超聲輔助提取川芎中阿魏酸工藝研究

楊 敏，鄒結(jié)晶

（1.吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院，吉林 吉林132001；2.吉林醫(yī)藥學(xué)院附屬醫(yī)院，吉林 吉林132001）

超聲輔助提取川芎中阿魏酸工藝研究

楊 敏1，鄒結(jié)晶2

（1.吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院，吉林 吉林132001；2.吉林醫(yī)藥學(xué)院附屬醫(yī)院，吉林 吉林132001）

研究川芎中阿魏酸的提取工藝。本試驗(yàn)以川芎為試驗(yàn)材料，以乙醇為實(shí)驗(yàn)試劑，采用超聲法提取川芎中的阿魏酸成分，以阿魏酸的提取含量為主要考察指標(biāo)，研究各單因素對(duì)阿魏酸提取含量的影響，設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)，確定最佳提取工藝。影響川芎中阿魏酸提取含量的因素是：超聲溫度＞超聲時(shí)間＞乙醇濃度＞乙醇量。最佳提取工藝參數(shù)為乙醇濃度85%，超聲溫度60°C，超聲時(shí)間15 min，乙醇量60 mL。

川芎；阿魏酸；超聲法；提取

川芎為傘形科植物川芎（Ligusticum Chuanxing Hort.）的干燥根莖，具有活血行氣、祛風(fēng)止痛的功能，臨床上用于治療胸痹心痛、月經(jīng)不調(diào)等[1～3]。阿魏酸是川芎中有效成分之一，其含量約為0.1%[4]。阿魏酸具有抗血小板聚集，抑制血小板5-羥色胺釋放，抑制血小板血栓素a2（txa2）的生成，增強(qiáng)前列腺素活性，鎮(zhèn)痛，緩解血管痙攣等作用。是生產(chǎn)用于治療心腦血管疾病及白細(xì)胞減少等癥藥品的基本原料。阿魏酸及其衍生物可解除血管平滑肌痙攣，改善心肌缺血，抗炎止痛，抗紫外線(xiàn)輻射以及調(diào)節(jié)人體免疫功能等[5]。

關(guān)于川芎中阿魏酸的提取，近來(lái)報(bào)道的有雙提取、醇提及超臨界流體萃取等工藝[6～8]。雖然人們對(duì)川芎中阿魏酸的提取研究方面很多，但用超聲法提取的研究報(bào)道很少。未見(jiàn)完整的超聲法提取的單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)的研究報(bào)道。本試驗(yàn)采用超聲法提取工藝，通過(guò)單因素和正交試驗(yàn)方法提取川芎中阿魏酸成分，確定最佳提取工藝。

1 試驗(yàn)材料

1.1 藥品與試劑

將川芎飲片放在通風(fēng)處風(fēng)干，粉碎，過(guò)60目篩，備用。阿魏酸標(biāo)準(zhǔn)品 (中國(guó)藥品生物制品檢定所)，乙醇（分析純）。

1.2 試驗(yàn)儀器

粉碎機(jī)（山東臨清宏源制藥設(shè)備有限公司），千分之一電子天平（天津市天巴儀器儀表有限公司）、UV-752型紫外分光光度計(jì) (上海光譜儀器有限公司)、KQ-100B 型超聲波清洗器 （昆山市超聲儀器有限公司）。

2 試驗(yàn)方法

2.1 阿魏酸標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制

參照XUZS等繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)[10～12]。回歸方程Y= 2.2775x+2.3703，相關(guān)系數(shù)R2=0.9956。

2.2 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)

在單因素實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上，川芎9份，每份5g，對(duì)川芎中阿魏酸提取效果的影響因素，即乙醇濃度、乙醇量、超聲時(shí)間、超聲溫度進(jìn)行L9(34)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，同時(shí)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果分析。

2.4 驗(yàn)證性試驗(yàn)

按正交試驗(yàn)結(jié)果優(yōu)選最佳制備工藝條件進(jìn)行重復(fù)性試驗(yàn)，重復(fù)三次，分別計(jì)算阿魏酸含量，求得平均數(shù)。

3 結(jié)果

3.1 單因素的影響

3.1.1 乙醇濃度對(duì)阿魏酸提取含量的影響結(jié)果

乙醇濃度對(duì)阿魏酸提取含量有影響。乙醇濃度60%～95%阿魏酸提取含量隨著濃度的升高，呈現(xiàn)先升高后降低趨勢(shì)，在80%時(shí)達(dá)到最大值（表1）。

3.2.2 乙醇量對(duì)阿魏酸提取含量的影響結(jié)果

乙醇用量對(duì)阿魏酸提取含量有影響。阿魏酸提取含量隨著乙醇量的增大逐漸提高，至乙醇量為60 mL時(shí)，達(dá)到提取最大值（表2）。

3.2.3 超聲時(shí)間對(duì)阿魏酸提取含量的影響結(jié)果

阿魏酸提取率隨著時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸升高，至超聲處理20min時(shí)，達(dá)到提取最大值。時(shí)間增加，提取

率又反而下降（表3）。

表1 乙醇濃度對(duì)阿魏酸提取含量的影響

表2 乙醇量對(duì)阿魏酸提取含量的影響

表3 超聲時(shí)間對(duì)阿魏酸提取含量的影響

3.2.4 超聲溫度對(duì)阿魏酸提取含量的影響結(jié)果

阿魏酸提取含量隨著溫度的升高逐漸升高，至溫度為60℃時(shí)，達(dá)到提取最大值。溫度增加，提取含量又反而下降（見(jiàn)表4）。

表4 回流時(shí)間對(duì)阿魏酸提取含量的影響

3.3 正交試驗(yàn)結(jié)果與分析

表5表明，四種因素的均值值表明各因素水平的影響程度是A3>A2>A1，B2>B3>B1，C1>C3>C2，D3>D2> D1即最佳的提取條件為是A3B2C1D3。四種因素阿魏酸提取率影響程度是B>C>A>D，超聲溫度>超聲時(shí)間>乙醇濃度>乙醇量；實(shí)驗(yàn)范圍內(nèi)，協(xié)同提取的最佳提取工藝條件：乙醇濃度85%，超聲溫度60°C，超聲時(shí)間15min，乙醇量60mL。

3.4 驗(yàn)證性試驗(yàn)結(jié)果

為進(jìn)一步驗(yàn)證最佳工藝條件，按最佳水平組合，即乙醇濃度85%、超聲溫度60℃、超聲時(shí)間15 min、乙醇量60mL，重復(fù)為3，（見(jiàn)表6）。

此方法與秦海燕[16]的方法相比，提高了提取含量，減少了提取時(shí)間。三批試驗(yàn)結(jié)果顯示，阿魏酸含

量平均值1.094，RSD值為0.967%。阿魏酸含量均高于正交試驗(yàn)各試驗(yàn)號(hào)，表明該工藝穩(wěn)定可行。

表5 正交試驗(yàn)表及試驗(yàn)結(jié)果

表6 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果

4 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)，以乙醇作為溶劑，采用超聲法輔助從川芎中提取阿魏酸成分，利用正交試驗(yàn)優(yōu)選最佳提取工藝，分析得出最佳提取工藝是A3B2C1D3，即提取的最佳工藝條件為：乙醇濃度85%，超聲溫度60℃，超聲時(shí)間15min，乙醇量60 mL，此時(shí)阿魏酸含量為1.094mg/g。因此超聲溫度對(duì)提取含量影響最大，其次是超聲時(shí)間、乙醇濃度，乙醇量的影響最小。

與傳統(tǒng)方法[16]相比提高了提取含量，縮短了提取時(shí)間。因?yàn)椴僮鞔嬖谡`差，提取含量還沒(méi)達(dá)到最高。

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典:一部[M].2010版.北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2010:38-39.

[2] 北京制藥工業(yè)研究所.川芎有效成分的研究I.川芎嗪的提取、分離和結(jié)構(gòu)鑒定[J].中華醫(yī)學(xué)雜志,1997,(7):420.

[3] 曹鳳銀,劉文心,溫月笙,等.川芎化學(xué)成分研究[J].中草藥, 1983,14(6):1.

[4] 陰健主編.中藥現(xiàn)代研究與臨床應(yīng)用[M].北京:學(xué)苑出版社,1993.108.

[5] XU R F,XU D S.The application development of Ferulicacid products[J].Journal of Cereals and Oils,2000,6:7-9.

[6] 吳清,李云谷,杜守穎,等.當(dāng)歸、川芎提取工藝研究[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,1999,5(6):17-18.

[7] 王文祥,顧明,徐向毅,等.正交設(shè)計(jì)法優(yōu)選川芎總酚提取工藝[J].中成藥,2000,22(5):325-327.

[8] 白海波,王劍飛,寧子榮,等.川芎提取工藝的優(yōu)化[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2003,9(4):8-10.

[9] 馬雙城,鄧少偉.川芎提取純化工藝條件的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)中藥雜志,1999,24(4):215-217.

[10]劉旭,楊雪梅,徐江平,等.正交試驗(yàn)對(duì)川芎提取工藝的篩選研究[J].廣東藥學(xué),2003,13(6):3-5.

[11]黃國(guó)興,季芳,楊文丹.川芎中阿魏酸的提取工藝研究[J].中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)藥志,2007,24(3):203.

[12]XUZS,CAIBC,ZHANGX.Research of the Stability of Ferulic Acid in Rhizoma Chuanxiong[J].Res Pract Chin Med,2004,18 (2):25-27.

[13]許惠.中藥川芎應(yīng)用與提取工藝的發(fā)展研究[J].重慶工商大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2005,22(3):233-236.

[14]楊廣德,梁明金,賀浪沖.川芎中阿魏酸的提取方法研究[J].中成藥,2002,24(6):418-420.

[15]鄒賢明,黃少明,劉寶生,等.運(yùn)用超聲波法提取川芎有效成分的研究[J].江西中醫(yī)藥,2012,(9):72-74.

[16]秦海燕,汪偉,索志榮.川芎中阿魏酸的提取工藝研究[J].中國(guó)新技術(shù)新產(chǎn)品,2009,(18):18.

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