結直腸癌患者血清VEGF和MMP-2水平的變化及意義

張　遷，韓　磊，尤文斌

（1.宣化縣人民醫(yī)院普外科，河北宣化 075100；2.河北北方學院附屬第一醫(yī)院普通外科）

結直腸癌患者血清VEGF和MMP-2水平的變化及意義

張遷1，韓磊2，尤文斌1

（1.宣化縣人民醫(yī)院普外科，河北宣化 075100；2.河北北方學院附屬第一醫(yī)院普通外科）

目的：探討結直腸癌患者血清血管內皮生長因子（VEGF）和基質金屬蛋白酶-2（MMP-2）水平的變化和意義。方法：采用雙抗體夾心法檢測72例結直腸癌患者（術前、術后3個月、術后1年）、30例結直腸腺瘤患者和30例健康體檢者血清VEGF和MMP-2的水平。結果：結直腸癌組患者術前血清VEGF和MMP-2水平明顯高于結直腸腺瘤組和正常對照組（P＜0.05）；術后3個月，72例結直腸癌患者血清VEGF和MMP-2水平明顯低于術前（P＜0.05），與正常對照組比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。結直腸癌患者血清VEGF和MMP-2水平與年齡、性別、組織類型、大體分型、腫瘤部位無關（P＞0.05）；與Dukes分期、分化程度、淋巴結轉移、浸潤深度、腫瘤大小有關（P＜0.05）。術后隨訪1年時，復發(fā)者血清VEGF和MMP-2水平明顯高于未復發(fā)者（P＜0.05）。結論：血清VEGF和MMP-2水平可能在結直腸癌的早期診斷、病情評估及預后評價中具有重要作用。

結直腸癌；血管內皮生長因子（VEGF）；基質金屬蛋白酶-2（MMP-2）

結直腸癌是臨床常見的惡性腫瘤之一，據統(tǒng)計其發(fā)病率在男性居第四位、在女性居第三位，嚴重威脅著人們的生命健康［1］。因此，結直腸癌的早期診斷、正確治療決策及預后備受關注。血清腫瘤標記物檢測是一種無創(chuàng)、有效的檢查方法，在輔助結直腸癌的診斷、預后評價中具有重要的臨床意義［2］。本文旨在探求血清血管內皮生長因子（VEGF）和基質金屬蛋白酶-2（MMP-2）在結直腸癌早期診斷，病情程度及預后評價中的臨床意義。

1　對象與方法

1.1研究對象

1.1.1結直腸癌組：以2012年9月-2013 年8月于我科行根治手術的72例結直腸癌患者為研究對象，女性32例、男性40例，年齡28-86歲，平均58.6歲。Dukes分期：A期6例、B期24例、C期42例。全部病例均經病史、查體、實驗室有關腫瘤標記物，上、下腹部CT，盆腔MRI，盆腹腔淋巴結彩超，電子結腸鏡及病理等檢查確診為結直腸癌且經術后病理證實，全部病例術前均未接受放、化療等治療。入選條件：結直腸癌患者不合并高血壓、糖尿病以及血栓性疾病等影響VEGF水平者；無嚴重心、腦、腎功能不全者；不合并其它部位惡性腫瘤；無免疫性疾病。

1.1.2結直腸腺瘤組：同期于我科住院治療的結直腸腺瘤患者30例，其中女性12例、男性18例，年齡26-80歲，平均53.5歲，全部病例均經電子結腸鏡及病理確診。

1.1.3正常對照組：同期來我院經健康體檢證實為健康者30例，其中女性16例、男性14例，年齡24-70歲，平均49.3歲。

以上三組性別構成、年齡等一般情況比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2方法與試劑 全部受檢者均于晨起采集空腹靜脈血4ml（結腸癌組患者分別于術前、術后3個月、隨訪1年時采集靜脈血），3000r/min離心10min，分離血清，-20℃冰箱中凍存待測。血清VEGF和MMP-2水平的測定采用雙抗體夾心法，實驗過程嚴格按照試劑盒（晶美生物工程公司）說明書進行，測定值按標準曲線換算成VEGF和MMP-2的含量。

1.3統(tǒng)計分析 使用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件包進行分析，實驗數據以均數±標準差表示。采用t檢驗和方差分析比較組間差異。

2　結果

2.1血清VEGF和MMP-2水平 結直腸癌組患者術前血清VEGF和MMP-2水平明顯高于結直腸腺瘤組和正常對照組（P＜0.05）；術后3個月，72例結 直腸癌患者血清VEGF和MMP-2水平明顯低于術前（P＜0.05），與正常對照組比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表1：

表1　三組血清VEGF和MMP-2水平檢測結果（）

表1　三組血清VEGF和MMP-2水平檢測結果（）

與正常對照組、結直腸腺瘤組、結腸癌術后3個月比較：*P＜0.05

2.2血清VEGF和MMP-2水平與結直腸臨床病理特征的關系 結直腸癌患者血清VEGF和MMP-2水平與年齡、性別、組織類型、大體分型、腫瘤部位無關（P＞0.05）；與Dukes分期、分化程度、淋巴結轉移、浸潤深度、腫瘤大小有關（P＜0.05）：Dukes C期患者明顯高于A期和B期患者，低、未分化患者明顯高于高、中分化患者，有淋巴結轉移者明顯高于無淋巴結轉移者，腫瘤浸潤漿膜層或全層者明顯高于未及漿膜者，腫瘤直徑≥5cm者明顯高于＜5cm者。見表2：

表2　血清VEGF和MMP-2水平與結直腸癌臨床病理特征的關系（n=72）

2.3結直腸癌患者隨訪1年時血清VEGF和MMP-2水平 復發(fā)組患者血清VEGF和MMP-2水平明顯高于未復發(fā)者（P＜0.05）。見表3：

表3　隨訪1年時結直腸癌患者血清VEGF和MMP-2水平（）

表3　隨訪1年時結直腸癌患者血清VEGF和MMP-2水平（）

組別　例數　VEGF（ng/L）　MMP-2（mg/L）復發(fā)組　8　380.6±88.5　262.8±35.3未復發(fā)組　64　132.3±41.0　178.6±27.8 P＜0.05?。?.05

3　討論

VEGF是Ferrara等1989年從牛正常垂體濾泡星型細胞中分離純化的一種特異性蛋白質，主要作用是參與血管內皮細胞增殖、血管形成以及腫瘤的浸潤、轉移［3-4］。VEGF是目前所知的促腫瘤血管生成活性最強、最特異的血管生長因子，可以直接作用于內皮使微血管的通透性增高。研究發(fā)現，腫瘤細胞VEGF表達水平升高，并且腫瘤細胞表達VEGF是腫瘤具有侵襲性的基礎［5］。結直腸癌患者血清VEGF水平升高已被大量研究所證實，目前認為主要是癌細胞分泌、血小板激活或破壞釋放以及侵入腫瘤組織的巨噬細胞釋放癌細胞分泌的VEGF隨穿過血管壁的血液細胞進入血液循環(huán)，或是VEGF使血管壁通透性增加，從而彌散到循環(huán)血液中。

細胞外基質和基底膜降解是惡性腫瘤局部浸潤、轉移的必要條件，MMPs是降解細胞外基質蛋白最主要的水解酶。MMPs可促進生長因子分泌，進而加速結腸癌的生長、侵襲以及轉移；同時，MMPs還可誘導結腸癌細胞凋亡耐受，使癌細胞逃避免疫監(jiān)視；MMPs還能促進結腸癌血管生成，豐富的血管可為腫瘤的迅速增殖提供營養(yǎng)和氧分。MMP-2是MMPs家族的重要成員，在腫瘤浸潤轉移的過程中起重要作用，主要降解Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型膠原、明膠彈性蛋白和層黏蛋白等。

本研究發(fā)現，結直腸癌患者血清VEGF和MMP-2水平明顯高于結腸腺瘤和健康體檢者，并且結直腸癌患者血清VEGF和MMP-2水平與Dukes分期、分化程度、淋巴結轉移、浸潤深度和腫瘤大小有關。本研究提示，血清VEGF和MMP-2水平在結直腸癌發(fā)生、發(fā)展過程中隨惡性程度的增加呈上升趨勢，且與結直腸癌病情有關，說明VEGF和MMP-2能較敏感地反應結直腸的惡變過程，在結直腸癌早期診斷、病情判斷上有重要意義；并且，VEGF和MMP-2水平升高是結直腸癌獲得高侵襲和轉移能力的重要因素，在某種程度上可以預測病情的惡化程度。本研究亦發(fā)現，結直腸癌患者術后3個月血清VEGF和MMP-2水平接近正常，隨訪1年時復發(fā)組患者血清VEGF和MMP-2水平明顯高于未復發(fā)組，說明二者能較敏感地反映結直腸癌患者病情和預后的變化，對評估病情具有重要的臨床意義。

綜上所述，VEGF和MMP-2在結直腸癌的生長、浸潤、轉移中發(fā)揮重要作用，檢測血清中VEGF和MMP-2水平對結直腸癌的早期診斷、病情評估和預后評價具有重要的臨床價值。

［1］Parkin DM， Bray F， Ferlay J， et al. Global cancer statistics，2002［J］. CA Cancer J Clin， 2005， 55（2）: 74-108.

［2］蔡三軍.結直腸肛管癌［M］.北京：北京大學醫(yī)學出版社，2006.177-178.

［3］吳胤瑛，李恩孝.VEGF在惡性腫瘤中的研究進展［J］.現代腫瘤醫(yī)學，2005，13（5）：附18-21.

［4］龔麗明，林世杰，王忠明，等.巢式RT-PCR擴增CK20、MMP-7診斷大腸癌淋巴結微轉移的初步研究［J］.腫瘤防治研究，2005，32（6）：346-349，345.

［5］Zafirellis K，Agrogiannis G，Zachaki A，et al.Prognostic significance of VEGF expression evaluated by quantitative immunohistochemical analysis in colorectal cancer［J］.J Surg Res， 2008，147（1）:99-107.

CHANGES AND SIGNIFICANE OF SERUM VEGF AND MMP-2 LEVEL OF COLORECTAL CANCER PATIENTS

ZHANG Qian， HAN Lei， YOU Wen-bin
(Department of General Surgery, Xuanhua People’s Hospital, Hebei Xuanhua 075100, China)

Objective: To investigate the changes and signifi cance of the vascular endothelial growth factor （VEGF）and matrix metalloproteinase-2 （MMP-2） level in serum of colorectal cancer patients. Methods: Double antibody sandwich method was used to detect the serum VEGF and MMP-2 level of 72 colorectal cancer patients （before operation， 3 months and 1 year after operation）， 30 colorectal adenomas patients and healthy controls. Results: The serum VEGF and MMP-2 level of colorectal cancer patients before operation were obviously higher than that of colorectal adenomas patients and healthy controls（P＜0.05）； 3 months after operation， the serum VEGF and MMP-2 level of colorectal cancer patients were signifi cantly lower than that before operation （P＜0.05）， and had no statistical signifi cance compared with healthy controls （P＞0.05）. The serum VEGF and MMP-2 level of colorectal cancer patients were not related to age， sex， histological type， gross classifi cation and tumour location （P＞0.05）； but related to Dukes stage， differentiated degree， lymph node metastasis， depth of infi ltration and tumour size （P＜0.05）. 1 year after operation， the serum VEGF and MMP-2 level of relapsed patients were obviously higher than that of no relapsed patients （P＜0.05）. Conclusions: The serum VEGF and MMP-2 level may play important role in early diagnosis， severity assessment and prognostic evaluation of colorectal cancer.

Colorectal cancer；Vascular endothelial growth factor（VEGF）；Matrix metalloproteinase-2（MMP-2）

R735.3

A

1004-6879（2016）01-003-03

2015-08-12）