超高效液相色譜-四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜法快速篩查辣椒粉中27種農(nóng)藥殘留

劉永強(qiáng), 李 凱, 許文娟, 郭禮強(qiáng), 孫 軍

(濰坊出入境檢驗(yàn)檢疫局, 山東 濰坊 261041)

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研究論文

超高效液相色譜-四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜法快速篩查辣椒粉中27種農(nóng)藥殘留

劉永強(qiáng)*, 李 凱, 許文娟, 郭禮強(qiáng), 孫 軍

(濰坊出入境檢驗(yàn)檢疫局, 山東 濰坊 261041)

建立了超高效液相色譜-四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜(UPLC-Q-TOF/MS)快速篩查辣椒粉中27種農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法。樣品采用乙腈提取,經(jīng)Carb/NH2固相萃取小柱凈化,用乙腈-乙酸乙酯(3∶1, v/v)洗脫,電噴霧正離子模式檢測(cè)。在一級(jí)質(zhì)譜模式下,以目標(biāo)物的保留時(shí)間、精確質(zhì)量數(shù)、同位素分布和同位素豐度比定性,以準(zhǔn)分子離子峰的峰面積定量。在Targeted MS/MS模式下,通過相應(yīng)碰撞能量下的離子碎片信息進(jìn)一步確證。27種化合物在各自的線性范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)均大于0.997。27種化合物的定量限為2.5～5.0 μg/kg,在3個(gè)添加水平下的回收率為72.3%～118.9%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.21%～12.7%(n=6)。該方法快速、靈敏、準(zhǔn)確,適用于辣椒粉中多種農(nóng)藥殘留的同時(shí)檢測(cè)。

超高效液相色譜-四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜;篩查;農(nóng)藥殘留;辣椒粉

農(nóng)藥在現(xiàn)代農(nóng)業(yè)的生產(chǎn)過程中起到不可替代的作用,為糧食、果蔬的增產(chǎn)做出了重大貢獻(xiàn)。然而農(nóng)藥的廣泛使用伴隨著日益嚴(yán)重的農(nóng)藥殘留問題,農(nóng)藥的濫用對(duì)人體健康和生態(tài)環(huán)境等方面造成了嚴(yán)重危害[1]。隨著新型農(nóng)藥的使用和農(nóng)藥最大殘留限量(MRLs)的日益嚴(yán)格,研發(fā)高效、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確的農(nóng)藥多殘留檢測(cè)方法成為檢測(cè)人員的首要任務(wù)。

目前辣椒中農(nóng)藥多殘留的分析方法主要有氣相色譜(GC)法[2-4]、氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)法[5]和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)法[6]。GC法定性能力較弱;GC-MS和LC-MS/MS法均采用低分辨質(zhì)譜,全掃描模式下的靈敏度較低[7],選擇離子監(jiān)測(cè)(SIM)和多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)模式下需分組檢測(cè)目標(biāo)物[8-10]。此外,GC、GC-MS和LC-MS/MS法的定性分析必須有標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行比對(duì)。近年來高分辨質(zhì)譜法在農(nóng)藥多殘留檢測(cè)方面的發(fā)展為以上問題提供了良好的解決途徑。

四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜(Q-TOF/MS)是一種四極桿和飛行時(shí)間質(zhì)量分析器相結(jié)合的高分辨質(zhì)譜技術(shù),具有較高的靈敏度,理論上可同時(shí)掃描目標(biāo)物的數(shù)量無上限,真正實(shí)現(xiàn)高通量分析[11-13]。Q-TOF/MS還可通過目標(biāo)化合物的保留時(shí)間、精確質(zhì)量數(shù)、同位素分布和同位素豐度比等信息,利用建立的篩查譜庫(kù),實(shí)現(xiàn)在無標(biāo)準(zhǔn)品比對(duì)的情況下對(duì)目標(biāo)物進(jìn)行準(zhǔn)確定性[14]。因此,Q-TOF/MS的高分辨率和高質(zhì)量精度的特點(diǎn)可以有效降低化學(xué)噪音,從而提高定性結(jié)果的可靠性和定量結(jié)果的準(zhǔn)確度,尤其適合復(fù)雜基質(zhì)體系中未知化合物的痕量分析[15]。

本文采用固相萃取的前處理方法,建立了超高效液相色譜-四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜(UPLC-Q-TOF/MS)同時(shí)分析辣椒粉中常見的27種農(nóng)藥殘留的快速篩查方法。該方法利用UPLC-Q-TOF/MS技術(shù)建立了包含精確質(zhì)量數(shù)、保留時(shí)間和3個(gè)碰撞能量(10、20、40 eV)下碎片離子質(zhì)譜圖信息的27種農(nóng)藥篩查譜庫(kù),通過篩查譜庫(kù)對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行檢索分析,實(shí)現(xiàn)了無標(biāo)準(zhǔn)品情況下對(duì)辣椒粉樣品中27種農(nóng)藥的快速篩查和確認(rèn),同時(shí)可對(duì)檢測(cè)到的目標(biāo)物進(jìn)行準(zhǔn)確定量。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

Agilent 1290-6530超高效液相色譜-四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜儀(美國(guó)Agilent公司); T25均質(zhì)器(德國(guó)IKA公司); 5810R高速冷凍離心機(jī)(德國(guó)Eppendorf公司); R-210旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(瑞士BUCHI公司); MMV-1000W振蕩器(日本EYELA公司)。

27種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品(純度91.5%～99.7%)均購(gòu)自德國(guó)Dr. Ehrenstorfer公司;正己烷、乙腈、乙酸乙酯(色譜純)和甲酸(分析純)均購(gòu)自美國(guó)Merck公司;無水硫酸鈉(分析純)購(gòu)自天津天大化工實(shí)驗(yàn)廠;氯化鈉(優(yōu)級(jí)純)購(gòu)自天津科密歐化學(xué)試劑有限公司;乙酸銨(色譜純)購(gòu)自上海晶純生化科技股份有限公司;石墨化碳-氨丙基鍵合硅膠復(fù)合固相萃取柱(Carb/NH2, 500 mg/500 mg/6 mL)購(gòu)自北京迪馬歐泰科技發(fā)展中心;乙腈飽和的正己烷:將乙腈和正己烷按1∶1(v/v)混合,振蕩,上層即為乙腈飽和的正己烷;實(shí)驗(yàn)用水為純水系統(tǒng)(美國(guó)Millipore公司)制得。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

準(zhǔn)確稱取10 mg(精確至0.01 mg)標(biāo)準(zhǔn)品,置于10 mL棕色容量瓶中,用甲醇定容至刻度,得單標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,于-18 ℃避光保存。用甲醇稀釋并配制中間濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液,于4 ℃避光保存。用空白辣椒粉提取液配制標(biāo)準(zhǔn)工作液,現(xiàn)用現(xiàn)配。

分別量取50 μL 27種農(nóng)藥單標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液至100 mL棕色容量瓶中,用甲醇定容至刻度,得到質(zhì)量濃度為500 μg/L的27種農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,現(xiàn)用現(xiàn)配。

1.3 樣品前處理

稱取辣椒粉2 g(精確至0.01 g),置于100 mL塑料離心管中,加入15 mL水,渦旋0.5 min,浸泡30 min,加入40 mL乙腈溶液,以11 000 r/min均質(zhì)1 min后,加入5 g氯化鈉,以11 000 r/min均質(zhì)1 min,以4 000 r/min離心5 min后,取20 mL乙腈層于250 mL梨形分液漏斗中,分別加入20 mL乙腈和10 mL乙腈飽和的正己烷,振蕩4 min,將乙腈層置于250 mL尖底旋蒸瓶中,旋蒸至近干,加入3 mL乙腈-乙酸乙酯(3∶1, v/v)溶液,溶解殘?jiān)?待凈化。

將Carb/NH2固相萃取小柱固定于裝置上,加入2 g無水硫酸鈉后,用8 mL乙腈-乙酸乙酯(3∶1, v/v)溶液預(yù)淋洗小柱,流速為1 mL/min。將3 mL溶解液過柱,于旋蒸瓶中加入3 mL乙腈-乙酸乙酯(3∶1, v/v)溶液后,過柱。用25 mL乙腈-乙酸乙酯(3∶1, v/v)洗脫,收集全部洗脫液于250 mL尖底旋蒸瓶中,旋蒸至近干,用0.1%(v/v)甲酸-乙腈(9∶1, v/v)定容至2 mL,待分析。

1.4 色譜-質(zhì)譜條件

色譜柱:Poroshell 120 SB-C18(100 mm×3.0 mm, 2.7 μm)。流動(dòng)相:A為含5 mmol/L乙酸銨的0.1%(v/v)甲酸水溶液, B為乙腈。梯度洗脫程序:0～5.00 min, 1%B～40%B; 5.00～8.00 min, 40%B; 8.00～14.00 min, 40%B～60%B; 14.00～18.00 min, 60%B～90%B; 18.00～20.00 min, 90%B; 20.00～20.01 min, 90%B～1%B; 20.01～24.00 min, 1%B。流速:0.4 mL/min。柱溫:40 ℃。

電噴霧離子(ESI)源,正離子模式;干燥氣溫度:325 ℃;干燥氣流速:10 L/min;霧化器壓力:276 kPa;鞘氣溫度:325 ℃;鞘氣流速:11 L/min;參比離子:m/z121.050 9、922.009 8;掃描方式:全掃描;掃描范圍:m/z100～1 000; MS掃描速率:3 spectra/s; MS/MS掃描速率:2 spectra/s;二級(jí)質(zhì)譜數(shù)據(jù)在Targeted MS/MS模式下采集,在Targeted List Table中設(shè)置母離子、保留時(shí)間、碰撞能量等信息;采用Agilent MassHunter Workstation (Version B05.01)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)采集與處理。

1.5 篩查譜庫(kù)的建立

配制27種農(nóng)藥的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,在一級(jí)質(zhì)譜模式下進(jìn)行測(cè)定,獲得化合物的精確質(zhì)量數(shù)、保留時(shí)間和母離子信息;在Targeted MS/MS模式下,對(duì)化合物進(jìn)行數(shù)據(jù)采集,每種化合物選擇3個(gè)碰撞能量(10、20、40 eV)下的碎片離子質(zhì)譜圖,并將其導(dǎo)入PCDL軟件,與對(duì)應(yīng)農(nóng)藥的保留時(shí)間和精確質(zhì)量數(shù)等信息相關(guān)聯(lián),從而建立篩查譜庫(kù)。27種農(nóng)藥的分子式、保留時(shí)間、理論質(zhì)量數(shù)、CAS號(hào)、母離子、碰撞能量和相對(duì)豐度最高的2～3個(gè)質(zhì)譜碎片離子及對(duì)應(yīng)的相對(duì)豐度比見表1。

表 1 27種農(nóng)藥的分子式、保留時(shí)間、理論質(zhì)量數(shù)、CAS號(hào)、母離子、碰撞能量和碎片離子信息

表 1 (續(xù))

2 結(jié)果與討論

2.1 前處理?xiàng)l件的優(yōu)化

2.1.1 提取方法的優(yōu)化

目前農(nóng)殘檢測(cè)中多采用乙腈作為提取溶劑[5,6,8-10],相比于其他溶劑,乙腈具有提取效率高、去除脂肪、蛋白質(zhì)和糖分等雜質(zhì)效果好和揮發(fā)性低等優(yōu)點(diǎn),因而本實(shí)驗(yàn)采用乙腈作為提取溶劑。

分析脫水蔬菜樣品時(shí),檢測(cè)前需加適量水浸泡，以提高農(nóng)藥殘留的提取效率[16]。辣椒粉屬脫水蔬菜,因此本實(shí)驗(yàn)對(duì)比了直接提取和加水浸泡后再提取對(duì)回收率的影響(見圖1)。結(jié)果表明,直接提取時(shí),只有滅多威和馬拉硫磷的加標(biāo)回收率在正常范圍內(nèi),其余農(nóng)藥的加標(biāo)回收率僅為6.0%～59%,三唑磷、咪唑菌酮和甲草胺的回收率幾乎為0;加水浸泡后再提取的樣品中27種農(nóng)藥的加標(biāo)回收率為64%～110%,滿足實(shí)驗(yàn)要求。且直接提取和加水浸泡后提取的樣品經(jīng)SPE小柱凈化后,洗脫液的顏色分別呈淡黃色和無色,說明直接提取的提取液中含有較多色素和基質(zhì)干擾物,導(dǎo)致后續(xù)凈化不徹底;加水浸泡后,樣品中部分干擾物轉(zhuǎn)移至水相,有利于樣品的凈化。因此本實(shí)驗(yàn)采用加水浸泡后再提取的方式。

圖 1 直接提取和加水浸泡后再提取對(duì)27種農(nóng)藥回收率的影響Fig. 1 Effect of direct extraction and immersion extraction on the recoveries of the 27 pesticides

本實(shí)驗(yàn)考察了振蕩器振蕩、均質(zhì)和超聲3種提取方式對(duì)回收率的影響。結(jié)果表明,振蕩器振蕩、均質(zhì)和超聲3種提取方式下，27種目標(biāo)物的回收率在70%～120%范圍內(nèi)的數(shù)量分別為18、20和15,其中均質(zhì)的提取效率最高。采用均質(zhì)提取時(shí)放熱較多,有利于農(nóng)藥殘留的提取,且均質(zhì)可有效保證樣品與試劑充分接觸。因此最終選擇均質(zhì)作為提取方式。

2.1.2 凈化方法的優(yōu)化

辣椒粉中含有大量油脂、色素和生物堿,屬于復(fù)雜基質(zhì)[17],如果凈化不徹底,容易對(duì)目標(biāo)物的檢測(cè)產(chǎn)生干擾,影響定性和定量的準(zhǔn)確性,同時(shí)會(huì)對(duì)色譜柱和質(zhì)譜系統(tǒng)造成嚴(yán)重污染,從而增加日常維護(hù)儀器的人力和財(cái)力。因此對(duì)辣椒粉樣品的凈化顯得尤為重要。

將辣椒粉樣品的提取液旋蒸后，會(huì)明顯觀察到旋蒸瓶?jī)?nèi)壁有油脂狀的液滴。正己烷對(duì)油脂具有較好的溶解性,用乙腈飽和的正己烷對(duì)提取液進(jìn)行液液萃取能夠快速地去除樣品中的油脂。去除油脂后,提取液旋蒸后已無明顯的油脂狀液滴(見圖2)。當(dāng)乙腈飽和的正己烷與提取液乙腈的比例為1∶4(v/v)時(shí),去除油脂的效果最好?？疾炝巳コ椭臀闯椭?種情況下27種目標(biāo)化合物的回收率。結(jié)果表明,去除油脂時(shí),85.2%的目標(biāo)物的回收率為70%～120%;未除油脂時(shí),55.6%的目標(biāo)物的回收率為70%～120%。除速滅磷外,其余26種化合物在去除油脂情況下的回收率均高于未除油脂的情況(見圖3),表明除去油脂后更有利于目標(biāo)物的檢測(cè)，且造成的損失相對(duì)更少。

圖 2 除油脂和不除油脂情況下旋蒸后的提取液Fig. 2 Extraction solutions after rotary evaporation with or without oil removal

圖 3 除油脂對(duì)27種農(nóng)藥回收率的影響Fig. 3 Effect of oil removal on the recoveries of the 27 pesticides

固相萃取柱的選擇對(duì)凈化效果起著至關(guān)重要的作用,本實(shí)驗(yàn)采用乙腈-乙酸乙酯(3∶1, v/v)作為洗脫液,比較了不同固相萃取小柱(Carb/NH2柱、NH2柱和SAX/PSA柱)對(duì)目標(biāo)物回收率的影響。結(jié)果表明,NH2柱和SAX/PSA柱的回收率相近,但對(duì)馬拉硫磷、三唑磷和噻嗪酮等目標(biāo)物的回收率過低;Carb/NH2柱的回收率整體上要高于另2種固相萃取柱,77.8%的目標(biāo)化合物的回收率在70%～120%范圍內(nèi)(見圖4)。從凈化效果看,Carb/NH2柱去除基質(zhì)干擾物的能力最強(qiáng),能夠有效去除辣椒粉中的色素、脂肪酸、有機(jī)酸等雜質(zhì);SAX/PSA柱具有雙NH2基團(tuán),能夠去除部分色素和脂肪酸,凈化效果次之;NH2柱對(duì)辣椒粉樣品的凈化效果最差。因此本實(shí)驗(yàn)最終選擇Carb/NH2固相萃取小柱作為凈化柱。

2.2 質(zhì)譜條件的優(yōu)化

在質(zhì)譜的各項(xiàng)參數(shù)中,質(zhì)譜圖的采集速率(acquisition rate, spectra/s)是十分重要的參數(shù),采集速率越高,色譜峰的信號(hào)強(qiáng)度越小。在Targeted MS/MS模式下,需合理地設(shè)定一級(jí)質(zhì)譜(MS)和二級(jí)質(zhì)譜(MS/MS)數(shù)據(jù)的采集速率,以獲得較好的檢測(cè)結(jié)果。以莠去津等9種化合物為研究對(duì)象,將MS和MS/MS的采集速率分別設(shè)為2-2、2-3、2-4、3-2、3-3、3-4、4-2、4-3和4-4,以化合物的峰面積來衡量色譜峰的信號(hào)強(qiáng)度。結(jié)果表明,對(duì)同一種化合物,當(dāng)MS的采集速率相同時(shí),隨著MS/MS采集速率的增大,色譜峰的信號(hào)強(qiáng)度逐漸降低;當(dāng)MS/MS采集速率相同時(shí),MS的采集速率變化對(duì)色譜峰信號(hào)強(qiáng)度影響不大。當(dāng)MS和MS/MS的采集速率分別為3 spectra/s和2 spectra/s時(shí),色譜峰的信號(hào)強(qiáng)度最大(見圖5)。

圖 4 不同固相萃取柱對(duì)27種農(nóng)藥回收率的影響Fig. 4 Effect of different SPE columns on the recoveries of the 27 pesticides

圖 5 不同的一級(jí)質(zhì)譜和二級(jí)質(zhì)譜采集速率組合對(duì)峰面積的影響Fig. 5 Effect of different combinations of MS and MS/MS acquisition rates on the peak areas

2.3 篩查確證分析

實(shí)際樣品在一級(jí)質(zhì)譜模式下測(cè)定,獲得的數(shù)據(jù)由篩查譜庫(kù)篩查。影響篩查結(jié)果的4個(gè)主要因素為精確質(zhì)量偏差、保留時(shí)間偏差、同位素分布和同位素豐度比。在LOQ的添加水平下考察27種目標(biāo)化合物的精確質(zhì)量偏差和保留時(shí)間偏差的數(shù)值,結(jié)果表明,所有化合物的精確質(zhì)量偏差均低于10×10-6(10 ppm), 27種目標(biāo)化合物的日間保留時(shí)間的最大偏差值低于0.30 min。因此將精確質(zhì)量和保留時(shí)間偏差窗口分別設(shè)置為10 ppm和0.30 min。含天然同位素的化合物在質(zhì)譜圖中存在著明顯的同位素峰,如吡蟲啉中含1個(gè)氯原子,同位素峰的m/z為255.205 2和257.049 6,相對(duì)豐度比為3∶1;抑霉唑中含2個(gè)氯原子,同位素峰的m/z為296.048 3、298.045 6和300.043 1,相對(duì)豐度比為9∶6∶1,同位素的分布和相對(duì)豐度比均有特定的規(guī)律。因此，在一級(jí)質(zhì)譜模式下測(cè)定的數(shù)據(jù)使用篩查譜庫(kù)篩查時(shí),可以通過精確質(zhì)量數(shù)、保留時(shí)間、同位素的分布和相對(duì)豐度比在無標(biāo)準(zhǔn)品的情況下對(duì)可能存在的目標(biāo)化合物進(jìn)行準(zhǔn)確篩查。

篩查出的疑似化合物在MS/MS模式下進(jìn)行確證,根據(jù)歐盟2002/657/EC決議,使用高分辨質(zhì)譜作為確證技術(shù)時(shí),檢測(cè)到1個(gè)具有精確質(zhì)量數(shù)的母離子即可獲得2個(gè)確證分?jǐn)?shù),二級(jí)質(zhì)譜中的每個(gè)子離子可獲得2.5個(gè)確證分?jǐn)?shù)。在篩查譜庫(kù)中,每種化合物均有2～3個(gè)特征碎片離子。因此,結(jié)合本文建立的篩查譜庫(kù),27種農(nóng)藥化合物均能被準(zhǔn)確確證。

2.4 基質(zhì)效應(yīng)

基質(zhì)效應(yīng)(matrix effect)是指目標(biāo)分析物以外的其他組分對(duì)測(cè)定值的影響,通常包括基質(zhì)抑制和基質(zhì)增強(qiáng)2種效應(yīng)。當(dāng)使用ESI源時(shí),在離子化過程中基質(zhì)組分與目標(biāo)分析物產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng),更易出現(xiàn)基質(zhì)抑制效應(yīng)。本實(shí)驗(yàn)采用空白基質(zhì)提取液和甲醇配制系列質(zhì)量濃度(5、10、20、50、100 μg/L)的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,以目標(biāo)物響應(yīng)值的峰面積對(duì)質(zhì)量濃度作標(biāo)準(zhǔn)曲線,比較2條標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率,從而判斷基質(zhì)效應(yīng)的存在情況。計(jì)算公式：基質(zhì)效應(yīng)=基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率/溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率[18],當(dāng)比值為0.85～1.15時(shí),基質(zhì)效應(yīng)較弱;當(dāng)比值大于1.15時(shí),存在較強(qiáng)的基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng);當(dāng)比值小于0.85時(shí),存在較強(qiáng)的基質(zhì)抑制效應(yīng)。27種農(nóng)藥中有15種農(nóng)藥的比值在0.85～1.15范圍內(nèi),12種農(nóng)藥的比值小于0.85。為盡可能地減小基質(zhì)效應(yīng)的影響,本實(shí)驗(yàn)采用基質(zhì)匹配法進(jìn)行定量分析。

2.5 方法學(xué)驗(yàn)證

2.5.1 線性范圍和定量限

將27種農(nóng)藥的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液用空白樣品提取液稀釋并配制成不同質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液,以峰面積(Y)對(duì)相應(yīng)的質(zhì)量濃度(X, μg/L)作標(biāo)準(zhǔn)曲線,以10倍信噪比(S/N)計(jì)算定量限(LOQ)。27種目標(biāo)化合物的線性范圍、線性方程、相關(guān)系數(shù)(r)、定量限(LOQ)見表2。27種目標(biāo)化合物在線性范圍內(nèi)的相關(guān)系數(shù)均大于0.995,定量限(LOQ)為2.5～5.0 μg/kg。

表 2 辣椒粉中27種農(nóng)藥的線性范圍、線性方程、相關(guān)系數(shù)(r)和定量限

For Nos.1-27, see Table 1;Y: peak area of quasi-molecular ions;X: mass concentration, μg/L.

表 3 辣椒粉中27種農(nóng)藥的加標(biāo)回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(n=6)

For Nos.1-27, see Table 1.

2.5.2 回收率和精密度

對(duì)陰性辣椒粉樣品進(jìn)行1、2和5倍LOQ添加水平的回收率和精密度試驗(yàn),按1.3節(jié)的方法進(jìn)行預(yù)處理,每個(gè)添加水平做6個(gè)平行樣品,計(jì)算回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)。27種農(nóng)藥的回收率為72.3%～118.9%, RSD為0.21%～12.7%(見表3)。說明該方法回收率高、穩(wěn)定性好,滿足辣椒粉中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)要求。

2.6 實(shí)際樣品的檢測(cè)

利用本方法對(duì)市場(chǎng)上購(gòu)買的10份辣椒粉樣品進(jìn)行檢測(cè),其中1份辣椒粉樣品檢出了甲萘威,含量為50.7 μg/kg。為驗(yàn)證方法的準(zhǔn)確性,采用GB/T 20769-2008標(biāo)準(zhǔn)方法對(duì)上述陽(yáng)性樣品進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果為58.2 μg/kg,與本實(shí)驗(yàn)方法結(jié)果基本一致。

3 結(jié)論

本文結(jié)合固相萃取和UPLC-Q-TOF/MS技術(shù),建立了辣椒粉中27種農(nóng)藥殘留的篩查確證方法。該方法簡(jiǎn)便、高效、靈敏,回收率、重復(fù)性和定量限均能滿足日常檢測(cè)的要求,可同時(shí)對(duì)樣品中的目標(biāo)物進(jìn)行準(zhǔn)確的定性和定量,適用于辣椒粉中多種農(nóng)藥殘留的快速檢測(cè)分析。

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Program of Shandong Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau (No. SK201613); Weifang Science and Technology Development Plan Project (No. 2015ZJ1101).

Rapid screening of 27 pesticide residues in chili powder by ultra performance liquid chromatography coupled with quadrupole-time of flight mass spectrometry

LIU Yongqiang*, LI Kai, XU Wenjuan, GUO Liqiang, SUN Jun

(Weifang Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Weifang 261041, China)

An analytical method was established for the simultaneous determination of 27 pesticide residues in chili powder by ultra performance liquid chromatography coupled with quadrupole-time of flight mass spectrometry (UPLC-Q-TOF/MS). The samples were extracted with acetonitrile, and cleaned-up by solid phase extraction (SPE) with Carb/NH2cartridges, and eluted with acetonitrile-ethyl acetate (3∶1, v/v). The eluent was determined by UPLC-Q-TOF/MS with electrospray ionization in positive mode. The confirmatory analysis was carried out by comparing the retention times, accurate masses, isotope abundance and isotope spacing of all the compounds and fragment ions with Targeted MS/MS. The correlation coefficients (r) were greater than 0.997 in the linear ranges of the 27 pesticides. The limits of quantification (LOQs) of the 27 pesticides were 2.5-5.0 μg/kg. At the three spiked levels, the recoveries were between 72.3% and 118.9%, with the relative standard deviations (RSDs,n=6) ranging from 0.21% to 12.7%. The method is efficient, sensitive and accurate, and can meet the requirement of the determination of the 27 pesticides in chili powder.

ultra performance liquid chromatography-quadrupole-time of flight mass spectrometry (UPLC-Q-TOF/MS); screening; pesticide residues; chili powder

10.3724/SP.J.1123.2016.07007

2016-07-06

山東出入境檢驗(yàn)檢疫局科研課題(SK201613);濰坊市科學(xué)技術(shù)發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(2015ZJ1101).

O658

A

1000-8713(2016)11-1055-08

* 通訊聯(lián)系人.E-mail:liuyongqianga@163.com.