SPME-GC-MS法分析聚篩蕊揮發(fā)性化學(xué)成分Δ

趙　超，韓國營，李紅梅，周　欣，2#（.貴州省山地環(huán)境信息系統(tǒng)與生態(tài)環(huán)境保護(hù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，貴陽55000；2.貴州省藥物質(zhì)量控制及評(píng)價(jià)技術(shù)工程實(shí)驗(yàn)室，貴陽　55000；.貴陽市防震減災(zāi)服務(wù)中心/貴陽市科技干部培訓(xùn)中心，貴陽　55008）

SPME-GC-MS法分析聚篩蕊揮發(fā)性化學(xué)成分Δ

趙超1，2＊，韓國營3，李紅梅1，周欣1，2#（1.貴州省山地環(huán)境信息系統(tǒng)與生態(tài)環(huán)境保護(hù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，貴陽550001；2.貴州省藥物質(zhì)量控制及評(píng)價(jià)技術(shù)工程實(shí)驗(yàn)室，貴陽550001；3.貴陽市防震減災(zāi)服務(wù)中心/貴陽市科技干部培訓(xùn)中心，貴陽550081）

地衣為低等植物的重要類群，是藻類和真菌組合在一起共生的復(fù)合有機(jī)體，無根莖葉分化，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單。由于藻類和菌類之間經(jīng)過漫長的演化過程共生緊密地結(jié)合在一起而成為一個(gè)單獨(dú)的固定有機(jī)體類群，使其既不同于一般真菌，也不同于一般藻類，具有獨(dú)特的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生理和遺傳等特征，因此應(yīng)

目的：采用固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法分析聚篩蕊揮發(fā)性化學(xué)成分。方法：色譜條件：色譜柱為ZB-5 MSI 5%苯-95%二甲基聚硅氧烷彈性石英毛細(xì)管柱，程序升溫［以5℃/min升溫至220℃（保持2 min）］，檢測(cè)器為氫火焰離子化檢測(cè)器，載氣為高純氦（純度：99.999%），柱流速為1.0 ml/min，汽化室溫度為250℃，不分流進(jìn)樣。質(zhì)譜條件：離子源為電子電離源，電離電壓為70 eV，接口溫度為280℃，離子源溫度為230℃，四極桿溫度為150℃，發(fā)射電流為34.6 μA，倍增器電壓為1 502 V，溶劑延遲時(shí)間為1.5 min，質(zhì)量范圍為30～500 amu。結(jié)果：從聚篩蕊中共分離、鑒定出19種揮發(fā)性化學(xué)成分，主要為烯烴和醛、醇、酮、呋喃等含氧揮發(fā)性化學(xué)成分，相對(duì)百分含量占總離子流圖中所有色譜峰的63.55%，其中含量較高的是2，4-辛二烯（29.66%）、己醛（5.93%）、3-甲基-1，4-庚二烯（5.45%）、呋喃（4.65%）。結(jié)論：該研究基本明確了聚篩蕊主要揮發(fā)性化學(xué)成分，為進(jìn)一步認(rèn)識(shí)聚篩蕊提供了一定科學(xué)依據(jù)。

聚篩蕊；地衣；固相微萃?。粴庀嗌V-質(zhì)譜聯(lián)用法

聚篩蕊Cladia aggregata（Sw.）Nyl.為石蕊科Cladoniaceae篩蕊屬地衣，篩蕊屬地衣在中國僅有一種，即聚篩蕊，主要分布在云南、四川、貴州、福建、臺(tái)灣及江西等地［4-8］。目前，未見其相關(guān)化學(xué)成分和生物活性研究，本研究采用固相微萃取法（SPME）提取其揮發(fā)性化學(xué)成分，結(jié)合氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（GC-MS）對(duì)新鮮聚篩蕊揮發(fā)性化學(xué)成分進(jìn)行分析。

1　材料

1.1儀器

HP6890/5975C型-GC-MS聯(lián)用儀（美國Agilent公司）；手動(dòng)SPME裝置、70 μm PDMS/DVB萃取纖維頭（美國Supelco公司）。

1.2藥材

藥材于2014年9月采自貴州省威寧縣，經(jīng)貴州省山地環(huán)境信息系統(tǒng)與生態(tài)環(huán)境保護(hù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室韓國營副研究員鑒定為真品。

2　方法

2.1試驗(yàn)條件

2.1.1色譜條件色譜柱：ZB-5 MSI 5%苯-95%二甲基聚硅氧烷彈性石英毛細(xì)管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；程序升溫：以5℃/min升溫至220℃，保持2 min；檢測(cè)器：氫火焰離子化檢測(cè)器；載氣：高純氦（純度：99.999%）；柱流速：1.0 ml/min；汽化室溫度：250℃；不分流進(jìn)樣。

2.1.2質(zhì)譜條件離子源：電子電離源；電離電壓：70 eV；接口溫度：280℃；離子源溫度：230℃；四極桿溫度：150℃；發(fā)射電流：34.6 μA；倍增器電壓：1 502 V；溶劑延遲時(shí)間：1.5 min；質(zhì)量范圍：30～500 amu。

2.2樣品制備

取適量樣品剪碎，置于手動(dòng)SPME樣品瓶中，插入裝有70 μm PDMS/DVB萃取纖維頭的手動(dòng)進(jìn)樣器，90℃下頂空萃取30 min左右，取出，快速插入色譜儀進(jìn)樣口（250℃）中。

3　結(jié)果

按照上述試驗(yàn)方法進(jìn)行樣品制備和分析處理，得到聚篩蕊揮發(fā)性化學(xué)成分總離子流圖（見圖1），共分離出39個(gè)色譜峰，將相關(guān)色譜峰數(shù)據(jù)碎片信息與Wiley275和Nist2005數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索、比對(duì)，并結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)［9-14］，從中鑒定出19個(gè)化學(xué)成分，主要為烯烴和醛、醇、酮、呋喃等含氧化合物，所有鑒定化合物相對(duì)百分含量占總離子流圖中所有色譜峰的63.55%，詳見表1。

圖1　總離子流圖Fig 1　Total ion flow chromatograms

表1　聚篩蕊中揮發(fā)性化學(xué)成分分析Tab 1　Results of analyzing the volatile chemical components in C.aggregate

續(xù)表1Continued tab 1

4　討論

從聚篩蕊中共分離、鑒定了19個(gè)化合物，主要為烯烴類化合物，如2，4-辛二烯、3-甲基-1，4-庚二烯、1，2-戊二烯等，其相對(duì)百分含量占總離子流圖中所有色譜峰的41.88%；醛、酮類化合物如己醛、3-甲基正丁醛、3-辛酮，其相對(duì)百分含量占總離子流圖中所有色譜峰的9.13%；呋喃類化合物如呋喃、2-乙基呋喃、2-甲基呋喃、2-戊基呋喃，其相對(duì)百分含量占總離子流圖中所有色譜峰的8.32%，主要化合物的分子量都相對(duì)較小，這可能與地衣植物揮發(fā)性化學(xué)成分特性相關(guān)。通過上述分析，基本明確了地衣植物聚篩蕊主要揮發(fā)性化學(xué)成分，為進(jìn)一步認(rèn)識(shí)地衣植物聚篩蕊提供了一定科學(xué)依據(jù)。

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（編輯：張靜）

Analysis of Volatile Components in Cladia aggregata by SPME-GC-MS

ZHAO Chao1，2，HAN Guoying3，LI Hongmei1，ZHOU Xin1，2（1.Key Laboratory for Information System of Mountainous Areas and Protection of Ecological Environment，Guiyang 550001，China；2.Guizhou Engineering Laboratory for Quality Control&Evaluation Technology of Medicine，Guiyang 550001，China；3.Guiyang Earthquake Preparedness and Mitigation Service Center/Guiyang Science and Technology Cadre Training Center，Guiyang 550081，China）

OBJECTIVE：To analyze the volatile components of Cladia aggregate by SPME-GC-MS.METHODS：The column was ZB-5 MSI 5%benzene-95%dimethylpolysiloxane fused silica capillary column，programmed temperature was heated from 5℃/min to 220℃（maintaining 2 min），detector was flame ionization detector，carrier gas was high purity He（99.999%），the column flow rate was 1.0 ml/min，vaporization room temperature was 250℃，splitless injection.MS conditions：ion source was electron ionization source，ionizing voltage was 70 eV，interface temperature was 280℃，ion source temperature was 230℃，quadrupole temperature was 150℃，emission current was 34.6 μA，multiplier voltage was 1 502 V，solvent delay time was 1.5 min，and quality range was 30-500 amu.RESULTS：19 volatile chemical components were separated and identified from C.aggregate，mainly olefins an aldehydes，alcohols，ketones，furans oxygenated volatile chemical components，relative contents accounted for 63.55%to all chromatographic peaks in total ion chromatogram，in which，2，4-octadiene（29.66%），hexanal（5.93%），3-methyl-1，4-heptadiene（5.45%）and furan（4.65%）showed the highest contents.CONCLUSIONS：The study has basically made clear the main volatile components in C.aggregate，which provide certain scientific basis for further exploring C.aggregate.

Cladia aggregate；Lichens；SPME；GC-MS把地衣當(dāng)作一個(gè)獨(dú)立的門看待。地衣適應(yīng)的生態(tài)環(huán)境廣泛，在海邊、高原、荒漠、草原和森林，甚至在赤道或南北兩極都有分布［1-3］。由于地衣共生的特殊性，能夠產(chǎn)生很多獨(dú)特的化學(xué)物質(zhì)［4-7］，其次生代謝產(chǎn)物構(gòu)成了天然有機(jī)化合物中獨(dú)特的類群，所以地衣是尚待開發(fā)的可再生資源寶庫，加強(qiáng)地衣基礎(chǔ)研究，有利于推動(dòng)地衣資源的開發(fā)和利用。

R917

A

1001-0408（2016）27-3843-02

10.6039/j.issn.1001-0408.2016.27.32

貴州省高技術(shù)產(chǎn)業(yè)化示范工程項(xiàng)目（No.黔發(fā)改高技〔2013〕2069號(hào)）；貴州省普通高等學(xué)校特色重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)項(xiàng)目（No.黔科合KY字〔2012〕005號(hào)）；貴州省高層次創(chuàng)新型人才培養(yǎng)項(xiàng)目（No.黔科合人才〔2015〕4033號(hào)）

＊副研究員。研究方向：天然產(chǎn)物化學(xué)。電話：0851-86690448。E-mail：chaozhao@126.com

教授，博士生導(dǎo)師。研究方向：中藥化學(xué)及中藥質(zhì)量控制。電話：0851-86690018。E-mail：alice9800@sina.com

（2015-11-25

2016-04-21）