生命科學(xué)前沿技術(shù)在病證結(jié)合研究中的應(yīng)用

李曉燕，魏濱，朱美冬，羅運(yùn)權(quán)，王文海，蘇式兵

1.上海中醫(yī)藥大學(xué)復(fù)雜系統(tǒng)研究中心，上海 201203；2.上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬曙光醫(yī)院肝膽外科，上海 201203；3.上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬第七人民醫(yī)院腫瘤科，上海 200137

生命科學(xué)前沿技術(shù)在病證結(jié)合研究中的應(yīng)用

李曉燕1，魏濱1，朱美冬2，羅運(yùn)權(quán)2，王文海3，蘇式兵1

1.上海中醫(yī)藥大學(xué)復(fù)雜系統(tǒng)研究中心，上海 201203；2.上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬曙光醫(yī)院肝膽外科，上海 201203；3.上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬第七人民醫(yī)院腫瘤科，上海 200137

病證結(jié)合研究是目前中西醫(yī)結(jié)合研究的主要思路與方法。病證結(jié)合體現(xiàn)了中西醫(yī)2種醫(yī)學(xué)的優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)，通過(guò)多學(xué)科交叉探討病證之間的關(guān)系，研究疾病證候診斷及辨證施治規(guī)律等。得益于現(xiàn)代生命科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，病證結(jié)合研究取得了長(zhǎng)足的進(jìn)步。本文主要介紹了近年來(lái)數(shù)據(jù)挖掘技術(shù)、系統(tǒng)生物學(xué)技術(shù)、表觀遺傳學(xué)技術(shù)、網(wǎng)絡(luò)生物學(xué)技術(shù)在病證結(jié)合研究中的應(yīng)用和發(fā)展前景，為進(jìn)一步研究和臨床應(yīng)用提供思路和方法。

病證結(jié)合；中西醫(yī)結(jié)合；技術(shù)應(yīng)用；綜述

中醫(yī)的“證”是對(duì)機(jī)體在疾病發(fā)展中某一階段的病理概括，而西醫(yī)所診斷的“病”是指人體在受到致病因素作用后，在體內(nèi)出現(xiàn)的具有一定發(fā)展規(guī)律的病理演變?nèi)^(guò)程，二者相互交叉，同一疾病在不同發(fā)展階段會(huì)出現(xiàn)不同證候，同一證候又會(huì)出現(xiàn)在不同疾病中。病證結(jié)合研究是把中醫(yī)的證放在疾病背景下研究，是多種理論的相結(jié)合及囊括多種診療措施的現(xiàn)代病證結(jié)合的新模式，對(duì)提高臨床診療水平具有重要意義。

病證結(jié)合研究的關(guān)鍵任務(wù)是解決證候分類的客觀化、證候的分子生物學(xué)基礎(chǔ)及證候的發(fā)生演變的內(nèi)在機(jī)制等問(wèn)題。近年來(lái)病證結(jié)合研究取得較大進(jìn)展，這與生命科學(xué)技術(shù)及分析技術(shù)的發(fā)展是同步的。這些新技術(shù)主要包括數(shù)據(jù)挖掘技術(shù)、系統(tǒng)生物學(xué)技術(shù)、表觀遺傳學(xué)技術(shù)及生物網(wǎng)絡(luò)技術(shù)等。茲就相關(guān)技術(shù)在病證結(jié)合研究領(lǐng)域的應(yīng)用作一綜述。

1　數(shù)據(jù)挖掘技術(shù)

數(shù)據(jù)挖掘是利用統(tǒng)計(jì)分析和人工智能等新技術(shù)以分析數(shù)據(jù)庫(kù)中的數(shù)據(jù)，尋找其規(guī)律性，提取出事先未知而潛在有用的信息。其代表方法有多元統(tǒng)計(jì)、聚類分析、關(guān)聯(lián)分析、決策樹(shù)、神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)、貝葉斯網(wǎng)絡(luò)和潛在結(jié)構(gòu)模型等。因傳統(tǒng)中醫(yī)證候診斷主觀性強(qiáng)，病證原始數(shù)據(jù)的獲得過(guò)程中可能混雜不規(guī)范數(shù)據(jù)或噪聲數(shù)據(jù)，導(dǎo)致眾多臨床資料中隱藏著大量的信息［1］，其辨證過(guò)程也缺乏客觀的衡量依據(jù)，不能為科學(xué)實(shí)驗(yàn)提供客觀診斷［2］。數(shù)據(jù)挖掘技術(shù)以其善于處理非線性復(fù)雜數(shù)據(jù)、挖掘數(shù)據(jù)內(nèi)在規(guī)律而在中醫(yī)證候研究中受到廣泛的關(guān)注，在中醫(yī)證候模型的建立方面具有一定的優(yōu)勢(shì)［3］。

有研究者運(yùn)用數(shù)據(jù)包絡(luò)分析法對(duì)中醫(yī)證候進(jìn)行“序列化”，拋棄以往對(duì)證候數(shù)據(jù)的無(wú)序挖掘，利用證候的發(fā)生、演變、轉(zhuǎn)歸等規(guī)律進(jìn)行建模［4］。隱結(jié)構(gòu)模型可通過(guò)客觀資料的分析，揭示證候發(fā)生與共生的規(guī)則，獲得復(fù)雜分類標(biāo)準(zhǔn)。而在具有先驗(yàn)知識(shí)的前提下，貝葉斯網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行證候分類的正確率較高。關(guān)聯(lián)規(guī)則算法在對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，從中找到證候元素對(duì)證型判別的貢獻(xiàn)權(quán)重，形成“證候元素-證型”診斷量表［5-7］。而且，中醫(yī)“病證結(jié)合”的研究應(yīng)重視以“證”為研究單位，引進(jìn)微觀辨證的研究成果，綜合運(yùn)用不同的智能算法進(jìn)行數(shù)據(jù)挖掘，才能達(dá)到最佳的證候診斷效果。

2　系統(tǒng)生物學(xué)技術(shù)

系統(tǒng)生物學(xué)是以系統(tǒng)理論為指導(dǎo)，研究一個(gè)生物系統(tǒng)中所有組成成分（基因、蛋白質(zhì)等）的構(gòu)成，以及在特定條件下這些組分間相互關(guān)系的科學(xué)。系統(tǒng)生物學(xué)的“涌現(xiàn)”特性與中醫(yī)的整體觀異曲同工，利用組學(xué)技術(shù)檢測(cè)機(jī)體的生物學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)，進(jìn)而整合這些生物信息，進(jìn)而探索和闡明機(jī)體物質(zhì)組學(xué)的整體變化，這為病證結(jié)合研究提供了新的研究思路［8］。系統(tǒng)生物學(xué)技術(shù)主要包括基因組學(xué)技術(shù)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù)、蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)以及代謝組學(xué)技術(shù)等，將這些組學(xué)技術(shù)運(yùn)用到病證結(jié)合研究中，得到病證相關(guān)指紋圖譜，獲取證候相關(guān)生物標(biāo)志物，極大地推進(jìn)了病證結(jié)合研究的進(jìn)展。

2.1基因組學(xué)/轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù)

基因組學(xué)技術(shù)主要是對(duì)生物體內(nèi)所有基因進(jìn)行繪圖、核苷酸序列分析及基因功能分析，研究基因組的表達(dá)、基因的多樣性、基因組功能的闡釋及蛋白質(zhì)產(chǎn)物的功能等的技術(shù)。包括基因芯片、測(cè)序等各種高通量技術(shù)以及實(shí)時(shí)熒光 PCR等定量分析技術(shù)。轉(zhuǎn)錄組學(xué)是功能基因組學(xué)的重要組成部分，是在整體水平上研究基因全部轉(zhuǎn)錄本種類、結(jié)構(gòu)和功能及轉(zhuǎn)錄調(diào)控規(guī)律的學(xué)科。

證候作為機(jī)體對(duì)致病因素的反應(yīng)，不僅與致病因素的性質(zhì)和強(qiáng)弱有關(guān)，更與患者個(gè)體的體質(zhì)因素有關(guān)，而基因組學(xué)認(rèn)為基因序列的多態(tài)性及基因表達(dá)的差異又決定了個(gè)體差異，可以認(rèn)為基因及其表達(dá)的改變是證的“內(nèi)涵”。所以，運(yùn)用基因芯片、測(cè)序等技術(shù)以發(fā)現(xiàn)不同證候基因序列的多態(tài)性及表達(dá)譜之間的差異，從而確定證候相關(guān)基因，有助于證候精確診斷［9］。迄今的研究顯示病證的基因組學(xué)研究主要包含2個(gè)層次，即證候的單核苷酸多態(tài)性研究和證候的基因表達(dá)譜研究。

2.1.1證候基因多態(tài)性研究二代測(cè)序或大規(guī)模并行測(cè)序的出現(xiàn)，將各種分析和篩選輕松升級(jí)。技術(shù)革新使測(cè)序數(shù)據(jù)的數(shù)量和質(zhì)量不斷攀升。運(yùn)用基因測(cè)序技術(shù)，檢測(cè)不同證候患者基因序列，通過(guò)比較得出疾病相關(guān)基因多態(tài)性與證候之間的聯(lián)系，有利于中醫(yī)證候分型研究［10］。Zhou等［11］利用Affymetrix SNP芯片對(duì)12個(gè)腎陽(yáng)虛及3個(gè)非腎陽(yáng)虛患者進(jìn)行單核甘酸多態(tài)性檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)腎陽(yáng)虛證有5處（包括DCDC5基因）發(fā)生連鎖失衡單核苷酸多態(tài)性變化，并證實(shí) DCDC5基因及其旁邊其他基因單核甘酸多態(tài)性與腎陽(yáng)虛證有關(guān)。Li等［12］利用SNaP shot Assay研究扶正化瘀方對(duì)乙型肝炎肝硬化患者CYP1A2基因多態(tài)性的影響，結(jié)果表明扶正化瘀方對(duì)乙肝肝硬化證候組的作用與CYP1A2-G2964A位點(diǎn)基因多態(tài)性有關(guān)。

目前三代測(cè)序技術(shù)（即單分子測(cè)序技術(shù)）逐漸發(fā)展起來(lái)，與二代測(cè)序技術(shù)相比，單分子測(cè)序技術(shù)具有更加快速、簡(jiǎn)便、讀長(zhǎng)更長(zhǎng)、分辨率也更高的特點(diǎn)，且單分子測(cè)序技術(shù)可直接對(duì)RNA進(jìn)行測(cè)序，即檢測(cè)細(xì)胞和組織內(nèi)基因表達(dá)水平，同時(shí)對(duì)基因的結(jié)構(gòu)做出分析，這會(huì)大大促進(jìn)對(duì)病證基因表達(dá)譜的研究。另外，三代測(cè)序技術(shù)可檢測(cè)出基因的甲基化，為病證的表觀遺傳調(diào)控的研究打開(kāi)了一條通路［13］。

2.1.2證候的基因表達(dá)譜研究基因表達(dá)譜芯片是基因芯片中的一個(gè)重要分支，主要側(cè)重于研究轉(zhuǎn)錄水平上基因的變化，用于闡明在疾病、藥物或其他因素的干擾下，基因的表達(dá)差異情況。利用基因表達(dá)譜芯片技術(shù)，研究者可對(duì)不同狀態(tài)的組織細(xì)胞內(nèi)基因表達(dá)情況進(jìn)行對(duì)比分析，進(jìn)一步闡明基因的相互協(xié)同、抑制、互為因果等關(guān)系，并能通過(guò)分析比較這些差異表達(dá)基因，進(jìn)而逐步識(shí)別決定證本質(zhì)的關(guān)鍵基因，在基因表達(dá)的基礎(chǔ)上闡明證候的發(fā)生、演變機(jī)制［14］。有研究運(yùn)用基因表達(dá)譜芯片技術(shù)檢測(cè)乙肝和肝硬化患者不同證候的差異基因表達(dá)譜，找出差異基因，獲得顯著成果，從分子層面上為中醫(yī)“異病同證”“同病異證”的客觀化提供依據(jù)［15-17］。筆者認(rèn)為，運(yùn)用基因表達(dá)譜芯片檢測(cè)病證相關(guān)的差異表達(dá)基因，能在一定程度上揭示病證生物物質(zhì)基礎(chǔ)及其分子機(jī)制。

2.2蛋白組學(xué)技術(shù)

蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)是以蛋白質(zhì)組為研究對(duì)象，分析細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的組成成分、表達(dá)水平與修飾狀態(tài)的動(dòng)態(tài)變化，了解蛋白質(zhì)之間的相互作用與聯(lián)系，在整體水平上研究蛋白質(zhì)組成與調(diào)控的活動(dòng)規(guī)律的技術(shù)。蛋白質(zhì)組學(xué)動(dòng)態(tài)、宏觀、整體和綜合特點(diǎn)與中醫(yī)證候具有的波動(dòng)性、整體性、時(shí)序性、可預(yù)測(cè)性和標(biāo)志性極其相似，有利于動(dòng)態(tài)的揭示同一個(gè)研究對(duì)象不同時(shí)期的變動(dòng)性，更符合病證的特點(diǎn)［18］。常用的蛋白組學(xué)技術(shù)包括二位凝膠電泳技術(shù)、多位液相色譜技術(shù)、質(zhì)譜技術(shù)及蛋白芯片技術(shù)等。

運(yùn)用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)對(duì)同病異證或異病同證患者的組織和細(xì)胞蛋白質(zhì)進(jìn)行分析研究，可揭示疾病發(fā)生發(fā)展變化過(guò)程中蛋白質(zhì)的差異表達(dá)。因此，蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)能夠成為揭示中醫(yī)證候變化以及藥物作用靶點(diǎn)物質(zhì)和功能基礎(chǔ)的重要手段，并且在此基礎(chǔ)上可以建立疾病證候的蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)［19］。

有研究者對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥（EMT）不同證候患者增生期在位和異位內(nèi)膜組織和增生期正常子宮內(nèi)膜組織標(biāo)本提取組織總蛋白，并通過(guò)雙向電泳技術(shù)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜及蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)檢索進(jìn)行蛋白質(zhì)鑒定。結(jié)果顯示EMT不同證候之間蛋白質(zhì)組成分存在差異。推測(cè)這些差異可能是證候?qū)嵸|(zhì)的內(nèi)在根源，可能成為EMT不同證候發(fā)病的候選生物標(biāo)志物［20］。Song等［21］運(yùn)用SELDI蛋白芯片檢測(cè)慢乙肝虛證和實(shí)證患者的血清蛋白，并進(jìn)行復(fù)雜分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)2種血清蛋白可作為慢乙肝虛證和實(shí)證的分類依據(jù)。因此，蛋白組學(xué)研究可能為病證結(jié)合診斷提供生物標(biāo)志物，輔助臨床診斷，能明顯提高診斷的準(zhǔn)確性，進(jìn)而提高對(duì)證治療效果。

2.3代謝組學(xué)技術(shù)

代謝組學(xué)技術(shù)是通過(guò)考察生物體系受刺激或擾動(dòng)后（如將某個(gè)特異的基因或環(huán)境變化后）代謝產(chǎn)物的變化或其隨時(shí)間的變化，研究生物體系的代謝途徑的一種技術(shù)。常用的代謝組學(xué)技術(shù)包括核磁共振技術(shù)、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)、液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)等?；诖x組學(xué)可以觀測(cè)生物體受到擾動(dòng)后（外界刺激、環(huán)境變化或遺傳修飾）所有代謝應(yīng)答的全貌和動(dòng)態(tài)變化，與中醫(yī)辨證論治的整體觀和動(dòng)態(tài)連續(xù)性相契合，代謝組學(xué)更有利于動(dòng)態(tài)揭示證候發(fā)生演變規(guī)律。運(yùn)用代謝組學(xué)技術(shù)在病證結(jié)合臨床研究中有助于早期發(fā)現(xiàn)疾病證候生物標(biāo)志物而達(dá)到輔助臨床診斷的目的［22-23］。該技術(shù)能通過(guò)檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)患者的代謝組，對(duì)由疾病及對(duì)證治療引起的代謝產(chǎn)物的動(dòng)態(tài)變化進(jìn)行分析［24］。

3　表觀遺傳學(xué)技術(shù)

表觀遺傳調(diào)控是指不改變基因DNA序列，而通過(guò)某種機(jī)制改變基因座或染色體狀態(tài)，并進(jìn)一步影響表型的調(diào)節(jié)方式。表觀遺傳調(diào)控是復(fù)雜疾病證候本質(zhì)的重要內(nèi)容，是遺傳與環(huán)境共同作用的結(jié)果，對(duì)同病異證、異病同證進(jìn)行表觀遺傳調(diào)控研究或許是揭示證候本質(zhì)的一種途徑，表觀遺傳調(diào)控的可逆性也是中醫(yī)通過(guò)綜合方式調(diào)控的重要環(huán)節(jié)［25-26］。表觀遺傳學(xué)調(diào)控包括DNA甲基化、組蛋白修飾、RNAi、染色體重塑、基因組印跡、microRNA調(diào)控等在內(nèi)的多種修飾機(jī)制。劉氏［27］采用甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)急性髓系白血病和健康人ID4基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài)并進(jìn)行組間及中醫(yī)證型間比較，結(jié)果顯示ID4基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化陽(yáng)性表達(dá)與證候相關(guān)。由于表觀遺傳是可逆性的，因此，筆者認(rèn)為消除表觀調(diào)控對(duì)基因的影響是中醫(yī)調(diào)治復(fù)雜性疾病證候的重要環(huán)節(jié)。

microRNA（miR）是一類非編碼的單鏈小分子RNA，通過(guò)和靶基因mRNA堿基配對(duì)引導(dǎo)沉默復(fù)合體降解mRNA或抑制mRNA的翻譯，從而在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控基因表達(dá)。研究表明，miR可通過(guò)調(diào)控組蛋白修飾引起染色質(zhì)重塑，導(dǎo)致基因表達(dá)異常［28］。Gao等［29］發(fā)現(xiàn)，miR-17、miR-21、miR-181b和miR-196a可作為胰腺癌辨證依據(jù)。Zhang等［30］發(fā)現(xiàn)，血清miR-583和miR-663或許可作為區(qū)分乙肝肝膽濕熱證和肝腎陰虛證的標(biāo)志物。雖然尚無(wú)miR調(diào)控表觀遺傳的病證結(jié)合方面的研究，但筆者認(rèn)為這將成為揭示環(huán)境對(duì)證候影響的中醫(yī)理論分子內(nèi)涵的重要途經(jīng)。

4　網(wǎng)絡(luò)生物學(xué)技術(shù)

網(wǎng)絡(luò)生物學(xué)技術(shù)是利用生物網(wǎng)絡(luò)（包括基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)、蛋白交互網(wǎng)絡(luò)、代謝和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)等）描述研究對(duì)象的生物學(xué)性質(zhì)、分析因果關(guān)系、認(rèn)識(shí)生命活動(dòng)規(guī)律的一門技術(shù)。人是生物分子相互作用形成的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)，病證的發(fā)生發(fā)展是這個(gè)復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)失衡導(dǎo)致的，單一分子及其構(gòu)成的單一信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路難以反映病證機(jī)制和治療的關(guān)鍵，因此需要從整體聯(lián)系的角度，整合不同層次的信息達(dá)到對(duì)病證機(jī)制的整體理解和認(rèn)知。而生物分子網(wǎng)絡(luò)則是該研究策略下的重要切入點(diǎn)［31］。所以，把網(wǎng)絡(luò)生物學(xué)技術(shù)運(yùn)用到病證結(jié)合研究中，有助于從分子水平綜合描述病證發(fā)展過(guò)程的復(fù)雜性及其相互之間的關(guān)聯(lián)關(guān)系，以及尋找辨證選方的中藥方劑作用的靶標(biāo)。

4.1基于生物分子網(wǎng)絡(luò)的“病-證”關(guān)系研究

生物分子網(wǎng)絡(luò)主要是指基因、基因產(chǎn)物和代謝物等生物分子之間通過(guò)復(fù)雜相互作用而形成的網(wǎng)絡(luò)，也可拓展到以生物分子為基礎(chǔ)的信號(hào)通路網(wǎng)絡(luò)、代謝網(wǎng)絡(luò)、生物過(guò)程網(wǎng)絡(luò)、組織網(wǎng)絡(luò)等。而融合文獻(xiàn)挖掘與基因表達(dá)譜分析、構(gòu)建特定“病-證”生物分子網(wǎng)絡(luò)是用于分析同病異證、異病同證分子基礎(chǔ)的前提條件。研究顯示，將分子生物網(wǎng)絡(luò)運(yùn)用到病證結(jié)合研究，不僅能進(jìn)一步理解寒熱、血瘀等不同證候之間的關(guān)系，還可從分子層面對(duì)疾病“辨證論治”及藥物與疾病之間“同病異治”“異病同治”的研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)［32］。Lu等［33］將“病-證”的關(guān)系置于生物分子網(wǎng)絡(luò)的背景下進(jìn)行比較分析，探討了慢性乙型肝炎和肝硬化“同病異證”“異病同證”的分子機(jī)制。

4.2基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的辨證論治研究

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是建立在疾病-基因-藥物的多層次網(wǎng)絡(luò)基礎(chǔ)上，從整體上預(yù)測(cè)藥物靶點(diǎn)、提高藥物發(fā)現(xiàn)效率的新興學(xué)科［34］。辨證施治是中醫(yī)治療學(xué)的精華，也是中醫(yī)藥個(gè)性化治療的主要表現(xiàn)。運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法研究病-證-方對(duì)應(yīng)關(guān)系，可以揭示疾病、證候、方藥之間的內(nèi)在聯(lián)系及網(wǎng)絡(luò)調(diào)控機(jī)理，從而更深入把握辨證論治的精髓。有研究通過(guò)IPA軟件分別構(gòu)建類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）熱證和對(duì)證中藥靶蛋白的分子相互作用網(wǎng)絡(luò)，結(jié)果顯示，RA熱證的疾病狀態(tài)和對(duì)證中藥的干預(yù)靶點(diǎn)，都能作用在相同的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，干預(yù)通路中的相同或不同的關(guān)鍵分子，進(jìn)而影響整個(gè)通路的生物學(xué)功能。這也許就是對(duì)證中藥治療RA熱證“藥-證對(duì)應(yīng)”的分子生物學(xué)機(jī)制之一。

網(wǎng)絡(luò)生物學(xué)的方法應(yīng)用于中醫(yī)證候及中藥復(fù)方的研究，對(duì)科學(xué)、合理的解釋中醫(yī)證候特征、證候病機(jī)演變內(nèi)涵及病-證-方的相關(guān)性等中醫(yī)學(xué)最根本問(wèn)題甚有裨益；另外，還可用于觀察中藥干預(yù)前后患者代謝網(wǎng)絡(luò)的整體變化及動(dòng)態(tài)趨勢(shì)，分析干預(yù)前后生物網(wǎng)絡(luò)的變化，探明中藥復(fù)方干預(yù)該病證在代謝網(wǎng)絡(luò)層面上的功能模塊和生物靶點(diǎn)，從而提供研究中藥復(fù)方作用機(jī)制的新思路。

5　展望

開(kāi)展中西醫(yī)生物醫(yī)學(xué)信息學(xué)研究，分析與挖掘病證組學(xué)數(shù)據(jù)，并進(jìn)行“病-證-方/效”生物網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建與分析，從而為臨床診斷和治療提供決策支持，是開(kāi)展病證結(jié)合研究的主要思路。盡管上述新技術(shù)為病證結(jié)合研究提供了不少支持并取得一定成果，但尚有許多問(wèn)題有待改進(jìn)，如數(shù)據(jù)挖掘僅用于證候診斷量表及診斷模型的建立，且處于探索階段，并不能真正代替醫(yī)生診斷。因此，還需在建立完整的四診數(shù)據(jù)庫(kù)基礎(chǔ)上開(kāi)發(fā)真正的人工智能診斷系統(tǒng)。另外，利用系統(tǒng)生物學(xué)技術(shù)獲得病證動(dòng)態(tài)變化信息雖然反映了機(jī)體內(nèi)的動(dòng)態(tài)變化，但因沒(méi)有確切的診斷標(biāo)準(zhǔn)，故這種標(biāo)志物指向相對(duì)的，尚不能實(shí)際用于臨床診斷。如何確立統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，從而為診斷治療及療效判定提供一個(gè)確切的標(biāo)準(zhǔn)是今后的研究重點(diǎn)。

針對(duì)病證結(jié)合研究不斷積累的大量數(shù)據(jù)，開(kāi)展基于系統(tǒng)生物學(xué)、生物信息學(xué)及復(fù)雜科學(xué)等多學(xué)科交叉的病證分子診斷及其調(diào)控機(jī)制研究，能為具有整體思維和個(gè)體化特征的中醫(yī)臨床證候的精確診斷和治療提供依據(jù)，促進(jìn)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)科及中西醫(yī)結(jié)合臨床精確醫(yī)療的發(fā)展，推動(dòng)中醫(yī)藥大健康發(fā)展及個(gè)體化精確醫(yī)療科學(xué)前沿研究。即以個(gè)人基因組信息為基礎(chǔ)，結(jié)合蛋白質(zhì)組、代謝組及表型組等相關(guān)內(nèi)環(huán)境信息，為患者量身設(shè)計(jì)出最佳診療方案，以期達(dá)到治療效果最大化和不良反應(yīng)最小化的一門定制醫(yī)療模式。因此，利用新技術(shù)開(kāi)展中西醫(yī)病證結(jié)合研究將為個(gè)體化精確醫(yī)療作出巨大貢獻(xiàn)。

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Application of Cutting-edge Techniques of Life Science in Research on Disease-Syndrome Combination

LI Xiao-yan1， WEI Bin1， ZHU Mei-dong2， LUO Yun-quan2， WANG Wen-hai3， SU Shi-bing1
（1. Research Center for Traditional Chinese Medicine Complexity System， Shanghai University of Traditional Chinese Medicine， Shanghai 201203， China； 2. Department of Liver and Gallbladder Surgery， Shuguang Hospital， Shanghai University of Traditional Chinese Medicine， Shanghai 201203， China； 3. Department of Oncology， Shanghai Seventh People Hospital， Shanghai 200137， China）

Research on disease-syndrome combination is the main approach and method of research on integrative traditional Chinese and Western medicine. Disease-syndrome combination embodies the complementary advantages of traditional Chinese medicine and Western medicine. It discusses the relationship between diseases and syndromes through an interdisciplinary approach， and explores rules of disease diagnosis and treatment based on differential diagnosis. Thanks to the development of modern life science techniques， research on disease-syndrome combination has made great achievements. This article mainly introduced the application and the development prospects of new techniques， such as data mining， system biology， epigenetics， biological network and network pharmacology in the research on disease-syndrome combination in recent years， with a purpose to provide the ideas and the methods for further research and clinical application.

disease-syndrome combination； integrative traditional Chinese and Western medicine； technique application； review

R2-05

A

1005-5304（2016）10-0132-05

2015-08-10）

（

2015-10-09；編輯：梅智勝）

國(guó)家自然科學(xué)基金（81202667）；上海市中醫(yī)臨床重點(diǎn)學(xué)科建設(shè)項(xiàng)目（ZYXK202010）；上海市浦東新區(qū)衛(wèi)生系統(tǒng)重點(diǎn)學(xué)科群建設(shè)項(xiàng)目（PWZxq2014-12）

蘇式兵，E-mail：shibingsu07@163.com

DOl：10.3969/j.issn.1005-5304.2016.10.033