American Oil Chemists Society, 1969, 46(3): 173-175.

[4] HAN Xiao-jin, CHENG Le-ming, ZHANG Rong, et al. Extraction of safflower seed oil by supercritical CO2[J]. Journal of Food Engineering, 2009, 92(4): 370-376.

[5] 王兆木, 阿爾斯坦格羅夫·山布·山明. 紅花籽油的營養(yǎng)價(jià)值與保健作用[J]. 新疆農(nóng)業(yè)科學(xué), 2006, 43(1): 57-60.

[6] 陶海榮, 高修庫, 肖吾開提, 等. 紅花籽油中不皂化物成分的分析[J]. 中國油料作物學(xué)報(bào), 2000, 22(4): 40-42.

[7] GUO Jian-xia, WANG Chang-lu, WU Zhi-jian. Study on hypolipidemic activities of safflower seed oil[J]. Applied Mechanics and Materials, 2013, 275-277: 1 640-1 645.

[8] 藺新英, 徐貴發(fā), 王淑娥, 等. 紅花籽油對動(dòng)脈粥樣硬化家兔血脂及脂質(zhì)過氧化作用的影響[J]. 山東醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2001, 39(3): 212-214.

[9] 韓榮, 吳桂榮, 張彤, 等. 配伍紅花籽油對大鼠嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞抗氧化損傷的保護(hù)作用[J]. 西北藥學(xué)雜志, 2009, 24(4): 276-278.

[10] LU Jun, ZHENG Yuan -lin, WU Dong-mei, et al. Ursolic acid ameliorates cognition deficits and attenuates oxidative damage in the brain of aging mice induced byD-galactose[J]. Biochem Pharmacol, 2007, 74: 1 078-1 090.

[11] 王燕, 陶鈞. 復(fù)合維生素對D-半乳糖小鼠衰老模型的抗衰老作用[J]. 食品與機(jī)械, 2012, 26(2): 64-66.

[12] SONG Xu, BAO Ming-min, LI Dian-dong, et al. Advanced glycation inD-galactose induced mouse aging model[J]. Mechan Age Devel, 1999, 108: 239-251.

[13] ZHANG Xiu-li, JIANG Bo, LI Zhi-bo, et al. Catalpol ameliorates cognition deficits and attenuates oxidative damage in the brain of aging mice induced byD-galactose[J]. Pharmacol, Biochem Behav, 2007, 88: 64-72.

[14] 王麗梅, 葉誠, 吳晨, 等. 紫蘇油對衰老模型大鼠的抗衰老作用研究[J]. 食品科技, 2013, 38(1): 280-284.

[15] 劉叢彬, 宣子華, 董振興, 等. 牡丹籽油體外及對脂代謝紊亂大鼠體內(nèi)抗氧化作用的研究[J]. 中國糧油學(xué)報(bào), 2014, 29(6): 53-55.

[16] NIEMEN D C. Exercise, upper respiratory tract infectionand the immene system[J]. Med. Sci. Sports Exerci., 1994, 26(2): 128-139.

[17] OH Chang-Young, LEE Kyung-Joon, LEE Jae-Cheon, et al. Differences of physiological injury and antioxidative reaction among three half-sib families of betula schmidtii to Cd treatment[J]. Journal of Korean Forestry Society, 2004, 93(7): 428-435.[18] ALVAREZ Garcia O, VEGA-NAREDO I, SIERRA V, et al.Elevated Oxidative Stress in the Brain of Senescence-accelerated Mice at 5 Months of age[J]. Biogerontology,2006,7: 43-52.

[19] 余德林, 馬超英, 宋磊, 等. 紫蘇籽油與紅花籽油聯(lián)合使用降血脂研究[J]. 中國油脂, 2014(12): 35-38.

[20] HARMAN D. Aging：a theory based on free radical and radiation chemistry[J]. J. Gerontol, 1956, 11(3): 298-300.

[21] 郭曉峰, 馮玉華, 趙延龍, 等. 大黃(庶蟲)蟲丸、當(dāng)歸補(bǔ)血湯對D-半乳糖致衰老小鼠血清中SOD和MDA影響的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 山西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2012(5): 17-19.

[22] 鄧紅, 李潔瑩, 甘雨, 等. 蛋白質(zhì)粉對老齡大鼠抗衰老作用的研究[J]. 營養(yǎng)學(xué)報(bào), 2013(4): 361-364.

[23] 韓立強(qiáng), 劉喜陽, 龐坤. 共軛亞油酸生理機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 信陽農(nóng)業(yè)高等?？茖W(xué)校校報(bào), 2013, 23(3): 103-106.

[24] 劉小娟, 龐廣昌, 李楊.ω-6亞油酸對小鼠免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用[J]. 食品科學(xué), 2010, 31(23): 375-379.

[25] LAPARRA J M, SANZ Y. Interactions of gut microbiota with functional food components and nutraceuticals[J]. Pharmacological Research, 2009, 11: 1-5.

[26] 王藝蓉, 白成勇. 紅花的作用及機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2009, 32(6): 451-453.[27] 金鳴, 李金榮, 吳偉. 紅花黃色素抗氧化作用的研究[J]. 中國中藥雜志, 2004, 29(5): 447-449.

[28] 劉志峰, 李萍, 李桂生, 等. 紅花提取物抗血小板聚集及抗血栓作用的觀察[J]. 中藥藥理與臨床, 2000, 16(6): 20-21.

[29] 萬秋, 劉秀明, 楊文婷, 等. 紅花色素研究概述[J]. 生命的化學(xué), 2013, 33(2): 54-58.

[30] GIZELLA Csire, JZSEF Demjén, SAROLTA Timári, et al. Electrochemical and SOD activity studies of copper(II) complexes of bis(imidazol-2-yl) derivatives[J]. Polyhedron, 2013, 61: 202-212.

[31] LIU Hui-hui, HE Jian-yu, CHI Chang-feng, et al. Identification and analysis of icCu/Zn-SOD, Mn-SOD and ecCu/Zn-SOD in superoxide dismutase multigene family of Pseudosciaena crocea[J]. Fish & Shellfish Immunology, 2015, 43: 491-501

[32] EDWARD S M Bahnsona, NATHANIEl Kooa, NADIEZHDA Cantu-Medellin, et al. Nitric oxide inhibits neointimal hyperplasia following vascular injury via differential,cell-specific modulation of SOD-1 in the arterial wall[J]. Nitric Oxide, 2015, 44C: 8-17.

Study on anti-aging effect of safflower oil on the mouse model aged byD-galactose

HANXiao-miao1WUSu-xi1,2WUMei-fang1MABin1 2

(1.CollegeofChemicalandBiologicalEngineering,ChangshaUniversityofScienceandTechnology,ChangshaHunan410114,China; 2.ChangshaHaoruiBio-technologyLtd.Co.,Changsha,Hunan410114,China)

To study the anti-aging functions of safflower oil, mice model aged byD-galactose were administered safflower oil by oral gavage. The content of malondialdehyde (MDA) and the activity levels of monoamine oxidase (MAO), glutathione peroxidase (GSH-Px), and superoxide dismutase (SOD) in the brain and liver of these mice were determined with biochemical kits, respectively. The significance of the differences in the content of the components associated with aging and anti-aging among each group was analyzed statistically. The main results were as follows. The MDA content and the activity level of MAO in the brain and liver of mice in the groups administered safflower oil were significantly lower (P<0.05) or very significantly lower (P<0.01) than those of the aging model group. However, the activity levels of GSH-Px, total SOD (T-SOD), CuZn-SOD, and Mn-SOD in the brain and liver of the mice were very significantly higher than those of the aging model group. It was supposed that the anti-aging mechanism of Safflower seed oil might be it could inhibit the lipid peroxidation induced by free radicals and reduces lipid peroxide by scavenging free radicals. By improving body's metabolism, it promoted the decomposition and metabolism ofD-galactose, and improved the material energy metabolism, and then regulated the expression of genes related to aging. Meanwhile, the expression of MAO gene was inhibited to reduce MAO content in liver and brain, which resulted in promoting the expression of the genes, including GSH-Px, CuZn-SOD, and Mn-SOD. This could increase the content of GSH-Ps, CuZn-SOD, and Mn-SOD both in liver and brain. We concluded that the safflower seed oil could significantly reduce content of MDA and MAO and increase that of GSH-Ps, CuZn-SOD, and Mn-SOD in liver and brain of aging mice models, performing the obvious anti-aging function.

safflower oil; anti-aging;D-galactose; SOD

湖南省科技計(jì)劃項(xiàng)目(編號：2016NK2136)；長沙市科技計(jì)劃項(xiàng)目(編號：k150189-21)

韓小苗，女，長沙理工大學(xué)在讀碩士研究生。

吳蘇喜 (1965-)，男，長沙理工大學(xué)教授，博士。

E-mail:wusuxi@126.com

2016—07—12

10.13652/j.issn.1003-5788.2016.10.030