柿木屑基質(zhì)下香菇培養(yǎng)基的優(yōu)化

劉敏,齊悅歌,申小燕,徐嘯晨,王謙

(1.河北大學(xué)生物技術(shù)研究中心,河北保定　071002；2.河北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,河北保定　071002)

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柿木屑基質(zhì)下香菇培養(yǎng)基的優(yōu)化

劉敏,齊悅歌,申小燕,徐嘯晨,王謙

(1.河北大學(xué)生物技術(shù)研究中心,河北保定071002；2.河北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,河北保定071002)

以柿木屑為基質(zhì),以菌絲長速和生物轉(zhuǎn)化率為主要指標(biāo),對(duì)香菇(Lentinusedodes)的栽培培養(yǎng)基進(jìn)行了優(yōu)化,結(jié)果表明：配方B是栽培香菇較為適宜的栽培配方,各組分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為柿木屑60%,雜木屑20%,麩皮19%,石灰1%.

香菇；柿木屑；栽培

香菇(Lentinusedodes)又名冬菇、香蕈、香菌等,隸屬于擔(dān)子菌門、傘菌綱、多孔菌目、多孔菌科、香菇屬,是世界著名的食用菌之一[1].香菇營養(yǎng)豐富,口味鮮美,是一種食藥兼用菌,其主要成分有香菇多糖、香菇嘌呤、三萜類化合物、核苷酸、多種蛋白質(zhì)和氨基酸、膳食纖維素等,有研究表明香菇還具有一定的免疫調(diào)節(jié)作用[2]，故深受消費(fèi)者的喜愛.目前行業(yè)內(nèi)主要使用雜木屑栽培香菇,近年來香菇產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅速,雜木屑的價(jià)格也一路飆升,且難以滿足香菇生產(chǎn)日益增長的需求,因此，尋找新原料栽培香菇具有重大的現(xiàn)實(shí)意義.柿子的栽培歷史悠久、栽培面積廣,河北省柿子的產(chǎn)量居全國第一.由于柿樹枝條的修剪,每年產(chǎn)生大量的廢棄柿木,不能被很合理地利用,只是被燒火或堆置,不僅浪費(fèi)資源,還污染環(huán)境.本文利用柿木屑來部分代替?zhèn)鹘y(tǒng)的雜木屑栽培香菇,初步確定適宜的配方,為柿木屑的開發(fā)利用提供參考.

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1供試菌株

香菇菌株X006,河北大學(xué)食藥用真菌研究所保藏菌種.

1.1.2培養(yǎng)基

斜面培養(yǎng)基：質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為馬鈴薯15%,麩皮5%,瓊脂2%,蔗糖2%.

原種培養(yǎng)基：質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為雜木屑80%,麩皮19%,石灰1%.

栽培培養(yǎng)基配方見表1.

表1　栽培培養(yǎng)基配方(干料)

1.2方法

1.2.1不同配方菌絲生長情況實(shí)驗(yàn)

按照表1進(jìn)行培養(yǎng)基的配制,配好后裝入18 mm×180 mm試管中,每管干料約8 g,121 ℃、0.15 MPa滅菌2.5 h,待培養(yǎng)基冷卻至室溫時(shí)進(jìn)行接種.接種時(shí)將X006菌株取等量菌塊分別轉(zhuǎn)接在各個(gè)培養(yǎng)基上,每組5個(gè)平行,25 ℃恒溫避光培養(yǎng),培養(yǎng)過程中注意觀察,待菌絲萌發(fā)長齊后開始劃線,每隔5 d劃1次線,記錄菌絲的長速、長勢.

1.2.2不同配方栽培比較實(shí)驗(yàn)

按表1栽培培養(yǎng)基配方,稱重,混合均勻后,按料水質(zhì)量比1∶(1.2～1.3)將水加入干料中,使培養(yǎng)料中水的質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)65%～75%(緊攥感覺指縫有水分溢出但不滴落),待培養(yǎng)基質(zhì)充分吸收水后裝入17 cm×32 cm×0.005 cm栽培袋中,每袋裝干料約320 g,每個(gè)配方接100袋.滅菌、接種.

在18～30 ℃條件下避光培養(yǎng),定期觀察菌絲生長情況,并記錄滿袋時(shí)間,菌絲長滿后,移至出菇棚,準(zhǔn)備脫袋轉(zhuǎn)色,進(jìn)行出菇管理.定時(shí)觀察各不同配方中的出菇情況,并計(jì)算生物轉(zhuǎn)化率.

生物轉(zhuǎn)化率=子實(shí)體鮮重/培養(yǎng)料干重×100%.

1.2.3香菇多糖的提取

子實(shí)體多糖的提取采用常規(guī)的水提醇沉法[3-6].首先將子實(shí)體烘干、去柄、粉碎.稱取10 g香菇干粉,加入200 mL蒸餾水,85 ℃水浴浸提5 h,粗蛋白去除采用Sevag 法：氯仿、正丁醇按體積比4∶1 混合后再以樣液、氯仿-正丁醇3∶1的體積比加入到多糖樣品中震蕩,使樣品中蛋白質(zhì)與混合液形成凝膠[7],過濾收集濾液.向?yàn)V液中加入2.5倍體積的無水乙醇,4 ℃靜置過夜,過濾后收集沉淀即為香菇多糖,烘干、稱重,計(jì)算多糖含量,每組做3個(gè)平行.

多糖含量=多糖質(zhì)量/樣品質(zhì)量×100%.

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析.

2　結(jié)果與分析

2.1不同配方菌絲生長情況

香菇菌株在不同配方培養(yǎng)基中菌絲生長情況見表2.

從表2可以看出,香菇在B、D培養(yǎng)基上長速較快并且與對(duì)照無顯著性差異,可以初步判斷,柿木屑完全可以用來栽培香菇,并且能達(dá)到與雜木屑相當(dāng)?shù)乃?

2.2不同配方栽培比較實(shí)驗(yàn)

香菇菌株在不同配方培養(yǎng)基中生物轉(zhuǎn)化率情況見表3.

表2　香菇菌株在不同培養(yǎng)基中的生長速度

不同小寫字母表示0.05水平上差異顯著；不同大寫字母表示0.01水平上差異極顯著；“+++”表示菌絲生長濃密.

表3　香菇菌株在不同培養(yǎng)基中的生物轉(zhuǎn)化率

不同小寫字母表示0.05水平上差異顯著；不同大寫字母表示0.01水平上差異極顯著.

從表3的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出,CK培養(yǎng)基中香菇的滿袋天數(shù)最短,生物轉(zhuǎn)化率最高,配方B、C、D與對(duì)照相比雖然生物轉(zhuǎn)化率有但是并無顯著性差異,因?yàn)榕浞紹的柿木屑含量較高，實(shí)際生產(chǎn)成本更低,結(jié)合2.1的實(shí)驗(yàn)結(jié)果綜合考慮,利用柿木屑栽培香菇的適宜配方為B:其中各組分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為柿木屑60%,雜木屑20%,麩皮19%,石灰1%.

2.3不同配方香菇多糖含量

不同配方栽培得到的香菇子實(shí)體中多糖含量情況見表4.

表4　香菇菌株在不同培養(yǎng)基中的多糖含量比較

相同小寫字母表示0.05水平上無顯著性差異.

由表4可知,不同配方栽培得到的香菇子實(shí)體中香菇多糖含量無顯著性差異,說明利用柿木屑栽培香菇并沒有影響香菇的藥用價(jià)值.

3　結(jié)論

本文從菌絲長速、滿袋時(shí)間、生物轉(zhuǎn)化率和多糖含量4個(gè)方面對(duì)利用柿木屑栽培香菇時(shí)的配方進(jìn)行了探討,適宜配方為B，其中各組分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為柿木屑60%、雜木屑20%、麩皮19%、石灰1%,不僅降低了生產(chǎn)成本、豐富了食用菌栽培原料,還為農(nóng)林廢棄物柿木屑的資源化利用開辟了一條新途徑.

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(責(zé)任編輯：趙藏賞)

Optimization of the cultivation medium for Lentinus edodes based on persimmon wood chips

LIU Min1,QI Yuege2,SHEN Xiaoyan2,XU Xiaochen2,WANG Qian1

(1.Research Center of Biotechnology,Hebei University ,Baoding 071002,China；2.College of Life Sciences,Hebei University,Baoding 071002,China)

Taking persimmon wood chips as materials,the formula of cultivation medium was studied according to the mycelial growth rate and biological efficiency.The results showed that the optimal cultivation medium was B.The mass fraction of each component was:persimmon wood chips 60%,sawdust 20%,bran 19%,and quicklime 1%.

Lentinusedodes；persimmon wood chips；mushroom cultivation

10.3969/j.issn.1000-1565.2016.02.012

2015-05-25

河北省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系食用菌創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目

劉敏(1985—),女,河北保定人,河北大學(xué)實(shí)驗(yàn)師,主要從事食藥用真菌研究與開發(fā)工作.

E-mail：liumin870115@163.com

Q93-335

A

1000-1565(2016)02-0180-04