利用剩余試劑進(jìn)行Sysmex XE5000全自動(dòng)血液分析儀的性能驗(yàn)證

劉　麗，李　梅，薛　暄，王　輝，張迎久，孫艷艷

(首都醫(yī)科大學(xué)石景山教學(xué)醫(yī)院/北京市石景山醫(yī)院檢驗(yàn)科　100043)

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·臨床研究·

利用剩余試劑進(jìn)行Sysmex XE5000全自動(dòng)血液分析儀的性能驗(yàn)證

劉麗，李梅，薛暄，王輝，張迎久，孫艷艷△

(首都醫(yī)科大學(xué)石景山教學(xué)醫(yī)院/北京市石景山醫(yī)院檢驗(yàn)科100043)

目的探討合并剩余試劑進(jìn)行Sysmex XE5000全自動(dòng)血液分析儀的性能驗(yàn)證。方法將Sysmex XE5000儀器的原裝剩余稀釋液、4DL、FFS試劑分別進(jìn)行合并，利用合并的殘液以國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會、美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會制定的評價(jià)方案為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評價(jià)試驗(yàn)。結(jié)果利用剩余試劑進(jìn)行的儀器性能驗(yàn)證，全血細(xì)胞計(jì)數(shù)精密度、準(zhǔn)確度、正確度、線性范圍良好，攜帶污染率低，2種進(jìn)樣模式相關(guān)性好，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)結(jié)果可比性好。結(jié)論Sysmex XE5000全自動(dòng)血液分析儀可對剩余試劑合并再利用，且能保證檢測質(zhì)量，降低檢測成本。

ISO 15189；全自動(dòng)血液分析儀；剩余試劑；性能驗(yàn)證；精密度；攜帶污染率

醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室ISO15189《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力的專用要求》指出，申請認(rèn)可的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對設(shè)備、檢測系統(tǒng)或方法的主要分析性能進(jìn)行驗(yàn)證，達(dá)到臨床檢測的標(biāo)準(zhǔn)[1]。該院檢驗(yàn)科使用的Sysmex XE 5000血液分析儀，以半導(dǎo)體激光器的流式細(xì)胞計(jì)數(shù)為基礎(chǔ)[2-3]?，F(xiàn)探討利用在效期內(nèi)合并儀器的剩余試劑，參考國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會、美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(CLSI)的相關(guān)性能評價(jià)文件，以該院健康體檢者、門診患者及住院患者的EDTA-K2抗凝血為研究對象，對Sysmex XE5000血液分析儀進(jìn)行性能評價(jià)實(shí)驗(yàn)[4]。

1　資料與方法

1．1一般資料EDTA-K2抗凝靜脈血標(biāo)本來自該院健康體檢者、門急診患者、血液科住院患者，標(biāo)本采集嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程(第3版)》執(zhí)行[5]。

1．2儀器與試劑日本Sysmex公司生產(chǎn)的XE 5000全自動(dòng)血液分析儀。所用校準(zhǔn)品和質(zhì)控品均為該儀器的配套產(chǎn)品，試劑全部為原裝試劑，其中稀釋液、4DL、FFS為效期內(nèi)合并的剩余原裝試劑，合并剩余試劑為同一項(xiàng)目、同一批號試劑，將瓶中剩余試劑每7～8瓶合并為1瓶。輕輕充分混勻，將氣泡小心吸出。所有合并試劑保證正確環(huán)境下保存、有效期內(nèi)使用。

1．3檢測方法[6]按照《WS/T406-2012 臨床血液學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目分析質(zhì)量要求》《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則》《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》，利用有效期內(nèi)、正確環(huán)境下保存的合并試劑，對Sysmex XE5000進(jìn)行本底計(jì)數(shù)驗(yàn)證、攜帶污染率驗(yàn)證、批內(nèi)精密度和日間精密度驗(yàn)證、線性范圍驗(yàn)證、正確度驗(yàn)證、不同吸樣模式的結(jié)果可比性、儀器間可比性驗(yàn)證及精密度驗(yàn)證。

1.3.1本底計(jì)數(shù)驗(yàn)證使用稀釋液作為標(biāo)本，在血球儀上連續(xù)檢測3 次，3 次檢測結(jié)果的最大值要求在允許范圍內(nèi)。

1.3.4日間精密度驗(yàn)證至少使用正常和異常2個(gè)水平的全血質(zhì)控品，在檢測當(dāng)天至少進(jìn)行1次室內(nèi)質(zhì)控剔除失控?cái)?shù)據(jù)后，按批號或月份計(jì)算在控?cái)?shù)據(jù)的變異系數(shù)。

1.3.5線性范圍驗(yàn)證根據(jù)CLSI EP6-P文件選取1份高值全血標(biāo)本(H)，按100%、80%、60%、40%、20%、0%的比例進(jìn)行稀釋，每個(gè)稀釋度重復(fù)測定3次，計(jì)算均值。均值與理論值作比較(偏離應(yīng)小于10%)，計(jì)算Y=aX+b，驗(yàn)證線性范圍。若斜率a在1.00±0.05范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r≥0.975或r2≥0.95。白細(xì)胞(WBC)、紅細(xì)胞(RBC)、血紅蛋白(Hb)、血小板(PLT)項(xiàng)目滿足要求的線性范圍在廠家說明書規(guī)定的范圍內(nèi)，則線性驗(yàn)證合格。

1.3.6正確度驗(yàn)證正確度驗(yàn)證以偏倚為評價(jià)指標(biāo)，使用20 份檢測結(jié)果在參考區(qū)間內(nèi)的新鮮全血，每份標(biāo)本檢測1次，計(jì)算20 次檢測結(jié)果的均值，以校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室的定值為標(biāo)準(zhǔn)，計(jì)算偏倚。正確度驗(yàn)證的允許偏倚判定標(biāo)準(zhǔn)CV分別：WBC≤5.00%，RBC≤2.00%，Hb≤2.50%，紅細(xì)胞壓積(HCT)≤2.50%，PLT≤6.00%，平均紅細(xì)胞體積(MCV)≤3.00%，平均血紅蛋白含量(MCH)≤3.00%，平均血紅蛋白濃度(MCHC)≤3.00%。

1.3.7不同吸樣模式的結(jié)果可比性驗(yàn)證儀器校準(zhǔn)后，取5份全血標(biāo)本，分別使用手動(dòng)進(jìn)樣和自動(dòng)進(jìn)樣2種不同模式進(jìn)行檢測，每份標(biāo)本各檢測2次，計(jì)算2種模式下檢測結(jié)果均值間的偏差，結(jié)果應(yīng)符合《臨床血液學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目的分析質(zhì)量要求》，偏差要求分別：WBC≤5.00%，RBC≤2.00%，Hb≤2.00%，HCT≤3.00%，MCV≤3.00%，PLT≤7.00%。

1.3.8儀器間可比性驗(yàn)證取20份臨床標(biāo)本，有一定濃度要求，以該科內(nèi)部規(guī)范操作檢測系統(tǒng)(貝克曼LH780 分析儀)為參考儀器，Sysmex XE5000為比對儀器，分別進(jìn)行檢測，以內(nèi)部規(guī)范操作檢測系統(tǒng)(貝克曼LH780 分析儀)的測定結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，計(jì)算相對偏差，WBC、RBC、Hb、PLT、HCT、MCV、MCH、MCHC 結(jié)果偏倚符合WS/T406-2012《臨床血液學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目分析質(zhì)量要求》中要求的比例(≥80%)。

1.3.9準(zhǔn)確度驗(yàn)證使用5份北京市室間質(zhì)評物分別進(jìn)行單次檢測，計(jì)算5份標(biāo)本檢測結(jié)果與靶值(室間質(zhì)評反饋結(jié)果)的相對偏差，每個(gè)檢測項(xiàng)目的相對偏差符合《臨床血液學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目的分析質(zhì)量要求》(行業(yè)標(biāo)準(zhǔn))比例(≥80%)。各參數(shù)變異系數(shù)分別為：WBC 5.00%，RBC 6.00%，Hb 6.00%，HCT 9.00%，PLT 20.00%，MCV 7.00%，MCH 7.00%，MCHC 8.00% 。

2　結(jié)　　果

2.1本底計(jì)數(shù)Sysmex XE5000血液分析儀檢測WBC、RBC、Hb、PLT本底值均為“0”，符合判定標(biāo)準(zhǔn)，驗(yàn)證合格。

2.2攜帶污染率WBC、RBC、Hb、PLT 的攜帶污染率分別為0.05%、0.15%、0、0.09%， 均小于標(biāo)準(zhǔn)1%，符合判定標(biāo)準(zhǔn)，驗(yàn)證合格。

2.3批內(nèi)精密度正常水平全血標(biāo)本檢測后，WBC、RBC、Hb、HCT、PLT、MCV、MCH、MCHC 的CV值分別為1.95%、0.42%、0.25%、0.90%、1.02%、0.55%、0.46%、1.08%，均小于判定標(biāo)準(zhǔn)(3.75%、1.50%、1.00%、1.50%、4.00%、1.00%、2.00%、2.00%)，驗(yàn)證合格。

2.4日間精密度本試驗(yàn)檢測的中、低2個(gè)水平的質(zhì)控品，其中中值水平的CV值為：WBC 1.08%，RBC 0.57%，Hb 0.52%，HCT 1.10%，PLT 1.70%，MCV 0.94%，MCH 0.84%，MCHC 1.30%；低值水平的CV值為：WBC 1.86%，RBC 0.77%，Hb 0.99%，HCT 1.37%，PLT 3.85%，MCV 0.93%，MCH 1.16%，MCHC 1.17%均小于判定標(biāo)準(zhǔn)。驗(yàn)證合格。

2.5線性范圍WBC、RBC、Hb、PLT 4項(xiàng)的線性范圍驗(yàn)證，a值(1.00±0.05)及r(≥0.975)均在判定標(biāo)準(zhǔn)要求范圍內(nèi),驗(yàn)證合格。見表1。

表1　　Sysmex XE5000線性范圍評價(jià)結(jié)果

2.6正確度以實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部規(guī)范操作檢測系統(tǒng)的測定均值為標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)行本儀器檢測的WBC、RBC、Hb、HCT、PLT、MCV、MCH、MCHC均值計(jì)算偏移。結(jié)果WBC、RBC、Hb、HCT、PLT、MCV、MCH、MCHC的偏移分別為4.73%、1.99%、1.72%、0.45%、1.99%、2.72%、1.05%、2.02%；均小于WS/T406-2012 判定標(biāo)準(zhǔn)，正確度驗(yàn)證合格。

2.7不同吸樣模式可比性手動(dòng)進(jìn)樣模式與自動(dòng)進(jìn)樣模式WBC、RBC、Hb、HCT、MCV、PLT的偏差分別為3.94%、0.84%、0.15%、1.03%、0.16%、4.72%，均小于WS/T406-2012判定標(biāo)準(zhǔn)，不同吸樣模式可比性驗(yàn)證合格。

2.8儀器間可比性Sysmex XE5000分析儀與貝克曼 LH780分析儀的可比性結(jié)果，20 份標(biāo)本的WBC、RBC、Hb、PLT、HCT、MCV、MCH、MCHC 結(jié)果偏倚符合率分別為90%、100%、100%、90%、100%、100%、100%、100%，均大于80%，符合WS/T406-2012 判定標(biāo)準(zhǔn)，驗(yàn)證合格。

2.9準(zhǔn)確度使用5份北京市質(zhì)評物進(jìn)行單次檢測，計(jì)算每份標(biāo)本檢測結(jié)果與靶值(室間質(zhì)評反饋結(jié)果)的相對偏差，WBC、RBC、Hb、PLT、HCT、MCV、MCH、MCHC結(jié)果偏差分別為：1號質(zhì)控物0.5%、2.6%、0、3.3%、0、0.5%、2.9%、3.4%；2號質(zhì)控物0.4%、2.1%、1.5%、4.9%、0.9%、2.6%、1.0%、3.8%；3號質(zhì)控物1.0%、3.2%、1.1%、4.1%、1.2%、0.5%、2.4%、3.2%；4號質(zhì)控物1.1%、1.7%、0.7%、4.9%、2.6%、3.1%、0.7%、4.1%；5號質(zhì)控物：2.2%、0.8%、1.5%、4.6%、1.4%、3.4%、0.6%、2.9%。均小于WS/T406-2012 判定標(biāo)準(zhǔn)，驗(yàn)證合格。

3　討　　論

Sysmex XE5000血細(xì)胞分析儀是目前臨床廣泛應(yīng)用的儀器之一，其檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性直接影響臨床對疾病的診斷和治療[8]。但該儀器使用的進(jìn)口試劑價(jià)格昂貴，本研究探討剩余試劑進(jìn)行儀器方法學(xué)驗(yàn)證，為檢測結(jié)果提供溯源性。ISO15189明確要求：分析系統(tǒng)應(yīng)具有完整性和有效性，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)使用與分析系統(tǒng)相適應(yīng)的試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品和消耗品等，并應(yīng)提供測定結(jié)果的溯源性[9]。近年來原衛(wèi)生部及各級臨床檢驗(yàn)中心也一再明確要求保證分析系統(tǒng)有效性。實(shí)際工作中由于成本因素，進(jìn)行剩余試劑的合并使用，但并未進(jìn)行儀器方法學(xué)驗(yàn)證，缺乏依據(jù)，影響系統(tǒng)的完整性、有效性。本研究利用EP15A CLSI標(biāo)準(zhǔn)化文件，對該儀器有效期內(nèi)、正確保存的合并剩余試劑進(jìn)行儀器的性能驗(yàn)證，結(jié)果表明，儀器的本底計(jì)數(shù)、攜帶污染率、批內(nèi)精密度、日間精密度、線性范圍、正確度、不同吸樣模式可比性、儀器間可比性、準(zhǔn)確度均達(dá)到WS/T406-2012 判定標(biāo)準(zhǔn)。

本研究結(jié)果顯示，Sysmex XE5000全自動(dòng)血液分析儀可對稀釋液、4DL、FFS的剩余試劑合并再利用，且能保證檢測質(zhì)量，有效降低檢測成本；同時(shí)，根據(jù)使用Sysmex XE5000的總結(jié),并且查閱大量文獻(xiàn)，Sysmex XE5000全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀性能良好，具有攜帶污染率低、精密度高、線性范圍寬及結(jié)果準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)，能夠滿足大、中型醫(yī)院的臨床檢測需求[10-11]。

[1]中國合格評定國家認(rèn)可委員會.ISO 15189醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則[S]．北京：中國合格評定國家認(rèn)可委員會，2008：1236．

[2]Hedley BD,Keeney M,Chin-Yee I,et al.Initial performance evaluation ofthe UniCel(R)DxH 800 Coulter(R) cellularanalysis system[J].Int J Lab Hematol,2011,33(1):45-56.

[3]陸進(jìn)，金燕，吳元?。甋ysmex XE5000血液分析儀檢測非血體液細(xì)胞的性能評價(jià)[J]．臨床檢驗(yàn)雜志，2012，30(4)：318-319．

[4]何俊，陳莉，趙美英．Sysmex XT5000i 全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀應(yīng)用評價(jià)[J]．國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2009，30(9)：917-920．

[5]葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜．全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M]．3版．南京：東南大學(xué)出版社，2006：496．

[6]劉志昂，陸婷婷，蘇靖凱．BC-5380全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀的性能評價(jià)[J]．實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2013，31(4)：407-408,395．

[7]胡曉波，宋穎，王青，等．ICSH血液分析儀評價(jià)指南介紹(2004年版上)[J]．檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2014，29(12)：1201-1206．

[8]彭黎明，叢玉隆．我國血細(xì)胞自動(dòng)分析中存在的問題及對策[J]．中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2005，28(9)：885-887．

[9]金逸，王雪琴，陸慧，等．羅氏COBAS化學(xué)發(fā)光儀殘留試劑檢測CA72-4、CYFRA211的初步評估[J]．中國血液流變學(xué)雜志，2012，22(4)：698-699．

[10]叢玉隆，樂家新．Sysmex XE2100 自動(dòng)血細(xì)胞分析和白細(xì)胞分類的復(fù)檢規(guī)則探討[J]．中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2008，31(7)：752-757．

[11]夏萬寶，張冬青，侯彥強(qiáng)，等．XE2100型血液分析儀應(yīng)用性能評價(jià)[J]．國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2015，31(21)：3194-3197．

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10.3969/j.issn.1673-4130.2016.19.061

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1673-4130(2016)19-2790-02

2016-02-11

2016-06-24)