豬、禽采血及血清制備操作方法

張偉

摘要：主要介紹了豬禽采血及血清制備的操作方法，供參考。

關(guān)鍵詞：豬；禽；采血；血清

中圖分類號(hào)：S851.33 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：1007-273X（2016）07-0011-02

血清學(xué)檢測是診斷動(dòng)物疫病、評(píng)價(jià)重大動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫效果的重要手段之一[1]，血液樣品的采集及制備是保證血清學(xué)檢測成功的前提條件。畜禽采血及血清制備是畜牧獸醫(yī)部門一項(xiàng)常規(guī)的業(yè)務(wù)工作，也是基層畜牧獸醫(yī)人員必須熟練掌握的技術(shù)。下面簡單介紹豬禽采血及血清制備的操作方法，以供參考。

1 采血前調(diào)查摸底

為了檢驗(yàn)動(dòng)物疫病免疫抗體水平，需要對(duì)已進(jìn)行免疫接種的畜禽進(jìn)行采血[2]。采血前，認(rèn)真查閱養(yǎng)殖檔案，摸清防疫等相關(guān)情況，對(duì)免疫注射情況不詳?shù)?，免疫注射時(shí)限未達(dá)到規(guī)定要求的不納入采樣范圍。同時(shí)，要檢查畜禽個(gè)體健康狀況，健康狀況不好的，正在患病治療或尚未治愈的，以及生長發(fā)育不良的也不納入采樣范圍，以免引發(fā)應(yīng)激反應(yīng)和意外事故。

2 采血方法

2.1 采血的部位

豬采血的部位可選擇前腔靜脈和耳靜脈。但大批量采血時(shí)宜選擇前腔靜脈。禽采血的部位可選擇禽翅靜脈和心臟，最常用的是禽翅靜脈采血法。

2.2 采血具體方法

2.2.1 豬前腔靜脈采血 采血前將同群豬只隔離，采取適當(dāng)?shù)谋６ǚ椒?。?duì)25kg以下的小豬，采取人工仰臥保定方法，雙后肢與身體平行向后輕輕拉直，雙前肢朝上拉直與體中線垂直并左右微微張開。在雙前肢與胸骨連線的前側(cè)左右凹窩內(nèi)，采血人員用酒精或碘酊棉球消毒后，選用9#針頭進(jìn)針2～3cm，針刺方向?yàn)橄蚝髢?nèi)方與地面呈60°角，輕輕抽出前腔靜脈血液即可。采血完畢，用消毒棉球緊壓采血部位針孔處，迅速拔出針頭，壓迫止血片刻后，解除保定。

對(duì)體型較大的豬只，采用站立式保定方法，用金屬保定器套住豬的上頜骨，收緊金屬保定器圈環(huán)，向前方用力牽引，將豬的上頜骨稍稍吊起偏向右側(cè)，使豬的頭頸與水平面呈30°角，這時(shí)豬的注意力集中在鼻部，豬多呈后退姿勢。采血人員用酒精或碘酊棉在豬的右側(cè)胸前凹窩處消毒，用采血針對(duì)準(zhǔn)凹窩最低處，垂直刺入，感覺有負(fù)壓感且有回血，則標(biāo)志已刺入血管，然后輕輕回抽針管內(nèi)芯，即可采取前腔靜脈血液。采血完畢，拔出針頭，采血部位用消毒棉球壓迫止血片刻后，解除保定。對(duì)100 kg以上的豬采血一般宜選用14#針頭采血，50～100 kg的育肥豬選用12#針頭，25～50 kg的小豬也選用12#針頭。

2.2.2 禽翅靜脈采血 輔助人員將家禽個(gè)體側(cè)臥保定，展開翅膀，拔掉腋窩部羽毛，可見由翼根進(jìn)入腋窩的翼根靜脈，對(duì)其用酒精或碘酊棉球進(jìn)行消毒。采血人員等待消毒液干燥后，左手拇指壓迫血管近心端，使靜脈血管怒張、明顯，右手用裝有7#針頭的采血針或注射器沿翼根向翅方向，于血管0.3～0.5 cm一旁傾斜刺入皮膚，再與血管平行進(jìn)針0.2～0.4 cm后刺入血管，然后逐步放松按壓，緩慢抽取血液。進(jìn)針不宜過深，針頭的切口面應(yīng)向上[3]。采血完畢后，用棉球壓迫采血部位1～2 min止血，同時(shí)可起到消毒作用。

2.3 采血時(shí)間

一般為豬、禽進(jìn)行免疫接種后抗體的高峰期進(jìn)行血樣采集。提前通知被采血單位或養(yǎng)殖戶在采血當(dāng)天采血前不要飼喂畜禽，被采樣畜禽禁食8h（空腹）后進(jìn)行采血，一天中多選擇在早上或午后采血。

3 血清制備

3.1 血樣靜置

豬樣品每份采集全血不少于3 mL，禽樣品每份采集全血不少于2 mL。用一次性無菌注射器采血后把注射器活塞往后拉，直接去掉內(nèi)芯，可形成封閉的離心管，再加針頭帽，最后針頭朝上傾斜30～45°擺放，在室溫（20～25 ℃）下放置2～3 h，待血清自然析出。

使用一次性采血針連接真空采血管采集血液樣品后，把采血針取下，直接將采血管與地面成30～45°斜放，在室溫下放置2～3 h，待血清自然析出。

3.2 血樣運(yùn)輸

采血后室溫靜置10～15 min，待血液凝固后才能運(yùn)送。運(yùn)送血樣樣品時(shí)一定要輕拿輕放，防止劇烈震動(dòng)。使用血液樣品專用運(yùn)輸箱運(yùn)送更好。能在4 h內(nèi)運(yùn)輸?shù)竭_(dá)實(shí)驗(yàn)室的，只需冷藏后運(yùn)輸；不能在4 h內(nèi)送達(dá)的，則要做冷凍處理后，再冷藏運(yùn)輸，必須在24 h內(nèi)送到。

3.3 實(shí)驗(yàn)室血清制備

血樣運(yùn)輸?shù)綄?shí)驗(yàn)室后，接收的樣品若血清析出良好，可直接將血清轉(zhuǎn)入塑料離心管，按實(shí)驗(yàn)室規(guī)定程序編號(hào)檢測；接收的樣品若血清析出較差或室外氣溫過低，可放入37 ℃恒溫箱中1 h或25～37 ℃水浴鍋中1 h作預(yù)處理，再用離心機(jī)1 500～2 000 r/min離心5 min分離血清。在實(shí)驗(yàn)室的保存，若短時(shí)間保存，4 ℃冷藏即可，時(shí)間最多不能超過1個(gè)月；若長時(shí)間保存，可在-20 ℃冷凍保存。血清由室溫轉(zhuǎn)入

-20 ℃或由-20 ℃轉(zhuǎn)入室溫時(shí)，須經(jīng)過冷藏并搖勻處理，切忌反復(fù)凍融[4]。

參考文獻(xiàn)：

[1] 王榮華.血清制備的影響因素[J].中國畜牧業(yè)，2016（5）：50.

[2] 李書儒.動(dòng)物免疫監(jiān)測的重大意義[J].當(dāng)代畜牧，2016（5）：46.

[3] 陳 靜，陳德明，徐玉玲.動(dòng)物血液樣品采集制備與保存的方法[J].獸醫(yī)導(dǎo)刊，2015（8）：72-73.

[4] 李 娟，黃仁樹.血清學(xué)診斷的運(yùn)用[J].四川畜牧獸醫(yī)，2015（1）：58-59.