東北虎巴氏桿菌病的流行及診斷

徐海濤王旭宮磊

摘 要：巴氏桿菌病是由巴氏桿菌屬細(xì)菌引起人獸共患的一種急性傳染病，呈世界性分布。隨著動(dòng)物源性巴氏桿菌強(qiáng)毒株和耐藥菌株的不斷出現(xiàn)，巴氏桿菌的感染譜逐漸擴(kuò)大，除各種家畜、家禽外，多種珍稀野生動(dòng)物也可感染致死，給整個(gè)動(dòng)物界造成極大的危害。本文主要對(duì)病死東北虎進(jìn)行病理學(xué)研究，為東北虎的巴氏桿菌病提供臨床病理學(xué)資料，為指導(dǎo)臨床上東北虎疾病的診斷和防治提供理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞：東北虎；巴氏桿菌??；流行；診斷

一、病原介紹

巴氏桿菌病是由多殺性巴氏桿菌病引起的細(xì)菌性傳染病。多殺巴氏桿菌氏一種兩段鈍圓，中央微突的短桿菌或球桿菌，長(zhǎng)0.6-2.5微米，寬0.25-0.6微米，不形成芽胞，不運(yùn)動(dòng)，無(wú)鞭毛，革蘭氏染色陰性的需氧兼性厭氧菌。本菌在添加血清或血液的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好。在血瓊脂上生成灰白色，濕潤(rùn)而粘稠的菌落，不溶血；在普通瓊脂上形成細(xì)小透明的露珠狀菌落；在普通肉湯中，初均勻混濁，以后形成黏性沉淀和菲薄的附壁菌膜；明膠穿刺培養(yǎng)，沿穿刺孔呈線裝生長(zhǎng)，上粗下細(xì)。本菌的抵抗力不強(qiáng)，在直射陽(yáng)光和干燥的情況下迅速死亡；60℃10min可殺死；一般消毒藥在幾分鐘或十幾分鐘內(nèi)可殺死。3%石炭酸和0.1%升汞水在1min內(nèi)可殺菌，10%石灰乳及常用的甲醛溶液3-4min內(nèi)可使之死亡。在無(wú)菌蒸餾水和生理鹽水中迅速死亡，但在尸體內(nèi)可存活1-3個(gè)月，在廄肥中亦可存活一個(gè)月。用特異性莢膜抗原（K抗原）吸附于紅細(xì)胞上作被動(dòng)血凝試驗(yàn)，分為A、B、D、E和F五型血清群；利用菌體抗原（O抗原）作凝集試驗(yàn)，將本菌分為12個(gè)血清型。若將K、O兩種抗原組合在一起，迄今已有16個(gè)血清型。該病的病型，宿主特異性，致病性，免疫性等，都與血清型有關(guān)。

二、流行情況

本病的發(fā)生一般無(wú)明顯的季節(jié)性，但以冷熱交替，氣候劇變，悶熱，潮濕，多雨的時(shí)期發(fā)生較多。體溫失調(diào)，抵抗力降低，是本病主要的發(fā)病誘因之一。另外長(zhǎng)途運(yùn)輸或頻繁遷移，過(guò)度疲勞，飼料突變，營(yíng)養(yǎng)缺乏，寄生蟲等也常常誘發(fā)此病。因某些疾病的存在造成機(jī)體抵抗力降低，易繼發(fā)本病。本病多呈地方流行或散發(fā)，同種動(dòng)物能相互傳染，不同種動(dòng)物之間也偶見相互傳染。

三、發(fā)病機(jī)理

當(dāng)氣候，季節(jié)變化，長(zhǎng)途運(yùn)輸和寄生蟲感染，營(yíng)養(yǎng)不良等因素導(dǎo)致動(dòng)物機(jī)體抵抗力降低時(shí)，健康帶菌動(dòng)物的呼吸道和扁桃體內(nèi)所存在的巴氏桿菌，會(huì)變成強(qiáng)毒菌而造成內(nèi)源性感染；另外可由于污染的飼料，水，空氣，器具等經(jīng)消化道，呼吸道，外傷而造成外源性感染。

如果機(jī)體抵抗力較弱，而侵入的時(shí)強(qiáng)毒菌，則會(huì)很快地通過(guò)淋巴結(jié)地阻止作用，進(jìn)入血流，形成菌血癥，染病動(dòng)物可于24h內(nèi)因敗血癥死亡。如果機(jī)體抵抗力強(qiáng)或侵入機(jī)體的菌數(shù)不太多或毒力較弱，病程可延長(zhǎng)1-2天或更久。如果病原菌屬于弱毒力，機(jī)體又具有較強(qiáng)的抵抗力，則病變會(huì)局限于局部。

四、診斷

眼觀患病虎營(yíng)養(yǎng)不良，消瘦，體質(zhì)量約100kg，被毛無(wú)光澤，可視黏膜發(fā)白。剖檢見腹腔和胸腔內(nèi)均有大量的黑褐色透明積液（約250mL）；肺臟膨大，表面有塌陷，呈典型的大葉性肺炎病變，切面可見有大量的膿性滲出物，肺臟實(shí)質(zhì)分布有較多的蠶豆大到核桃大的化膿灶，充滿多量綠色膿汁；肝臟腫大，土黃色，分布有塊狀壞死灶和白色小結(jié)節(jié)，膽囊腫大，充滿綠色膽汁；脾臟皺縮，質(zhì)地柔軟，表面分布大量白色斑點(diǎn)；胃內(nèi)無(wú)內(nèi)容物，胃黏膜表面有大量粘稠黑褐色黏液樣物質(zhì)；腸空無(wú)內(nèi)容物，腸道內(nèi)有大量的黑褐色黏液樣物質(zhì)。其他組織臟器無(wú)明顯的眼觀病變。

經(jīng)革蘭氏染色的病料涂片可見有大量的兩端鈍圓、兩極濃染的紅色球桿菌，堿性美藍(lán)染色可見大量的呈明顯兩極著色的球桿菌；血清肉湯培養(yǎng)基變渾濁，有大量細(xì)菌生長(zhǎng)，涂片革蘭氏染色鏡檢可見大量均勻的兩端濃染的球桿菌；麥康凱培養(yǎng)基無(wú)細(xì)菌菌落生長(zhǎng)；血清肉湯培養(yǎng)的細(xì)菌接種的10只小鼠均在16～ 48h內(nèi)死亡。解剖小鼠后，取病變臟器觸片染色鏡檢并同時(shí)進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng)，其分離細(xì)菌的特征與病料中分離的一致。

心肌纖維間毛細(xì)血管擴(kuò)張充血，心肌纖維腫脹，肌漿中含有大量紅染顆粒，呈顆粒變性變化；部分肌纖維崩解斷裂，在斷裂部有多量的紅細(xì)胞，呈局灶性出血；肝組織失去固有結(jié)構(gòu)，肝細(xì)胞索紊亂，肝細(xì)胞胞漿凝固，胞核皺縮深染，甚至有的肝細(xì)胞核溶解消失，呈中毒性肝營(yíng)養(yǎng)不良；脾小體發(fā)生壞死，細(xì)胞核溶解碎裂，并有大量炎性細(xì)胞，脾小梁被支解成島嶼狀；肺細(xì)支氣管和小血管周圍結(jié)締組織增生，呈現(xiàn)支氣管和小動(dòng)脈周圍炎變化；部分肺泡內(nèi)含大量變性、壞死的嗜中性白細(xì)胞，呈化膿性肺炎變化；另有部分肺泡中含有大量纖維蛋白和少量的白細(xì)胞，呈現(xiàn)纖維素性肺炎變化；腎小管上皮細(xì)胞發(fā)生變性壞死，鏡檢見腎小管上皮細(xì)胞脫落，大部分腎小管上皮細(xì)胞核溶解，上皮細(xì)胞崩解堵塞管腔，腎小管間含有大量的紅細(xì)胞；小腸腸絨毛黏膜壞死脫落，可見大量巨噬細(xì)胞，呈卡他性腸炎變化。

五、討論

東北虎為我國(guó)的一級(jí)保護(hù)動(dòng)物，在國(guó)內(nèi)分布較為普遍，由于生存環(huán)境的破壞、偷獵行為、疾病等多種因素導(dǎo)致其數(shù)量不斷減少。近年來(lái)，雖然人工圈養(yǎng)虎的數(shù)量有所增加，但隨之而來(lái)的疾病導(dǎo)致虎死亡的報(bào)道也逐漸增多。常見的一些病原微生物如鏈球菌、大腸桿菌、犬瘟熱病毒、細(xì)小病毒、杯狀病毒、流感病毒等均可自然感染虎并導(dǎo)致死亡?？梢姡膊〉牧餍幸步o虎造成巨大的威脅。

巴氏桿菌是條件致病性細(xì)菌之一，在健康動(dòng)物眼、鼻、喉與外界接觸部位經(jīng)?？梢苑蛛x到，各種畜、禽及野生動(dòng)物都可感染。當(dāng)遇到氣候驟變、環(huán)境惡劣時(shí)，造成動(dòng)物機(jī)體抵抗力降低，菌群失調(diào)，毒力增強(qiáng)，由常在菌變?yōu)橹虏【?；如果飼養(yǎng)管理不當(dāng)，很容易為細(xì)菌繁殖造成可乘之機(jī)，從而導(dǎo)致動(dòng)物發(fā)病死亡。本試驗(yàn)從臨床送檢的虎病料中分離獲得1株巴氏桿菌，經(jīng)動(dòng)物回歸試驗(yàn)證實(shí)其有致死性。另外，本試驗(yàn)選用與東北虎物種相近的傳代細(xì)胞系F81細(xì)胞（貓腎細(xì)胞系）和雞胚進(jìn)行病毒檢測(cè)，結(jié)果均未分離到病毒粒子，排除東北虎感染病毒致死的可能性，所以診斷為東北虎因巴氏桿菌病死亡。

病理剖檢變化發(fā)現(xiàn)該病例最明顯的病變?cè)诜闻K，呈現(xiàn)典型的大葉性肺炎變化，這也是動(dòng)物生前表現(xiàn)咳嗽、呼吸困難等呼吸道癥狀的主要原因。另外，肺臟的大量化膿灶和病理組織學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)的大量嗜中性白細(xì)胞可以證實(shí)該東北虎死于細(xì)菌性疾病。

巴氏桿菌常通過(guò)消化道和呼吸道感染，在該病例，推測(cè)經(jīng)常飼喂活雞或生肉而使東北虎通過(guò)消化道感染病原的可能性較大。因此，在日常飼喂動(dòng)物時(shí)應(yīng)保持生肉新鮮、活物健康，防止有害細(xì)菌從食物鏈進(jìn)入動(dòng)物機(jī)體，特別是像東北虎這樣野性較強(qiáng)的動(dòng)物，因不易接近，平時(shí)很難觀察到他的前期癥狀，更應(yīng)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，防止病從口入。因此，實(shí)施綜合獸醫(yī)衛(wèi)生管理措施是防患于未然的根本保障，尤其是一些國(guó)家珍稀野生動(dòng)物，應(yīng)采取必要而有效的保健和防治措施，以盡可能減少疾病所造成的巨大損失。