復(fù)方抗?jié)⒒鞈乙孩虻蔫b別研究

葉根深，忻志鳴，葛德洲，姚莉，鄧祖磊

（1.安徽省蚌埠市第一人民醫(yī)院藥學(xué)部，安徽蚌埠233000；2.安徽省蚌埠市藥品食品檢驗(yàn)中心，安徽蚌埠233000）

復(fù)方抗?jié)⒒鞈乙孩虻蔫b別研究

葉根深1，忻志鳴1，葛德洲2，姚莉2，鄧祖磊2

（1.安徽省蚌埠市第一人民醫(yī)院藥學(xué)部，安徽蚌埠233000；2.安徽省蚌埠市藥品食品檢驗(yàn)中心，安徽蚌埠233000）

目的研究復(fù)方抗?jié)⒒鞈乙孩颍–AUSⅡ）的鑒別方法,為建立、完善醫(yī)院內(nèi)制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。方法以薄層色譜（TLC）法對(duì)制劑中黃芩、黃芪進(jìn)行定性鑒別；并通過外觀性狀及紫外光譜（UV）法檢測(cè)諾氟沙星，對(duì)CAUSⅡ與復(fù)方抗?jié)⒒鞈乙海–AUS）進(jìn)行鑒別。結(jié)果CAUSⅡ中黃芩、黃芪經(jīng)TLC法鑒別，斑點(diǎn)清晰，分離度好，相應(yīng)缺味陰性對(duì)照不形成干擾。CAUSⅡ呈橙黃色，UV法273 nm波長(zhǎng)處無吸收；CAUS為棕黃色，UV法273 nm波長(zhǎng)處有吸收。結(jié)論CAUSⅡ中黃芩、黃芪可用TLC法鑒別檢出；與CAUS相比，CAUSⅡ可通過外觀顏色及UV法鑒別。

復(fù)方抗?jié)⒒鞈乙孩?；薄層色譜法；鑒別；黃芩苷；黃芪甲苷

復(fù)方抗?jié)⒒鞈乙孩颍–AUSⅡ）是基于醫(yī)院既往院內(nèi)制劑復(fù)方抗?jié)⒒鞈乙海–AUS）而改良的自制制劑，處方中去除了諾氟沙星，仍含有黃芩、黃芪等組分，用于感染性、非感染性創(chuàng)面［1］及拔甲術(shù)后創(chuàng)面［2］，臨床療效佳。本研究中以薄層色譜（TLC）法對(duì)制劑中黃芩、黃芪進(jìn)行了定性鑒別，并通過外觀性狀及紫外光譜（UV）法檢測(cè)諾氟沙星，以鑒別CAUSⅡ與CAUS，為建立、完善醫(yī)院內(nèi)制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。現(xiàn)報(bào)道如下。

1　儀器與試藥

1.1儀器

薄層層析硅膠G（青島海洋化工廠分廠）；聚酰胺薄膜（浙江省臺(tái)州市路橋四甲生化塑料廠）；TU-1901型雙光束紫外分光光度計(jì)（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）；WP-95-1型三用紫外分析儀（溫州奧利生物醫(yī)學(xué)儀器廠）；pHS-3C型pH計(jì)（上海雷磁儀器廠）。

1.2試藥

黃芩苷對(duì)照品（供含量測(cè)定用，批號(hào)為110715-201117），黃芪甲苷對(duì)照品（供含量測(cè)定用，批號(hào)為110781-200512），諾氟沙星對(duì)照品（供含量測(cè)定用，批號(hào)為130450-201206），均由中國食品藥品檢定研究院提供；水為重蒸餾水，其他試劑均為分析純；供試品CAUSⅡ，缺味陰性對(duì)照樣品均為我院自制；CAUS（我院自制），作為鑒別性狀及檢測(cè)諾氟沙星時(shí)的對(duì)照品。

2　方法與結(jié)果

2.1TLC法鑒別黃芩［3-4］

取本品10 mL，加甲醇30 mL，加熱回流30 min，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0 mL使溶解，用鹽酸調(diào)節(jié)pH至1～2，用乙酸乙酯振搖提取2次，每次20 mL，合并提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液；同法制備未加入黃芩的缺味陰性對(duì)照品溶液。另取黃芩苷對(duì)照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照2010年版《中國藥典（一部）》附錄ⅥB薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各3 μL，分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5∶3∶1∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1%三氯化鐵乙醇溶液。供試品溶液色譜中，在與對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，而黃芩缺味陰性對(duì)照品溶液無干擾。詳見圖1。

2.2TLC法鑒別黃芪［5-6］

取CAUSⅡ20 mL，加甲醇40 mL，加熱回流4 h，濾過，濾液加于中性氧化鋁柱（100～200目，8 g，內(nèi)徑12 mm）上，用40%甲醇100 mL洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)铀?5 mL使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次25 mL，合并正丁醇提取液，用水洗滌2次，每次25 mL，棄去水液，正丁醇蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液；同法制備不含黃芪的缺味陰性對(duì)照品溶液。另取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照2010年版《中國藥典（一部）》附錄ⅥB薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各8 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13∶7∶2）的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品溶液色譜中，在與對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；黃芪缺味陰性對(duì)照品溶液無干擾。詳見圖2。

圖1　黃芩薄層色譜圖

圖2　黃芪薄層色譜圖

2.3CAUSⅡ與CAUS的鑒別

2.3.1性狀

相同試驗(yàn)條件下，考察3批供試品CAUSⅡ、對(duì)照品CAUS的性狀。CAUSⅡ呈橙黃色，CAUS為棕黃色。兩者均為黏稠狀混懸液，久置后可明顯分層，但無結(jié)塊；相同力度輕輕振搖5～10 s后均可再次恢復(fù)為混懸液；均具有芳香氣味。兩者除顏色有差異外，上述其他性狀無明顯不同。

2.3.2UV檢測(cè)諾氟沙星［7］

取CAUSⅡ1 mL，精密加入0.1%氫氧化鈉溶液100 mL，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液2 mL，置50 mL容量瓶中，加0.1%氫氧化鈉溶液稀釋至刻度，搖勻；同法制備對(duì)照品。參考2010年版《中國藥典（二部）》“諾氟沙星乳膏”項(xiàng)下紫外光譜鑒別法；不含諾氟沙星的CAUSⅡ在此條件下無吸收，而對(duì)照品溶液（含諾氟沙星的CAUS）在273 nm波長(zhǎng)處有最大吸收。詳見圖3。

圖3　光譜掃描曲線圖

3　討論

CAUSⅡ臨床療效良好，但缺乏具體的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，不利于質(zhì)量控制及作用機(jī)制等方面的深入研究。定性鑒別研究是開展藥品質(zhì)量控制的重要內(nèi)容［8］，常采用薄層色譜法［9］；而黃芩、黃芪具有清熱燥濕、涼血解毒［10］及益衛(wèi)固表、托瘡生?。?1］等作用，是CAUSⅡ中的重要組分；故本研究中結(jié)合文獻(xiàn)資料，通過薄層色譜法對(duì)兩者進(jìn)行了鑒別研究。

薄層色譜法檢測(cè)黃芩時(shí)，與文獻(xiàn)［3-4］中報(bào)道所用展開劑不同，本試驗(yàn)中采用了乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5∶3∶1∶1），能使供試品及各對(duì)照品良好分離；鑒別黃芪時(shí)，則選用了三氯甲烷-甲醇-水（13∶7∶2）為展開劑，這與文獻(xiàn)［5-6］方法也不盡相同；可能與具體供試品、硅膠G薄層板、試驗(yàn)室溫濕度條件差異等因素有關(guān)。本研究結(jié)果證實(shí)，應(yīng)用上述方法，能依次檢出CAUSⅡ中的黃芩、黃芪，且相應(yīng)缺味陰性對(duì)照品不形成明顯干擾，達(dá)到了有效鑒別的目的，方法可行、易于操作。

能否恢復(fù)均勻混懸狀態(tài)是混懸劑的重要屬性之一。本研究結(jié)果顯示，CAUSⅡ久置后可分層，但無結(jié)塊，且經(jīng)輕微振搖后可迅速恢復(fù)為混懸液，符合要求，便于臨床應(yīng)用。

CAUSⅡ是基于CAUS改良后的制劑，本研究中在考察CAUSⅡ性狀特征、完善質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的同時(shí)，對(duì)兩者進(jìn)行了鑒別。本研究結(jié)果顯示，兩者在靜置分層時(shí)間、振搖后恢復(fù)混懸狀態(tài)情況、氣味等性狀上無明顯差異；但制劑顏色分別為橙黃色、棕黃色，可利于進(jìn)一步增強(qiáng)兩者辨識(shí)度，有效防范研究過程中誤用、混用。此外，在特殊情形如發(fā)生嚴(yán)重不良事件而需定性檢測(cè)制劑中是否含有諾氟沙星時(shí)，可參照本研究結(jié)果，按文中操作步驟，以UV法檢測(cè)制劑在273 nm波長(zhǎng)處是否有相應(yīng)吸收。

本研究中未包含CAUSⅡ組方中其他組分的定性鑒別，也未進(jìn)行相關(guān)組分的含量測(cè)定，將在今后的研究中加以探索、完善質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

［1］忻志鳴，葉根深，黃紅艷，等.復(fù)方抗?jié)⒒鞈乙孩驅(qū)?chuàng)面愈合的療效觀察［J］.安徽醫(yī)藥，2015，19（9）：1 811-1 813.

［2］葉根深，忻志鳴，黃紅艷，等.復(fù)方抗?jié)⒒鞈乙孩驅(qū)Π渭仔g(shù)創(chuàng)面愈合的作用［J］.中國藥業(yè)，2014，23（18）：111-112.

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Study on the Identification of Compound Anti-Ulcer SuspensionsⅡ

Ye Genshen1，Xin Zhiming1，Ge Dezhou2，Yao Li2，Deng Zulei2
（1.Department of Pharmacy，Bengbu First People′s Hospital，Bengbu，Anhui，China233000；2.Bengbu Food and Drug Inspection Center，Bengbu，Anhui，China233000）

ObjectiveTo study the identification methods for Compound Anti-Ulcer SuspensionsⅡ（CAUSⅡ），and to provide the basis for the future establishment and improvement of the hospital preparation quality standards.MethodsThin layer chromatography（TLC）was used in qualitative identification for Scutellaria baicalensis and astragalus in CAUSⅡ，and CAUSⅡwas identified with Compound Anti-Ulcer Suspensions（CAUS）by the appearance or ultraviolet spectroscopy（UV）detection for norfloxacin.ResultsScutellaria baicalensis and astragalus in CAUSⅡwere well separated with clear spot by TLC，while the relative negative control didn′t show any spot.CAUSⅡwas orange yellow，and had no absorption at 273 nm in UV，while CAUS was brown and had UV absorption at 273 nm.ConclusionScutellaria baicalensis and astragalus in CAUSⅡcan be identified by TLC；compared with CAUS，CAUSⅡcan be identified by color and UV method.

Compound Anti-Ulcer SuspensionsⅡ；thin layer chromatography；identification；baicalin；astragaloside

R284．1；R286．0

A

1006－4931（2016）16－0020－03

安徽省蚌埠市科技局科研計(jì)劃項(xiàng)目，項(xiàng)目編號(hào)：蚌科2011-33號(hào)。

葉根深，男，碩士研究生，主管藥師，研究方向?yàn)榕R床藥學(xué)與藥事管理，（電話）0552-4017964（電子信箱）bongb@126.com；忻志鳴，男，大學(xué)本科，主任藥師，研究方向?yàn)樗幨鹿芾?、藥效學(xué)與藥物代謝動(dòng)力學(xué)，本文通訊作者，（電話）0552-4017964（電子信箱）xzm999999@163.com。

（2016－03－22；

2016－05－01）