• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    影響雞胸肉中肌肽/鵝肌肽提取率因素的研究

    2016-10-31 02:45:22朱俊穎趙黎明蔣麗華邱勇雋夏泉鳴
    食品工業(yè)科技 2016年17期
    關(guān)鍵詞:二肽肌肽組氨酸

    朱俊穎,趙黎明,蔣麗華,邱勇雋,夏泉鳴

    (華東理工大學(xué)生物反應(yīng)器國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,發(fā)酵工業(yè)分離提取技術(shù)研發(fā)中心,上海 200237)

    ?

    影響雞胸肉中肌肽/鵝肌肽提取率因素的研究

    朱俊穎,趙黎明*,蔣麗華,邱勇雋,夏泉鳴

    (華東理工大學(xué)生物反應(yīng)器國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,發(fā)酵工業(yè)分離提取技術(shù)研發(fā)中心,上海 200237)

    為了探尋低值原料中提取制備肌肽和鵝肌肽的工藝,并進(jìn)一步優(yōu)化提取工藝條件,本研究采用OPA柱前衍生法檢測了雞胸肉等7種市售原料中兩種二肽的含量,并對提取方式、料液比和膜處理方式進(jìn)行了優(yōu)化研究。結(jié)果表明:7種天然原料中,雞胸肌肉中含有肌肽和鵝肌肽含量最高,總量為21.58 μmol/g;相對于切丁、絞碎、攪拌、超聲、蒸煮及酶解等提取方法,絞碎后攪拌的方法能夠最大化的提取兩種二肽,且提取物中其他蛋白質(zhì)及多肽較少;采用1000 u超濾膜和500 u納濾膜兩步法進(jìn)行分離,進(jìn)一步除去大分子蛋白和多肽,經(jīng)氨基酸分析,提取液中肌肽和鵝肌肽含量約60%(w/w)。本研究為低值肉制品的高值利用和開發(fā)提供了基礎(chǔ)的工藝技術(shù)。

    肌肽,鵝肌肽,分離提取,雞胸肉

    組氨酸二肽(Histidine-containing dipeptides,HCDPs)[1]是一類天然水溶性二肽,包括肌肽(Carnosine,β-alanyl-L-histidine,Car)、鵝肌肽(Anserine,β-alanyl-L-1-methylhistidine,Ans)、鯨肌肽(Balenine,β-alanyl-L-3-methylhistidine)及N-乙酰-肌肽等。組氨酸二肽具有許多生理特性,如:具有緩沖生理pH功能[2],螯合金屬離子功能[3],具有抗氧化[4]、抗衰老的能力[5];以及神經(jīng)調(diào)節(jié)的能力等。近年來,有研究發(fā)現(xiàn)肌肽和鵝肌肽在治療高尿酸血癥以及痛風(fēng)[6-7]、阿爾茲海默癥[8]上有一定作用,并且在體外及體內(nèi)治療中有明顯作用。因此,組氨酸二肽中,對于肌肽和鵝肌肽的研究最為廣泛,分子式如圖1所示。

    圖1 肌肽和鵝肌肽結(jié)構(gòu)圖Fig.1 The structure of carnosine and anserine

    目前市售的組氨酸二肽保健品中兩種二肽主要從鰹魚、鮪魚等深海魚中提取,這些原料深海魚捕撈難、價(jià)格貴,這些因素限制了兩種二肽的規(guī)模生產(chǎn)和廣泛應(yīng)用。組氨酸二肽具有良好的水溶性,在水溶液中呈堿性,不溶于醇,并具有高熱穩(wěn)定性,如肌肽可承受120 ℃高溫20 min[9],因此提取方式通常為肌肉中直接提取,如可采用加工廢棄的肉骨上的肉提取[10],或從肉類預(yù)煮液中提取[11],也有從淘汰的蛋雞肉中提取[12]。所以通過從低值肉類或肉類下腳料中提取肌肽和鵝肌肽,是降低組氨酸二肽生產(chǎn)成本重要選項(xiàng),也是未來對組氨酸二肽研究的一個(gè)重要方向。

    本文研究了從7種市售天然原料(豬、牛、雞、鴨、帶魚、秋刀魚及黃花魚)提取肌肽和鵝肌肽的關(guān)鍵技術(shù),為兩種二肽的提取尋找低值原料,并進(jìn)一步優(yōu)化提取工藝,降低成本,為低值肉制品原料及下腳料的利用和開發(fā)提供了依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1材料與儀器

    豬肉、牛肉、雞胸肉、鴨肉、帶魚、秋刀魚、黃花魚上海超市;肌肽標(biāo)準(zhǔn)品、β-巰基乙醇北京百靈威科技有限公司公司;鵝肌肽標(biāo)準(zhǔn)品上海予利化學(xué)科技有限公司;乙腈、甲醇、硼砂、鄰苯二甲酸(OPA)、甲醇國藥化學(xué)試劑有限公司;無水乙酸鈉、乙酸、三氯乙酸、鹽酸、氫氧化鈉上海凌風(fēng)化學(xué)試劑有限公司;動物蛋白酶廣西南寧龐博生物制品有限公司。其中,肌肽和鵝肌肽標(biāo)準(zhǔn)品為生物純,乙腈、甲醇為色譜純,其他化學(xué)試劑均為分析純,蛋白酶為食品級。

    Agilent 1200 LC高效液相色譜儀美國安捷倫科技公司;ODS-C18液相色譜柱日本島津有限公司;Waters 600高效液相色譜儀沃特世科技有限公司;TSK-Gel G2000柱日本TOSOH有限公司;DS-1高速組織搗碎機(jī)上海標(biāo)本模型廠;L-8900全自動氨基酸分析儀日本Hitachi公司;KDN-2C凱氏定氮儀上海纖檢儀器有限公司;RNM-1812G卷式膜設(shè)備杭州瑞納膜工程有限公司。

    1.2實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.1肌肽和鵝肌肽的提取新鮮原料購于市場后保存于-20 ℃冰箱中,測定前取出置于4 ℃冰箱內(nèi)解凍12 h。豬肉、牛肉等去肥去筋,帶魚、秋刀魚、黃花魚去皮去骨取魚肉。分別稱取20 g原料,加入50 mL去離子水于高速組織搗碎機(jī)中,破碎勻漿2 min。采用高速冷凍離心機(jī)4 ℃下12000×g離心15 min,將殘?jiān)?0 mL水?dāng)嚢杈鶆?相同提取方法再提取2次,將3次提取得到的上清液混合,并定容至100 mL,得粗提液。取粗提液5 mL,加入5 mL 10%(v/v)三氯乙酸混勻,于4 ℃下靜置2 h。采用4 ℃下12000×g離心15 min,取上清液并經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過濾。采用OPA衍生法測定(詳見1.2.4),并計(jì)算肌肽和鵝肌肽含量,如下。

    式(1)

    式(2)

    式中,CCar和CAns分別為提取液中肌肽和鵝肌肽的濃度(mmol/L);V為提取液體積,即100 mL;m為原料質(zhì)量,即20 g。

    1.2.2提取方式對雞胸肉中肌肽和鵝肌肽提取的影響冷凍雞胸肉于4 ℃下解凍12 h,A組切成約1 cm3立方體,B組采用高速組織搗碎機(jī)絞碎成泥。將A、B兩組各分為4等份,每份20 g備用。A、B兩組每份分別置于4 ℃下攪拌(150 r/min),4 ℃下超聲提取,100 ℃沸水中隔水蒸煮。30 min后取出,于4 ℃下12000×g離心15 min取上清液,將殘?jiān)?0 mL水?dāng)嚢杈鶆?相同提取方法提取2次,將3次提取得到的上清液混合,并定容至100 mL。另取A、B組各20 g,加水90 mL于50 ℃水浴鍋中預(yù)熱,加入動物蛋白酶(2000 U/g),50±1 ℃下攪拌(150 r/min)1.5 h。分別于4 ℃下12000×g離心15 min,取上清液并定容至100 mL。采用OPA衍生法測定肌肽和鵝肌肽含量(詳見1.2.4)。

    1.2.3料液比對雞肉中提取肌肽和鵝肌肽的影響冷凍雞胸肉于4 ℃下解凍12 h,切成小塊后用高速組織搗碎機(jī)攪拌成泥。準(zhǔn)確取10.0、20.0、30.0、40.0、50.0 g肉泥,分別加50 mL水置于4 ℃下攪拌30 min(150 r/min),并于4 ℃下12000×g離心15 min取上清液,將殘?jiān)?0 mL水?dāng)嚢杈鶆?相同提取方法再提取2次,將3次提取得到的上清液混合,并定容至100 mL。采用OPA衍生法測定肌肽和鵝肌肽含量(詳見1.2.4)。

    1.2.4肌肽和鵝肌肽的測定肌肽和鵝肌肽的定量檢測方法采用OPA柱前衍生高效液相(OPA-HPLC)法進(jìn)行測定[13]。色譜柱采用島津ODS-C18色譜柱(4.6 mm×25 mm,5 μm),色譜設(shè)備選用Agilent 1200高效液相色譜設(shè)備,流動相A為12.5 mmol/L乙酸-乙酸鈉緩沖液,流動相B為甲醇-乙腈溶液(7∶3,v/v)。梯度洗脫條件為:0 min,A相為60%;15 min,A相為40%;20~22 min,A相為0;后運(yùn)行5 min。樣品進(jìn)樣量為10 μL,樣品流速為1.0 mL/min,柱溫為28 ℃,檢測器選用紫外檢測器,于228 nm下測定。OPA衍生試劑的配制方法采用20 mg領(lǐng)苯二甲酸,加入1 mL甲醇溶解后,加入4 mL硼酸緩沖液(pH9.5)和100 mLβ-巰基乙醇混勻,避光,現(xiàn)配現(xiàn)用。

    1.2.5提取液中蛋白溶出率的測定采用雙縮脲法測定蛋白質(zhì)含量,采用濃度為0~10 g/L牛血清白蛋白(BSA)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

    1.2.6提取液中蛋白質(zhì)分子量分布利用高效凝膠排阻色譜進(jìn)行分子量[14],采用Waters600 HPLC系統(tǒng)和TSK-Gel G2000柱(7.8 mm× 300 mm)。用含有0.1%三氟乙酸的45%乙腈稀釋樣品,進(jìn)樣量10 μL,洗脫液為45%乙腈(含有0.1%三氟乙酸),柱溫30 ℃,0.5 mL/min的流速洗脫30 min,220 nm處檢測。分子量由標(biāo)準(zhǔn)分子量曲線計(jì)算得到。

    1.2.7膜處理對肌肽和鵝肌肽提取的影響雞胸肉粗提液3 L(固形物含量為1.6%),采用1812型膜設(shè)備,進(jìn)行MWCO 1000 u超濾膜分離實(shí)驗(yàn)(QY-UF-10-T-1812),跨膜壓差控制在2.25 bar下進(jìn)行超濾處理,截留液加1 L水進(jìn)行透析,并重復(fù)2次,收集透過液進(jìn)行合并,將透過液在進(jìn)行MWCO 500 u納濾膜分離實(shí)驗(yàn)(QY-NF-5-A-1812),跨膜壓差控制在3.0 bar下進(jìn)行納濾處理,截留液加1 L水進(jìn)行透析。檢測超濾和納濾透過液肌肽和鵝肌肽含量,計(jì)算透過率。

    式(3)

    式中,C透過液分別為透過液中肌肽/鵝肌肽的濃度(mmol/L);V為料液體積(L)。

    1.2.8數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均經(jīng)過3次平行實(shí)驗(yàn)獲得,并計(jì)算平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差。采用平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差作圖,采用OriginPro 8.0作圖軟件對作圖。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Statistix 8.0(Analytical Software,Tallahassee,FL,USA)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,采用t檢驗(yàn)法計(jì)算數(shù)據(jù)間的顯著性差異,其中顯著水平p為0.05,當(dāng)p<0.05為顯著性差異。

    2 結(jié)果與討論

    2.1不同物種中的肌肽和鵝肌肽含量

    盡管前人研究中報(bào)道了常見肉類(豬肉、牛肉、雞肉、鴨肉)以及幾種低價(jià)值魚類中的肌肽和鵝肌肽,但是他們的數(shù)據(jù)差異性比較大,為了本實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性,課題組在同種實(shí)驗(yàn)條件下對它們的含量進(jìn)行測定。本研究測試了上述樣品中肌肽和鵝肌肽含量(圖2)。我們發(fā)現(xiàn)畜類中豬肉和牛肉中肌肽含量(10.86、9.51 μmol/g)明顯高于鵝肌肽(0.91、0.48 μmol/g);對于家禽而言,兩種二肽含量高于畜類,且鵝肌肽含量(11.01 μmol/g,雞肉;7.35 μmol/g,鴨肉)略高于肌肽含量(10.57 μmol/g,雞肉;6.68 μmol/g,鴨肉)。而對于水產(chǎn)來說,不同種類魚的肌肽和鵝肌肽含量差異較大,如帶魚中不含有鵝肌肽,肌肽含量僅為1.55 μmol/g;黃花魚中肌肽和鵝肌肽含量與帶魚較為類似;而秋刀魚中肌肽和鵝肌肽含量相對豐富,且肌肽含量高于鵝肌肽含量。綜上,禽類中肌肽和鵝肌肽含量豐富,而畜類動物中肌肽含量高于鵝肌肽,而對于水產(chǎn)類而言,肌肽和鵝肌肽含量較低,秋刀魚除外。

    圖2 不同動物中的肌肽和鵝肌肽含量Fig.2 The concentration of Car and Ans in different animals注:標(biāo)注不同字母表示差異顯著(p<0.05),圖3~圖5同。

    2.2提取方式對肌肽和鵝肌肽含量的影響

    圖3 不同提取方式下雞胸肉中肌肽和鵝肌肽含量Fig.3 The contents of Car and Ans via different extraction methods注:A為切丁處理,B為絞碎處理。

    從上述數(shù)據(jù)可以看出,禽類肉中肌肽和鵝肌肽含量相對豐富(特別是雞胸肉含量最高,數(shù)據(jù)未顯示),所以在接下來的實(shí)驗(yàn)中,采用禽類樣品作為研究對象。采用雞胸肉作為原料在料液比為2∶10(w/v)條件下,采用不同提取方法提取肌肽和鵝肌肽。由圖3A和圖3B比較發(fā)現(xiàn),絞碎成肉泥后再經(jīng)后續(xù)處理的肌肽和鵝肌肽的提取率明顯高于切丁處理,說明相比較切丁處理方式,經(jīng)高速組織搗碎機(jī)絞碎后,肌肽和鵝肌肽更容易溶到水中。由圖3B可見,經(jīng)絞碎后,分別采用攪拌、超聲和蒸煮這3中提取方式,對于肌肽和鵝肌肽的提取并沒有顯著差異(p>0.05),說明組氨酸二肽為水溶性二肽,經(jīng)絞碎后,已經(jīng)能夠很好地溶在水中[15],而經(jīng)過酶解處理,總含量卻有所下降,表明采用動物蛋白酶進(jìn)行酶解,酶解位點(diǎn)可能作用于組氨酸和丙氨酸間的肽鍵上,促使肌肽和鵝肌肽水解,使檢測出的二肽含量降低。

    由圖4可以看出,無論是切丁還是絞碎的處理方式,采用蒸煮或者酶解方法提取都會使蛋白溶出率明顯增加,而肌肽和鵝肌肽總量卻并未增加(圖3)。這可能是由于蒸煮和酶解這種加工條件比較劇烈,而導(dǎo)致動物細(xì)胞的完整性遭到破壞,而使細(xì)胞內(nèi)肌漿蛋白流出,使蛋白含量升高。但是所需的肌肽和鵝肌肽的絕對含量沒有增加,說明肌漿蛋白中不含有這兩種二肽,但是肌漿蛋白的溶出反而會影響肌肽和鵝肌肽的提取。因此,采用高速組織破碎機(jī)絞碎成肉泥后采用攪拌的提取方法,避免動物細(xì)胞的破壞,既能得到高含量的肌肽和鵝肌肽,同時(shí)能控制其他蛋白質(zhì)和多肽的溶出。

    圖4 不同提取方式下溶液中蛋白質(zhì)的含量Fig.4 The protein contents via different extraction methods

    2.3料液比對肌肽和鵝肌肽提取的影響

    為研究料液比對從雞胸肉中提取肌肽和鵝肌肽的影響,在料液比為1∶10、2∶10、3∶10、4∶10、5∶10(w/v)條件下,從雞胸肉泥中提取的肌肽和鵝肌肽,并采用HPLC進(jìn)行檢測,繪圖5。由圖可見,隨著料液比的增加,肌肽和鵝肌肽含量也增加。而在料液比為1∶10(w/v)和料液比為2∶10(w/v)下無明顯差異(p>0.05),至于料液比對以上二肽引起含量下降的原因是,二肽中丙氨酸二肽殘基為疏水氨基酸所致。為了平衡物料處理量和提取液中肌肽和鵝肌肽的含量,因此采用料液比為2∶10(w/v)進(jìn)行提取。

    圖5 料液比對肌肽和鵝肌肽提取的影響Fig. 5 The effect of the ratio of material to solvent to extract Car and Ans

    2.4膜處理對肌肽和鵝肌肽透過率的影響

    膜處理在食品加工中具有工業(yè)化的潛力,因此采用膜處理對肌肽和鵝肌肽提取液進(jìn)行處理。采用絞碎-攪拌的方法提取得到3 L粗提液,經(jīng)離心后的分子量分布如圖6所示。分子量大于1300 u的蛋白質(zhì)多肽占16%,分子量范圍在700~1300 u之間的多肽占8%,而分子量小于500 u的小分子肽及氨基酸超過70%。故采用MWCO為1000 u和500 u兩級膜過濾,減少膜堵塞的產(chǎn)生。

    圖6 雞胸肉粗提液分子量分布Fig. 6 The molecular weight distribution of the extraction from chicken breast

    由于膜設(shè)備存在1 L料液殘留,為了減少截留液中肌肽和鵝肌肽的含量,增加其透過率,因此在超濾過程中加水2次,每次1 L,多次過濾。表1為超濾前后物料肌肽及鵝肌肽的含量及得率。超濾前3.23 L的粗提液中含有肌肽3.63 mmol,鵝肌肽5.03 mmol。經(jīng)過超濾處理的透過液中肌肽和鵝肌肽含量分別為3.14、4.46 mmol,透過率分別達(dá)到87%和89%。同時(shí)料液中的固形物含量由原來的1.6%減少至1.2%(折算成相同體積)透過液為澄清透明液體,微黃。

    表1 過膜處理下肌肽和鵝肌肽的透過率

    取納濾處理后的提取液,測定溶液中的氨基酸組成如表2所示。經(jīng)過膜處理后以肌肽和鵝肌肽為代表的組氨酸二肽含量約為60%(w/w)。提取液中含有人體必需的18種氨基酸,而其中丙氨酸含量為8.21%,谷氨酸含量為5.54%,其余氨基酸含量均小于5%,表明采用絞碎-攪拌法提取,再經(jīng)過膜處理,能獲得較高含量的肌肽和鵝肌肽。

    表2 經(jīng)納濾處理后提取液中游離氨基酸含量

    3結(jié)論

    測定不同物種中組氨酸二肽含量發(fā)現(xiàn),以牛、豬為代表的畜類中肌肽含量高于鵝肌肽;而以雞鴨為代表的禽類匯總鵝肌肽含量高于肌肽,且總含量高于家畜;3種水產(chǎn)中肌肽和鵝肌肽含量隨物種不同而差異明顯。采用切丁、絞碎、攪拌、超聲、蒸煮及酶解方法提取肌肽和鵝肌肽,絞碎后攪拌方法能夠最大化的提取二肽且引入其他蛋白質(zhì)及多肽較少,2∶10(w/v)為最佳料液比。采用1000 u超濾膜和500 u納濾膜兩步法進(jìn)行分離,肌肽和鵝肌肽的透過率較高,經(jīng)氨基酸分析,組氨酸二肽含量約60%(w/w)。

    綜上,雞胸肉中既含有較高的肌肽含量同時(shí)又具有低廉的經(jīng)濟(jì)價(jià)值,是獲得組氨酸二肽的理想原料。采用絞碎-攪拌方法提取二肽,能夠最大程度的提取二肽,同時(shí)減少其他多肽和氨基酸引入。粗提液經(jīng)兩步膜分離后,二肽含量約60%。

    [1]Boldyrev A A,Severin S E. The histidine-containing dipeptides,carnosine and anserine:distribution,properties and biological significance[J]. Advances in Enzyme Regulation,1990,30(90):175-188.

    [2]Smith E C B. The buffering of muscle in rigor;protein,phosphate and carnosine[J]. The Journal of Physiology,1938,92(3):336-343.

    [3]Yanase K,Funaguchi N,Iihara H, et al. Prevention of radiation esophagitis by polaprezinc(zinc L-carnosine)in patients with non-small cell lung cancer who received chemoradiotherapy

    [J]. International Journal of Clinical and Experimental Medicine,2015,8(9):16215-16222.

    [4]Manhiani P S,Northcutt J K,Han I,et al. Antioxidant activity of carnosine extracted from various poultry tissues[J]. Poultry Science,2013,92(2):444-453.

    [5]Song B C,Namseok J,Aldini G,et al. Biological functions of histidine-dipeptides and metabolic syndrome[J]. Nutrition Research & Practice,2014,8(1):3-10.

    [6]Yeum K J,Orioli M,Regazzoni L. Profiling histidine dipeptides in plasma and urine after ingesting beef,chicken or chicken broth in humans[J]. Amino Acids,2010,38(3):847-858.

    [7]Grover R P,Rakhra K S. Pes anserine bursitis-an extra-articular manifestation of gout.[J]. Bulletin of the Nyu Hospital for Joint Diseases,2010,68(1):46-50.

    [8]Herculano B,Tamura M,Ohba A,et al.β-alanyl-L-histidine rescues cognitive deficits caused by feeding a high fat diet in a transgenic mouse model of Alzheimer’s disease.[J]. Journal of Alzheimers Disease Jad,2013,33(4):983-997.

    [9]Sale C,Artioli G G,Gualano B,et al. Carnosine:from exercise performance to health[J]. Amino Acids,2013,44(6):1477-1491.

    [10]Mora L,Sentandreu M A,Toldrá F. Hydrophilic chromatographic determination of carnosine,anserine,balenine,creatine,and creatinine[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry,2007,55(12):4664-4669.

    [11]邢子鑫,何一航,朱秋勁. 牛肉預(yù)煮液中肌肽含量的檢測[J]. 食品科學(xué),2008,29(9):515-517.

    [12]Nabetani H,Hagiwara S, Yanai N,et al. Purification and concentration of antioxidative dipeptides obtained from chicken extract and their Application as Functional Food[J]. Journal of Food and Drug Analysis,2012,20(1):179-183.

    [13]Mark D,Roger CH. High-performance liquid chromatographic determination of imidazole dipeptides,histidine,1-methylhistidine and 3-methylhistidine in equine and camel muscle and individual muscle fibres[J]. Journal of Chromatography B,1997,688(1):47-55.

    [14]朱麗娟,熊幼翎,唐學(xué)燕,等. 玉米醇溶蛋白抗氧化肽耐消化性研究[J]. 食品工業(yè)科技,2008(12):61-64.

    [15]Mano T,Senju T. Distribution of carnosine in several species of fish and shellfish[J]. Journal of the Japanese Society of Food and Nutrition,1969,22(3):164-167.

    Factors affecting the extraction of carnosine/anserine from chicken breast

    ZHU Jun-ying,ZHAO Li-ming*,JIANG Li-hua,QIU Yong-jun,XIA Quan-ming

    (State Key Laboratory of Bioreactor Engineering,R&D Center of Separation and Extraction Technology in Fermentation Industry,East China University of Science and Technology,Shanghai 200237,China)

    To explore the extraction process of carnosine and anserine from natural materials which has low-value and optimize the extraction conditions,high-pressure liquid chromatography with OPA as reagent were used in this study. Carnosine and anserine concentration of seven kinds of materials in the market,extracting approach,the ratio of material to solvent and the membrane treatment were investigated. The results showed the chicken breast had a high concentration of histidine-containing dipeptides(21.58 μmol/g),including the seven kinds of materials in market. The chopping,homogenates,stirring,ultrasonic,boiling and enzymatic hydrolysis method were employed to extract carnosine and anserine. Homogenate/stirring method was the best way to extract carnosine and anserine,and with lower other peptides or proteins. After sequential treatment of ultrafiltration(1000 u)and nanofiltration(500 u),the content of carnosine and anserine was 60%(w/w)in extraction samples which assayed by the amino acid analysis. Our research provides the basic technique for utilizing the low-valued materials.

    carnosine;anserine;separation;chicken breast

    2016-06-03

    朱俊穎(1991-),女,碩士研究生,研究方向:食品加工技術(shù),E-mail:juju2_2@163.com。

    趙黎明(1977-),男,博士,教授,研究方向:食品加工技術(shù),E-mail:zhaoliming@ecust.edu.cn。

    國家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃“863”課題(2014AA021005)。

    TS251.1

    B

    1002-0306(2016)17-0215-05

    10.13386/j.issn1002-0306.2016.17.034

    猜你喜歡
    二肽肌肽組氨酸
    大型海藻中環(huán)二肽類抑藻活性化合物的分離純化
    代謝工程改造大腸桿菌合成L-組氨酸
    左旋多巴與脯氨酸或谷氨酸構(gòu)成的環(huán)二肽的合成及其DPPH自由基清除活性測試
    組氨酸對番茄生長及微量元素濃度的影響
    中國蔬菜(2019年4期)2019-06-06 08:08:56
    組氨酸的生理功能及在動物生產(chǎn)中的應(yīng)用
    中國飼料(2018年7期)2018-01-24 03:38:16
    電化學(xué)發(fā)光分析法測定糖尿病相關(guān)二肽
    二肽的生物合成及應(yīng)用研究進(jìn)展
    過瘤胃蛋氨酸、賴氨酸和組氨酸對泌乳奶牛生產(chǎn)性能的影響
    飼料博覽(2016年7期)2016-04-05 14:20:34
    肌肽鋅對低鈣性骨質(zhì)疏松籠養(yǎng)蛋雞AKP、BGP及E2的影響
    腦苷肌肽注射液治療2型糖尿病性周圍神經(jīng)病變46例療效觀察
    欧美xxxx性猛交bbbb| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 亚洲成a人片在线一区二区| 欧美潮喷喷水| 日本免费一区二区三区高清不卡| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 婷婷丁香在线五月| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产精品一区二区性色av| 精品一区二区免费观看| 老鸭窝网址在线观看| 欧美黄色淫秽网站| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 男人舔奶头视频| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 麻豆成人午夜福利视频| 亚洲在线自拍视频| 熟女电影av网| 他把我摸到了高潮在线观看| 男插女下体视频免费在线播放| 免费黄网站久久成人精品 | 久久人人爽人人爽人人片va | 国产伦在线观看视频一区| 亚洲专区中文字幕在线| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 欧美乱妇无乱码| 又爽又黄a免费视频| 激情在线观看视频在线高清| 亚洲美女视频黄频| 欧美成人a在线观看| 精品午夜福利视频在线观看一区| 免费看光身美女| 少妇人妻一区二区三区视频| 嫩草影院新地址| 最新在线观看一区二区三区| 特级一级黄色大片| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 国产69精品久久久久777片| 麻豆一二三区av精品| av在线蜜桃| 97超视频在线观看视频| 久久九九热精品免费| 最近最新中文字幕大全电影3| 亚洲专区国产一区二区| 一进一出好大好爽视频| 日韩高清综合在线| 直男gayav资源| 国产精品98久久久久久宅男小说| 久久这里只有精品中国| 中亚洲国语对白在线视频| 欧美极品一区二区三区四区| av天堂中文字幕网| 国产精品,欧美在线| 久久午夜福利片| 亚洲不卡免费看| 亚洲国产精品合色在线| 精品国产三级普通话版| 一区二区三区免费毛片| 十八禁国产超污无遮挡网站| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 久久中文看片网| 亚洲av一区综合| 我要搜黄色片| 国产主播在线观看一区二区| 亚洲自偷自拍三级| 嫩草影院精品99| 免费观看人在逋| 亚洲精品色激情综合| 午夜福利在线在线| 看片在线看免费视频| 熟女人妻精品中文字幕| 综合色av麻豆| 亚洲精品成人久久久久久| 九九在线视频观看精品| 99久久精品一区二区三区| 99久久精品国产亚洲精品| 亚洲黑人精品在线| 88av欧美| 丁香欧美五月| 又粗又爽又猛毛片免费看| 麻豆成人av在线观看| 麻豆久久精品国产亚洲av| 欧美精品国产亚洲| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 真人做人爱边吃奶动态| 午夜影院日韩av| 午夜亚洲福利在线播放| 亚洲久久久久久中文字幕| 一个人看的www免费观看视频| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 午夜福利在线观看吧| 一本精品99久久精品77| 色哟哟哟哟哟哟| 亚洲精品粉嫩美女一区| 国产视频内射| 日本熟妇午夜| 亚洲,欧美精品.| 男人的好看免费观看在线视频| 天堂网av新在线| 欧美一区二区精品小视频在线| 12—13女人毛片做爰片一| 国内揄拍国产精品人妻在线| 国模一区二区三区四区视频| 国产大屁股一区二区在线视频| 亚洲电影在线观看av| 一二三四社区在线视频社区8| 午夜精品久久久久久毛片777| 波多野结衣巨乳人妻| 午夜免费成人在线视频| 69人妻影院| 国产精品久久电影中文字幕| ponron亚洲| 听说在线观看完整版免费高清| 一级av片app| 一个人看的www免费观看视频| 久久中文看片网| 精品一区二区三区视频在线| 欧美日韩国产亚洲二区| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 亚洲五月婷婷丁香| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 亚洲最大成人中文| 宅男免费午夜| 两人在一起打扑克的视频| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 91麻豆精品激情在线观看国产| 久久久色成人| 看黄色毛片网站| 无遮挡黄片免费观看| 欧美在线一区亚洲| 啦啦啦韩国在线观看视频| 午夜免费成人在线视频| 欧美成人a在线观看| 亚洲av成人精品一区久久| 国产爱豆传媒在线观看| 亚洲av第一区精品v没综合| 亚洲美女搞黄在线观看 | 免费无遮挡裸体视频| 国产91精品成人一区二区三区| 欧美乱妇无乱码| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 久久午夜福利片| 免费在线观看日本一区| 少妇人妻一区二区三区视频| 在现免费观看毛片| 91在线观看av| 国内揄拍国产精品人妻在线| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 欧美乱色亚洲激情| 亚洲,欧美精品.| 99热6这里只有精品| 国产精品乱码一区二三区的特点| 亚洲精品粉嫩美女一区| 中文字幕免费在线视频6| 亚洲成人免费电影在线观看| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 国产高清三级在线| 日本与韩国留学比较| 91久久精品国产一区二区成人| 老女人水多毛片| 亚洲专区中文字幕在线| 啪啪无遮挡十八禁网站| 窝窝影院91人妻| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 别揉我奶头 嗯啊视频| 亚洲一区二区三区色噜噜| 听说在线观看完整版免费高清| 国产成人啪精品午夜网站| 人妻夜夜爽99麻豆av| 18禁在线播放成人免费| 国产 一区 欧美 日韩| 日韩人妻高清精品专区| 色播亚洲综合网| 亚洲人成网站高清观看| 精品久久久久久,| 成人无遮挡网站| 国产精品野战在线观看| 一区福利在线观看| bbb黄色大片| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 色哟哟·www| 老司机午夜福利在线观看视频| 麻豆成人av在线观看| 亚洲无线在线观看| 黄色丝袜av网址大全| 中文字幕av成人在线电影| 日本a在线网址| av在线老鸭窝| av欧美777| 能在线免费观看的黄片| 免费看光身美女| 国产高清视频在线观看网站| 又爽又黄无遮挡网站| 欧美三级亚洲精品| 男女之事视频高清在线观看| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 一级a爱片免费观看的视频| 男人的好看免费观看在线视频| netflix在线观看网站| 久久这里只有精品中国| 99久久精品国产亚洲精品| 国产老妇女一区| 露出奶头的视频| 老司机福利观看| 国内精品美女久久久久久| 男女之事视频高清在线观看| 少妇的逼水好多| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 无人区码免费观看不卡| 成人特级黄色片久久久久久久| 黄色视频,在线免费观看| 乱码一卡2卡4卡精品| 亚洲精品一区av在线观看| 中国美女看黄片| 91在线观看av| 长腿黑丝高跟| 在线天堂最新版资源| 丰满人妻一区二区三区视频av| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| av天堂中文字幕网| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 亚洲人与动物交配视频| 久久久久性生活片| 精品久久国产蜜桃| 中国美女看黄片| 成人亚洲精品av一区二区| 国产亚洲精品av在线| 亚洲精品亚洲一区二区| 久久久久久久久久黄片| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 国产精品人妻久久久久久| 波多野结衣高清无吗| 麻豆国产97在线/欧美| 嫁个100分男人电影在线观看| 亚洲第一电影网av| 一个人看的www免费观看视频| av欧美777| 最近最新免费中文字幕在线| 国产在视频线在精品| 一区二区三区激情视频| 九九在线视频观看精品| 欧美一区二区亚洲| 真人做人爱边吃奶动态| 国产精品一及| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 日韩成人在线观看一区二区三区| 亚洲人成伊人成综合网2020| 两个人的视频大全免费| 日韩高清综合在线| 看十八女毛片水多多多| 一级毛片久久久久久久久女| 在线国产一区二区在线| 少妇的逼好多水| 日本三级黄在线观看| 亚洲成人久久性| 男女视频在线观看网站免费| 国产伦一二天堂av在线观看| 淫秽高清视频在线观看| 成人欧美大片| 日本精品一区二区三区蜜桃| 一本精品99久久精品77| 国产精品av视频在线免费观看| x7x7x7水蜜桃| 一进一出抽搐gif免费好疼| 中亚洲国语对白在线视频| 91狼人影院| 变态另类丝袜制服| av在线老鸭窝| 我的女老师完整版在线观看| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 无遮挡黄片免费观看| 亚洲人成电影免费在线| 永久网站在线| 桃红色精品国产亚洲av| 国产黄片美女视频| 亚洲七黄色美女视频| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 他把我摸到了高潮在线观看| 久久伊人香网站| 精品久久久久久,| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 日韩中文字幕欧美一区二区| 亚洲精华国产精华精| 一本综合久久免费| 国产精品精品国产色婷婷| 欧美一级a爱片免费观看看| 婷婷六月久久综合丁香| 亚洲男人的天堂狠狠| 精品人妻1区二区| 精品一区二区三区视频在线| 精品一区二区三区人妻视频| 亚洲av免费高清在线观看| av福利片在线观看| 亚洲精品影视一区二区三区av| 91狼人影院| 成人特级黄色片久久久久久久| 偷拍熟女少妇极品色| 可以在线观看毛片的网站| 免费av毛片视频| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 精品一区二区三区视频在线| 1000部很黄的大片| av女优亚洲男人天堂| 黄色日韩在线| 欧美黑人巨大hd| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 啦啦啦观看免费观看视频高清| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 欧美国产日韩亚洲一区| 草草在线视频免费看| 一级av片app| 亚洲精品一区av在线观看| 一进一出抽搐动态| 日本免费一区二区三区高清不卡| 精品欧美国产一区二区三| 一级黄色大片毛片| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 国产精品女同一区二区软件 | 日韩欧美国产一区二区入口| 精品无人区乱码1区二区| ponron亚洲| 小说图片视频综合网站| 午夜老司机福利剧场| 国产毛片a区久久久久| 一个人免费在线观看电影| 人人妻人人看人人澡| 国产精品三级大全| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 国产高清视频在线观看网站| 脱女人内裤的视频| 亚洲av成人av| 啦啦啦韩国在线观看视频| 国产高清视频在线观看网站| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 国产精品,欧美在线| 国产在视频线在精品| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 国产三级在线视频| 久久草成人影院| 亚洲国产精品999在线| 麻豆av噜噜一区二区三区| 精品人妻1区二区| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 午夜福利高清视频| 美女 人体艺术 gogo| 嫩草影视91久久| 51国产日韩欧美| 老熟妇仑乱视频hdxx| av女优亚洲男人天堂| 麻豆久久精品国产亚洲av| 久久午夜亚洲精品久久| 日韩欧美 国产精品| 在现免费观看毛片| 午夜福利高清视频| 欧美色欧美亚洲另类二区| 午夜福利在线在线| 成人鲁丝片一二三区免费| 午夜福利18| 夜夜夜夜夜久久久久| 国产av在哪里看| 两人在一起打扑克的视频| 免费看a级黄色片| 午夜老司机福利剧场| 亚洲午夜理论影院| 草草在线视频免费看| 国产成人福利小说| 欧美不卡视频在线免费观看| 亚洲精品日韩av片在线观看| 美女 人体艺术 gogo| 少妇熟女aⅴ在线视频| 精品人妻视频免费看| 亚洲成av人片免费观看| 日本一本二区三区精品| 亚洲成人久久性| 我要搜黄色片| 十八禁国产超污无遮挡网站| 国产一区二区在线观看日韩| 亚洲人与动物交配视频| 动漫黄色视频在线观看| 99国产精品一区二区蜜桃av| 啦啦啦韩国在线观看视频| 国产91精品成人一区二区三区| 国产成人av教育| 九九在线视频观看精品| 欧美成人性av电影在线观看| 中出人妻视频一区二区| 激情在线观看视频在线高清| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 99久国产av精品| 成人毛片a级毛片在线播放| 毛片一级片免费看久久久久 | 日韩av在线大香蕉| 观看免费一级毛片| 国产三级在线视频| 精品人妻熟女av久视频| 成人国产综合亚洲| 精品乱码久久久久久99久播| 成人av在线播放网站| 内射极品少妇av片p| 成人av一区二区三区在线看| 久久久久久久精品吃奶| a级一级毛片免费在线观看| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 18+在线观看网站| 国产伦精品一区二区三区视频9| 久9热在线精品视频| 757午夜福利合集在线观看| 少妇的逼好多水| 欧美高清性xxxxhd video| 波多野结衣高清无吗| 给我免费播放毛片高清在线观看| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 丰满乱子伦码专区| 国产 一区 欧美 日韩| 国产主播在线观看一区二区| 成人鲁丝片一二三区免费| 97碰自拍视频| 成人av在线播放网站| 网址你懂的国产日韩在线| 深爱激情五月婷婷| 99久久九九国产精品国产免费| 一区二区三区免费毛片| 成人av一区二区三区在线看| 日本黄色片子视频| 草草在线视频免费看| 国产色爽女视频免费观看| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 亚洲成av人片在线播放无| 日韩欧美免费精品| 免费av不卡在线播放| 亚洲成av人片免费观看| av天堂在线播放| 亚洲欧美精品综合久久99| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 在线播放国产精品三级| 男女床上黄色一级片免费看| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 日日干狠狠操夜夜爽| 久久国产精品影院| 1024手机看黄色片| 亚洲乱码一区二区免费版| 特大巨黑吊av在线直播| 亚洲,欧美精品.| a级一级毛片免费在线观看| 日韩欧美免费精品| 小说图片视频综合网站| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 村上凉子中文字幕在线| 久久久久精品国产欧美久久久| 国产欧美日韩精品亚洲av| 亚洲中文日韩欧美视频| 欧美激情在线99| 亚洲中文字幕日韩| 精品无人区乱码1区二区| www日本黄色视频网| 欧美国产日韩亚洲一区| 亚洲精品粉嫩美女一区| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 亚洲五月婷婷丁香| 天天一区二区日本电影三级| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 少妇的逼好多水| 国产精品电影一区二区三区| 亚洲自偷自拍三级| 亚洲av成人精品一区久久| 男女床上黄色一级片免费看| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 精华霜和精华液先用哪个| 首页视频小说图片口味搜索| 大型黄色视频在线免费观看| 国产淫片久久久久久久久 | 亚州av有码| 99热这里只有是精品50| 国产精品免费一区二区三区在线| 国产av一区在线观看免费| 99久久精品热视频| 国产大屁股一区二区在线视频| 国产精品一及| 亚洲av成人精品一区久久| 天堂动漫精品| 久久精品国产亚洲av天美| avwww免费| 国产精品久久久久久久久免 | 听说在线观看完整版免费高清| 成人一区二区视频在线观看| 亚州av有码| 国产高清三级在线| 97超视频在线观看视频| 国产大屁股一区二区在线视频| 亚洲av.av天堂| 级片在线观看| 91麻豆精品激情在线观看国产| 国产精品久久电影中文字幕| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 欧美丝袜亚洲另类 | av在线蜜桃| 午夜福利视频1000在线观看| 熟女电影av网| 嫁个100分男人电影在线观看| 99视频精品全部免费 在线| 欧美乱妇无乱码| 国内精品美女久久久久久| 午夜精品在线福利| 亚洲第一区二区三区不卡| 在现免费观看毛片| 人妻夜夜爽99麻豆av| 精品一区二区三区视频在线| 两个人的视频大全免费| 简卡轻食公司| 大型黄色视频在线免费观看| 三级毛片av免费| 又粗又爽又猛毛片免费看| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 久久欧美精品欧美久久欧美| 久久99热6这里只有精品| 国产欧美日韩一区二区三| 成人精品一区二区免费| 最近最新免费中文字幕在线| 男人舔奶头视频| 直男gayav资源| 99热只有精品国产| 精品国内亚洲2022精品成人| 一二三四社区在线视频社区8| 脱女人内裤的视频| 国产精品三级大全| 9191精品国产免费久久| 午夜亚洲福利在线播放| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 日本 欧美在线| 身体一侧抽搐| 99热6这里只有精品| 午夜福利在线在线| 在线看三级毛片| 美女免费视频网站| 精品日产1卡2卡| 少妇人妻一区二区三区视频| 久久草成人影院| 久久精品国产自在天天线| 亚洲avbb在线观看| 亚洲综合色惰| 99热这里只有是精品50| 变态另类丝袜制服| 国产精品人妻久久久久久| 一级毛片久久久久久久久女| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 日本 欧美在线| 亚洲电影在线观看av| 亚洲国产色片| av在线观看视频网站免费| 国产v大片淫在线免费观看| 国产高清激情床上av| 久久久久精品国产欧美久久久| 亚洲av免费在线观看| 免费人成在线观看视频色| 成人特级av手机在线观看| 国产伦在线观看视频一区| 欧美在线一区亚洲| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 99在线视频只有这里精品首页| 午夜福利欧美成人| 亚洲中文日韩欧美视频| 一本久久中文字幕| 美女免费视频网站| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 午夜福利在线观看吧| 欧美日本亚洲视频在线播放| 成人美女网站在线观看视频| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 成人国产一区最新在线观看| 乱码一卡2卡4卡精品| 国产黄色小视频在线观看| 亚洲电影在线观看av| 如何舔出高潮| 丰满乱子伦码专区| 亚洲国产高清在线一区二区三| 男人狂女人下面高潮的视频| 国产成年人精品一区二区| 韩国av一区二区三区四区| 国产精华一区二区三区| eeuss影院久久| 看黄色毛片网站| 男人的好看免费观看在线视频| 精华霜和精华液先用哪个| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 99riav亚洲国产免费| 久久国产乱子伦精品免费另类| 欧美最黄视频在线播放免费| 性插视频无遮挡在线免费观看| 国产男靠女视频免费网站| 亚洲人成网站高清观看| 欧美在线一区亚洲| 国产男靠女视频免费网站| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 日日干狠狠操夜夜爽| 女同久久另类99精品国产91| 日韩亚洲欧美综合| 午夜福利高清视频| 国产中年淑女户外野战色| 午夜a级毛片| 国产色婷婷99| 88av欧美| 欧美日本视频| 亚洲精华国产精华精| 91久久精品电影网| 一级av片app| 色吧在线观看|