釩對(duì)雛雞大腦皮層γ-氨基丁酸表達(dá)的影響

唐　麗，辛丹寧，田春洋，崔恒敏

(四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，成都 611130)

?

釩對(duì)雛雞大腦皮層γ-氨基丁酸表達(dá)的影響

唐麗，辛丹寧，田春洋，崔恒敏*

(四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，成都 611130)

為了研究釩對(duì)雛雞大腦皮層γ-氨基丁酸(GABA)表達(dá)的影響，選用280只1日齡艾維因肉雞，隨機(jī)分為4組，每組7個(gè)處理，每個(gè)處理10只，分別飼喂對(duì)照日糧和釩添加日糧(低劑量組：15 mg·kg-1；中劑量組：30 mg·kg-1；高劑量組：45 mg·kg-1)6周，采用免疫組織化法檢測(cè)雛雞大腦皮層中GABA的表達(dá)變化。結(jié)果表明，42 d雛雞，15 mg·kg-1釩添加組的大腦皮層GABA表達(dá)量最高(P<0.01或P<0.05)，其次為30 mg·kg-1釩添加組的(P<0.01或P<0.05)，45 mg·kg-1釩添加組的高于對(duì)照組的(P>0.05)；45 mg·kg-1釩添加組，28 d時(shí)大腦皮層GABA表達(dá)量均極顯著(P<0.01)高于14和42 d的；14 d時(shí)大腦皮層水平細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞GABA表達(dá)量均高于42 d的(P>0.05)。綜上表明，日糧釩與雛雞大腦皮層GABA的表達(dá)存在量效與時(shí)效關(guān)系，提示其調(diào)控作用可能與GABA的表達(dá)上調(diào)相關(guān)。

釩；大腦皮層；γ-氨基丁酸；免疫組化法；雛雞

釩是動(dòng)物的必需微量元素之一，對(duì)維持機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、消化能力、抗氧化能力及維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境恒定等起著重要的作用[1-9]。釩缺乏時(shí)，動(dòng)物機(jī)體的生理功能會(huì)受到嚴(yán)重的影響；釩過(guò)量可引起動(dòng)物機(jī)體的釩中毒[10-12]，其中家禽對(duì)釩毒性最敏感。

γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid，GABA)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一種重要的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)，對(duì)動(dòng)物機(jī)體正常的生理功能起著重要的作用，具有調(diào)節(jié)機(jī)體消化攝食、增加免疫性能及抗氧化能力、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌等多種生理活性[13]。GABA在腦內(nèi)的含量很高，腦內(nèi)有超過(guò)30%的突觸是以GABA 作為神經(jīng)遞質(zhì)傳遞信息的[14]。GABA存在于大腦的多種中間神經(jīng)元和投射神經(jīng)元，參與調(diào)節(jié)突觸可塑性，對(duì)興奮擴(kuò)散及傳導(dǎo)過(guò)程中起負(fù)調(diào)節(jié)作用[15-17]。研究表明[18]，大腦皮層星形膠質(zhì)細(xì)胞能與從丘腦來(lái)的特異傳入纖維(傳入的上行纖維)形成突觸；大腦皮層水平細(xì)胞的突起與錐體細(xì)胞頂樹(shù)突聯(lián)系，是大腦皮質(zhì)區(qū)的局部(中間)神經(jīng)元；大腦皮層錐體細(xì)胞的長(zhǎng)軸突進(jìn)入白質(zhì)，組成投射纖維(下行至腦干或脊髓)或聯(lián)合纖維(到同側(cè)或?qū)?cè)的另一皮質(zhì)區(qū))，是大腦皮質(zhì)的主要投射(傳出)神經(jīng)元。以上3種傳遞方式由此構(gòu)成了皮質(zhì)信息傳遞的復(fù)雜微循環(huán)[19]。

文獻(xiàn)表明，氟和砷可引起大鼠大腦皮質(zhì)GABA含量的變化，導(dǎo)致中樞神經(jīng)功能紊亂[20]。R.Poggioli等[21]報(bào)道了釩染毒組大鼠出現(xiàn)明顯的神經(jīng)癥狀。目前，關(guān)于釩對(duì)雛雞的研究多集中于消化、免疫和生殖系統(tǒng)等方面[1-9]。作者通過(guò)研究釩對(duì)雛雞大腦皮層GABA表達(dá)的影響，初探其可能的調(diào)節(jié)機(jī)制，為釩在家禽飼養(yǎng)及提高抗應(yīng)激能力中提供理論參考依據(jù)。

1　材料與方法

1.1動(dòng)物

1日齡健康艾維茵肉雞280只，購(gòu)自四川省成都市溫江正大畜禽有限公司。

1.2主要藥物

偏釩酸銨、普通飼料(釩含量73 μg·kg-1)、4%多聚甲醛、PBS緩沖液、檸檬酸鹽緩沖液、兔抗雞多克隆抗體GABA(北京博奧森生物技術(shù)有限公司，抗體貨號(hào)：bs-2252R，稀釋倍數(shù)：1∶100)、二抗、SABC(兔IgG)、DAB顯色劑、多聚賴氨酸(武漢博士德生物工程有限公司)等。

1.3主要儀器

101—2型電熱鼓風(fēng)干燥箱(上海儀表廠)、微波爐(格蘭仕)、電子天平(沈陽(yáng)龍騰電子有限公司)、石蠟切片機(jī)(Leica RM2135)、數(shù)顯電熱恒溫水浴鍋(上海醫(yī)療器械七廠WSZ-261-7) 、光學(xué)顯微鏡(Olympus)、圖像分析系統(tǒng)(江蘇省捷達(dá)科技發(fā)展有限公司)。

1.4方法

1.4.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的建立及分組將健雛280只，隨機(jī)分為4組，每組70只，分別飼喂對(duì)照日糧和釩添加日糧(低劑量組：15 mg·kg-1；中劑量組：30 mg·kg-1；高劑量組：45 mg·kg-1)，釩源為偏釩酸銨。飼養(yǎng)環(huán)境：溫度(20±4) ℃，濕度(60±20)%室內(nèi)整潔安靜，通風(fēng)良好，每籠飼養(yǎng)10只，每周更換墊料2次。常規(guī)管理，自由飲水和采食(標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)飼料)，試驗(yàn)期為6周。

1.4.2樣本采集及處理雛雞分別于14、28和42 d頸動(dòng)脈放血致死，取腦置于4%多聚甲醛-0.1%磷酸緩沖液中固定24 h，制作光鏡樣本。

1.4.3樣本制作取大腦(矢狀切)石蠟包埋，連續(xù)切片(厚度為4～6 μm)，SABC 法染色，OLYMPUS 顯微鏡觀察并顯微攝影。

1.4.4免疫組化染色程序按SABC試劑盒說(shuō)明書操作。

1.4.5結(jié)果判定對(duì)照組切片染色為陰性(-)，細(xì)胞內(nèi)無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞產(chǎn)物。陽(yáng)性細(xì)胞胞核出現(xiàn)棕黃色，根據(jù)顯色程度分3級(jí)，并結(jié)合Image Pro Plus圖像分析系統(tǒng)中的積分光度對(duì)結(jié)果進(jìn)行判定：(+++)深棕色，強(qiáng)陽(yáng)性；(++)中等著色，棕色，陽(yáng)性；(+)著色淺，淡黃色，弱陽(yáng)性。

1.4.6統(tǒng)計(jì)分析在10×40鏡下，利用美國(guó)Image Pro Plus圖像分析系統(tǒng)，每張切片按統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)隨機(jī)截取10個(gè)視野，測(cè)定陽(yáng)性產(chǎn)物的平均光密度(OD)和積分光密度(IOD)，利用SPSS13.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，用多因素方差分析(ANOVA)差異顯著性。P<0.05為差異顯著，P<0.01為差異極顯著。

2　結(jié)　果

GABA陽(yáng)性產(chǎn)物為棕黃色或褐色，雛雞大腦皮層神經(jīng)元胞質(zhì)和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)均有陽(yáng)性產(chǎn)物的分布(圖1)。

2.1不同劑量釩對(duì)42日齡雛雞大腦皮層GABA表達(dá)的影響

與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組中雛雞大腦皮層GABA表達(dá)量增多，15或30 mg·kg-1釩添加組GABA陽(yáng)性信號(hào)高于或同于對(duì)照組；15或30 mg·kg-1釩添加組的三種細(xì)胞(大腦皮層水平細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和中型錐體細(xì)胞)的GABA表達(dá)量均顯著(P<0.05)或極顯著(P<0.01)高于對(duì)照組；45 mg·kg-1釩添加組的三種細(xì)胞的GABA表達(dá)量均與對(duì)照組差異不顯著(P>0.05)。15 mg·kg-1釩添加組的三種細(xì)胞GABA表達(dá)量顯著(P<0.05)或極顯著(P<0.01)高于其他組(圖1～2，表1)。

大腦皮層水平細(xì)胞：與其它組相比，15 mg·kg-1釩添加組GABA平均光密度與平均積分光密度最高(P<0.01)；30 mg·kg-1釩添加組GABA的平均積分光密度極顯著(P<0.01)低于15 mg·kg-1釩添加組的，顯著高于(P<0.05)高于45 mg·kg-1釩添加組和

對(duì)照組的；45 mg·kg-1釩添加組和對(duì)照組GABA的平均積分光密度差異不顯著(P>0.05)。

星形膠質(zhì)細(xì)胞：15 mg·kg-1釩添加組GABA的平均積分光密度最高，極顯著高于(P<0.01)高于45 mg·kg-1釩添加組和對(duì)照組的，與30 mg·kg-1釩添加組的差異不顯著(P>0.05)；30 mg·kg-1釩添加組GABA的平均積分光密度極顯著高于(P<0.01)高于45 mg·kg-1釩添加組和對(duì)照組的，其GABA平均光密度高于其他試驗(yàn)組的；45 mg·kg-1釩添加組和對(duì)照組GABA的平均積分光密度差異不顯著(P>0.05)。

錐體細(xì)胞：15 mg·kg-1釩添加組GABA的平均積分光密度最高，極顯著(P<0.01)或顯著高于(P<0.05)其他組的；30 mg·kg-1釩添加組GABA的平均積分光密度顯著高于(P<0.05)高于45 mg·kg-1釩添加組和對(duì)照組的，其GABA平均光密度高于其他試驗(yàn)組的。

表1不同劑量釩對(duì)42日齡雛雞大腦皮層GABA表達(dá)的影響

Table 1Effect of vanadium on the expression of GABA in the cerebral cortex of 42-day-old chickens

細(xì)胞名稱Cellname劑量/(mg·kg-1)DoseGABA平均光密度(x-±s)Theaverageopticaldensity平均積分光密度(x-±s)Integralopticaldensity強(qiáng)弱判定Strengthdetermination大腦皮層水平細(xì)胞Horizontalcellcortex00.223±0.0323.095±1.272c+153.095±1.27251.569±18.129a+++301.752±1.27219.538±12.374B+450.162±0.0236.986±2.220c+大腦皮層星形膠質(zhì)細(xì)胞Corticalastrocytes00.227±0.05411.403±6.929B++150.171±0.021182.088±65.131a+300.226±0.009131.513±48.801a++450.135±0.02021.643±14.013B+大腦皮質(zhì)錐體細(xì)胞(中)Pyramidalcellsinthecerebralcortes00.177±0.05727.188±13.895C+150.162±0.006108.923±67.504a+300.206±0.03348.531±21.119b++450.169±0.02328.969±5.455C+

同列標(biāo)注不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)

A column，treatment means without a common miniscule letter differs significantly(P<0.05)，within a coulumn，treatment means without a common capital letter differs too much significantly (P<0.01) and the same

2.245 mg·kg-1釩添加量對(duì)不同日齡雛雞大腦皮層GABA表達(dá)的影響

釩添加量為45 mg·kg-1時(shí)，28 d時(shí)三種細(xì)胞(大腦皮層水平細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和中型錐體細(xì)胞)GABA表達(dá)量均極顯著(P<0.01)高于14和42 d的；14 d的三種細(xì)胞GABA表達(dá)量高于42 d的，但差異不顯著(P>0.05)。28 d時(shí)大腦皮層水平細(xì)胞GABA平均光密度均高于14 d和42 d的(圖2，表2)。

棕黃色或褐色為陽(yáng)性信號(hào)。“→”為水平細(xì)胞；“”為錐體細(xì)胞；“▲”為星形膠質(zhì)細(xì)胞。A.42 d對(duì)照組大腦皮層GABA；B.42 d 15 mg·kg-1試驗(yàn)組大腦皮層GABA；C.42 d 30 mg·kg-1試驗(yàn)組大腦皮層GABA；D.42 d 45 mg·kg-1試驗(yàn)組大腦皮層GABAThe postive signals of immunohistochemistry were tan and brown.“→”show the horizontal cells;“”show the cones;“▲”show the astrocytes.A.Control;B.15 mg·kg-1 experiment group;C.30 mg·kg-1 experiment group;D.45 mg·kg-1 experiment group圖1　不同劑量釩對(duì)42日齡雛雞大腦皮層GABA表達(dá)的影響Fig.1　Effect of vanadium on the expression of GABA in the cerebral cortex of 42-day-old chickens

棕黃色或褐色為陽(yáng)性信號(hào)?！啊睘樗郊?xì)胞；“”為錐體細(xì)胞；“▲”為星形膠質(zhì)細(xì)胞A.14 d大腦皮層GABA;B.28 d大腦皮層GABA;42 d大腦皮層GABA的表達(dá)見(jiàn)圖1DThe positive signals of immunohistochemistry were tan and brown “→”show the horizontal cells;“”show the cones;“▲”show the astrocytes.A.14 d;B.28 d;42 d′s figure is showed in the Fig.1 D圖2　45 mg·kg-1釩添加量對(duì)不同日齡雛雞大腦皮層GABA表達(dá)的影響Fig.2　Effects of GABA expression in the cerebral cortex of different day-old chickens with 45 mg·kg-1 vanadium

表245 mg·kg-1釩添加量對(duì)不同日齡雛雞大腦皮層GABA表達(dá)的影響

Table 2Effects of GABA expression in the cerebral cortex of different day-old chickens with 45 mg·kg-1vanadium

細(xì)胞名稱Cellname日齡Age/dGABA平均光密度(x-±s)Theaverageopticaldensity平均積分光密度(x-±s)Integralopticaldensity強(qiáng)弱判定Strengthdetermination大腦皮層水平細(xì)胞Horizontalcellcortex140.125±0.01721.220±6.889B+280.149±0.01155.745±28.921a++420.112±0.0236.983±2.220B+大腦皮層星形膠質(zhì)細(xì)胞Corticalastrocytes140.209±0.03065.202±7.841B++280.168±0.027111.840±44.894a+420.135±0.02021.643±14.013B+大腦皮質(zhì)錐體細(xì)胞(中)Pyramidalcellsinthecerebralcortes140.134±0.01026.095±7.766B+280.107±0.00187.171±13.057a+420.169±0.02328.969±5.455B+

3　討　論

3.1不同劑量釩對(duì)42日齡雛雞大腦皮層GABA表達(dá)的影響

黃選洋等[10]指出，添加 15 mg·kg-1的釩可使雛雞巨噬細(xì)胞數(shù)目增多，活性增強(qiáng)，淋巴細(xì)胞增殖，有助免疫器官的發(fā)育；30 mg·kg-1的釩可抑制雛雞免疫功能，但也有研究指出其促進(jìn)了免疫器官組織結(jié)構(gòu)的發(fā)育，故30 mg·kg-1釩添加量對(duì)雞免疫器官的影響尚有爭(zhēng)議。

本課題組研究表明[22]，15 mg·kg-1釩添加組雛雞的消化、免疫等器官指數(shù)、組織學(xué)指標(biāo)、抗氧化能力等均有正向升高；30 mg·kg-1釩添加量對(duì)大部分器官有正向影響，但個(gè)別器官表現(xiàn)組織學(xué)結(jié)構(gòu)受損。

GABA是三羧酸循環(huán)中“GABA 環(huán)路”的產(chǎn)物，在體內(nèi)也作為供能物質(zhì)參與能量代謝[23]。資料表明[24]，GABA具有增強(qiáng)黏膜免疫、促進(jìn)消化吸收、調(diào)節(jié)神經(jīng)—內(nèi)分泌—免疫網(wǎng)絡(luò)、減輕應(yīng)激等作用。GABA可促進(jìn)下丘腦分泌生長(zhǎng)激素釋放激素，作用垂體使生長(zhǎng)激素分泌增加，影響胃腸道激素的分泌；可通過(guò)抑制交感-腎上腺系統(tǒng)，抑制去甲腎上腺素的分泌，促使自由基的產(chǎn)生量減少；抑制神經(jīng)元的缺氧損傷，在神經(jīng)元的發(fā)生、發(fā)育、可塑性等方面發(fā)揮著積極作用，使神經(jīng)元處于“穩(wěn)態(tài)”[14]；此外，GABA對(duì)自身免疫性炎癥有良好的抑制作用，原理是通過(guò)GABA干預(yù)CD4+(輔助性T細(xì)胞)和CD8+(細(xì)胞毒性T細(xì)胞)的數(shù)量及其比值發(fā)揮作用，通過(guò)抑制免疫反應(yīng)，維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定[15-17]。

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，42 d雛雞，15 mg·kg-1釩添加組的大腦皮層GABA表達(dá)量最高，其次為30 mg·kg-1釩添加組的，45 mg·kg-1釩添加組的高于對(duì)照組的。提示15 mg·kg-1釩添加組雛雞大腦皮層高水平的GABA表達(dá)，可能與機(jī)體的供能、消化、免疫、抗氧化等的增強(qiáng)相關(guān)。30和45 mg·kg-1釩添加組GABA表達(dá)的上調(diào)，可能與機(jī)體抑制神經(jīng)元的缺氧損傷，維持機(jī)體內(nèi)穩(wěn)態(tài)有關(guān)，其機(jī)制尚需進(jìn)一步的研究。

3.245 mg·kg-1釩添加量對(duì)不同日齡雛雞大腦皮層GABA表達(dá)的影響

研究表明[10]，雞日糧中添加高劑量釩時(shí)，添加初期其抗氧化酶的活性代償性升高，但長(zhǎng)期攝入高劑量的釩，則對(duì)機(jī)體造成氧化損傷。資料指出[24]，小鼠在應(yīng)激初期，GABA含量未升高，甚至下降，機(jī)體處于應(yīng)激適應(yīng)期；在應(yīng)激后期，GABA積聚，以避免應(yīng)激對(duì)機(jī)體造成過(guò)度傷害。阮懷珍等[25]指出，艾維因肉雞胃蛋白酶隨日齡的增長(zhǎng)而逐漸增加，于28 d達(dá)到峰值，隨后降低。

課題組研究表明[22]，45 mg·kg-1釩添加量，在添加初期，部分器官表現(xiàn)較好的耐受性。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，45 mg·kg-1釩添加組，28 d時(shí)大腦皮層GABA表達(dá)量極顯著高于14 d和42d的；14 d的三種細(xì)胞GABA表達(dá)量高于42 d。提示45 mg·kg-1釩添加量在添加時(shí)間為14 d時(shí)，大腦皮層GABA的較高表達(dá)可能與機(jī)體部分器官有較好的耐受性有關(guān)；而添加時(shí)間28 d時(shí)，可能因釩劑量的累積，以及28 d可能是雛雞細(xì)胞分化的重要階段，為維持機(jī)體內(nèi)穩(wěn)態(tài)的穩(wěn)定，大腦皮層GABA的表達(dá)量達(dá)到最高值；釩添加時(shí)間為42 d時(shí)，大腦皮層GABA的表達(dá)略高于對(duì)照組，可能是為避免釩毒性累積對(duì)機(jī)體造成過(guò)度傷害。其具體機(jī)制仍需進(jìn)一步的探討。

4　結(jié)　論

15 mg·kg-1釩添加量與大腦皮層GABA表達(dá)呈正相關(guān)；45 mg·kg-1釩添加量，添加時(shí)間28日齡時(shí)，大腦皮層GABA表達(dá)呈拐點(diǎn)。提示日糧釩與雛雞大腦皮層GABA的表達(dá)存在量效與時(shí)效關(guān)系，其調(diào)控作用可能與GABA的表達(dá)上調(diào)相關(guān)。

[1]CUI W，GUO H，CUI H.Vanadium toxicity in the thymic development[J].Oncotarget，2015，6(30)：28661-28677.

[2]DENG Y，CUI H，PENG X，et al.Effects of high dietary fluoride on serum biochemistry and oxidative stress parameters in broiler chickens[J].Health，2014，06(14)：1840-1848.

[3]LIU J，CUI H，LIU X，et al.Dietary high vanadium causes oxidative damage-induced renal and hepatic toxicity in broilers[J].BiolTraceElemRes，2012，145(2)：189-200.

[4]CUI W，CUI H，PENG X，et al.Dietary vanadium induces lymphocyte apoptosis in the bursa of Fabricius of broilers[J].BiolTraceElemRes，2011，146(1)：59-67.

[5]WANG K，CUI H，DENG Y，et al.Effect of dietary vanadium on the ileac T cells and contents of cytokines in broilers[J].BiolTraceElemRes，2011，147(1-3)：113-119.

[6]DENG Y，CUI H，XI P，et al.Changes of IgA+cells and cytokines in the cecal tonsil of broilers fed on diets supplemented with vanadium[J].BiolTraceElemRes，2012，147(1-3)：149-155.

[7]CUI W，CUI H，PENG X，et al.Dietary vanadium induces decrease in antioxidant enzyme activities and oxidative stress in the spleens of broilers[J].MedChem，2012，02(2)：103-106.

[8]DENG Y，CUI H，PENG X.The relevance of cytokines for mucosal immunity induced by dietary vanadium in the intestine of broilers[J].MedChem，2012，02(2)：051-056.

[9]CUI H.Effect of vanadium on TLR4 and TLR7 mRNA expression in the lymphoid organs of broilers[J/OL].MedChem，2012.[2016-06-23].http：//www.omicsonline.org/2161-0444/2161-0444-2-103.pdf.

[10]黃選洋，王建萍，丁雪梅，等.釩對(duì)雞健康的影響及其作用機(jī)理[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)報(bào)，2015，27(8)：2335-2341.

HUANG X Y，WANG J P，DING X M，et al.Effects of vanadium on chicken health and its mechanism[J].JournalofAnimalNutrition，2015，27(8)：2335-2341.(in Chinese)

[11]DENG Y，CUI H，PENG X，et al.Dietary vanadium induces oxidative stress in the intestine of broilers[J].BiolTraceElemRes，2012，145(1)：52-58.

[12]WANG K，CUI H，DENG Y，et al.Effect of dietary vanadium on intestinal microbiota in broiler[J].BiolTraceElemRes，2012，149(2)：212-218.

[13]戴四發(fā).谷氨酰胺和γ-氨基丁酸對(duì)肉雞抗熱應(yīng)激和肉品質(zhì)的影響及機(jī)理探討[D].南京：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，2012.

DAI S F.Effects and mechanism of glutamine and gamma-aminobutyric acid supplementation on anti-stress and meat quality of broilers under heat stress[D].Nanjing：Nanjing Agricultural University，2012.(in Chinese)

[14]徐同锏.包被γ-氨基丁酸對(duì)奶牛熱應(yīng)激的防治效果及機(jī)理的研究[D].安徽：安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)，2013.

XU T J.Effects coated gamma-aminobutyric acid on alleviating heat stress of cows and investigation on the mechanism[D].Anhui：Anhui Agricultural University 2013.(in Chinese)

[15]張志榮.Gabarap在炎癥反應(yīng)過(guò)程中的功能研究[D].廈門：廈門大學(xué)，2014.

ZHANG Z R.The study of roles of Gabarap in inflammatory responses[D].Xiamen：Xiamen University，2014.(in Chinese)

[16]BHAT R，AXTELL R，MITRA A，et al.Inhibitory role for GABA in autoimmune inflammation[J].ProcNat1AcadSciUSA，2010，107(6)：2580-2585.

[17]馬玉華，王斌，孫進(jìn)，等.γ-氨基丁酸對(duì)高脂膳食小鼠免疫功能的影響[J].免疫學(xué)雜志，2014，(7)：599-603.

MA Y H，WANG B，SUN J，et al.The effect of GABA on immune function of mice fed with high fat diet[J].JournalofImmunology，2014，(7)：599-603.(in Chinese)

[18]程肖蕊，周文霞，張永祥.中樞神經(jīng)系統(tǒng)谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體的研究進(jìn)展[J].生命科學(xué)，2009，(2)：246-252.

CHENG X R，ZHOU W X，ZHANG Y X.Glutamate transporters in central nervous system[J].LifeScience，2009，(2)：246-252.(in Chinese)

[19]楊銀鳳.家畜解剖學(xué)及組織胚胎學(xué)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2011.

YANG Y F.Animal anatomy and embryology[M].Beijing：China agriculture press，2011.(in Chinese)

[20]曾洋，鄭國(guó)穎，李明艷，等.氟和砷染毒對(duì)子代大鼠海馬和大腦皮質(zhì)組織谷氨酸與γ-氨基丁酸含量的影響[J].環(huán)境與健康雜志，2014，31(5)：402-405.

ZENG Y，ZHENG G Y，LI M Y，et al.Effects of fluoride and arsenic exposure on contents of glutamate and gamma-aminobutyric acid in hippocampus and cortex in offspring rats[J].Journalofenvironmentandhealth，2014，31(5)：402-405.(in Chinese)

[21]POGGIOLI R，ARLETTI R，BERTOLINI A，et al.Behavioral and developmental outcomes of prenatal and postnatal vanadium exposure in the rat[J].PharmacolRes，2001，43(4)：341-347.

[22]鄧苑馨.日糧釩添加水平對(duì)雛雞腸道免疫功能和抗氧化功能影響的研究[D].雅安：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)，2012.

DENG Y X.The effects of dietary vanadium on intestinal immune function and antioxidant function in broilers[D].Yaan：Sichuan Agricultural University，2012.(in Chinese)

[23]史婧.γ-氨基丁酸、γ-氨基丁酸受體、γ-氨基丁酸受體基因在腦梗死中的作用[J].包頭醫(yī)學(xué)，2011，35(1)：3-6.

SHI J.Role GABA，GABA receptors，GABA receptor gene in cerebral infarction[J].JournalofBaotouMedicine，2011，35(1)：3-6.(in Chinese)

[24]李慧.γ-氨基丁酸對(duì)高溫條件下蛋雞產(chǎn)蛋性能及抗熱應(yīng)激的影響[D].杭州：浙江大學(xué)，2010.

LI H.Effects of gamma-aminobutyric acid on laying performance and heat stress resistance capability in hens under high temperature in summer[D].Hangzhou：Zhejiang University，2010.(in Chinese)

[25]阮懷珍，楊萍，張吉強(qiáng)，等.醫(yī)學(xué)神經(jīng)生物學(xué)課程體系的建設(shè)與實(shí)踐[J].基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)教育，2008，10(4)：404-406.

RUAN H Z，YANG Z，HU Z A，et al.Construction and practice in the curriculum system of medical nerve biology[J].BasicMedicalEducation，2008，10(4)：404-406.(in Chinese)

(編輯白永平)

Effect of Vanadiumon on the Expression of GABA in the Cerebral Cortex in Broilers

TANG Li，XIN Dan-ning，TIAN Chun-yang，CUI Heng-min

(CollegeofVeterinaryMedicine，SichuanAgriculturalUniversity，Chengdu611130，China)

To study the effect of vanadium on the chick cerebral cortex γ-aminobutyric acid (GABA) expression，280 1-day-old Avian broilers were chosen and randomly divided into four groups，each group divided into seven sample groups，each sample group have 10 broilers，and fed control diet and diet added vanadium (low dose group：15 mg·kg-1；dose group：30 mg·kg-1；high dose group：45 mg·kg-1) for 6 weeks using the immunohistochemical method to detect the expression of chick cerebral cortex GABA Variety.The results showed that the expression level of the cerebral cortex GABA 42 d chicks，15 mg·kg-1of vanadium-added group was the highest (P<0.01 orP<0.05)，followed by 30 mg·kg-1of vanadium added group (P<0.01 orP<0.05)，45 mg·kg-1of vanadium-added group than the control group (P>0.05)；45 mg·kg-1of vanadium-added group，when at 28 d the cerebral cortex expression levels were significantly (P<0.01) higher than the 14 and 42 d；when at the 14 cortex horizontal cells and astrocytes of GABA expression were higher than 42 d (P>0.05).In summary，it showed that the dietary vanadium and the expression of chick’s cortex GABA exist in a dose and time-effect relationship，suggesting that the regulation of expression may be related to up-regulation of GABA.

vanadium；cerebral cortex；GABA；immunohistochemical method；broilers

10.11843/j.issn.0366-6964.2016.09.024

2016-04-12

教育部博士后基金項(xiàng)目(04310611)

唐麗(1979-)，女，陜西洛南人，副教授，博士，主要從事禽類神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的研究，E-mail: tangyimingtt@163.com；Tel：028-86291348。注：唐麗和辛丹寧貢獻(xiàn)相同，為共同第一作者。

崔恒敏，教授，E-mail:cuihengmin2008@sina.com

S852.3

A

0366-6964(2016)09-1940-07