L型鈣離子通道 1C基因多態(tài)性與氨氯地平降壓療效相關(guān)性分析

黨立群，何慶榮，朱飛飛，李素梅，伏冬梅

（黑龍江省大慶市龍南醫(yī)院，黑龍江大慶163453）

L型鈣離子通道 1C基因多態(tài)性與氨氯地平降壓療效相關(guān)性分析

黨立群，何慶榮，朱飛飛，李素梅，伏冬梅

（黑龍江省大慶市龍南醫(yī)院，黑龍江大慶163453）

目的探討L型鈣離子通道 1C基因（CACNA1C）多態(tài)性與氨氯地平降壓療效的相關(guān)性，為指導(dǎo)臨床合理用藥提供理論依據(jù)。方法選取醫(yī)院2014年1月至2015年1月收治的原發(fā)性高血壓患者92例，經(jīng)過2周洗脫期后均給予苯磺酸氨氯地平片2.5 mg/d的降壓方案，療程為4周。4周后根據(jù)血壓下降幅度將患者分為氨氯地平高效組［收縮壓下降幅度（ SBP） 20 mmHg］、中效組（10 mmHg SBP＜20 mmHg）和低效組（ SBP＜10 mmHg），記錄3組患者性別、年齡、體重指數(shù)（BMI）等一般資料，并采用聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）-直接測序法對患者CACNA1C基因rs2238032、rs2239128及rs1051375等位點進行分型，經(jīng)單因素2檢驗和Logistic多因素回歸方法分析影響氨氯地平降壓療效的因素。結(jié)果3組患者的收縮壓（SBP）和舒張壓（DBP）的基線水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），其中高效組、中效組的SBP和DBP的基線水平均明顯高于低效組（P＜0.05）；3組患者的BMI比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），其中高效組和中效組BMI明顯低于低效組（P＜0.05）；rs2238032位點不同型別的降壓幅度由高到低依次為TT型（突變型純合子）、GT型（野生型雜合子）和GG型（野生型純合子），兩兩比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。經(jīng)Logistic多因素回歸分析，患者BMI、血壓基線水平和rs2238032基因型是影響氨氯地平降壓療效的相關(guān)因素。結(jié)論原發(fā)性高血壓患者的BMI、血壓基線水平及rs2238032基因型與氨氯地平療效明顯相關(guān)，臨床應(yīng)參考相關(guān)因素制訂合理的用藥方案。

高血壓；氨氯地平；L型鈣離子通道 1C基因；基因多態(tài)性

鈣離子拮抗劑是臨床常見的降壓藥物，可單獨使用，也可聯(lián)合其他藥物使用。其中氨氯地平為第3代二氫吡啶類鈣離子拮抗劑，具有藥效持續(xù)時間長、血壓波動小、不良反應(yīng)少等優(yōu)勢，同時也可治療心絞痛，并抑制與高血壓有關(guān)的心肌肥大，故受到廣大高血壓患者的青睞［1］。但研究發(fā)現(xiàn)，不同個體使用二氫吡啶類鈣離子拮抗劑所產(chǎn)生的降壓效果有一定差異，該差異被認為是遺傳與環(huán)境共同作用的結(jié)果［2］。Johnson等［3］研究認為，基因多態(tài)性決定了個體間運載體、藥物代謝酶及受體的差異，而L型鈣離子通道α1C基因（CACNA1C）多態(tài)性可能是影響鈣離子拮抗劑療效的主要因素。目前，對CACNA1C多態(tài)性與氨氯地平療效間關(guān)系尚無大量報道。為此，筆者探討了CACNA1C等位點型別的差異對氨氯地平降壓效果的影響，現(xiàn)報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

納入標準：確診原發(fā)性高血壓；門診隨訪2次血壓不低于160/100 mmHg，之前未接受正規(guī)治療，或已接受正規(guī)治療但降壓效果不滿意，門診隨訪2次血壓不低于140/90 mmHg；本研究經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會同意，患者對本次研究知情并簽署同意書。

排除標準：繼發(fā)性高血壓；3個月內(nèi)發(fā)生過心腦血管事件；既往有藥物過敏史或存在用藥禁忌證；合并不穩(wěn)定型心絞痛、先天性心臟病、風(fēng)濕性心內(nèi)膜炎及心肌?。缓喜⒋x性疾病、惡性腫瘤及重要器官功能不全；合并神經(jīng)精神類疾病或依從性差，無法完成隨訪。

病例選擇：選取我院2014年1月至2015年1月收治的原發(fā)性高血壓患者92例，其中男51例，女41例；年齡45～72歲，平均（59.1±4.9）歲。

1.2方法

1.2.1治療方法

用藥前所有患者接受2周洗脫，而后給予苯磺酸氨氯地平片（上海滬源醫(yī)藥有限公司，批號為201308075，規(guī)格為每片2.5 mg）2.5 mg/d口服。2周后訪視，若患者血壓維持在正常范圍內(nèi)或高于正常范圍但無身體不適則維持原劑量，繼續(xù)隨訪；若血壓高于正常范圍且出現(xiàn)頭暈、頭痛等癥狀則停止隨訪，增加劑量或改為其他降壓方案。

1.2.2一般指標測量及分組

洗脫期后計算患者體重指數(shù)（BMI），體重（kg）應(yīng)于晨起空腹并排空膀胱，去外衣和鞋帽后測量，數(shù)值精確至0.1 kg；測量身高（m）時去鞋帽，數(shù)值精確至1 mm。按公式“BMI（kg/m2）=體重/身高2”計算［4］。用藥前及治療4周后10：00～12：00測量患者坐位右上臂血壓，測量前排空膀胱，至少安靜休息5 min，測量2次取平均值。根據(jù)治療前后血壓下降幅度將患者分為氨氯地平高效組［收縮壓下降幅度（ΔSBP）≥20 mmHg］、中效組（10 mmHg≤ ΔSBP＜20 mmHg）和低效組（ΔSBP＜10 mmHg）。

1.2.3基因檢測

取患者外周血10 mL，用DNA提取試劑盒（杭州沃森生物技術(shù)有限公司）提取基因組DNA，而后采用聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）-直接測序法對患者CACNA1C基因rs2238032、rs2239128及rs1051375等位點進行分型，所需PCR引物由上海伯豪生物技術(shù)有限公司根據(jù)CACNA1C參考序列（NT_025519，NT_001860，NT_009860）合成［5］。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理

2　結(jié)果

2.1患者一般資料

治療2周訪視時，5例患者血壓高于正常范圍且出現(xiàn)頭暈、頭痛等癥狀，余87例繼續(xù)參與研究。4周后，根據(jù)治療前后血壓下降幅度分為高效組（39例），中效組（31例），低效組（17例）。3組患者的年齡和性別比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；但3組患者的收縮壓（SBP）和舒張壓（DBP）的基線水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），其中高效組、中效組的SBP和DBP的基線水平均明顯高于低效組（P＜0.05）；3組患者的BMI比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），其中高效組和中效組的BMI明顯低于低效組（P＜0.05）。詳見表1。

表1　3組患者一般資料比較

2.2CACNA1C不同基因型攜帶者血壓降幅比較

rs2239128和rs1051375位點不同型別患者降壓幅度比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；rs2238032位點不同型別的降壓幅度差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），ΔSBP和ΔDBP由高到低均依次為TT型（突變型純合子）、GT型（野生型雜合子）和GG型（野生型純合子），兩兩比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。詳見表2。

2.3影響氨氯地平降壓療效的多因素分析

以年齡、性別、BMI、基線SBP、基線DBP和rs2238032（TT型）為自變量，以ΔSBP為因變量，行多因素Logistic回歸分析。結(jié)果顯示，BMI低、基線SBP和 DBP高、rs2238032（TT型）的高血壓患者服用氨氯地平降壓效果好。詳見表3。

3　討論

隨著生活方式和飲食結(jié)構(gòu)的不斷改變，我國高血壓病的發(fā)病率呈逐年遞增趨勢，20歲以上成年人患病率高達27.7%［6］。高血壓患者中90%以上為原發(fā)性高血壓，機制尚未闡明，目前認為是遺傳和環(huán)境綜合因素引起的、處于不斷進展狀態(tài)的心血管綜合征，可造成血管和心臟功能和結(jié)構(gòu)的改變［7-8］。治療原發(fā)性高血壓的方法主要為藥物控制，目的是最大限度降低心血管事件的發(fā)生率［9］。以氨氯地平為代表的二氫吡啶類鈣離子拮抗劑可與細胞膜電壓依賴L型鈣離子通道的α1亞基結(jié)合，減少Ca2+內(nèi)流，具有擴張血管和負性肌力作用，減少末梢血管阻力，從而達到降壓目的，具有藥效持續(xù)時間長、血壓波動小、不良反應(yīng)少等優(yōu)勢［10-12］。氨氯地平可單獨用藥，但部分患者單獨使用降壓效果不佳，需與其他藥物聯(lián)用，表明其療效在人群中具有一定差異性。

表2　CACNA1C不同基因型攜帶者血壓下降幅度比較（±s，mmHg）

表2　CACNA1C不同基因型攜帶者血壓下降幅度比較（±s，mmHg）

注：與GG型相比， P＜0.05；與GT型相比，#P＜0.05。

單核苷酸多態(tài)性基因型S B P D B P P t值t值P r s 2 2 3 9 1 2 8 0 . 1 3 4＞0 . 0 5 0 . 0 7 9＞0 . 0 5 r s 1 0 5 1 3 7 5 0 . 0 7 2＞0 . 0 5 0 . 0 4 5＞0 . 0 5 r s 2 2 3 8 0 3 2 C C（n = 2 0）C T（n = 4 5）T T（n = 2 2）A A（n = 2 1）A G（n = 4 7）G G（n = 1 9）T T（n = 2 0）G T（n = 4 6）G G（n = 2 1）測定值1 9 . 1 ± 6 . 8 1 9 . 4 ± 6 . 9 2 0 . 0 ± 7 . 1 1 9 . 6 ± 7 . 0 2 0 . 1 ± 7 . 1 1 9 . 8 ± 6 . 9 2 3 . 6 ± 5 . 8#2 0 . 1 ± 5 . 4 1 7 . 2 ± 4 . 6 4 . 9 8 7＜0 . 0 5測定值9 . 6 ± 3 . 1 9 . 4 ± 3 . 2 1 0 . 0 ± 3 . 6 1 0 . 1 ± 3 . 8 9 . 9 ± 3 . 7 9 . 5 ± 3 . 2 1 1 . 2 ± 3 . 1#9 . 3 ± 2 . 8 7 . 4 ± 1 . 9 5 . 3 6 5＜0 . 0 5

表3　影響氨氯地平降壓療效的Logistic多因素分析（n=87）

基因多態(tài)性決定了個體間運載體、藥物代謝酶及受體的差異，研究發(fā)現(xiàn)，CACNA1C基因編碼L型鈣離子通道的α1亞基，故臨床普遍認為CACNA1C基因的多態(tài)性是影響氨氯地平降壓效果的主要因素［13-14］。但CACNA1C基因具有眾多位點，哪個位點在影響鈣離子通道α1亞基的結(jié)構(gòu)和功能上起主要作用尚未明確。本研究中選取CACNA1C基因上rs2238032、rs2239128和rs1051375位點，聯(lián)合性別、年齡、BMI等基線資料，探討了影響氨氯地平療效的因素。

本研究結(jié)果顯示，3組患者SBP和DBP的基線水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），其中高效組、中效組的SBP和DBP的基線水平均明顯高于低效組（P＜0.05）；3組患者的BMI比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），其中高效組和中效組BMI明顯低于低效組（P＜0.05），與劉彤崴等［15］的研究結(jié)果一致；rs2239128及rs1051375位點不同型別患者降壓幅度比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），rs2238032位點不同型別的降壓幅度由高到低依次為TT型、GT型和GG型，兩兩比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），說明G等位基因?qū)Π甭鹊仄酱嬖诘头磻?yīng)性。這與景林德等［16］的研究結(jié)果不完全一致，其認為CACNA1C的7個位點中，rs2238032、rs2239128、rs2239050及rs1051375均可對氨氯地平降壓效果產(chǎn)生顯著影響，這可能與病例納入標準不同有關(guān)。經(jīng)Logistic多因素回歸分析，患者BMI、血壓基線水平和rs2238032基因型是影響氨氯地平降壓療效的相關(guān)因素。但本研究存在兩點不足：本研究中基于倫理道德，將治療期間出現(xiàn)不良反應(yīng)的患者剔除研究，一定程度上影響了對結(jié)果的分析；樣本量較小，且因資金技術(shù)等問題未對CACNA1C所有位點進行分析，具有一定局限性。

綜上所述，原發(fā)性高血壓患者的BMI、血壓基線水平及rs2238032基因型與氨氯地平療效明顯相關(guān)，臨床應(yīng)參考相關(guān)因素制訂合理用藥方案。同時，本研究還為單因素對氨氯地平降壓療效的交互作用提供了有力的依據(jù)。

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Correlation Analysis between the Polymorphism of L Type Calcium Channel α1C Gene and Efficacy of Amlodipine on Hypertension

Dang Liqun，He Qingrong，Zhu Feifei，Li Sumei，F(xiàn)u Dongmei
（Daqing Longnan Hospital，Daqing，Heilongjiang，China163453）

ObjectiveTo investigate the correlation between the polymorphism of L type calcium channel α1C gene（CACNA1C）and the efficacy of amlodipine on hypertension.Methods92 cases of hypertensive patients treated in the hospital from January 2014 to January 2015 were selected and given amlodipine（2.5 mg/d）for 4 weeks after 2-week washout period.They were divided into high efficiency group（ΔSBP≥20mmHg），medium efficiency group（10 mmHg≤ΔSBP＜20 mmHg）and low efficiency group（ΔSBP＜10 mmHg）.The general clinical features and polymorphism of CACNA1C gene（rs2238032，rs2239128 and rs1051375 allelic loci）were compared among 3 groups.ResultsThe baseline levels of SBP and DBP in high efficiency group and medium efficiency group were higher than those in low efficiency group（P＜0.05）.The BMI of high efficiency group and medium efficiency group were higher than that of low efficiency group（P＜0.05）.In different types of rs2238032 allelic loci，the degree of decreasing blood pressure was TT type，GT type and GG type from high to low order.According to Logistic analysis，the effect of amlodipine was related to BMI，baseline level of blood pressure and rs2238032 gene types.ConclusionThe effect of amlodipine was related to BMI，baseline level of blood pressure and rs2238032 gene types.

hypertension；amlodipine；L type calcium channel α1C gene；gene polymorphism

R969.3；R972+.4

A

1006-4931（2016）12-0032-04

黨立群（1972-），女，大學(xué)本科，主治醫(yī)師，研究方向為動態(tài)心電和動態(tài)血壓監(jiān)測，（電子信箱）504591246@qq.com。

（2016-01-06；

2016-02-13）