特應(yīng)性與非特應(yīng)性鼻息肉中黏膜炎癥模式的特征分析*

黃遠(yuǎn)　余文興　巴羅　楊奉玲　張靜　杜進(jìn)濤

(1.遂寧市中心醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科， 四川 遂寧 629000； 2.西藏自治區(qū)人民醫(yī)院耳鼻咽喉科, 西藏 拉薩 850099；3.四川大學(xué)華西醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科上呼吸道實(shí)驗(yàn)室，四川 成都 610041)

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特應(yīng)性與非特應(yīng)性鼻息肉中黏膜炎癥模式的特征分析*

黃遠(yuǎn)1余文興1巴羅2楊奉玲1張靜1杜進(jìn)濤3

(1.遂寧市中心醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科， 四川 遂寧 629000； 2.西藏自治區(qū)人民醫(yī)院耳鼻咽喉科, 西藏 拉薩 850099；3.四川大學(xué)華西醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科上呼吸道實(shí)驗(yàn)室，四川 成都 610041)

目的對(duì)致敏因素相關(guān)特應(yīng)性鼻息肉與非特應(yīng)性鼻息肉間進(jìn)行黏膜免疫表型及炎癥模式的臨床比較研究。方法在進(jìn)行功能性鼻內(nèi)窺鏡手術(shù)中獲取85例慢性鼻竇炎伴鼻息肉患者的息肉組織，其中特應(yīng)性息肉40例、非特應(yīng)性息肉45例。另選非變應(yīng)性鼻中隔偏曲患者36例的下鼻甲粘膜組織作對(duì)照；采用Elisa法檢測(cè)各種炎癥相關(guān)免疫細(xì)胞因子。通過皮膚點(diǎn)刺及血清檢測(cè)特異性IgE將鼻息肉劃分特應(yīng)性與非特應(yīng)性息肉進(jìn)行比較分析。進(jìn)一步通過體外刺激實(shí)驗(yàn)和PCR檢測(cè)Th細(xì)胞相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子mRNA進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果特應(yīng)性鼻息肉中主要以IL-5、 ECP和總IgE等嗜酸性炎癥反應(yīng)性免疫指標(biāo)增高為主，同時(shí)Th2轉(zhuǎn)錄因子GATA-3 mRNA 顯著升高(P<0.05)；但兩組息肉中均表現(xiàn)為FOXP3 mRNA顯著降低(P<0.05)。體外實(shí)驗(yàn)抗-IgE刺激后IL-5, IL-2和IL-17等在特應(yīng)性息肉中釋放顯著增加(P<0.05)，而IFN-γ, IL-6及 IL-8在兩組息肉間無(wú)顯著差異。結(jié)論特應(yīng)性與非特應(yīng)性鼻息肉患者在息肉組織及全身層面表現(xiàn)為各自獨(dú)特的免疫表型及炎癥模式特征，可為臨床有效的靶向治療策略提供參考。

鼻息肉； 特應(yīng)性； 細(xì)胞因子； T輔助細(xì)胞； 免疫球蛋白E

慢性鼻竇炎是一種比較普遍的慢性疾病，依據(jù)中鼻道內(nèi)有無(wú)息肉生長(zhǎng)將其分類為伴有或不伴有鼻息肉的兩種慢性鼻竇炎亞型[1]。多項(xiàng)研究表明不伴息肉的慢性鼻竇炎炎癥反應(yīng)與Th1免疫反應(yīng)密切相關(guān)，而伴有鼻息肉的鼻竇炎具有Th2傾向嗜酸性炎癥反應(yīng)特征。確切地說伴有鼻息肉鼻竇炎的發(fā)病，某種程度上環(huán)境因素(包括細(xì)菌、病毒及真菌等)與宿主反應(yīng)有著密切而復(fù)雜的關(guān)系。目前認(rèn)為變應(yīng)性與感染性雙重反應(yīng)可能是慢性鼻竇炎鼻息肉發(fā)病發(fā)展的主要因素[2]。鼻息肉發(fā)病機(jī)制中變應(yīng)性作用一直處于爭(zhēng)論狀態(tài)，有學(xué)者認(rèn)為變應(yīng)性及強(qiáng)化Th2免疫反應(yīng)與組織中嗜酸性細(xì)胞浸潤(rùn)密切相關(guān)，況且該結(jié)論在歐美人群鼻息肉研究中反復(fù)得到證實(shí)[3]。然而最近東亞許多國(guó)家鼻息肉研究發(fā)現(xiàn)嗜酸性粒細(xì)胞反應(yīng)并不突出，反之表現(xiàn)為強(qiáng)化Th1/Th17免疫反應(yīng)及普遍中性粒細(xì)胞炎癥反應(yīng)之特征[4]；并且該現(xiàn)象與非變應(yīng)性因素存在某種關(guān)聯(lián)[5-7]。為深入研究變應(yīng)性因素在國(guó)人人群鼻息肉發(fā)病病理機(jī)制中的作用，我們將特應(yīng)性與非特應(yīng)性鼻息肉進(jìn)行系統(tǒng)免疫機(jī)制的分類研究，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告于下。

1　對(duì)象與方法

1.1對(duì)象選擇收集2013年12月～2015年12月間分別在遂寧市中心醫(yī)院與華西醫(yī)院及西藏自治區(qū)人民醫(yī)院耳鼻咽喉科擬行功能性鼻竇內(nèi)窺鏡手術(shù)121例患者(女性54名，男性67名)，年齡16～60歲，其中包括85例慢性鼻竇炎鼻息肉(CRSwNP)患者作為研究對(duì)象，分為特應(yīng)性組40例，非特應(yīng)性組45例及36例非變應(yīng)性單純鼻中隔偏曲患者作為正常對(duì)照組。術(shù)前所有患者停用各種藥物3周以上。標(biāo)本收集：CRSwNP患者樣本取自息肉組織，正常對(duì)照組織樣本取自中隔偏曲行鼻中隔成型術(shù)患者的下鼻甲粘膜組織并備存于-80℃ 冰箱。 術(shù)前癥狀嚴(yán)重程度采用VAS評(píng)分評(píng)估，鼻內(nèi)鏡鼻腔內(nèi)及息肉表現(xiàn)程度采用Davos分級(jí)方法，CT掃描分級(jí)依據(jù)Lund-Mackay評(píng)估方法。評(píng)估過敏采用皮膚點(diǎn)刺實(shí)驗(yàn)和變應(yīng)原特異性IgE抗體Phadiatop檢測(cè)。

1.2研究方法

1.2.1檢測(cè)細(xì)胞因子及免疫介質(zhì)三組患者所取標(biāo)本先行稱重，每0.1 g 標(biāo)本加入1.0 ml 0.9%NaCl溶液，勻漿前加入混合蛋白酶抑制劑(Complete Roche; Mannheim, Germany)。組織勻漿(Braun 勻漿器1500rpm轉(zhuǎn)速5分鐘)。勻漿液在4℃下離心(3000 rpm轉(zhuǎn)速，15分鐘),收集上清液分裝EP管并采用Elisa法檢測(cè)，試劑盒為Fluorokine MAP Multiplex Kits (R&D Systems, Minneapolis,MN,USA)，測(cè)定IL-2sRα、IL-5、IL-6、IL-8、IL-17、 IFN-γ、ECP、MPO及總IgE和SAE-IgA等。檢測(cè)血清中蒿草和塵螨特殊IgE水平。

1.2.2轉(zhuǎn)錄因子RT-PCR檢測(cè)通過定量RT-PCR評(píng)估轉(zhuǎn)錄因子GATA-3, T-bet, FOXP3和 RORc等的mRNA 水平。使用RNeasy 試劑盒(QIAGEN GmbH, Hilden, Germany)按照操作說明書萃取總RNA。cDNA制備：通過PrimeScript RT 試劑盒 (Takara Biotechnology Co, Ltd, Dalian, China)將 0.5μg的總RNA反轉(zhuǎn)錄生成cDNA。cDNA相當(dāng)于40ng 總RNA被用于執(zhí)行定量RT-PCR。 mRNA制備分析：通過使用GATA-3、T-bet、FOXP3、RORc的特異性引物序列20在iCycler iQ Real-Time PCR 檢測(cè)系統(tǒng) (BioRad Laboratories, CA, USA)中完成擴(kuò)增。聚合酶鏈反應(yīng)使用SYBR Premix Ex Taq II 試劑盒 (Takara Biotechnology Co, Ltd, Dalian, China) 進(jìn)行。通過geNorm軟件(Ghent University, Ghent, Belgium) 驗(yàn)證后，三個(gè)基因：肌動(dòng)蛋白β、羥甲基膽素合酶和延長(zhǎng)因子1的表達(dá)被用于標(biāo)準(zhǔn)化轉(zhuǎn)錄。通過使用qBase program (version 1.3.5; Ghent University, Ghent, Belgium)，分析出任一基因的相對(duì)表達(dá)水平。

1.2.3抗IgE刺激鼻息肉組織釋放細(xì)胞因子檢測(cè)按統(tǒng)計(jì)學(xué)原理各組隨機(jī)選出樣本，即特應(yīng)性NP 12例， 非特應(yīng)性NP 12例。用10ml RPMI 1640 組織培養(yǎng)液(Sigma-Aldrich, Bornem, Belgium)，分別不同鼻息肉患者的新鮮鼻息肉標(biāo)本浸泡在-4 ℃培養(yǎng)24小時(shí)后，組織切碎混懸液過濾以獲得大小約0.9 mm3， 每0.04克組織加入1 ml培養(yǎng)液的比例將組織塊再次浸泡混勻，1 μg/ml的濃度加入人骨髓瘤 IgE (Calbiochem, VWR International, Leuven, Belgium) 在37℃下5%CO2孵化1小時(shí)，再用培養(yǎng)液洗三次。再次1ml培養(yǎng)液浸泡混勻，然后在48孔的組織培養(yǎng)板(BD Falcon,VWR,Leuven,Belgium)中每孔加入0.5 ml組織混懸液，再于每孔中加入陰性對(duì)照培養(yǎng)液或0.5 μg/mlSEB(Sigma-Aldrich) 然后放入37 ℃下5%CO2孵化30分鐘。孵化結(jié)束樣本離心1300rpm 10分鐘，將上清液按上述Elisa方法檢測(cè)細(xì)胞因子。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析所有數(shù)據(jù)資料應(yīng)用統(tǒng)計(jì)分析軟件包SPSS 18.0 (SPSS, Inc, Chicago)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。定量資料采用非參數(shù)檢驗(yàn)(秩和檢驗(yàn)Kruskal-Wallis 法和Mann-Whitney 雙尾U檢驗(yàn))；基線變化分析采用方差分析或Fisher確切概率法以及部分T檢驗(yàn)等。采用 Sigmaplot 18.0 software版本，繪制數(shù)據(jù)圖示。數(shù)據(jù)以箱型圖顯示中位數(shù)，范圍及四分位數(shù)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1特應(yīng)性與非特應(yīng)性鼻息肉臨床特點(diǎn)比較納入的85例慢性鼻竇炎伴鼻息肉患者，按照慢性鼻竇炎歐洲指南診斷，根據(jù)病史確認(rèn)有無(wú)過敏、皮膚點(diǎn)刺及血清中變應(yīng)原特殊IgE檢測(cè)結(jié)果，將鼻息肉劃分為特應(yīng)性鼻息肉40例和非特應(yīng)性鼻息肉45例；另對(duì)照非變應(yīng)性鼻炎鼻中隔偏曲患者36例。兩種息肉亞型人口分布大致均衡，兩者均有較高臨床癥狀評(píng)估積分。共有8例哮喘病史均分布在特應(yīng)性息肉組，并且特應(yīng)性鼻息肉患者表現(xiàn)為在噴嚏、鼻癢及流清涕等癥狀積分相對(duì)較高(P<0.05)，見表1。

表1　三組患者臨床癥狀參數(shù)評(píng)估比較

注：表中數(shù)據(jù)由中位數(shù)和可信區(qū)間表達(dá)，P值由ANOVA單因素方差分析和似然比概率得來(lái)。NS.沒有顯著性差異;①對(duì)照vs 非特應(yīng)性鼻息肉; ②對(duì)照vs 特應(yīng)性鼻息肉; ③兩組息肉

2.2各組中多種基線炎癥介質(zhì)檢測(cè)水平息肉組織中IL-5, IFN-γ, IL-6, IL-8,和IL-2sR,等細(xì)胞因子的表達(dá)均顯著高于對(duì)照組，但I(xiàn)L-17在息肉與對(duì)照間無(wú)顯著差異。此外，在特應(yīng)性息肉中IL-5和 IL-6,顯著高于非變應(yīng)性息肉組(P<0.05)；而IFN-γ, IL-8, 和 IL-2sR等因子表達(dá)在兩組息肉間無(wú)顯著差異?？侷gE、ECP和MPO在息肉中顯著高于對(duì)照 (P<0.05)，而SAE-IgE無(wú)顯著差異。兩組息肉中比較總IgE和 ECP 在特應(yīng)性息肉顯著高于非特應(yīng)性息肉 (P<0.05)，但 MPO在兩組息肉間無(wú)顯著差異，見表2。

表2　三組患者主要炎癥因子、介質(zhì)以及總IgE SAE-IgE表達(dá)差異的比較

注：NS.無(wú)顯著差異; ①對(duì)照vs 非特應(yīng)性NP; ②對(duì)照vs 特應(yīng)性NP; ③兩組NP

2.3特應(yīng)性與非特應(yīng)性息肉中轉(zhuǎn)錄因子mRNA 表達(dá)水平特應(yīng)和非特應(yīng)組息肉中的轉(zhuǎn)錄因子T-bet 和 GATA-3 的mRNA 顯著高于對(duì)照組，然而轉(zhuǎn)錄因子FOXP3的 mRNA與對(duì)照相比在息肉中明顯下降(P<0.05)。轉(zhuǎn)錄因子RORc的 mRNA表達(dá)在對(duì)照與息肉組間無(wú)顯著差異。另發(fā)現(xiàn)GATA-3 mRNA l表達(dá)水平在特應(yīng)性息肉中顯著高于非特應(yīng)性息肉組(P<0.05)。而T-bet、FOXP3及 RORc表達(dá)在兩組亞型息肉間無(wú)顯著差異，見表3。

2.4體外抗IgE誘導(dǎo)刺激合成鼻息肉組織內(nèi)細(xì)胞因子水平比較鼻息肉組織在24小時(shí)用標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)液(RPMI)中刺激培養(yǎng)后，釋放的IL-5和IL-6在特應(yīng)性息肉中顯著高于非特應(yīng)性組(P<0.05)，而自發(fā)釋放的IFN-γ、IL-17、,IL-2及 IL-8等在兩息肉組間無(wú)顯著差異?？?IgE (10 μg/mL)刺激24小時(shí)合成釋放的IL-5、IL-2和 IL-17比培養(yǎng)液?jiǎn)渭兇碳上⑷饨M顯著升高(P<0.05)。 釋放IFN-γ、 IL-6,和IL-8等在兩息肉組間無(wú)顯著差異。當(dāng)抗-IgE刺激后兩息肉組比較IL-5, IL-2, IL-17等在特應(yīng)性組比非特應(yīng)組顯著增高 (P<0.05)，但I(xiàn)FN-γ、IL-6和 IL-8釋放在兩息肉組間無(wú)顯著差異，見 圖1。

表3　三組患者轉(zhuǎn)錄因子FOXP3、T-bet,、GATA3和ROR等的mRNA表達(dá)水平比較

圖1體外刺激各組鼻息肉釋放炎癥因子水平

Figure 1The level of inflammatory mediators in stimulated nasal polyp tissues

注：組內(nèi)成對(duì)資料比較使用Kruskal-Wallis 檢驗(yàn)，組間不成對(duì)資料使用The Mann-WhitneyU雙尾。 統(tǒng)計(jì)意義為P≤0.05。RPMI.組織培養(yǎng)液; Co.對(duì)照; NANP.非特應(yīng)性鼻息肉; ANP.特應(yīng)性鼻息肉

3　討論

研究發(fā)現(xiàn)息肉組織中組織重塑相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子FOXP3 mRNA表達(dá)顯著下降,而轉(zhuǎn)錄因子GATA-3 與 T-bet mRNA表達(dá)水平顯著增強(qiáng)。評(píng)估組織中常規(guī)主導(dǎo)細(xì)胞因子(IL-5, IFN-γ、IL-6、IL-8、 IL-2sR等)，有趣發(fā)現(xiàn)與我們團(tuán)隊(duì)前期發(fā)現(xiàn)的結(jié)論相吻合[8,9]，即特應(yīng)性息肉表現(xiàn)為嗜酸性免疫因子IL-5, ECP及總IgE等顯著增多并伴有Th2細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄因子GATA-3的 mRNA表達(dá)水平顯著增強(qiáng)。表明特應(yīng)性與非特應(yīng)性鼻息肉患者中存在明顯免疫表型與炎癥模式的差異性。 目前為止，對(duì)于慢性鼻竇炎鼻息肉發(fā)病機(jī)制還尚未明了，近年來(lái)認(rèn)為慢性鼻竇炎鼻息肉(CRSwNP)是一種復(fù)雜異質(zhì)性疾病譜的一種單元。盡管在西方人群中普遍將CRSwNP認(rèn)為Th2傾向嗜酸性炎癥性特征；然而最近研究發(fā)現(xiàn)在亞洲人群(中國(guó)、韓國(guó)及日本等)中鼻息肉表現(xiàn)為一種Th17傾向中性粒細(xì)胞性炎癥模式的特征[5，7]。在泰國(guó)人群中慢性鼻竇炎伴鼻息肉雖表現(xiàn)為Th17//Th1傾向中性粒細(xì)胞炎癥特征，但隨著時(shí)間向Th2轉(zhuǎn)化特征[10]。預(yù)示著慢性鼻竇炎鼻息肉發(fā)病機(jī)制隨著地區(qū)差異而表現(xiàn)出不同的特征；不僅在不同國(guó)家、種族之間有差異而且同一國(guó)家不同地方之間也表現(xiàn)出不同發(fā)病機(jī)制特征[11]。前期國(guó)內(nèi)研究報(bào)道，在我國(guó)沿海與中部地區(qū)慢性鼻竇炎鼻息肉表現(xiàn)出不同炎癥模式并其與上呼吸道不同細(xì)菌類型感染相關(guān)[11,12,]。有趣的是本研究發(fā)現(xiàn)作為分化Th1細(xì)胞的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子T-bet在兩種息肉中均有增高現(xiàn)象，可能細(xì)菌對(duì)抗獲得性免疫反應(yīng)在早期鼻息肉發(fā)病機(jī)制中的作用較為顯著[13]。

我們關(guān)注細(xì)菌感染因素在變應(yīng)性鼻息肉發(fā)病機(jī)制中的作用，結(jié)果表明轉(zhuǎn)錄因子GATA-3在特應(yīng)性息肉中顯著高于非特應(yīng)性息肉組，眾所周知GATA-3是分化Th2細(xì)胞及控制產(chǎn)生相應(yīng)細(xì)胞因子的關(guān)鍵性轉(zhuǎn)錄因子。而IL-5在嗜酸性粒細(xì)胞的募集和凋亡過程中起到中軸調(diào)節(jié)作用，如此在特應(yīng)性鼻息肉中GATA-3 和IL-5的同時(shí)升高，明確闡述變應(yīng)性因素導(dǎo)致局部IgE升高和大致嗜酸性反應(yīng)的加劇。特應(yīng)性在慢性鼻竇炎鼻息肉中病理機(jī)理及臨床癥狀中的重要作用已經(jīng)闡述多年，然而變應(yīng)性作為潛在致病因素在伴有或不伴有鼻息肉慢性鼻竇炎中的作用仍在爭(zhēng)論不休[14,15]。不過有更多研究證實(shí)特應(yīng)性與非特應(yīng)性CRSwNP患者表現(xiàn)不同免疫炎癥機(jī)制特征。如；Hamilos等報(bào)道[8]，特應(yīng)性與非特應(yīng)性CRSwNP亞型顯現(xiàn)不同細(xì)胞因子表達(dá)趨勢(shì)，其中特應(yīng)性亞型中主要以IL-4 和IL-5為主，而非特應(yīng)性亞型中以IFN-γ為主導(dǎo)。最近Peric等[16]發(fā)現(xiàn),變應(yīng)因素未能改變CRSwNP患者的各項(xiàng)臨床參數(shù)，包括癥狀、CT及鼻內(nèi)窺鏡檢查結(jié)果，但是發(fā)現(xiàn)變應(yīng)性CRSwNP患者鼻腔分泌物中嗜酸性細(xì)胞及IL-4、IL-5及 IL-6濃度顯著高于非變應(yīng)組。而在Scavuzzo等[9]也研究提示，特應(yīng)性CRSwNP患者中總IgE 和IL-8的濃度顯著高于非特應(yīng)性CRSwNP。上述研究結(jié)論與我們的結(jié)果完全相符，發(fā)現(xiàn)特應(yīng)性息肉組織中強(qiáng)化嗜酸性反應(yīng)，增強(qiáng)GATA-3 mRNA表達(dá)及IL-5、 ECP和總IgE濃度顯著高于非特應(yīng)組。由此表明不論地域、種族差異，特應(yīng)性CRSwNP患者能夠表現(xiàn)出嗜酸性炎癥模式之特征。通過本研究發(fā)現(xiàn)，變應(yīng)原因素也是我國(guó)人群CRSwNP發(fā)病的重要病因之一，同時(shí)闡明了傳統(tǒng)意義上鼻息肉發(fā)病中軸作用的嗜酸性免疫指標(biāo)IL-5, ECP和 IgE等，在不同亞型息肉中表現(xiàn)出截然不同的差異性。

盡管有眾多相關(guān)資料強(qiáng)調(diào)變應(yīng)性因素在 CRSwNP發(fā)病機(jī)制中核心作用，但還有待于展開更深入研究來(lái)闡述其確切病理機(jī)制。為此，新近研究表明局部IgE產(chǎn)生，在特應(yīng)性CRSwNP組織中驅(qū)動(dòng)嗜酸性炎癥反應(yīng)起到核心作用[17]。例如；Bachert等[18]報(bào)道，西方人群鼻息肉組織中的總IgE和特殊IgE抗原與局部嗜酸性炎癥反應(yīng)密切相關(guān)。最近亞洲眾多研究證實(shí)，鼻息肉發(fā)病中肥大細(xì)胞表面具有分化及轉(zhuǎn)化IgE、產(chǎn)生IgE及IgE局域作用[19]。更有趣的是，Cao等[20],研究發(fā)現(xiàn)鼻息肉局部IgE產(chǎn)生，源于常見空氣致敏原介導(dǎo)肥大細(xì)胞激活并促成鼻息肉中嗜酸性炎癥反應(yīng)的結(jié)果。為了觀察局部IgE產(chǎn)生如何在變應(yīng)性或嗜酸性炎癥中的重要作用機(jī)制，我們建立體外模型刺激實(shí)驗(yàn)。用抗-IgE刺激新鮮息肉組織觀察組織中各種炎癥介質(zhì)釋放情況，發(fā)現(xiàn)兩組亞型息肉中均有IL-5, IL-2及 IL-17等釋放顯著升高，其中在特應(yīng)性息肉中IL-5、 IL-2和IL-17A等釋放高于非特應(yīng)性息肉組。本研究結(jié)果能夠初步闡述，空氣致敏因素導(dǎo)致鼻息肉中IgE介導(dǎo)炎癥反應(yīng)性免疫機(jī)制作用。另外能夠?yàn)樽儜?yīng)性鼻息肉IgE介導(dǎo)炎癥反應(yīng)的靶向干預(yù)提供理論根基。我們的結(jié)論認(rèn)為，變應(yīng)性因素在慢性鼻竇炎鼻息肉發(fā)病過程中起到重要作用，推斷局部IgE產(chǎn)生能夠募集更多嗜酸性細(xì)胞并且導(dǎo)致Th2傾向性免疫反應(yīng)等。

4　結(jié)論

由于系統(tǒng)性致敏因素在慢性鼻竇炎伴鼻息肉發(fā)病機(jī)制中作用尚未清楚，本研究發(fā)現(xiàn)特應(yīng)性鼻息肉中主要以IL-5、 ECP和總IgE等嗜酸性炎癥反應(yīng)的免疫指標(biāo)增高為主，同時(shí)Th2轉(zhuǎn)錄因子GATA-3 mRNA 顯著升高。但特應(yīng)與非特應(yīng)兩組息肉中均表現(xiàn)FOXP3 mRNA顯著降低。體外抗IgE刺激后特應(yīng)性息肉中釋放更多IL-5、 IL-2及IL-17等炎癥介質(zhì)。認(rèn)為特應(yīng)息肉與非特應(yīng)性息肉各自具有獨(dú)特免疫表型及炎癥模式特征，提示對(duì)該病治療策略上能反映有效靶向目標(biāo)提供臨床參考。

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Characterization of inflammatory profiles in atopic and nonatopic nasal polyps

HANG Yuan1, YU Wenxing1, BA Luo2,et al

(1.DepartmentofOtorhinolaryngology,HeadandNeckSurgery,CentralHospitalofShuining,Suining629000,Sichuan,China; 2.DepartmentofOtorhinolaryngology,ThePeople’sHospitalofTibetAutonomousRegion,Lhasa850099,China; 3.TheUpperAirwaysResearchLaboratory,DepartmentofOtorhinolaryngology,HeadandNeckSurgery,WestChinaHospital,SichuanUniversity,Chengdu610041,China)

ObjectiveThis study sought to characterize the pattern of cytokines and immune-type in nasal polyp tissues with and without atopic patients. MethodsAtopic and nonatopic polyp and normal tissues were collected from 85 CRSwNP patients and 36 control subjects. The levels of Th cells cytokine and inflammatory mediators in tissue homogenates were measured using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). sIgE in serum and prick skin for determining of Atopic were detected. The mRNA levels of relative transcription factors were determined using quantitative real-time polymerase chain reaction (qPCR). The anti-IgE stimulated polyp tissues in vitro were did for further verified. Results Atopic CRSwNP patients were characterized by enhanced eosinophilic inflammation (elevated IL-5, ECP and total IgE), and significantly increased GATA-3 mRNA level (P<0.05). However, both atopic and non-atopic CRSwNP patients showed decreased FOXP3 mRNA expression (P<0.05). After anti-IgE stimulation, atopic polyps released more IL-5, IL-2 and IL-17 in the supernatant of stimulated polyp tissues than nonatopic. ConclusionAtopic and nonatopic nasal polyp patients carry on different immuny-type and profile of different inflammation response in polyp tissues.

Nasal polyps; Atopy; Cytokine; T help cell; IgE

國(guó)家自然科學(xué)基金(81560172；81260158)

巴羅Email：bhanor@163.com

R 765.25

Adoi：10.3969/j.issn.1672-3511.2016.10.007

2016-04-05； 編輯： 陳舟貴)