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    加酶擠壓處理玉米淀粉對低聚異麥芽糖產(chǎn)量的影響

    2016-11-15 01:09:30潔吳春森韌金征宇徐學(xué)明焦愛權(quán)
    食品與機(jī)械 2016年9期
    關(guān)鍵詞:麥芽糖淀粉酶產(chǎn)物

    葛 潔吳春森 王 瀅 王 韌金征宇 徐學(xué)明 焦愛權(quán) 周 星

    (1. 江南大學(xué)食品科學(xué)與技術(shù)國家重點實驗室,江蘇 無錫 214122;2. 江南大學(xué)食品學(xué)院,江蘇 無錫 214122;3. 江南大學(xué)食品安全與營養(yǎng)協(xié)同創(chuàng)新中心,江蘇 無錫 214122)

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    加酶擠壓處理玉米淀粉對低聚異麥芽糖產(chǎn)量的影響

    葛 潔1,2吳春森1,2王 瀅1,2王 韌1,2金征宇2,3徐學(xué)明1,3焦愛權(quán)1,3周 星1,3

    (1. 江南大學(xué)食品科學(xué)與技術(shù)國家重點實驗室,江蘇 無錫 214122;2. 江南大學(xué)食品學(xué)院,江蘇 無錫 214122;3. 江南大學(xué)食品安全與營養(yǎng)協(xié)同創(chuàng)新中心,江蘇 無錫 214122)

    采用加酶擠壓技術(shù)處理玉米淀粉,以擠出產(chǎn)物制備低聚異麥芽糖。以異麥芽糖(IG2)、潘糖(P)、異麥芽三糖(IG3)含量之和作為低聚異麥芽糖產(chǎn)量指標(biāo),通過正交試驗優(yōu)化相關(guān)參數(shù),確定最優(yōu)的加酶擠壓工藝(擠壓過程中擠壓溫度為95 ℃,擠壓物料含水量為45%,擠壓加酶量為0.8%)。通過上述參數(shù)進(jìn)行試驗所得的低聚異麥芽糖產(chǎn)量最高可達(dá)35%以上。

    α-淀粉酶;擠壓;玉米淀粉;低聚異麥芽糖

    低聚異麥芽糖(Isomalto-oligosaccharides, IMOs)是一種分支性功能低聚糖,葡萄糖單位間至少有一個α-1,6糖苷鍵連接而成[1]。作為食品添加劑可以降低甜度,改善口感;在酸性和高溫條件下較穩(wěn)定;保濕能力強(qiáng);不易被微生物利用,所提供的能量較低;低聚異麥芽糖屬于非消化性低聚糖,是益生菌的增值因子,能促進(jìn)改善腸道菌群,提高生理機(jī)能[2-3]。因其特殊的生理功能,已被廣泛運(yùn)用在食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。目前,低聚異麥芽糖的生產(chǎn)主要是以淀粉為原料,通過噴射液化的方式對原料進(jìn)行液化預(yù)處理,再經(jīng)糖化和轉(zhuǎn)苷等步驟實現(xiàn)低聚異麥芽糖的生產(chǎn)[4-6]。然而利用此法,在高壓噴射處理階段存在著蒸汽使用量大、處理原料濃度低、能耗大等問題。因此,尋求一種高效率、低能耗的生產(chǎn)方式將大有前途[7]。早先就有提出將擠壓機(jī)作為連續(xù)生物反應(yīng)器用于生產(chǎn)的概念,將擠壓技術(shù)運(yùn)用在淀粉糖的生產(chǎn)中,則具有零蒸汽消耗、所處理的淀粉濃度可達(dá)50%以上、設(shè)備要求低等優(yōu)點,是一種有效降低能耗,綠色環(huán)保的淀粉糖生產(chǎn)方式[8-10]。高溫高剪切的擠壓條件可以有效糊化、降解淀粉,擠壓時添加耐熱型的α-淀粉酶能進(jìn)一步液化降解淀粉,使淀粉黏度下降,有利于調(diào)漿等后續(xù)操作[11-15]。

    綜上,考慮將擠壓技術(shù)運(yùn)用于低聚異麥芽糖的生產(chǎn)。本試驗研究了將加酶擠壓技術(shù)代替?zhèn)鹘y(tǒng)的噴射液化對玉米淀粉進(jìn)行處理,并將擠壓產(chǎn)物用于低聚異麥芽糖的生產(chǎn),考察了擠壓溫度、物料水分含量、擠壓加酶量3種擠壓參數(shù)對淀粉降解及最終低聚異麥芽糖產(chǎn)量的影響。根據(jù)正交試驗確定了加酶擠壓處理玉米淀粉生成低聚異麥芽糖的最優(yōu)生產(chǎn)工藝參數(shù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與儀器

    1.1.1 材料與試劑

    玉米淀粉:食品級,市售;

    耐高溫α-淀粉酶、普魯蘭酶、真菌α-淀粉酶、β-淀粉酶:丹麥Novozymes公司;

    α-葡萄糖苷轉(zhuǎn)移酶:日本Amano酶制劑公司;

    潘糖標(biāo)品、異麥芽糖標(biāo)品、異麥芽三糖標(biāo)品:美國Sigma化學(xué)試劑公司;

    乙腈:色譜純,天津賽孚瑞科技有限公司;

    3,5-二硝基水楊酸:化學(xué)純,國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;

    氫氧化鈉、苯酚等:分析純,國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

    1.1.2 主要儀器設(shè)備

    電熱恒溫震蕩搖床:DKZ型,上海一恒科技有限公司;

    高效液相色譜儀:LC-20A型,島津公司;

    高效液相柱:APS-2 HYPERSIL型,賽默飛世爾科技有限公司;

    雙螺桿擠壓機(jī):POLYLAB型,美國賽默飛世爾科技公司;

    紫外—可見光度計:SP-2102UV型,上海光譜儀器有限公司。

    1.2 試驗方法

    1.2.1 玉米淀粉加酶擠壓試驗 主要對擠壓溫度、物料水分含量、耐熱性α-淀粉酶的添加量三個因素對加酶擠壓淀粉生產(chǎn)低聚異麥芽糖的影響進(jìn)行討論。根據(jù)試驗要求,分別調(diào)節(jié)原料玉米淀粉水分含量(質(zhì)量分?jǐn)?shù))為35%,40%,45%,相應(yīng)添加質(zhì)量比為0.0%,0.1%,0.5%,0.8%,1.0%含量的耐熱型α-淀粉酶,擠壓物料混合均勻后,放于4 ℃冰箱內(nèi)平衡水分12 h。擠壓溫度分別設(shè)定為75,85,95,105 ℃進(jìn)行原料淀粉的擠壓試驗,其中螺桿轉(zhuǎn)速均為150 r/min,喂料速率均為200 kg/h。

    1.2.2 擠壓產(chǎn)物糖化轉(zhuǎn)苷生成低聚異麥芽糖 取適量擠壓產(chǎn)物加入pH 4.0的醋酸鹽緩沖液中,沸水浴滅酶10 min,滅酶后的擠壓產(chǎn)物加水調(diào)漿至物料濃度(質(zhì)量分?jǐn)?shù))為30%,pH調(diào)為5.5,分別添加20 U/g真菌α-淀粉酶、20 U/gβ-淀粉酶及10 U/g普魯蘭酶,置于55 ℃的水浴搖床中震蕩反應(yīng),糖化2 h后添加30 U/gα-轉(zhuǎn)移葡糖糖苷酶,反應(yīng)48 h后沸水浴滅酶,取樣分析低聚異麥芽糖含量。

    1.2.3 擠壓產(chǎn)物DE值測定 擠壓產(chǎn)物經(jīng)滅酶、稀釋處理,4 500 r/min離心15 min,取上清,利用DNS法測定540 nm處吸光度值,計算還原糖含量,進(jìn)一步計算得到擠壓產(chǎn)物的葡萄糖當(dāng)量值(DE值)[16]。

    (1)

    1.2.4 低聚異麥芽糖含量測定 利用高效液相色譜法對糖液進(jìn)行組分分析,流動相為水—乙腈混合液,水與乙腈的體積比為20∶80,流速1 mL/min,采用示差檢測,柱溫30 ℃,低聚異麥芽糖(IMOS)含量以異麥芽糖(IG2)、潘糖(P)、異麥芽三糖(IG3)總和進(jìn)行表示[17]。

    1.2.5 加酶擠壓玉米淀粉生產(chǎn)低聚異麥芽糖正交試驗 在單因素試驗結(jié)果基礎(chǔ)上,采用正交試驗方法,優(yōu)化加酶擠壓生產(chǎn)低聚異麥芽糖中擠壓操作單元。

    2 結(jié)果與討論

    2.1 擠壓溫度對擠壓產(chǎn)物DE值和低聚異麥芽糖產(chǎn)量的影響

    高溫剪切可促進(jìn)淀粉糊化,利于高溫α-淀粉酶作用,但過高的擠壓溫度不僅會使酶活性降低甚至失活,在試驗中發(fā)現(xiàn),同時也會導(dǎo)致擠壓產(chǎn)物顏色變深生成不良產(chǎn)物,因此選擇擠壓溫度在75~105 ℃為宜。由圖1可知,在高溫高壓的擠壓剪切條件下有利于淀粉糊化降解,α-淀粉酶的添加可以使糊化的淀粉發(fā)生進(jìn)一步的降解,隨擠壓溫度增加擠壓產(chǎn)物DE值逐漸增加,當(dāng)溫度升至105 ℃時,相應(yīng)的DE值略有降低,這主要是在相同的擠壓條件下,擠壓溫度的變化會進(jìn)一步影響淀粉糊化以及耐熱型α-淀粉酶的活性。隨著溫度的提高,耐高溫α-淀粉酶的活性逐漸升高,這有利于促進(jìn)淀粉降解,進(jìn)一步提高擠壓溫度,淀粉酶會出現(xiàn)部分失活,從而使淀粉水解程度降低,DE值降低。對不同擠壓溫度條件下的樣品分別進(jìn)行糖化轉(zhuǎn)苷試驗,由所得的低聚異麥芽糖含量可知,隨著擠壓溫度的升高,低聚異麥芽的產(chǎn)量呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢,結(jié)合淀粉DE值變化情況分析,這可能是在加酶擠壓處理的過程中,淀粉發(fā)生糊化、降解,大顆粒的淀粉被降解為小的淀粉鏈,小片段淀粉可作為后續(xù)反應(yīng)中糖化酶及轉(zhuǎn)苷酶的作用底物,利于低聚異麥芽糖的生成。

    2.2 物料水分含量對擠壓產(chǎn)物DE值和低聚異麥芽糖產(chǎn)量的影響

    物料水分含量過低,會使淀粉在擠壓剪切過程中不易糊化,甚至在擠壓過程中造成堵料現(xiàn)象,影響機(jī)器正常運(yùn)行。同時,在擠壓過程中添加的酶制劑也需要一定的水分含量才能正常發(fā)揮其水解作用。因此,在擠壓處理過程中,提高物料淀粉的水分含量將有利于促進(jìn)淀粉糊化,提高酶利用率,有效降低擠壓產(chǎn)物的黏度。然而,水分含量過高不利于剪切過程中摩擦力的產(chǎn)生,使擠壓機(jī)剪切能力降低,不利于淀粉糊化水解,降低了擠壓剪切效率。因此,本試驗選擇擠壓物料水分含量在35%~45%。由圖2可知,試驗所涉及的物料水分含量對擠壓產(chǎn)物的DE值影響不大,隨著水分含量的增加物料的DE值只有略微增加,基本在55左右。提高物料水分含量可以使淀粉充分糊化,另外,由于酶促反應(yīng)也需要水分參與,水分含量的提高會加速酶反應(yīng),促進(jìn)淀粉水解。但同時,水分含量的增加會使擠壓機(jī)剪切能力降低,不利于淀粉糊化水解,因此需控制適當(dāng)?shù)奈锪纤趾?。在試驗所選擇的物料水分含量范圍內(nèi),隨著物料的水分含量的增加,擠壓淀粉轉(zhuǎn)化生成的低聚異麥芽糖產(chǎn)量越高,最高可達(dá)129 mg/mL,說明隨水分含量增加,酶解擠壓降解的淀粉產(chǎn)物有利于轉(zhuǎn)化生產(chǎn)低聚異麥芽糖。

    圖1 擠壓溫度對擠壓產(chǎn)物葡萄糖當(dāng)量和低聚異麥芽糖產(chǎn)量的影響

    Figure 1 Effect of extrusion temperature on dextrose equivalent and isomalto-oligosaccharides content

    圖2 物料水分含量對擠壓產(chǎn)物葡萄糖當(dāng)量和

    Figure 2 Effect of feed moisture content on dextrose equivalent and isomalto-oligosaccharides content

    2.3 加酶量對擠壓產(chǎn)物DE值和低聚異麥芽糖產(chǎn)量的影響

    高溫高剪切的擠壓條件可以促進(jìn)淀粉糊化降解,在擠壓過程中添加酶制劑可以促進(jìn)淀粉進(jìn)一步液化降解,降低淀粉黏度。因此,選擇在擠壓時添加耐熱型α-淀粉酶,該酶可以適用于試驗條件下擠壓機(jī)內(nèi)的高溫環(huán)境,酶解淀粉,促進(jìn)水解,有效降低淀粉黏度,利于后續(xù)調(diào)漿糖化。由圖3可知,隨著耐熱型α-淀粉酶添加量的提高,淀粉水解程度增加,DE值逐漸升高。同時隨著擠壓加酶量的提高低聚異麥芽糖的含量呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢,這可能是淀粉在加酶擠壓過程中發(fā)生水解生成的短鏈淀粉成為了后續(xù)糖化酶和轉(zhuǎn)苷酶適宜的反應(yīng)底物,有利于低聚異麥芽糖的生成。但過高的加酶量會使淀粉過度水解,導(dǎo)致葡萄糖的含量明顯增高,不利于后續(xù)反應(yīng)。

    圖3 加酶量對擠壓產(chǎn)物葡萄糖當(dāng)量和

    Figure 3 Effect of enzyme concentration on dextrose equivalent and isomalto-oligosaccharides content

    2.4 正交優(yōu)化加酶擠液化生產(chǎn)低聚異麥芽糖

    為進(jìn)一步優(yōu)化加酶擠壓生產(chǎn)低聚異麥芽糖的生產(chǎn)工藝,根據(jù)DE值和各擠壓參數(shù)對低聚異麥芽糖產(chǎn)量影響的單因素試驗結(jié)果,選擇擠壓溫度、物料水分含量以及耐熱型α-淀粉酶加酶量做三因素三水平正交試驗,正交因素水平見表1。分析正交擠壓樣品糖化轉(zhuǎn)苷后,其低聚異麥芽糖產(chǎn)量(IG2+P+IG3),從而進(jìn)一步確定擠壓液化的最優(yōu)組合。試驗設(shè)計及結(jié)果見表2。

    表1 正交因素水平

    表2 正交試驗設(shè)計與結(jié)果

    根據(jù)正交試驗極差結(jié)果顯示,擠壓溫度>加酶量>物料水分含量,說明加酶擠壓參數(shù)中影響后續(xù)低聚麥芽糖生成主要因素是擠壓溫度,其次是加酶量,而物料水分含量影響最小。比較各因素均值效果值,隨著物料水分含量提高低聚異麥芽糖產(chǎn)量逐漸增加,但低聚異麥芽糖產(chǎn)量并非隨著擠壓溫度及加酶量的增加而增加。據(jù)分析,選擇最優(yōu)因素水平組合方案為A2B3C2。在此優(yōu)化條件下進(jìn)行實驗驗證,3次平行實驗結(jié)果(IG2+P+IG3) 含量均在120 mg/mL以上,(IG2+P +IG3)產(chǎn)率大于35%,已達(dá)中國低聚異麥芽糖IMO-50生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)(GB/T 20881—2007)。

    3 結(jié)論

    加酶擠壓處理玉米淀粉可以有效降解淀粉,降低物料黏度,所處理的淀粉物料有利于后續(xù)糖化轉(zhuǎn)苷。DE值可用于衡量淀粉的液化程度,DE值越大,淀粉降解越大,黏度變小。試驗發(fā)現(xiàn)淀粉降解有利于低聚異麥芽糖的生產(chǎn),但過高的DE值,會使產(chǎn)量降低。利用單因素試驗對擠壓溫度、物料水分含量和擠壓加酶量對擠壓產(chǎn)物DE值和最終低聚異麥芽糖產(chǎn)量的影響進(jìn)行分析,通過三因素三水平正交試驗對條件進(jìn)行優(yōu)化,最終確定最佳工藝參數(shù):擠壓溫度為,95 ℃擠壓物料含水量為45%,擠壓加酶量為0.8%。利用此優(yōu)化條件進(jìn)行實驗驗證,最終所得粗糖中(IG2+P+IG3)含量均在35%以上,已達(dá)中國規(guī)定低聚異麥芽糖IMO-50的生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)。因此,本研究為加酶擠壓技術(shù)代替?zhèn)鹘y(tǒng)的噴射液化對淀粉原料處理進(jìn)行低聚異麥芽糖生產(chǎn)提供了一定的理論參數(shù)依據(jù)。

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    Influence of enzymatic extrusion of corn starch on preparation of isomalto-oligosaccharides

    GE Jie1,2WUChun-sen1,2WANGYing1,2WANGRen1,2JINZheng-yu2,3XUXue-ming1,3JIAOAi-quan1,3ZHOUXing1,3

    (1.TheStateKeyLaboratoryofFoodScienceandTechnology,JiangnanUniversity,Wuxi,Jiangsu214122,China;2.SchoolofFoodScienceandTechnology,JiangnanUniversity,Wuxi,Jiangsu214122,China;3.SynergeticInnovationCenterofFoodSafetyandNutrition,JiangnanUniversity,Wuxi,Jiangsu214122,China)

    The treatment of corn starch by adding enzyme extrusion technology as material to produce isomalto-oligosaccharide. With the sum content of isomaltose (IG2), panose (P) and maltotriose (IG3) as the yield index of isomalto-oligosaccharide, the parameters were optimized by orthogonal experiment, and the optimum processes for production of ismalto-oligosaccharide from corn starch with enzymatic extrusion were as followed: the extrusion temperature 95 ℃, the water content 45%, and the amount of enzyme 0.8%. And the yield of the ismalto-oligosaccharide with the highest yield could reach over 35%.

    α-amylose; extrusion; corn starch; isomalto-oligosaccharide

    國家自然科學(xué)基金(編號:31301505);江蘇省自然科學(xué)基金(編號:BK20130140,BE2013311)

    葛潔,女,江南大學(xué)在讀碩士研究生。

    周星(1982-),女,江南大學(xué)副教授,博士。

    E-mail:zhouxing@jiangnan.edu.cn

    2016-04-29

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