黃花蒿提取物生產工藝條件及其對乳中共軛亞油酸（CLA）生成的調控作用

王麗芳，姚一萍

（內蒙古農牧業(yè)科學院，內蒙古 呼和浩特 010031）

黃花蒿提取物生產工藝條件及其對乳中共軛亞油酸（CLA）生成的調控作用

王麗芳，姚一萍

（內蒙古農牧業(yè)科學院，內蒙古 呼和浩特 010031）

黃花蒿乙醇提取物含有多種營養(yǎng)活性物質，主要包括萜類、倍半萜類、芳香族類、脂肪酸類、甾體類、黃酮類、生物堿類等化合物。反芻動物日糧中添加黃花蒿乙醇提取物能夠增加其乳中共軛亞油酸（CLA）含量。綜述了黃花蒿乙醇提取物的主要營養(yǎng)活性物質、提取工藝條件、營養(yǎng)活性物質的檢測方法及黃花蒿提取物在動物日糧中的適宜添加量，旨在為生產CLA乳提供參考。

黃花蒿乙醇提取物；營養(yǎng)活性物質；提取工藝；檢測方法；適宜添加量

黃花蒿是菊科蒿屬植物，在我國分布廣泛，其提取物含有多種營養(yǎng)活性物質，但提取工藝條件不同，提取物所含的營養(yǎng)活性物質種類也不相同。研究表明，黃花蒿乙醇提取物能增加乳中共軛亞油酸（CLA）含量［1］。筆者就黃花蒿乙醇提取物的主要營養(yǎng)活性物質、提取工藝條件、營養(yǎng)活性物質的檢測方法及其在動物日糧中的適宜添加量進行綜述，旨在為生產CLA乳提供參考。

1 黃花蒿提取工藝條件

目前，提取植物活性成分通常采用的方法有煎煮法、浸漬法、滲漉法、回流提取法、壓榨工藝及超臨界CO2法等［2］。其中回流提取法應用較多，主要是用乙醇等易揮發(fā)的有機溶劑提取植物的原料成分，將浸出液加熱蒸餾，即當乙醇等有機溶劑在提取罐中受熱以后蒸發(fā)又被冷卻，重復流回浸出容器中浸提原料，這樣周而復始，直到目的產物提取完成為止。回流法提取液在蒸發(fā)鍋中受熱時間較長，故不適用于受熱易遭破壞的原料成分的浸出。在植物提取過程中，影響提取率的因素眾多，主要包括提取溫度、提取次數、提取時間、溶劑用量等，上述參數通常被稱為工藝條件。因此，確定最佳的工藝條件不僅可以獲得含量較高的提取產物，同時也節(jié)約了成本。如王麗芳［1］在采用黃花蒿提取物生產CLA功能乳時，采用回流提取法提取黃花蒿活性成分，將乙醇作為提取溶劑，通過正交試驗，確定了最佳提取工藝條件為：乙醇濃度55%、提取溫度95℃、提取時間2 h。

2 黃花蒿乙醇提取物活性成分及其檢測方法

乙醇是常用的提取溶劑之一，在提取植物活性成分時，采用不同濃度的乙醇所提取的營養(yǎng)活性成分也不相同。一般乙醇含量在90%以上時，提取的主要成分為揮發(fā)油、有機酸、內酯、樹脂等；乙醇含量在50%～70%時，提取的主要成分為生物堿、苷類等。

目前，對于植物提取物活性物質的檢測通常采用氣質聯用法（GC-MS）、液質聯用法（LC-MS）及核磁共振法（NMR）等檢測方法［3］。GC-MS聯用技術建立于1957年，是氣相色譜與單聚焦型質譜儀的聯用系統，該分析技術適合植物提取物中低分子化合物（分子量＜1 000）、易揮發(fā)性或易衍生化及能氣化的物質，尤其是植物揮發(fā)油成分的研究，但不適用于化學和生物樣品中熱不穩(wěn)定性組分及難揮發(fā)性組分的分析。LC-MS法主要用于非揮發(fā)性化合物、極性化合物、熱不穩(wěn)定性化合物及大分子化合物（包括蛋白質、多肽及多聚物等）的分析測定，其沒有商品化的譜庫對比查詢。LC-MS法具有選擇性強、靈敏度高等優(yōu)點，適用于藥學、環(huán)境分析與檢測、生物化學等領域。NMR法是鑒定分子結構最現代化和行之有效的方法之一，在分子結構分析和立體化學研究方面是其他檢測技術無法替代的。

表1 黃花蒿LC-MS/NMR分析結果

王麗芳［1］采用GC-MS法、LC-MS法及NMR法測定了黃花蒿乙醇提取物中的活性成分種類，其中LC-MS法和NMR法分析獲得的主要活性成分種類是萜類和黃酮類；GC-MS法分析獲得的主要種類是倍半萜類、芳香族類、脂肪酸類、甾體類、三萜類、酚類及生物堿類等（見表1和圖1）。

圖1 黃花蒿提取物GC-MS法所測各成分比例

3 黃花蒿乙醇提取物對乳中CLA生成的調控作用

隨著生活水平的提高，人們對食品的要求不再僅僅停留在量的需求上，更多的是對品質的追求。牛奶是國民生活離不開的營養(yǎng)物質，而具有營養(yǎng)保健功能的牛奶更受國民的青睞。富含CLA的牛奶正是符合人們需求的綠色、安全、具有多種生物學功能的產品。因此，增加乳中CLA的含量成為動物營養(yǎng)領域的研究熱點。關于增加乳中CLA含量的研究多數是在奶牛日糧中添加富含亞油酸或亞麻酸的植物油、魚油及離子載體，然而植物油對畜牧業(yè)生產會產生消極作用［4］，一些不飽和脂肪酸對瘤胃微生物也會產生毒害作用［5］，長期使用離子載體可能會產生耐藥菌［6］。因此，尋找CLA生成的新型調控劑成為目前的研究熱點。植物提取物因其具有綠色、安全、無毒副作用等優(yōu)點成為生成CLA調控劑的首選，而且FDA公布植物提取物對人類食品藥品安全也無毒副作用［7］。

近年來，有研究表明，植物或其提取物能增加乳中CLA含量。Collomb等［8］研究表明，奶牛采食菊科植物可以增加乳中CLA含量，但其作用機理未被闡明；Cabiddu等［9］研究表明，采食含有菊科植物茼蒿在內的3種牧草 （其中茼蒿占1/3，不采食精料）的奶山羊，與對照組只采食不含茼蒿的其他2種牧草的奶山羊相比，乳中CLA含量顯著增加，可能的作用機理是茼蒿中含有較高比例的亞油酸，從而增加了羊乳中CLA生成的底物；Wallace［10］研究表明，菊科植物或其提取物增加乳中CLA含量的作用機理可能是其抑制了瘤胃微生物的氫化作用，從而增加了乳中CLA的生成。王麗芳［1］通過體外批次試驗、活體動物飼養(yǎng)試驗、乳腺動靜脈血插管試驗及乳腺組織塊體外培養(yǎng)試驗，系統地研究了菊科植物黃花蒿乙醇提取物對奶山羊乳中CLA含量的影響。研究結果表明，奶山羊日糧中添加菊科植物黃花蒿乙醇提取物可以顯著增加羊奶中CLA含量，2個試驗組 ［精料中黃花蒿提取物添加量分別為7.26、12.10 g/（kg·BW·d）（DM基礎）］的CLA含量比對照組分別增加了26.3%和38.6%，這主要是由于添加菊科植物黃花蒿提取物增加了瘤胃氫化中間產物trans11-C18∶1（VA）的積累，2個試驗組VA含量比對照組分別增加了16.8%和21.2%，這與前人研究結果一致［4］，即反芻動物產品中CLA的主要來源是VA在SCD脫氫酶的作用下脫氫生成。可能的作用機制是黃花蒿提取物所含的營養(yǎng)活性物質抑制了瘤胃中B族菌的活性。進一步研究表明，精飼料中黃花蒿乙醇提取物的適宜添加量為12.10 g/（kg·BW·d）（DM基礎）。

4 小結

目前，隨著生活水平的提高，人們對綠色、安全、無污染、無藥物殘留的食品的需求不斷增長。黃花蒿乙醇提取物因其具有綠色、安全、無毒副作用等優(yōu)點，在生產CLA牛奶方面具有廣闊的應用前景。但是目前對其增加乳中CLA含量的機理研究還不夠深入，在未來的研究中，有必要進一步開展該方面的研究工作。

［1］王麗芳.添加菊科植物黃花蒿提取物對奶山羊乳中CLA含量影響及機理研究［D］.呼和浩特：內蒙古農業(yè)大學，2010.

［2］崔福德.藥劑學［M］.5版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2004： 37-38.

［3］譚仁祥.植物成分分析［M］.北京：科學出版社，2002：287-297.

［4］GRIINARIJM，BAUMAN D E.Biosynthesisof conjugated linoleic acid and its incorporation into meat andmilk inruminants ［M］//YURAWECZ M P，MOSSOBA M M，KRAMER J K G，et al.Advances in Conjugated Linoleic Acid Research.Champaign：AOCS Press，1999：180-200.

［5］HARFOOT C G，HAZELWOOD G P.Lipid metabolism in the rumen［M］//HOBSON P N，STEWART C S.The Rumen Microbial Ecosystem. New York：Blackie Academic＆Professional，1997：382-426.

［6］WITTE K，ALLEN M.A meta-analysis of fear appeals：implications for effective public health campaigns［J］. Health Education＆Behavior，2000，27（5）：608-632.

［7］Food and Drug Administration of the US.21 CFR 184［EB/OL］.［2004-09-20］.http://www.cfsan.fda.gov/-Lrd/ FCF 184.htm.

［8］COLLOMB M，BUTIKOFER U，SIEBER R，etal. Correlation between fatty acids in cows′milk fat produced in the Lowlands，Mountains and Highlands of Switzerland and botanical composition of the fodder［J］.J Int Dairy，2002，12（8）：661-666.

［9］CABIDDU A，ADDIS M，PINNA G，et al.The inclusion of a daisy plant（Chrysanthemum coronarium）in dairy sheep diet.1：Effect on milk and cheese fatty acid composition with particular reference to C18∶2 cis-9，trans-11［J］. Livest Sci，2006，101（1/3）：57-67.

［10］WALLACE R J.Biohydrogenation of fatty acids in the rumen［C］//The 6thJoint Symposium of China-Korea-Japan on Rumen Metabolism and Physiology.Hangzhou：JRS 2007 Committee，2007.

（責任編輯：趙俊利）

Processing Condition of Artemisia annua L.Extracts and Its Regulative Effect on Production of Conjugated Linoleic Acid（CLA）in Milk

WANG Li-fang，YAO Yi-ping
（Inner Mongolia Academy of Agricultural and Animal Husbandry Sciences，Hohhot 010031，China）

Ethanol extracts of Artemisia annua L.contains many kinds of nutritional and biologically active components,including terpenoids,sesquiterpenoids,aromatics,fatty acids,steroids,flavonoids,alkaloids,etc.Supplementation of ethanol extracts of Artemisia annua L.in ruminant diet is able to increase the CLA content in their milk.Here,we reviewed the nutritional and biologically active components,extraction conditions,detection methods and proper supplementation level in animal diet of ethanol extracts of Artemisia annua L,so as to provide references for the large scale production of CLA-enriched milk.

ethanol extracts of Artemisia annua L.；nutritional and biologically active components；extraction conditions；detection methods；proper supplementation level

R284.2；S816.7

A文章順序編號：1672-5190（2016）02-0047-03

2016－01－06

項目來源：內蒙古自治區(qū)自然科學基金項目（2013MS0418）；內蒙古農牧業(yè)科學院青年創(chuàng)新基金項目（2014QNJJ M02）。

王麗芳（1975—），女，副研究員，博士，主要研究方向為反芻動物營養(yǎng)調控理論與技術、生鮮乳質量安全。