煙草親和性解鉀PGPR菌株篩選及其促生效果研究

龔文秀,曹媛媛,倪海婷,孫樂妮,唐欣昀

安徽農(nóng)業(yè)大學生命科學學院，安徽合肥230000

煙草親和性解鉀PGPR菌株篩選及其促生效果研究

龔文秀,曹媛媛,倪海婷,孫樂妮,唐欣昀

安徽農(nóng)業(yè)大學生命科學學院，安徽合肥230000

【目的】為篩選具有煙草親和性的解鉀PGPR菌株，考察PGPR對煙草生長和葉片鉀含量的作用?！痉椒ā坎捎媒忖浖毦囵B(yǎng)基和煙草凝集素雙重篩選技術(shù)，從健康煙草幼苗根際土壤中篩選具有高促生潛力的煙草親和性解鉀PGPR，測定菌株解鉀能力，選取優(yōu)良解鉀菌株進行盆栽接種試驗，調(diào)查PGPR對煙株生長影響，并測定葉片含鉀量?！窘Y(jié)果】煙草親和性細菌占全部菌株數(shù)量的84.11%；18株P(guān)GPR的解鉀能力、產(chǎn)IAA、產(chǎn)鐵載體能力較強；其中7株P(guān)GPR能顯著促進煙草幼苗根系生長發(fā)育，促進根系和地上部分干物質(zhì)量積累，具有較大的促生長潛力。11株P(guān)GPR能促進植株對鉀素的吸收，使煙草葉片含鉀量顯著高于施用同樣水平鉀肥的對照，達到施用100%鉀肥處理的水平。經(jīng)綜合評價，TK11、TK32、TK54、TK84、TK89 共5株高效煙草親和性菌株具有進一步研究和應(yīng)用的潛力。5株高效PGPR經(jīng)鑒定分屬5個屬，具有豐富的多樣性。【結(jié)論】煙草凝集素可作為篩選高效專用PGPR的有效工具，獲得的5株優(yōu)良PGPR為研發(fā)煙草專用生物鉀肥提供了可靠材料。

煙草；解鉀能力；親和性；PGPR；葉片鉀含量

我國烤煙平均鉀含量僅為1.3%[1]，遠低于優(yōu)質(zhì)煙含鉀量高于2.5%的要求[2]，不能滿足生產(chǎn)高品質(zhì)煙草的需求。鉀素影響煙葉的生長、品質(zhì)和可用性[3]，煙葉含鉀量與根際土壤速效鉀含量極顯著正相關(guān)[4]。硫酸鉀和硝酸鉀等化學鉀肥施用促進了煙草的生產(chǎn)，但作物對化肥的平均利用率只有30%左右。施用硫酸鉀使硫素進入土壤，過量的SO42-會抑制煙草生長[5]，影響煙葉燃燒性和烤煙品質(zhì)[6]。過量使用化肥導致資源、能源的浪費，并產(chǎn)生嚴重的環(huán)境污染。

植物根際促生菌（Plant growth promoting rhizobacteria，PGPR）是一類存活在植物根際，可促進植物生長、防治病害、增加作物產(chǎn)量的有益菌群[7]。PGPR可以合成促進植物根系生長發(fā)育的吲哚-3-乙酸（Indole-3-acetic acid，IAA）[8,9]和具有生物防治相關(guān)性的鐵載體（Siderodhore）[10,11]，并能夠溶解土壤中的礦物態(tài)元素[12,13]等。土壤中全鉀含量很高，但作物可直接吸收利用的速效鉀僅占全鉀的1%～10%；鉀素多以鉀長石、伊利石等礦石形態(tài)存在，不能被作物直接吸收。已有一些研究利用土壤中解鉀細菌制作生物肥料施到田間，增加土壤中速效鉀濃度，減少鉀肥的施用量。但是，由于生物肥料和目標作物之間缺乏親和性，兩者不能相互識別進而產(chǎn)生穩(wěn)定的關(guān)系，解鉀細菌不能有效地在作物根部定居，造成施用效果波動。因此，需要篩選到與目標作物具有親和性的PGPR，以生產(chǎn)目標作物專用的生物肥料。凝集素（Lectin）是一種具有識別專一性的糖結(jié)合糖蛋白。植物凝集素參與細胞-細胞識別[14]，可以介導植物促生細菌定殖于植物根部和抵御病原菌對植物的侵害[15]。目前為止尚沒有關(guān)于對煙草具有親和性的專用解鉀細菌的研究和應(yīng)用。

本研究以凝集素為介導篩選煙草親和性解鉀PGPR，考察煙草PGPR的解鉀能力等促生生理活性，了解其對煙草生長和葉片鉀含量的影響，以期獲得具有煙草親和性的解鉀PGPR，為研究特定作物專用生物肥料、保護農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境和實現(xiàn)農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展提供試驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

煙草樣品：從煙草大田挖取健康煙草苗完整根系及根際土壤。

兔血：安徽農(nóng)業(yè)大學動物科技學院提供。

煙草種子：云煙97品種，由安徽省農(nóng)業(yè)科學院煙草研究所提供。

黃褐土（g·kg-1）：總氮1.11，有機質(zhì)21.33，有效磷(P2O5) 0.0315，速效鉀(K2O) 0.154。

有機基質(zhì)營養(yǎng)土：購于淮安市春山基質(zhì)肥廠。

1.2 培養(yǎng)基、試劑

牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、解鉀細菌培養(yǎng)基[16]、細菌解鉀作用試驗培養(yǎng)基[12]、MKB培養(yǎng)基[10]、含0.5 g·L-1L型色氨酸的King B培養(yǎng)基[17]、鉀長石（標準品）、CAS檢測液[18]、Salkowski’s反應(yīng)液[19]。

1.3 煙草凝集素提取及活性

取5 g煙草種子置于清水中室溫浸泡10 h，搓種除去種皮蠟質(zhì)，研磨，4 ℃條件下提取凝集素。種子中加入25 mL預冷石油醚，脫脂14 h；加50 mL預冷PBS （磷酸鹽緩沖液：0.01 mol·L-1，pH 7.2，0.15 mol·L-1NaCl，下同），混勻，浸提24 h；吸取中間水相，10000 r·min-1離心20 min，上清即為粗提液；冰浴，待石油醚揮發(fā)完全后，0.2 μm微孔濾膜過濾除菌，4℃保藏備用。

按文獻[20]方法用PBS配成2% 血細胞懸液，4℃保存?zhèn)溆?。采用玻片法檢測凝集素的凝血活性，在玻片凹形孔中加20 μL凝集素粗提液，再加20 μL 2%血細胞懸液，混勻，室溫靜置10 min，低倍鏡檢。用PBS代替凝集素溶液做空白對照。對有凝血活性的煙草凝集素進行凝血效價檢測[21]。

1.4 煙草根際細菌篩選

稱取1 g帶有微量根際土壤的煙草苗幼根，加到100 mL無菌生理鹽水中，加入50 μL吐溫-80，120 r.min-1振蕩1 h。制備解鉀細菌培養(yǎng)基（制霉菌素終濃度30 mg.L-1），采用稀釋平板法分離解鉀細菌菌株，28 ℃培養(yǎng)72 h；挑取水滴狀、透明圈較大的菌株，分離純化，選取長勢較好的菌株保藏，待進一步研究。

1.5 凝集素親和性菌株篩選

將分離保藏的煙草根際土壤細菌接種至牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，160 r·min-128 ℃下培養(yǎng)至對數(shù)期，離心收集菌體，蒸餾水洗滌后制成終濃度為108CFU·mL-1菌懸液備用。取干凈載玻片，在玻片凹形孔中加20 μL凝集素粗提液，再加入等量菌懸液，混勻，室溫下保濕反應(yīng)30 min后自然干燥，結(jié)晶紫簡單染色后鏡檢。煙草凝集素浸提緩沖液代替煙草凝集素粗提液做空白對照。選取煙草凝集素親和性陽性菌株保藏備用。

1.6 煙草根際細菌促生長特性評估

參考盛下放等的試驗方法[12]，利用細菌解鉀作用試驗培養(yǎng)基進行搖瓶試驗，過氧化氫灰化法處理發(fā)酵液，采用火焰分光光度計法測定PGPR解鉀能力。參考王平等[10]方法測定煙草根際促生細菌產(chǎn)鐵載體能力。參照文獻[8]方法，利用 King B液體培養(yǎng)基（含0.5 g.L-1L型色氨酸）培養(yǎng)各菌株，采用Salkowski比色法，測定煙草根際促生細菌合成 IAA能力。

1.7 根際促生細菌對煙草幼苗的促生長作用

浸種：煙草種子用蒸餾水室溫浸泡8～10 h，去掉漂浮的種子和雜質(zhì)；消毒：將洗凈的種子用75%乙醇處理30 s，無菌蒸餾水洗凈，再置于10% H2O2中浸泡8 min，無菌蒸餾水清洗；催芽：置于28 ℃人工氣候箱中光暗比16 : 8催芽至煙草種子露白。

菌液處理種子：將供試菌株接種至牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中，28 ℃ 160 r·min-1培養(yǎng)至穩(wěn)定期。菌液處理露白的煙草種子45 min，無菌蒸餾水清洗3次。同時取滅菌牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基同等條件處理露白煙草種子作對照。

花盆（? 96 mm×110 mm）中裝有150 g有機基質(zhì)營養(yǎng)土，第盆播種5～10顆種子，最終保留2株煙草苗，設(shè)3次重復；煙草置于25 ℃，光暗比16 : 8的條件下培養(yǎng)32 d至長出第5片真葉、根系活躍、發(fā)育較完整時取出完整植株。使用EPSON Perfection V700/750根系掃描儀掃描植株根系，采用WinRHIZO根系分析專業(yè)版軟件分析實驗數(shù)據(jù)；分別將地上部分和地下部分烘干至恒重，測干重。

1.8 根際促生細菌對煙草葉片鉀含量的影響

采用盆栽法檢測煙草PGPR對煙草葉片鉀含量的影響。所有土壤施肥（g·kg-1土） CO(NH2)20.676、(NH4)2HPO40.0369，第盆裝黃褐土2.5 kg，土壤含水量以田間持水量的50%計。實驗設(shè)置3次重復。設(shè)置2個鉀肥施用梯度（g KCl /kg土）：CK1 0.134，CK2 0.267，實驗組0.134，以CK2鉀肥施用量為參考（100%），CK1和實驗組鉀肥施用量為50%。

煙草種子消毒、催芽同1.7，第盆播種5～10顆種子。實驗組第盆加1 mL菌懸液（同前）處理種子，對照組第盆加1 mL滅菌牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基處理種子，覆土；3 d后出苗整齊，第盆留1株苗。盛花期打頂后，收獲煙草植株，烘干至恒重。采用火焰分光光度計法[22]測煙草中部葉葉片含鉀量,對數(shù)據(jù)進行單因素方差分析。

1.9 煙草根際促生菌株鑒定

據(jù)《常見細菌系統(tǒng)鑒定手冊》[23]和《伯杰氏細菌鑒定手冊》第9版[24]，對篩選得到的煙草根基促生細菌菌株進行形態(tài)和生理生化鑒定。采用PCR技術(shù)擴增各菌株16S rDNA，PCR產(chǎn)物由生工生物工程（上海）股份有限公司測序，在NCBI核酸數(shù)據(jù)庫進行BLAST比對，結(jié)合形態(tài)及生理生化特征判定種屬。

2 結(jié)果與分析

2.1 菌株篩選

煙草凝集素凝集兔血細胞如圖1所示，在視野范圍內(nèi)，實驗組兔血細胞凝集成團，分布不均勻，而空白對照組兔血細胞均勻分布，結(jié)果表明煙草凝集素具有凝血活性。經(jīng)檢測，煙草粗凝集素提液凝集兔血細胞的最高效價為26。

煙草凝集素凝集煙草PGPR活性如圖1所示，在視野范圍內(nèi)，部分菌株凝聚成團，呈陽性，而空白對照組細菌均勻分布。

利用解鉀選擇培養(yǎng)基從健康煙草苗根部初步篩選獲得101株解鉀菌。根據(jù)煙草凝集素對煙草PGPR的親和性差異，85株對煙草凝集素呈現(xiàn)陽性反應(yīng)，占篩選PGPR總數(shù)84.11%，這些菌株即為對煙草具有親和性的特異性菌株。

2.2 煙草根際細菌促生長特性測定

測定85株煙草凝集素凝集反應(yīng)陽性菌株的促生長特性，85株供試PGPR均有不同程度的解鉀能力。挑選出18株具有較強解鉀能力的菌株進行后續(xù)實驗。

18株供試PGPR培養(yǎng)液中鉀含量遠高于對照組，菌株之間解鉀能力存在顯著差異，供試PGPR發(fā)酵液中鉀含量相對增加量在36.96%～253.55%之間。不同PGPR菌株產(chǎn)鐵載體能力和IAA能力也存在明顯差異。

圖1 煙草凝集素與兔血細胞和PGPR菌株的凝集反應(yīng)Fig.1 Agglutination of tobacco lectin with rabbit blood cells and strains

表1 18株菌的促生長特性Tab.1 Plant growth-promoting traits of 18 strains

續(xù)表1

2.3 煙草根際細菌促生長研究

觀察各菌株對煙草幼苗生長的影響（表2），發(fā)現(xiàn)13株P(guān)GPR顯著促進根系干物質(zhì)量積累，其中9株效果極顯著；7株P(guān)GPR顯著促進地上部分干物質(zhì)量積累，其中2株效果極顯著；7株P(guān)GPR顯著促進植株總干物質(zhì)量積累，其中3株效果極顯著。6株P(guān)GPR顯著促進根系干物質(zhì)量積累，但沒有顯著促進地上部分干重積累；7株P(guān)GPR促生效果顯著，顯著促進植株根系和地上部分干物質(zhì)量積累，占菌株數(shù)量的38.89%。

進一步分析試驗菌株對煙草幼苗根系生長發(fā)育的影響，結(jié)果見表3?？疾炝薖GPR菌株對根系的總表面積、總體積、總長度、平均直徑、根尖數(shù)、分枝數(shù)共6個指標的影響程度，發(fā)現(xiàn)11株顯著促進總根長增加，其中9株作用極顯著；13株顯著促進根系總表面積和總體積增加，其中10株作用極顯著；3株顯著促進根系平均直徑增大，其中2株作用極顯著；9株顯著促進根系根尖數(shù)增加；7株顯著促進根系分枝數(shù)增加，其中4株作用極顯著；11株顯著促進根系交叉數(shù)增加，其中7株作用極顯著。12株P(guān)GPR顯著促進指標達到3個及以上，占總菌株數(shù)量的66.67%。

供試菌株對煙草幼苗的根系數(shù)量的影響見表4。5株P(guān)GPR明顯促進煙草根系總數(shù)量的增加，2株達到顯著水平，3株達到極顯著水平。進一步分析表明這種效果是表現(xiàn)在對根系二級側(cè)根的影響方面，而對一級側(cè)根數(shù)量影響不顯著。

試驗結(jié)果初步說明煙草PGPR能有效促進煙草根系發(fā)育，促進煙草生長和干物質(zhì)量的積累。分析IAA和煙草幼苗根系之間的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)IAA與考察指標均不相關(guān)，可能是PGPR多個促生長特性同時影響植物根系的生長發(fā)育。

表2 PGPR對煙草幼苗干物質(zhì)積累量的影響Tab. 2 Effects of tobacco PGPR on dry matter accumulation of tobacco seedlings

表3 PGPR對煙草幼苗根系生物量的影響Tab.3 Effects of tobacco PGPR on root parameters of tobacco seedlings

表4 PGPR對煙草幼苗根系數(shù)量的影響Tab.4 Effects of tobacco PGPR on root number of tobacco seedlings

2.4 菌株對葉片鉀含量的影響

試驗菌株對煙草葉片含鉀量的影響見表5。PGPR處理煙草葉片含鉀量高于同樣施50%鉀肥的CK1，其中14株效果顯著，10株效果極顯著；13株P(guān)GPR處理煙草葉片含鉀量高于施100%鉀肥的CK2，效果與CK2相當。初步說明，煙草PGPR可以代替部分鉀肥提高煙草葉片含鉀量。

表5 煙草PGPR對煙草葉片含鉀量的影響Tab.5 Effects of tobacco PGPR on potassium content of tobacco leaves

分析18株P(guān)GPR的解鉀能力與煙葉含鉀量之間的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)二者之間無顯著相關(guān)性。解鉀能力不是唯一影響煙葉含鉀量和煙草根際土壤鉀素營養(yǎng)的因素，PGPR的其他特性也影響煙草對鉀素的吸收和利用。

分析分類學上相近屬內(nèi)菌株的解鉀能力（發(fā)酵液鉀素濃度）和葉片鉀含量的關(guān)系，以降低PGPR其他特性對煙草葉片含鉀量的影響，結(jié)果如表6所示。芽孢桿菌屬和類芽孢桿菌屬細菌的解鉀能力與煙草葉片含鉀量顯著正相關(guān)（P＜0.05）；假單胞菌屬和鞘氨醇單胞菌屬細菌的解鉀能力與煙草葉片含鉀量中度負相關(guān)，相關(guān)系數(shù)0.5≤|r|＜0.8。

2.5 親和性菌株鑒定

18株煙草PGPR形態(tài)特征及部分生理生化特征研究及16s rDNA鑒定，結(jié)果如表7所示。18株煙草PGPR分屬7個屬，具有豐富的多樣性。

表7 煙草PGPR鑒定結(jié)果Tab.7 Identi fi cation of tobacco PGPR

3 討論

凝集素與微生物的根際定殖密切相關(guān)。Antonyuk等認為麥胚凝集素在固氮螺菌和植物之間的通訊中起到重要作用[25]，Yegorenkova等研究發(fā)現(xiàn)巴西固氮螺菌(Azospirillum brasilense)在小麥根部的定殖可能涉及麥胚凝集素與細菌多糖之間的識別和交聯(lián)[26]。夏覓真和齊飛飛等研究PGPR在棉花根際的定殖證實凝集素可作為篩選特異親和性的高效PGPR菌株工具，可以篩選易于在特定植物根際定殖的PGPR菌株[27,28]。本研究利用解鉀細菌培養(yǎng)基和煙草凝集素雙重技術(shù)，從健康煙草幼苗根際初步篩選獲得煙草親和性PGPR，結(jié)果顯示煙草凝集素特異親和陽性菌株數(shù)量占初篩菌株的84.11%，獲得大量煙草親和性菌株。本研究獲得18株具有解鉀活性的煙草PGPR菌株，分屬7個屬，其中芽孢桿菌屬(Bacillussp.)、類芽孢桿菌屬(Paenibacillussp.)、假單胞菌屬(Pseudomonassp.)為已經(jīng)報道的解鉀細菌類群[12,16,27-30]；而微桿菌屬(Microbacteriumsp.)[31]、鞘氨醇單胞菌屬(Sphingomonassp.)[32]、短小桿菌屬(Curtobacteriumsp.)、鏈霉菌屬(Streptomycessp.)[33]等4屬為本試驗首次證明具有較強的解鉀活性。本研究結(jié)果大幅度增加了解鉀細菌的類群范圍，說明植物根際解鉀細菌資源具有豐富的多樣性。因此采用煙草凝集素能夠獲得大批對煙草具有親和性的可在其根際定殖的PGPR菌株。

植物根系與營養(yǎng)的吸收利用直接相關(guān)，在植物生長發(fā)育過程中具有重要的作用，最終影響著地上部分的生長發(fā)育。根系表面積及根尖數(shù)影響根系對土壤養(yǎng)分的吸收利用。PGPR可以產(chǎn)生植物激素（IAA、CTK、GA等），對根構(gòu)型有明顯調(diào)節(jié)作用，促進根尖細胞周期蛋白基因的表達、驅(qū)動側(cè)根發(fā)生和伸長[8,9]。PGPR促進礦質(zhì)元素的釋放[13]、產(chǎn)生鐵載體[11]等活性也與植物的根際營養(yǎng)密切相關(guān)。本試驗考察了煙草PGPR菌株對根系的總表面積、總體積、總長度、平均直徑、根尖數(shù)、分枝數(shù)共6個指標的影響程度，發(fā)現(xiàn)12株顯著促進指標達到3個以上，7株煙草PGPR顯著促進二級側(cè)根數(shù)量的增加。13株P(guān)GPR顯著促進根系干物質(zhì)量積累，其中有7株P(guān)GPR能顯著促進煙草幼苗根系、地上部分和植株總干重積累。試驗獲得7株具有顯著促生效果的PGPR菌株，占總菌株數(shù)量的38.89%。

解鉀細菌能釋放土壤礦物鉀，提高土壤中速效鉀含量[12]。根際土壤速效鉀與煙葉含鉀量極顯著正相關(guān)[4]。使用18株P(guān)GPR菌株接種處理的煙草葉片含鉀量均高于施用50%鉀肥的對照，其中14株效果顯著，13株煙草PGPR處理的煙草葉片含鉀量在不同程度上高于施用100%鉀肥的對照，說明解鉀PGPR菌株能夠促進煙草對土壤鉀素的吸收和利用。試驗獲得11株P(guān)GPR能促進植株對鉀素的吸收，大幅度提高煙草葉片含鉀量。

綜合評價對煙草生長和葉片含鉀量的影響等特性，TK11、TK32、TK54、TK84、TK89 共5株高效煙草親和性菌株具有優(yōu)良的促生生理活性和促生效果，具備在煙草栽培生產(chǎn)中應(yīng)用的潛力。經(jīng)鑒定，這5株高效PGPR分屬5個屬，其中芽孢桿菌屬(Bacillussp.)、假單胞菌屬(Pseudomonassp.)、類芽孢桿菌屬(Paenibacillus sp.)是常見煙草高效解鉀菌[29,30]；而鞘氨醇單胞菌屬(Sphingomonassp.)、短小桿菌屬(Curtobacteriumsp.)等為本試驗首次證明具有較強解鉀活性的類群。

4 結(jié)論

采用凝集素作為介導復篩煙草PGPR的方法具有可行性，本方法可提高獲得易于在目標植株根部定殖的PGPR概率，大量獲得對目標作物具有專一性的優(yōu)良PGPR菌株。綜合評價對煙草生長和葉片含鉀量的影響等特性，TK11、TK32、TK54、TK84、TK89 共5株高效煙草親和性菌株具有進一步研究和應(yīng)用的潛力。5株優(yōu)良PGPR為研發(fā)煙草專用生物鉀肥提供可靠材料，但不同PGPR菌株促生效果有差異，土壤差異可能會影響解鉀細菌的使用效果，需要進一步考察這些菌株在田間栽培使用中的表現(xiàn)，以提供可靠的煙草專用解鉀生物肥料菌株。

致謝

安徽農(nóng)業(yè)大學農(nóng)學院朱英華老師和武麗老師對本試驗多次給予指導，特此致謝。

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Screening of af fi nity PGPRs from tobacco root and their growth-promotion effects on tobacco

GONG Wenxiu, CAO Yuanyuan, NI Haiting, SUN Leni, TANG Xinyun
College of Life Science, Anhui Agricultural University, Hefei 230036, China

[Objective] This paper aims to screen affinity potassium-solubilizing bacteria PGPR strains from tobacco, and to examine their e ff ects on growth and potassium content in leaf tobacco. [Method] Potassium-solubilizing bacteria culture and tobacco lectin methods were applied, and tobacco affinity potassium-solubilizing strains with a high potential for growth-promoting were selected from healthy tobacco seedlings rhizosphere soil. Strains with excellent potassium-solubilizing capability were selected by the potassium-solubilizing capability. E ff ects of the strains on growth and potassium content in leaf tobacco were investigated with pot experiment. [Result] The number of tobacco-affinity bacteria accounted for 84.11% of all isolates; 18 PGPR had strong capacity to solubilize potassium, and produced IAA and siderophore. Seven PGPR strains signi fi cantly promoted root growth and the accumulation of root and aerial parts dry matter of tobacco seedling. Eleven PGPR strains helped plant absorb more potassium, substantially increase potassium content in tobacco leaves. Potassium contents in tobacco leaves treated with these strains were much higher than those of the control with same level of potassium fertilizer dose, and even higher than those of control with 100% potassium fertilizer application. Being evaluated comprehensively with the parameters of the promotion on growth and potassium content of tobacco leaf and other characteristics, TK11, TK32, TK54, TK84 and TK89 were considered efficient affinity tobacco strains, and had the potential for further research and applications. Five efficient PGPR were identi fi ed and categorized into 5 genera.[Conclusion] Tobacco lectin can be used as an e ff ective tool for screening high-efficiency tobacco PGPR, and 5 excellent PGPR obtained provide a reliable material for the development of the tobacco-speci fi c potassium-solving fertilizer.

tobacco; potassium solving ability; affinity; PGPR; potassium content of leaf

龔文秀,曹媛媛,倪海婷,等. 煙草親和性解鉀PGPR篩選及促生效果研究[J]. 中國煙草學報，2016,22（1）

國家自然基金(No. 41401269)、安徽省高校青年基金重點項目(No. 2013SQRL015ZD)、安徽農(nóng)業(yè)大學穩(wěn)定和引進人才基金（No.yj2011-25）、安徽農(nóng)業(yè)大學校青年科研基金（No. 2012zr006）

龔文秀（1989—），碩士，微生物生理學研究方向，Email：gong.wenxiu@163.com

曹媛媛（1980—），副教授，微生物生理學研究方向，Email：caoyy721@sina.com

2015-04-07

: GONG Wenxiu, CAO Yuanyuan, NI Haiting, et al. Screening of affinity PGPRs from tobacco root and their growth-promotion e ff ects on tobacco [J]. Acta Tabacaria Sinica, 2016,22(1)