• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    鹿特異性復(fù)合麻醉劑對(duì)大鼠腦區(qū)NOS活性及NO/cGMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)的影響

    2016-11-15 08:51:13尹柏雙宋永利付連軍呼顯生沙萬(wàn)里方文山
    中國(guó)獸醫(yī)雜志 2016年9期
    關(guān)鍵詞:麻醉劑信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)小腦

    尹柏雙,宋永利,付連軍,呼顯生,沙萬(wàn)里,方文山,高 利

    (1.吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院,吉林 吉林 132101;2.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院,黑龍江 哈爾濱 150030)

    鹿特異性復(fù)合麻醉劑對(duì)大鼠腦區(qū)NOS活性及NO/cGMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)的影響

    尹柏雙1,宋永利1,付連軍1,呼顯生1,沙萬(wàn)里1,方文山1,高利2

    (1.吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院,吉林 吉林 132101;2.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院,黑龍江 哈爾濱 150030)

    研究鹿特異性復(fù)合麻醉劑麻醉下大鼠不同腦區(qū)NOS活性、NO和cGMP濃度的變化,探討鹿特異性復(fù)合麻醉劑的中樞作用機(jī)理。將24只SD大鼠隨機(jī)分成4組,分別為對(duì)照組、誘導(dǎo)期、麻醉期和催醒期,于不同時(shí)期采集大鼠大腦皮質(zhì)、小腦、腦干、海馬和丘腦。采用比色法測(cè)定各腦區(qū)NOS活性和NO含量,酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定各腦區(qū)cGMP濃度。結(jié)果表明,腹腔注射鹿特異性復(fù)合麻醉劑30 mg/kg體重后,麻醉期各腦區(qū)一氧化氮合酶(NOS)活性顯著降低(P<0.05或P<0.01);NO產(chǎn)量與對(duì)照組比較降低極顯著(P<0.01);鳥(niǎo)甘酸環(huán)化酶(cGMP)濃度降低顯著(P<0.05或P<0.01)。結(jié)果提示,鹿特異性復(fù)合麻醉劑抑制大鼠各腦區(qū)NOS活性,阻斷NO/cGMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)可能是其產(chǎn)生全麻作用的重要機(jī)理之一。

    鹿特異性復(fù)合麻醉劑;一氧化氮合酶;一氧化氮/環(huán)鳥(niǎo)苷酸;信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)

    一氧化氮(NO)是一種氣體信號(hào)分子,可激活鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶(cGMP),起到細(xì)胞間信號(hào)傳遞的作用[1-2]。cGMP作為第二信使,起到傳遞細(xì)胞內(nèi)信息的作用[3]。一氧化氮合酶(NOS)是NO生成的關(guān)鍵酶[4]。NO/cGMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是細(xì)胞內(nèi)重要的信號(hào)通路[5-6],將胞外信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)至細(xì)胞核,參與肌肉收縮、神經(jīng)傳遞和細(xì)胞生長(zhǎng)等生理過(guò)程[7]。研究發(fā)現(xiàn),NO/cGMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路介導(dǎo)了麻醉藥對(duì)神經(jīng)突觸作用,引起興奮性突觸的抑制和抑制性突觸的增強(qiáng),從而產(chǎn)生麻醉現(xiàn)象[8-10]。鹿特異性復(fù)合麻醉劑是根據(jù)平衡麻醉理論以賽拉嗪和強(qiáng)痛寧組方而成的針對(duì)于鹿生理特點(diǎn),為鹿的鋸茸、野外分群和疾病診療等需要研制。本試驗(yàn)旨在探討鹿特異性復(fù)合麻醉劑麻醉下大鼠各腦區(qū)NOS活性、NO和cGMP含量的變化,擬從NO/cGMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)的變化揭示鹿特異性復(fù)合麻醉劑作用的分子學(xué)機(jī)理。

    1 材料與方法

    1.1試驗(yàn)材料及動(dòng)物鹿特異性復(fù)合麻醉劑(噻啦嗪∶替來(lái)他明∶強(qiáng)痛寧=0.90∶0.82∶0.26);NOS測(cè)定試劑盒(南京建成生物工程研究所,批號(hào):20130815);NO測(cè)定試劑盒(南京建成生物工程研究所,批號(hào):20130812);考馬斯亮藍(lán)蛋白質(zhì)含量測(cè)定試劑盒(南京建成生物工程研究所,批號(hào):20130816);cGMP Elisa Kit(南京建成生物工程研究所,批號(hào):20130915)。SD純種大鼠24只,體重200±20 g,雌雄不拘,吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,同一條件下飼養(yǎng)2周后進(jìn)行試驗(yàn)。

    1.2動(dòng)物分組與處理SD純種大鼠,共24只,隨機(jī)取6只作為生理鹽水對(duì)照組,其余大鼠為試驗(yàn)組;試驗(yàn)組大鼠隨機(jī)分成誘導(dǎo)期(注藥后5 min)、麻醉期(翻正反射消失)、催醒期(翻正反射恢復(fù))3個(gè)亞組,每組6只。對(duì)照組大鼠腹腔注射30 mL/ kg體重的生理鹽水,試驗(yàn)組大鼠腹腔注射30 mg/ kg體重的鹿特異性復(fù)合麻醉劑。

    1.3樣品采集和處理對(duì)照組大鼠在腹腔注射給藥后5 min斷頭取腦,誘導(dǎo)期、麻醉期和催醒期分別在給藥后5 min、大鼠翻正反射消失即刻、翻正反射恢復(fù)即刻斷頭取腦,在生理鹽水冰面上迅速分離大腦皮層、海馬、丘腦、小腦和腦干,分別稱重,裝入凍存管后投入液氮中保存。

    分別將腦組織取出置入冰冷的蔗糖緩沖液(0.32 mol/L,1/10,W/V)介質(zhì)中勻漿,2 500 r/min離心10 min,制備成10%腦組織勻漿液,為待測(cè)樣品。

    1.4檢測(cè)方法采用比色法測(cè)定NOS酶活性和NO含量,ELISA測(cè)定cGMP濃度,考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定蛋白質(zhì)含量。檢測(cè)具體方法參照各檢測(cè)試劑盒的操作說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

    1.5試驗(yàn)數(shù)據(jù)的分析與統(tǒng)計(jì)試驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(±SD)表示,用SPSS 13.0數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,組間比較采用t檢驗(yàn)。

    2 結(jié)果

    2.1鹿特異性復(fù)合麻醉劑對(duì)大鼠不同腦區(qū)NOS活性的影響結(jié)果如表1所示,復(fù)合麻醉劑給藥后抑制了大鼠各腦區(qū)內(nèi)NOS活性,誘導(dǎo)期海馬、腦干NOS活性與對(duì)照組比較分別降低了34.93%(P<0.01)和18.91%(P<0.05);麻醉期大腦皮質(zhì)、小腦、腦干、海馬和丘腦NOS活性與對(duì)照組相比分別降低了32.73%(P<0.01)、11.47%(P<0.05)、31.79%(P<0.01)、35.65%(P<0.01)和28.52%(P<0.01);催醒期大腦皮質(zhì)、小腦和丘腦NOS活性仍然較對(duì)照組低(P<0.05或P<0.01)。

    2.2鹿特異性復(fù)合麻醉劑對(duì)大鼠不同腦區(qū)NO含量的影響由表2可見(jiàn),復(fù)合麻醉劑降低了大鼠各腦區(qū)NO含量,誘導(dǎo)期大腦皮質(zhì)、小腦、腦干和丘腦NO含量與對(duì)照組比較分別降低了53.35%(P<0.01)、35.53%(P<0.01)、39.83%(P<0.01)和36.55%(P<0.01);麻醉期大腦皮質(zhì)、小腦、海馬、腦干和丘腦NO含量與對(duì)照組比較分別降低了74.96%(P<0.01)、70.09%(P<0.01)、48.89%(P<0. 01)、39.63%(P<0.01)和63.62%(P<0.01)。催醒期小腦NO含量仍低于對(duì)照組(P<0.01)。

    表1 復(fù)合麻醉劑對(duì)大鼠不同腦區(qū)NOS活性的影響(n=6,D)[mol Pi/mg(prot)/h]

    表1 復(fù)合麻醉劑對(duì)大鼠不同腦區(qū)NOS活性的影響(n=6,D)[mol Pi/mg(prot)/h]

    注:與對(duì)照組比較;**:P<0.01,差異極顯著;*:P<0.05,差異顯著,下表同

    大腦  小腦  腦干  海馬  丘腦對(duì)照組 6.526±0.21 6.443±0.19 14.197±2.34 6.536±0.54 9.063±1.03誘導(dǎo)期 6.146±0.23 6.684±0.22 11.512±2.74* 4.253±0.37** 9.650±1.14麻醉期 4.390±0.17** 5.704±0.25* 9.684±2.17** 4.206±0.28** 6.478±1.08**催醒期 5.600±0.13* 5.957±0.18* 13.222±3.13 7.676±0.65 5.180±0.39**

    2.3鹿特異性復(fù)合麻醉劑對(duì)大鼠不同腦區(qū)cGMP濃度的影響結(jié)果如表3所示,復(fù)合麻醉劑引起大鼠麻醉期各腦區(qū)內(nèi)cGMP濃度降低,與對(duì)照組比較差異顯著(P<0.05或P<0.01)。催醒期大鼠小腦和腦干cGMP濃度仍低于對(duì)照組(P<0.05或P<0.01)。

    3 討論

    NO在維持機(jī)體清醒狀態(tài)、調(diào)解生理機(jī)能等方面發(fā)揮著重要作用[11-12]。中樞神經(jīng)通路的興奮性和抑制性與NO/cGMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)關(guān)系密切,CNS通過(guò)調(diào)節(jié)中樞NO/cGMP系統(tǒng)使神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)cGMP含量升高引起興奮性;cGMP含量下降引起中樞抑制[13]。

    表2 復(fù)合麻醉劑對(duì)大鼠不同腦區(qū)NO含量的影響(n=6,D)(U/mg)

    表2 復(fù)合麻醉劑對(duì)大鼠不同腦區(qū)NO含量的影響(n=6,D)(U/mg)

    大腦  小腦  腦干  海馬  丘腦對(duì)照組 1.957±0.17 7.500±0.78 3.839±0.57 4.502±0.65 3.587±0.28誘導(dǎo)期 0.913±0.12** 4.835±0.21** 2.310±0.36** 3.966±0.37 2.276±0.19**麻醉期 0.490±0.06** 2.243±0.19** 1.962±0.21** 2.718±0.15** 1.305±0.11**催醒期 1.847±0.23 4.393±0.42** 3.886±0.46 4.267±0.48 3.055±0.36

    表3 復(fù)合麻醉劑對(duì)大鼠不同腦區(qū)cGMP濃度的影響(n=6,D)(pmol/mL)

    表3 復(fù)合麻醉劑對(duì)大鼠不同腦區(qū)cGMP濃度的影響(n=6,D)(pmol/mL)

    大腦  小腦  腦干  海馬  丘腦對(duì)照組 8.19±0.84 9.76±0.97 6.22±1.03 11.62±1.07 7.18±0.51誘導(dǎo)期 7.92±0.47 8.70±0.72 6.11±1.76 11.78±1.25 7.04±0.38麻醉期 7.25±0.73* 8.34±1.05* 5.25±0.85* 9.62±0.97** 5.83±0.73**催醒期 7.68±0.69 7.34±0.67** 5.13±0.71* 12.84±1.06 7.06±0.83

    過(guò)去的研究表明,多數(shù)麻醉藥能明顯減少大腦皮質(zhì)、小腦等腦區(qū)cGMP的含量,提示NO/cGMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)的抑制可能促使了全身麻醉作用的出現(xiàn)[14]。王洪斌等研究結(jié)果表明,噻環(huán)乙胺麻醉下大鼠大腦皮層、海馬和丘腦內(nèi)NOS活性被抑制,引起NO和cGMP含量明顯下降,提示噻環(huán)乙胺麻醉與NO/cGMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)被抑制相關(guān)[10]。劉煥奇等研究表明,NO/cGMP信號(hào)傳遞系統(tǒng)參與了賽拉唑產(chǎn)生全麻作用[15]。胡興國(guó)等研究表明,異丙酚明顯抑制大鼠小腦、海馬和大腦皮層中NOS活性,顯著減少腦區(qū)NO和cGMP含量,提示NO/cGMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)在異丙酚全麻分子機(jī)理中發(fā)揮重要作用[16]。本研究結(jié)果表明,腹腔注射鹿特異性復(fù)合麻醉劑30 mg/kg體重后,引起麻醉期各腦區(qū)NOS活性顯著降低,NO和cGMP含量下降,提示NO/cGMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)參與了鹿特異性復(fù)合麻醉劑全麻分子機(jī)理調(diào)控。

    4 結(jié)論

    本研究結(jié)果表明,鹿特異性復(fù)合麻醉劑抑制大鼠大腦皮質(zhì)、小腦、海馬、腦干和丘腦內(nèi)NOS活性,降低NO和cGMP含量,阻斷NO/cGMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)可能是其產(chǎn)生全麻作用的重要機(jī)理之一。

    [1]沈政,鐵國(guó)棟,趙興緒,等.雌性動(dòng)物生殖系統(tǒng)中的一氧化氮[J].細(xì)胞生物學(xué)雜志,2004,26(4):349-351.

    [2]周振琪,潘玲梅,王恬,等.環(huán)鳥(niǎo)苷酸對(duì)卵巢細(xì)胞功能的調(diào)控[J].細(xì)胞生物學(xué)雜志,2005,27(6):603-606.

    [3]朱亮,章孝榮,劉亞,等.一氧化氮與卵母細(xì)胞發(fā)育[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2010,31(2):107-110.

    [4]Okhotin V E,Shuklin A V.Significance of neuronal,endothelial and inducible NO-synthase isoforms in the cardiac muscle histophysiology[J].Morfologiia,2006,129(1):7.

    [5]Basini G,Bussolati S,Santini S E,et al.The impact of the phytooestrogen genistein on swine granulosa cell function[J].J Anim Physiol Anim Nutr,2010,94(6):374-382.

    [6]Heydarpour P,Salehi-Sadaghiani M,Javadi-Paydar M,et al.Estradiol reduces depressivelike behavior through inhibiting nitric oxide/cyclic GMP pathway in ovariectomized mice[J].Horm Behav,2013,63(2):361-369.

    [7]Marathe N,Rangaswami H,Zhuang S,et al.Prosurvival effects of 17β-estradiol on osteocytes are mediated by nitric oxide/cGMP via differential actions of cGMP-dependent protein kinases I and II[J].J Biol Chem,2012,287(2):978-988.

    [8]Ybksel K,Wilhelm B,S?nke B,et al.NO/cGMP signaling molecules in the rat epithelial rests of Malassez[J].Euro J Oral Sciences,2004,112(1):55-60.

    [9]Sugunobu T A,Chock P B,Chiueh C C.Preconditioning mediated neuroprotection role of nitric oxide,cGMP,and new protein expression[J].Annals o f the New York Academy of Sciences,2002,962(5):127.

    [10]王洪斌,范宏剛,盧德章,等.噻環(huán)乙胺對(duì)大鼠不同腦區(qū)NOS活性及NO產(chǎn)量和cGMP含量的影響[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào),2008,39(11):1599-1605.

    [11]許木林,鄭開(kāi)之,孫思宇,等.NOS及NO/cGMP信號(hào)通路對(duì)哺乳動(dòng)物卵泡發(fā)育的調(diào)控作用[J].中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào),2013,35(7):1063-1067.

    [12]王偉鵬,李立環(huán).臨床麻醉學(xué)[M].4版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2004:269-271.

    [13]劉鵬,偉忠民,佟宇.NO、NOS對(duì)學(xué)習(xí)記憶和神經(jīng)毒性作用的研究進(jìn)展[J].遼寧醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2009,30(4):369-373.

    [14]莊心良,曾因明,陳伯鑾.現(xiàn)代麻醉學(xué)[M].3版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2004:397-399.

    [15]劉煥奇,王洪斌,范洪剛,等.賽拉唑?qū)Υ笫蟛煌X區(qū)NONOS-cGMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)的影響[J].中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào),2010,30(4):493-497.

    [16]胡興國(guó),王鈞,曾因明,等.異丙酚對(duì)大鼠腦NO/cGMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)的影響[J].臨床麻醉學(xué)雜志,2000,16(2):93-95.

    Effects of theSpecificity Anesthetic for Deer on NOS activity and NO/cGMP Signal Pathway in Different Encephalic Region of Rats

    YIN Bai-shuang1,SONG Yong-li1,F(xiàn)U Lian-jun1,HU Xian-sheng1,SHA Wan-li1,F(xiàn)ANG Wen-shan1,GAO Li2
    (1.Department of Animal Medicine,JiLin Agricultural Science and technology,Jilin 132101,China;2.College of Animal Medicine,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China)

    NOS activity,NO and cGMP contents in different encephalic regions of rats were measured to explore the possible molecular mechanism of action of the deer specific anesthetic on the central nervous system.24 SD rats were divided randomly into four groups including the control,the induction the anesthesia and the recovery.Rats'brain samples of cerebral cortex,hippocampus,cerebellum,thalamus and stem were separated at the different time points under the deer specific anesthesia.The activities of NOS were measured by using colorimetry,and the concentrations of NO and cGMP were determined by Elisa.The NOS activities(P<0.05 or P<0.01),the NO contents(P<0.01),and the concentration of cGMP(P<0.05 or P<0.01)were all obviously decreased in all encephalic regions in the anesthesia group compared with control groups.These results indicated that the deer specific anesthetic inhibited NOS activity and blocked NO/cGMP signal transduction,which might be one of the important mechanisms for the drug to generate general anesthesia.

    deer specific anesthetic;NOS;NO/cGMP;signal pathway

    GAO Li

    S859.791

    A

    0529-6005(2016)09-0114-03

    2015-03-04

    國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31302150);長(zhǎng)白山動(dòng)植物資源保護(hù)與利用省級(jí)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室基金項(xiàng)目(吉農(nóng)院合字2012701,2013S029);吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院博士啟動(dòng)基金項(xiàng)目(吉農(nóng)院合字2012307);吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院種子基金項(xiàng)目(吉農(nóng)院合字2013905);吉林省教育廳“十二五”科學(xué)技術(shù)研究(吉教科合字2014379)

    尹柏雙(1978-),男,副教授,博士,從事麻醉與鎮(zhèn)痛研究,E-mail:ybs3421@126.com

    高利,E-mail:gaoli43450@163.com

    猜你喜歡
    麻醉劑信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)小腦
    Wnt/β-catenin信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在瘢痕疙瘩形成中的作用機(jī)制研究
    新生兒小腦發(fā)育與胎齡的相關(guān)性研究
    麻醉劑的使用
    陰差陽(yáng)錯(cuò)的麻醉劑
    動(dòng)動(dòng)小手和小腦
    麻醉劑
    哈哈哈哈,請(qǐng)跟著我大聲念出來(lái)
    哲思2.0(2017年12期)2017-03-13 17:45:04
    1例以小腦病變?yōu)橹饕憩F(xiàn)的Fahr’s病報(bào)道并文獻(xiàn)復(fù)習(xí)
    HGF/c—Met信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移中的作用
    亞麻醉劑量氯胺酮對(duì)術(shù)前抑郁老年患者術(shù)后認(rèn)知功能障礙的影響
    a级一级毛片免费在线观看| 亚洲自偷自拍三级| a在线观看视频网站| 三级毛片av免费| 十八禁国产超污无遮挡网站| 精品国产亚洲在线| 久久精品国产清高在天天线| 啪啪无遮挡十八禁网站| 国产精品伦人一区二区| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 精品久久久久久,| 久久久久久大精品| 能在线免费观看的黄片| 真人做人爱边吃奶动态| 99国产极品粉嫩在线观看| 精品久久久久久久久av| 国产成人av教育| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 国产成年人精品一区二区| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 色av中文字幕| 国产精品1区2区在线观看.| 精品人妻视频免费看| av在线天堂中文字幕| 三级毛片av免费| 国产伦精品一区二区三区四那| 亚洲第一区二区三区不卡| 免费av毛片视频| 亚洲黑人精品在线| 一本精品99久久精品77| 成年女人看的毛片在线观看| 九色成人免费人妻av| 日韩欧美精品免费久久 | 国产精品av视频在线免费观看| 69人妻影院| 最新在线观看一区二区三区| 99久久99久久久精品蜜桃| 国产乱人视频| 90打野战视频偷拍视频| 国产精品亚洲av一区麻豆| 在线观看舔阴道视频| 婷婷精品国产亚洲av在线| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 久久久久性生活片| 国内精品一区二区在线观看| 欧美在线黄色| 欧美成人一区二区免费高清观看| 男女那种视频在线观看| 亚洲专区中文字幕在线| 欧美性感艳星| 久久草成人影院| 日本熟妇午夜| 精品一区二区免费观看| 日韩亚洲欧美综合| 亚洲午夜理论影院| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 国产精品久久视频播放| 怎么达到女性高潮| 精品人妻1区二区| 国产精品爽爽va在线观看网站| 一进一出抽搐动态| 日韩欧美在线乱码| www日本黄色视频网| 91在线精品国自产拍蜜月| 国产精品伦人一区二区| 波野结衣二区三区在线| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 在线免费观看不下载黄p国产 | 97碰自拍视频| 一夜夜www| 特大巨黑吊av在线直播| 久久国产精品影院| 十八禁网站免费在线| 麻豆国产av国片精品| 啦啦啦韩国在线观看视频| 麻豆久久精品国产亚洲av| 久久人人爽人人爽人人片va | 久久香蕉精品热| 色吧在线观看| 亚洲人与动物交配视频| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 国产高清激情床上av| 亚洲精品影视一区二区三区av| 欧美又色又爽又黄视频| 18禁在线播放成人免费| 亚洲美女搞黄在线观看 | 成人高潮视频无遮挡免费网站| 少妇被粗大猛烈的视频| 亚洲成av人片免费观看| 中文字幕高清在线视频| 午夜福利欧美成人| 久久性视频一级片| 午夜视频国产福利| 一a级毛片在线观看| 免费搜索国产男女视频| 久久久久久久亚洲中文字幕 | 亚洲精品456在线播放app | 日本 av在线| 久久久久久久精品吃奶| 国产精品永久免费网站| 国产高潮美女av| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 很黄的视频免费| 免费看光身美女| 国产主播在线观看一区二区| 国模一区二区三区四区视频| 脱女人内裤的视频| 色在线成人网| 日韩高清综合在线| 九色国产91popny在线| 国产在线男女| 91久久精品国产一区二区成人| 99在线视频只有这里精品首页| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 欧美精品啪啪一区二区三区| 波多野结衣高清无吗| 国产精品日韩av在线免费观看| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 成人午夜高清在线视频| 美女xxoo啪啪120秒动态图 | 欧美最黄视频在线播放免费| 欧美高清性xxxxhd video| 欧美国产日韩亚洲一区| 国产久久久一区二区三区| 精品久久久久久久久久免费视频| 日本一本二区三区精品| 高清在线国产一区| 夜夜躁狠狠躁天天躁| av在线老鸭窝| 91麻豆av在线| 国产综合懂色| 脱女人内裤的视频| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 日本黄大片高清| 午夜福利18| 男女床上黄色一级片免费看| 中国美女看黄片| 成熟少妇高潮喷水视频| 欧美日韩国产亚洲二区| 欧美+亚洲+日韩+国产| 精品久久久久久久久av| 好男人在线观看高清免费视频| 真实男女啪啪啪动态图| 国产老妇女一区| 国产主播在线观看一区二区| 两个人视频免费观看高清| 成年免费大片在线观看| 国产亚洲精品av在线| 1000部很黄的大片| 国产主播在线观看一区二区| 露出奶头的视频| 亚洲欧美日韩高清专用| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 久久久久久久久中文| 在线a可以看的网站| 久久久久亚洲av毛片大全| 国产欧美日韩一区二区三| 亚洲性夜色夜夜综合| 精品欧美国产一区二区三| 国产精品久久电影中文字幕| 国产精品野战在线观看| 亚洲av五月六月丁香网| 精品人妻视频免费看| 久久午夜福利片| 欧美潮喷喷水| 亚洲美女视频黄频| 在线免费观看不下载黄p国产 | 国产一区二区三区视频了| 精品人妻视频免费看| 露出奶头的视频| 女人被狂操c到高潮| 国内精品一区二区在线观看| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 欧美日韩综合久久久久久 | 特级一级黄色大片| 最近最新中文字幕大全电影3| 午夜精品在线福利| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 99热只有精品国产| or卡值多少钱| 91在线精品国自产拍蜜月| 少妇人妻精品综合一区二区 | 日韩精品中文字幕看吧| 99久久九九国产精品国产免费| www日本黄色视频网| 欧美日韩乱码在线| av女优亚洲男人天堂| 高潮久久久久久久久久久不卡| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 国产老妇女一区| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 欧美在线一区亚洲| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 国产成人影院久久av| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 一本久久中文字幕| 1024手机看黄色片| 亚洲国产精品久久男人天堂| 久久国产精品人妻蜜桃| 欧美精品啪啪一区二区三区| 1000部很黄的大片| www.色视频.com| 国产一区二区在线av高清观看| 高清毛片免费观看视频网站| 亚洲av不卡在线观看| 国产精品电影一区二区三区| 国产av一区在线观看免费| 久久久久久久久久成人| 又粗又爽又猛毛片免费看| 男女床上黄色一级片免费看| 久久性视频一级片| bbb黄色大片| 免费在线观看成人毛片| 99久久精品国产亚洲精品| 欧美成人免费av一区二区三区| 内地一区二区视频在线| 天天一区二区日本电影三级| 大型黄色视频在线免费观看| 90打野战视频偷拍视频| 能在线免费观看的黄片| 99热精品在线国产| 国产av在哪里看| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 99久久99久久久精品蜜桃| 我的女老师完整版在线观看| 国产精品亚洲av一区麻豆| 不卡一级毛片| 日韩高清综合在线| 成人永久免费在线观看视频| 国产三级黄色录像| 乱码一卡2卡4卡精品| 日本与韩国留学比较| 男人的好看免费观看在线视频| 色5月婷婷丁香| 国产精品,欧美在线| 成年免费大片在线观看| 亚洲 国产 在线| 日韩高清综合在线| 亚洲最大成人中文| 欧美性感艳星| 18+在线观看网站| 91麻豆精品激情在线观看国产| 欧美黄色淫秽网站| 麻豆久久精品国产亚洲av| 欧美在线一区亚洲| 一个人看视频在线观看www免费| 免费高清视频大片| 亚洲人成网站高清观看| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 在线免费观看不下载黄p国产 | 在线免费观看的www视频| 久久久国产成人精品二区| 日本黄大片高清| 夜夜爽天天搞| 国产探花极品一区二区| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 国产欧美日韩精品一区二区| 亚洲av美国av| 色综合欧美亚洲国产小说| 国产乱人视频| 简卡轻食公司| 三级国产精品欧美在线观看| 欧美黑人巨大hd| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片 | 好男人在线观看高清免费视频| 国产乱人伦免费视频| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 赤兔流量卡办理| 日韩欧美三级三区| 亚洲天堂国产精品一区在线| 美女大奶头视频| 国产成人aa在线观看| 在线a可以看的网站| 亚洲av第一区精品v没综合| 国产精品电影一区二区三区| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 国产成人a区在线观看| 一a级毛片在线观看| 欧美色欧美亚洲另类二区| 成人av一区二区三区在线看| 国产亚洲精品久久久com| 激情在线观看视频在线高清| 午夜亚洲福利在线播放| 韩国av一区二区三区四区| 欧美精品国产亚洲| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 久久香蕉精品热| 丝袜美腿在线中文| 黄色一级大片看看| 亚洲av一区综合| 看片在线看免费视频| 99热只有精品国产| 国产色爽女视频免费观看| 色噜噜av男人的天堂激情| xxxwww97欧美| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 国产人妻一区二区三区在| 在线天堂最新版资源| 毛片一级片免费看久久久久 | 久久精品91蜜桃| 亚洲黑人精品在线| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 美女xxoo啪啪120秒动态图 | 色精品久久人妻99蜜桃| 一个人看的www免费观看视频| 一级毛片久久久久久久久女| 国产亚洲精品av在线| 国产精品日韩av在线免费观看| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 高清日韩中文字幕在线| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 婷婷色综合大香蕉| 一级av片app| 两个人的视频大全免费| 性色avwww在线观看| 国语自产精品视频在线第100页| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 舔av片在线| av专区在线播放| 久久人人爽人人爽人人片va | 国产伦精品一区二区三区视频9| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 美女大奶头视频| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 久久精品人妻少妇| 热99re8久久精品国产| av在线蜜桃| 欧美乱妇无乱码| 欧美日韩综合久久久久久 | 国产精品美女特级片免费视频播放器| 国产高潮美女av| 欧美色视频一区免费| 全区人妻精品视频| 男插女下体视频免费在线播放| 国产精品98久久久久久宅男小说| 欧美黑人巨大hd| 伦理电影大哥的女人| 搡老妇女老女人老熟妇| 国产毛片a区久久久久| 男女之事视频高清在线观看| 欧美精品啪啪一区二区三区| 啪啪无遮挡十八禁网站| 又紧又爽又黄一区二区| 亚洲五月婷婷丁香| 国产极品精品免费视频能看的| 99riav亚洲国产免费| 精品不卡国产一区二区三区| 性色avwww在线观看| 女同久久另类99精品国产91| 在线观看午夜福利视频| 国产视频一区二区在线看| 欧美成人一区二区免费高清观看| 波野结衣二区三区在线| 一本久久中文字幕| 三级国产精品欧美在线观看| 国产美女午夜福利| 97碰自拍视频| 日韩 亚洲 欧美在线| 日韩欧美 国产精品| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| a在线观看视频网站| 熟女电影av网| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 午夜影院日韩av| 最新在线观看一区二区三区| av国产免费在线观看| 欧美成人免费av一区二区三区| www日本黄色视频网| 人妻久久中文字幕网| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 国产精品久久久久久久久免 | 免费在线观看亚洲国产| 亚洲欧美日韩无卡精品| 亚洲男人的天堂狠狠| 在线观看一区二区三区| 午夜久久久久精精品| 亚洲av.av天堂| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 波多野结衣高清作品| 天堂网av新在线| 亚洲av成人av| a级一级毛片免费在线观看| 亚洲无线在线观看| 久久久久免费精品人妻一区二区| 91在线精品国自产拍蜜月| 国产精品国产高清国产av| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 搡老岳熟女国产| 午夜福利成人在线免费观看| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 最后的刺客免费高清国语| 日本成人三级电影网站| 欧美乱妇无乱码| 国产高清视频在线播放一区| 国产视频内射| 日韩欧美精品v在线| 精品日产1卡2卡| 一区福利在线观看| av在线老鸭窝| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 18+在线观看网站| 免费大片18禁| 国语自产精品视频在线第100页| 国模一区二区三区四区视频| 人妻夜夜爽99麻豆av| 成人性生交大片免费视频hd| 欧美日本亚洲视频在线播放| 精品久久久久久成人av| 亚洲av美国av| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 国产伦人伦偷精品视频| 在线观看66精品国产| 最近最新免费中文字幕在线| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 麻豆成人午夜福利视频| 欧美日本亚洲视频在线播放| 内地一区二区视频在线| 男女床上黄色一级片免费看| 午夜日韩欧美国产| 亚洲av熟女| 一个人看的www免费观看视频| 桃红色精品国产亚洲av| ponron亚洲| 亚洲人成伊人成综合网2020| 午夜福利欧美成人| 国产精品一区二区免费欧美| 久久久久久久午夜电影| 伊人久久精品亚洲午夜| 毛片一级片免费看久久久久 | 人人妻人人澡欧美一区二区| 老司机福利观看| 久久久久久久久大av| 99热这里只有是精品50| 嫩草影院精品99| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 日韩欧美精品免费久久 | 99久国产av精品| 精品国产三级普通话版| 国产色婷婷99| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 在现免费观看毛片| 日本五十路高清| 欧美极品一区二区三区四区| 丰满人妻一区二区三区视频av| 欧美最黄视频在线播放免费| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 一个人看的www免费观看视频| 亚洲最大成人手机在线| 精品一区二区三区人妻视频| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 欧美成人一区二区免费高清观看| av天堂中文字幕网| 亚洲精华国产精华精| 欧美激情久久久久久爽电影| 嫩草影院精品99| a级一级毛片免费在线观看| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 中文在线观看免费www的网站| 色吧在线观看| 老女人水多毛片| 他把我摸到了高潮在线观看| 特大巨黑吊av在线直播| 深夜a级毛片| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 午夜影院日韩av| x7x7x7水蜜桃| 国产精品综合久久久久久久免费| 桃红色精品国产亚洲av| av天堂中文字幕网| 天天躁日日操中文字幕| 又黄又爽又免费观看的视频| 免费观看人在逋| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 亚洲性夜色夜夜综合| 18+在线观看网站| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 丁香六月欧美| 在线免费观看的www视频| 国产在视频线在精品| www.色视频.com| 在线播放国产精品三级| 99久久精品热视频| 久久伊人香网站| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 欧美另类亚洲清纯唯美| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 99久国产av精品| 一级a爱片免费观看的视频| 国产精品伦人一区二区| 日韩成人在线观看一区二区三区| av黄色大香蕉| 欧美性猛交黑人性爽| 亚洲最大成人中文| 1024手机看黄色片| av国产免费在线观看| 淫妇啪啪啪对白视频| 日韩欧美免费精品| netflix在线观看网站| 欧美黄色片欧美黄色片| 国产成人影院久久av| 毛片一级片免费看久久久久 | 美女xxoo啪啪120秒动态图 | 床上黄色一级片| 日本三级黄在线观看| 久久国产乱子伦精品免费另类| 高清毛片免费观看视频网站| 亚洲成人免费电影在线观看| 在线观看午夜福利视频| 免费看光身美女| 狠狠狠狠99中文字幕| 欧美精品啪啪一区二区三区| 男女之事视频高清在线观看| 国产免费男女视频| 嫩草影院新地址| 99国产精品一区二区三区| 精品免费久久久久久久清纯| 一个人看视频在线观看www免费| 免费看美女性在线毛片视频| 在线观看舔阴道视频| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 熟女电影av网| 亚洲人与动物交配视频| 精品人妻视频免费看| 国产av一区在线观看免费| 波多野结衣高清作品| 中文字幕高清在线视频| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 国产精品亚洲美女久久久| 最近中文字幕高清免费大全6 | 久久人人精品亚洲av| 欧美成狂野欧美在线观看| 99国产极品粉嫩在线观看| 色av中文字幕| 亚洲综合色惰| 久久久精品大字幕| 麻豆国产97在线/欧美| 日韩欧美在线乱码| 日本免费a在线| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 两个人视频免费观看高清| 黄色一级大片看看| 久久亚洲真实| 一级黄色大片毛片| 中国美女看黄片| 日韩中文字幕欧美一区二区| 国产精华一区二区三区| 色哟哟哟哟哟哟| 日韩有码中文字幕| 国产乱人视频| 国产视频内射| 美女免费视频网站| 99热这里只有精品一区| 精品国产三级普通话版| 国产av一区在线观看免费| 在线免费观看的www视频| 亚洲在线观看片| 亚洲内射少妇av| 波多野结衣巨乳人妻| 淫秽高清视频在线观看| 91九色精品人成在线观看| 69av精品久久久久久| 亚洲成人免费电影在线观看| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 亚洲自拍偷在线| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 欧美极品一区二区三区四区| 男女下面进入的视频免费午夜| 欧美极品一区二区三区四区| 日韩中字成人| 欧美极品一区二区三区四区| 亚洲av.av天堂| 国产欧美日韩精品一区二区| or卡值多少钱| 免费看光身美女| 日本 欧美在线| 在线观看免费视频日本深夜| 欧美成狂野欧美在线观看| 国产三级中文精品| 两人在一起打扑克的视频| 亚洲成人精品中文字幕电影| 成人亚洲精品av一区二区| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 国产av不卡久久| 亚洲午夜理论影院| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 国产乱人伦免费视频| 亚洲五月婷婷丁香| 欧美一区二区精品小视频在线| 老司机午夜十八禁免费视频| 久久国产乱子免费精品| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 国产精品一及| av专区在线播放| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 少妇高潮的动态图| 国产亚洲精品久久久com| 中文字幕av成人在线电影| 欧美黄色淫秽网站| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 久久久久久久亚洲中文字幕 | 看免费av毛片| 国产精品爽爽va在线观看网站| 亚洲最大成人中文| 在线观看午夜福利视频| 老熟妇仑乱视频hdxx| 麻豆av噜噜一区二区三区| 99久久精品热视频|