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    應(yīng)用自由絲狀體培育法篩選壇紫菜良種

    2016-11-22 02:19:44褚茂兵肖徐進陳高峰黃景選郭安托
    水產(chǎn)養(yǎng)殖 2016年11期
    關(guān)鍵詞:絲狀蒼南縣紫菜

    褚茂兵,肖徐進,陳高峰,黃景選,郭安托

    (蒼南縣水產(chǎn)研究所,浙江 蒼南 325802)

    應(yīng)用自由絲狀體培育法篩選壇紫菜良種

    褚茂兵,肖徐進,陳高峰,黃景選,郭安托

    (蒼南縣水產(chǎn)研究所,浙江蒼南325802)

    壇紫菜人工養(yǎng)殖自20世紀(jì)70年代初引進浙江省蒼南縣以來,養(yǎng)殖技術(shù)到如今已有了根本性的變革,養(yǎng)殖面積也已大大擴展,但苗種培育方式卻一直沒有改進。種質(zhì)異化、退化嚴重,病害頻發(fā),嚴重制約了蒼南縣壇紫菜產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟可持續(xù)發(fā)展。近年來,我們應(yīng)用自由絲狀體貝殼移植法對壇紫菜良種進行擴種和篩選試驗,取得了較好的效果?,F(xiàn)總結(jié)如下。

    1 材料和方法

    1.1種菜

    A為沿浦本地養(yǎng)殖菜;B為平潭養(yǎng)殖菜;C為南麂野生菜;D為象山養(yǎng)殖菜。挑選成熟度好、健壯無病無爛、不附生雜藻的藻體,要求單株能剪取20 cm2有效葉片。

    1.2海水

    無工業(yè)污染的蒼南縣近岸海水。比重1.018~1.021,pH值7.9~8.1。海水經(jīng)沉淀過濾后,在培養(yǎng)用的三角燒瓶中煮沸,冷卻后添加適量營養(yǎng)液待用。

    1.3培養(yǎng)容器

    主要有500、1 000、2 000、3 000和5 000 mL的三角燒瓶。先把瓶子洗凈,再加需要量的培養(yǎng)海水作煮沸消毒處理,煮沸后瓶口馬上包扎雙層濾紙,然后冷卻待用。

    1.4營養(yǎng)液

    在1 000 mL淡水中溶解40 g硝酸鉀、40 g硝酸鈉、10 g磷酸二氫鉀、20 g乙二胺四乙酸二鈉(EDTA)、0.8 g氯化鈣、2.5 g硫酸亞鐵、0.2 g硫酸錳,加熱溶化煮沸,冷卻后加入VB10.1g、VB120.25 mg。在棕色瓶中存放,一個月重配1次。每1 000 mL培養(yǎng)海水中滴加營養(yǎng)液1 mL,作為標(biāo)準(zhǔn)量。

    2 試驗過程

    2.1種菜的去污處理

    上午把挑選的每樣種菜各3株洗凈,11:00—14:00日曬3 h,日曬溫度15~17℃,14:00—16:00進行無菌洗刷。然后,把經(jīng)此處理后藻體上富含果孢子囊部分的葉片剪取放入果孢子采集瓶中。

    2.2果孢子采集

    把經(jīng)除污處理的種菜,加入消毒海水,置于500 mL三角燒瓶里采集果孢子。每天多次搖動瓶子,務(wù)必使放散出的孢子不堆集,并在第3或4天以及第7天分兩次收集孢子水,收集時要刷干凈采集瓶的瓶底和瓶壁,然后計數(shù)水中孢子量,以此計算放散量,去掉每樣各一瓶放散量最少的。

    2.3自由絲狀體的培養(yǎng)

    2.3.1去污效果檢查階段(附壁培養(yǎng)),1月中旬到2月下旬以每瓶(1 000 mL三角燒瓶)投放果孢子50萬~100萬的量,進行分瓶培養(yǎng),A、B、D各為8瓶,C為4瓶。這期間,培養(yǎng)海水中營養(yǎng)鹽含量為標(biāo)準(zhǔn)的1/4,水溫控制為15~20℃,光強1 000~2 000 lx,光照時間為24 h,每天搖瓶2次。快者4~5 h,慢者7~10 d,可以觀察到紅色絲狀絲出現(xiàn)在瓶底,并逐漸布滿瓶底,最后擴展到瓶壁,果孢子投放濃度越高出現(xiàn)時間越早。約20 d左右開始,會逐漸發(fā)現(xiàn)有雜藻污染的瓶子,至2月下旬結(jié)束此階段。

    2.3.2擴大培養(yǎng)階段(懸浮培養(yǎng))2月下旬到4月下旬,附壁培養(yǎng)階段結(jié)束后,去除有污染的瓶子,刷壁收集共得各樣自由絲狀體濕重(下同)為A 15 g、B 14 g、C 3 g、D 11 g。以每0.5 g(C樣)或1 g(A、B、D樣)濕重自由絲狀體加1 000 mL培養(yǎng)海水為比例進行擴大培養(yǎng):第1個月每半月加一次標(biāo)準(zhǔn)營養(yǎng)液,第2個月每周加一次標(biāo)準(zhǔn)營養(yǎng)液,水溫控制在20℃,光強2 000 lx,光照時間24 h,每天搖瓶3~4次,每次100下,每半月更換培養(yǎng)海水50%。

    2.4自由絲狀體的貝殼移植及培養(yǎng)

    4月下旬,取4樣自由絲狀體各50 g,用切碎機切碎,裝入噴壺,加入育苗海水,充分攪勻后,均勻噴灑到池底的貝殼上。噴灑后蓋光48 h,再弱光培育7 d時間,防止藻段浮起。移植后約半個月時間可見苗,至7月上旬其生長發(fā)育程度已與傳統(tǒng)于2—3月采果孢子的貝殼絲狀體同步。8月上旬開始縮光培育(與大眾同樣),培育條件也相同。如此同傳統(tǒng)育苗法相比,可節(jié)省2個月(30%)貝殼管理時間,洗殼總次數(shù)也減少了30%。

    2.5秋季采苗(采殼孢子)和海上養(yǎng)成

    9月中旬(比海區(qū)大眾統(tǒng)一采苗時間遲一天)下午,取已完全成熟的貝殼絲狀體下海刺激,刺激時間為當(dāng)日傍晚16:30至次日4:30。刺激完后,每樣貝殼各放一桶,分別加清潔海水50 L,并取貝殼(與試驗組同樣量)于一桶作對照,觀察發(fā)現(xiàn)7:00開始有殼孢子放散,9:00進入放散高峰期,尤以A、B為顯著,對照組水色無變化。10:30鏡檢孢子放散量,10×10倍下每視野孢子數(shù):A為110,B為107,C為83,D為103,對照組為26。用染布法采殼孢子,每樣各采3行60張網(wǎng)簾(3 m×4 m),晾1小時掛入海區(qū)筏架。于10月上旬分苗完畢,每樣各一行分別養(yǎng)在高、中、低潮區(qū)。按照普通的方法進行養(yǎng)殖管理及收割。

    3 試驗結(jié)果

    3.1第一年試驗結(jié)果

    3次收割各試驗組(另取各試驗組所在同排同時收割中產(chǎn)量較好的傳統(tǒng)養(yǎng)殖紫菜一行作對照組)總產(chǎn)量見表1。如此計算得:A增產(chǎn)(總產(chǎn),下同)12.1%,B增產(chǎn)10.9%,C增產(chǎn)4.9%,D增產(chǎn)2.0%。通過第一年的自由絲狀體培育技術(shù)研究及應(yīng)用于生產(chǎn),初步選定由沿浦海區(qū)(A)和平潭海區(qū)(B)挑選的種菜具有養(yǎng)殖優(yōu)勢,次年將在這兩個品種的試驗筏架上挑選出個體健壯的菜種進行重復(fù)擴大驗證試驗,并著重探索降低育苗成本的技術(shù)方法。

    3.2第二年進一步篩選結(jié)果

    次年1月中旬,在各試驗筏架上分別選取優(yōu)良種菜各3株,進行果孢子采集和自由絲狀體擴大培育。4月下旬進行自由絲狀體貝殼移植,A、B各12 000只。并在3月上旬,用從A、B筏架上選取的種菜各10 kg進行傳統(tǒng)育苗法采苗(春季采苗,下稱A(傳統(tǒng))、B(傳統(tǒng)),各采40×667 m2(4萬只貝殼)。9月中旬統(tǒng)一下海刺激,采殼孢子。觀察殼孢子放散量(每千只貝殼加海水10 L,10×10倍下每視野孢子數(shù)):A為116,B為122,A(傳統(tǒng))為24,B(傳統(tǒng))為27,對照組為21。采得網(wǎng)簾:A、B各6行,A(傳統(tǒng)),B(傳統(tǒng))各10行。

    計算結(jié)果,A:新育苗法可增產(chǎn)12.5%,傳統(tǒng)育苗法可增產(chǎn)5.6%;B:新育苗法可增產(chǎn)11.7%,傳統(tǒng)育苗法可增產(chǎn)4.8%。從A及B的試驗數(shù)據(jù)中可見:同樣種菜來源,采用新育苗法,其增產(chǎn)效果更加明顯。

    表1 收獲情況表

    4 小結(jié)

    據(jù)有關(guān)研究報告和筆者這幾年的試驗生產(chǎn)結(jié)果表明,通過自由絲狀體進行紫菜生產(chǎn)和通過傳統(tǒng)貝殼絲狀體進行紫菜生產(chǎn)相比,其效果是相同的,甚至更好。而自由絲狀體法是通過單株采苗、純種培育,這樣就能很容易鑒別出品種的性狀是否優(yōu)良,從而使選種育種工作更容易取得進展。

    壇紫菜果孢子萌發(fā)溫度范圍為7~26℃,在這一范圍內(nèi),溫度在低限時萌發(fā)速度雖然比較慢,但萌發(fā)率比較高,病死率較低;而溫度傾向高限時,則萌發(fā)快,萌發(fā)率在短期內(nèi)也比較高,但病死率增加。因此具備控溫控光條件的,為大規(guī)模生產(chǎn)性育苗著想,可以在11—12月份就進行果孢子采集,也可以把經(jīng)過養(yǎng)成證明為良種的自由絲狀體通過試驗室常規(guī)條件培育,連續(xù)為下年育苗用,這也是本育種法的優(yōu)勢之一。另外海水比重在1.020~1.025,pH值在8.0~8.2之間最好。

    采用同樣的種菜,用該育苗方法能比傳統(tǒng)育苗法有較大程度增加產(chǎn)量的結(jié)果,再加上其種菜需求量極少,育苗時間短,管理成本也可降低30%左右。因此,該法具有較大的推廣應(yīng)用價值。

    10.3969/j.issn.1004-2091.2016.11.016

    (2015-09-14)

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